石蜡切片制作流程表
一. 取材
1，样品要求：长，宽各1cm左右，厚不超过5mm
2，固定液：10%福尔马林固定液或4%多聚甲醛：组织块=20:1为宜
3，固定时间：依大小而定，一般3-5h即可，如24h或更长，应密封瓶口，封前换液
4, 修块
二.脱水
1，水洗：将固定组织块放入广口瓶，瓶口用纱布包好，置流水下水洗，水洗时间依固定时间而定，一般12h以上，固定时间越长水洗时间越长。
2，脱水
1）75%酒精1h
2) 80%酒精1h
3）95%酒精Ⅰ1h
4) 95%酒精Ⅱ1h
5) 100%酒精Ⅰ1h
6) 100%酒精Ⅱ1h
组织块在进入下一阶段梯度酒精前要用吸水纸吸干水，尤其在95%酒精（Ⅱ）中进入100%酒精（Ⅰ）中，切记防止带入水分，所有过程要在瓶口加盖，防止水分进入。
三．透明
1)酒精（100%）：二甲苯=1：1 10min
2)二甲苯Ⅰ透明10min
3二甲苯Ⅱ10min
四．浸蜡
1）二甲苯：石蜡=1：1 30min 温箱56—58℃
2）石蜡Ⅰ1h 温箱56—58℃
3) 石蜡Ⅱ1h 温箱56—58℃
4) 石蜡Ⅲ1h 温箱56—58℃
温度保持在56—58℃，温度太高会烧坏组织块，太低石蜡会凝固。
五．包埋
首先在金属框架上涂抹凡士林，以保证石蜡到入后不会外溢。将包埋用石蜡及浸蜡组织块放在有石棉网的电炉上保温。在框架中先倒入少许包埋用石蜡，再用镊子将组织块迅速移入框架，再倒入石蜡，待完全凝固后取出待用。
六．切片和烘片（烘片温度38℃）
七．附贴（45℃）；烤片
（一）附贴（45℃）
附贴液的配制：新鲜蛋白20ml,麝香草酚少许，用玻璃棒混匀，再加入甘油20ml,继续混匀。若有多聚懒氨酸处理的切片则直接用之。
（二）烤片：温箱内的温度应保持在40-45℃之间，烤片时间至少1小时。
八．H．E染色
（一）脱蜡
1 二甲苯Ⅰ（脱蜡） 10min
2 二甲苯Ⅱ（脱蜡） 10min
3 100%酒精Ⅰ（脱二甲苯） 10min
4 100%酒精Ⅱ（脱二甲苯） 10min
5 95%酒精Ⅰ（脱二甲苯） 5 min
6 95%酒精Ⅱ（脱二甲苯） 5 min
7 80%酒精（脱二甲苯） 5 min
8 自来水或蒸馏水洗（去酒精）5 min （二）染色
1 苏木素染液 6 min
2 冲洗清水（兰化）15 min
3 酸水分化视情况而定 10-20S
4 冲洗淡蓝色即可 20 min
5 伊红染液视情况而定
6 min （三）脱水，透明
13 80%酒精颜色淡化
14 95%酒精Ⅰ 5min
15 95%酒精Ⅱ 5 min
16 100%酒精Ⅰ 5min
17 100%酒精Ⅱ 10min
18 二甲苯Ⅰ（透明） 5min
19 二甲苯Ⅱ（透明） 10 min 九．封片：用中性树胶将切片标本封固。
