山茱萸检验标准操作规程

原药材检验标准操作规程

山茱萸检验标准操作规程 执行日期

起草 审核 批准

部门 质量控制部 质量控制部 质量保证部 生产制造部 质量负责人

姓名

签名

日期

分发部门 质量控制部、质量保证部

目 的： 建立一个中药饮片原药材检验标准操作程序，确保检验结果准确可靠。

适用范围：中药原药材。

责 任 人：质量保证部主任、质量控制部主任、化验员。

标准来源：《中华人民共和国药典》2010年版一部、《安徽省中药饮片炮制规范》。

内 容：

1、性状

取本品适量，放入白瓷盘中，用眼观察，可见以下性状特征：

本品呈不规则的片状或囊状，长1～1.5cm，宽0.5～1cm。表面紫红色至紫黑色，皱缩，有光泽。顶端有的有圆形宿萼痕，基部有果梗痕。质柔软。气微，味酸、涩、微苦。

2、鉴别

仪器：电子分析天平、电子显微镜、紫外光灯等。

2.1显微鉴别：

2.1.1 试液配制

2.1.1.1 水合氯醛试液：取水合氯醛50克，加水15毫升与甘油10毫升使溶解，即得。

2.1.1.2 甘油醋酸试液：取甘油、醋酸及水各等份混匀，即得。 2.1.1.3 稀甘油：取甘油33毫升，加水稀释至100毫升，再加樟脑一小块或液化苯酚1滴，即得。

2.1.2 供试品制备

2.1.2.1 取本品10g，研细后取少量粉末，置载玻片上，滴加水合氯醛搅拌均匀 ，置酒精灯上加热透化；加稀甘油数滴， 搅拌均匀，分装2～3片，加盖玻片，即得。

2.1.2.2 取研细的粉末少量置载玻片上，加甘油醋酸试液，搅拌均匀，加盖玻片，即得。

2.1.2.3取研细后取少量粉末，置载玻片上，滴加水搅拌均匀，同时滴加少许稀甘油，加盖玻片，即得。

2.1.3 置显微镜下观察

本品粉末红褐色。果皮表面细胞橙黄色，表面观多角形或类长方形，直径16～30µm，垂周壁连珠状增厚，外平周壁颗粒状角质增厚，胞腔含淡橙黄色物。中果皮细胞橙棕色，多皱缩。草酸钙簇晶少数，直径12～32µm。石细胞类方形、卵圆形或长方形，纹孔明显，胞腔大。

2.2 薄层鉴别

2.2.1 取本品粉末0.5g，加乙酸乙酯10ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中华人民共和国药典》附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯—乙酸乙酯—甲酸（20∶4∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点；置紫外光灯（365nm）下检视，显相同的橙黄色荧光斑点。

2.2.2 取本品粉末0.5g，加无水乙醇10ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取马钱苷对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中华人民共和国药典》附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯—乙醇—冰醋酸（50∶10∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。

3、检查

仪器：电子分析天平、电热恒温干燥箱等。

3.1 水分 取供试品2-5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中厚度不超过5mm，精密称定，打开瓶盖在100～105℃干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，按下式计算即得。

W2－W3

供试品中的含水量（%）＝────────×100％

W2－W

W 称量瓶重（g）

W2 烘前称量瓶和样品重之和（g）

W3 烘后称量瓶和样品重之和（g）

本品含水量不得过16.0%。

3.2 杂质（果核、果梗）、灰屑检查 取100g样品，按照杂质检查法标准操作规程（ZLSOP02401）拣出杂质，过二号筛；按照灰屑检查法标准操作规程（ZLSOP02301）筛出灰屑，过三号筛。杂质、灰屑合并并称重，计算，含杂质、灰屑不得过3.0%。

3.3 二氧化硫残留量

取本品细粉10g置于两颈圆底烧瓶中，加水300－400ml和6mol/L盐酸10ml连接分液漏斗，并导入氮气至瓶底，连接回流冷凝管，在冷凝管上部连接导气管，将导气管插入250ml锥形瓶底部。锥形瓶内加水125ml和淀粉指示液1ml作为吸收液，置于磁力搅拌器上不断搅拌。加热圆底烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸约2分钟后开始用0.01mol/L的碘滴定液滴定，至蓝色持续20秒不消失，记录消耗的碘滴定液的ml数，并将滴定的结果用空白校正，记录消耗的碘滴定液ml数。按下式计算即得：

供试品中二氧化硫残留量（mg/g）=(A-B)×C×0.032×1000/W

式中A为供试品消耗的滴定液的体积，ml B为空白消耗的滴定液的体积，ml

C为滴定液的浓度，mol/L

D为供试品的重量，g

0.032为每1ml碘滴定液mol/L相当二氧化硫的重量，g

本品二氧化硫量不得过150mg/kg。

3.4 总灰分

取供试品适量，粉碎使能通过二号筛混合均匀后，取2～3g，置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量（准确至0.01g），缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～600℃，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，按下式计算即得。

W2－W1

供试品中总灰分的含量（％）＝────────×100％

W

W1 坩埚重（g）

W 样品重（g）

W2 炽灼残渣与坩埚重之和（g）

本品总灰分不得过6.0％。

4、 浸出物

仪器：电子分析天平、电热恒温干燥箱、水浴锅、蒸发皿等。

取供试品适量，粉碎使能通过二号筛，并混合均匀后，取约4g，精密称定，置250～300ml的锥形瓶中，精密加水100ml，密塞，冷浸，前6小时内时时振摇，再静置18小时，用干燥滤器迅速滤过，精密量取续滤液20ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时 ，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。以干燥品按下式计算即得。

（W2－W1）×（100/20）

供试品中水溶性浸出物的含量（%）＝────────——×100％

W×（1－W4）

W 样品重（g）

W1 蒸发皿重（g） W2 残渣与蒸发皿重之和（g）

W4 供试品的含水量（%）

本品浸出物不得少于50.0%。

5、含量测定

仪器：电子分析天平、高效液相色谱仪等。

照高效液相色谱法（《中华人民共和国药典》附录Ⅵ D）测定。

5.1 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈—水（15∶85）为流动相；检测波长为240nm。理论板数按马钱苷峰计算应不低于3000。

5.2 对照品溶液的制备 取马钱苷对照品适量，精密称定，加80%甲醇制成每1ml含40µg的溶液，即得。

5.3 供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

5.4 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品以干燥品按下式计算即得：

Ax×CR×Vx

供试品的含量（％）＝────────——×100％

AR×G×（1－W）×106

Ax 供试品的峰面积或峰高。

Vx 供试品的体积(ml)

CR 对照品的浓度

AR 对照品的峰面积或峰高

G 供试品的重量(g)

W 供试品的含水量(%)

本品含马钱苷（C17H26O10）不得少于0.60%；