提取绞股蓝皂苷实验方案

正交实验优选绞股蓝总皂苷的提取方法
张阿慧;安彩贤;侯鸿军;黄克勇;杨云
【期刊名称】《西北药学杂志》
【年(卷),期】2001(016)006
【摘要】采用分光光度法测定湘西野生七叶绞股蓝及其茶制品中绞股蓝总苷含量.设计正交实验考察不同提取方法对测定结果的影响,结果表明8倍量的80%甲醇回流3 次,每次2h为最佳提取方案.
【总页数】2页(P252-253)
【作者】张阿慧;安彩贤;侯鸿军;黄克勇;杨云
【作者单位】西安交通大学理学院,;西安交通大学药学院,;西安交通大学药学院,;北京首都钢铁公司医院药剂科;西安交通大学理学院,
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
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2.正交实验优选甘草总黄酮和总皂苷提取工艺 [J], 赵妮;邓毅;刘靓;董金香;曼琼
3.正交实验优选水田七总皂苷的提取工艺研究 [J], 黄媛恒;黄晓亮;黄永运;刘妤婷;马兴菊;李映新
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绞股蓝提取物制备工艺研究绞股蓝是一种多年生草本植物，具有清热解毒、消肿止痛等药用价值，特别是对肝炎、胆囊炎等疾病有很好的治疗效果。

因此，绞股蓝提取物也备受青睐，常常被用于制备药品、保健品和化妆品等。

本文主要介绍绞股蓝提取物的制备工艺研究，并分析其制备过程中的优缺点。

一、绞股蓝提取物的配方绞股蓝提取物的配方通常包括绞股蓝草杆、乙醇和水。

其中，乙醇和水的混合比例对提取物的质量和产量有很大的影响。

根据实验结果，50%～70%的乙醇浓度和30%～50%的水浓度可以得到良好的提取效果。

同时，绞股蓝草杆与溶剂的比例也要掌握好，一般为1：10～1:15。

1. 原料处理选取优质的鲜绞股蓝草杆，去除杂质、泥沙等杂物，并清洗干净。

待压去水分后切成小段，以便于提取。

2. 提取过程将切好的绞股蓝草杆与乙醇水混合液按比例放入提取罐内，然后用搅拌器对其进行搅拌均匀。

之后，将提取罐密封，并保持一定的温度和时间，使草杆中的有效成分充分溶解入提取液中。

通常，提取温度为60℃左右，提取时间为2～4小时即可。

3. 分离过程经过提取后，将提取液过滤分离，用压滤布和压榨机过滤和压榨草渣，将草渣中的水乙醇溶液再次回流提取。

经过多次提取、过滤和回流，草渣中的有效成分逐渐提取出来，提取液中含有绞股蓝提取物。

4. 浓缩过程通过浓缩器对提取液进行浓缩，达到一定浓度后停止浓缩过程。

5. 干燥过程将浓缩后的绞股蓝提取物进行干燥处理，以去除残余水份和乙醇。

干燥方式有三种，一种是自然晾晒，一种是烘箱干燥，还有一种是喷雾干燥。

1. 优点提取方法简单，操作便于掌握提取液的配制比例容易把握提取时间短，可以缩短制备时间提取液的回收利用可以提高制备效率2. 缺点提取液中的溶质不易快速有效地转移到溶剂中质量受原料质量、操作技术及环境条件等多方面影响提取过程中，由于溶质与溶剂之间的相互作用不同，可能会导致不同的挥发度，从而影响提取物的成分含量和质量。

综上所述，绞股蓝提取物的制备工艺需要考虑多个因素，包括原材料的选择、提取液的配制、提取时间和温度、分离和浓缩方法的选择等。

绞股蓝提取物制备工艺研究绞股蓝是一种中药材，其含有多种有效成分，如绞股蓝甙、蓝花苷、维生素C和硒等。

它具有清热解毒、凉血止血、消肿散结、增强免疫力等功效。

因此，绞股蓝被广泛应用于中医药方中，并成为了近年来研究的热点之一。

其中，绞股蓝提取物是绞股蓝应用的一种形式，其在绿色化工、医药、化妆品和食品等领域中有着广泛的应用前景。

因此，本文主要研究绞股蓝提取物的制备工艺。

绞股蓝提取物制备的主要步骤包括破碎、提取、浓缩和干燥。

其中，破碎和提取是制备绞股蓝提取物的关键步骤。

首先，绞股蓝干品需要进行破碎处理，以增加其表面积，有利于提取有效成分。

目前常用的破碎方法有机械研磨、超声波破碎和微波破碎等。

其中，超声波破碎是一种高效、易操作、成本较低的方法，可以将绞股蓝干品破碎成较小的颗粒，并增加其表面积。

在超声波破碎实验中，主要考虑的参数包括超声波功率、处理时间和处理温度等因素。

其次，采用适当的溶剂提取绞股蓝有效成分。

目前经常使用的溶剂包括乙醇、甲醇、水和其它有机溶剂等。

以乙醇为例，提取不同时间和温度下的绞股蓝，其提取效果也会有所不同。

理论上，不同成分（如多糖和黄酮类化合物）的提取方案也不同。

因此，在提取过程中，需要考虑每种有效成分的适宜性提取量，进行合理配伍，并同时减少杂质的提取。

接下来，进行浓缩处理。

常用的浓缩方法有真空浓缩、回流浓缩和结晶法等。

其中，真空浓缩是一种高效、易操作、工艺简单的方法，能较好地保留有效成分，但一般只能浓缩到一定的程度。

因此，需要根据实际需要选择合适的浓缩方法。

最后，进行干燥处理。

干燥过程中也需要考虑温度和湿度等因素，以避免有效成分的破坏。

干燥方法有自然干燥、烘干和喷雾干燥等。

在实际生产中，应选择适当的干燥方法，以达到最佳的干燥效果。

总的来说，绞股蓝提取物的制备工艺需要综合考虑各个环节的因素，在破碎、提取、浓缩和干燥等步骤中合理选择方法和条件，以保证绞股蓝提取物的质量和效果。

正交法提取绞股蓝总皂苷及对T cell免疫作用的研究第35卷第7期2006年7月辽宁化工LiaoningChemicalIndustryV o1.35.No.7July,2006正交法提取绞股蓝总皂苷及对Tcell免疫作用的研究张慧丽,靳宝峰,李玉,刘宏生(1.辽宁大学生命科学系,辽宁沈阳110036;2.沈阳军区药品检验所,辽宁沈阳1l0o26)摘要:通过正交实验优化提取确定绞股蓝总皂苷的的最佳条件及抗氧化作用.采用I~3)4确定甲醇浓度,回流时间,甲醇用量,回流次数;用最优方案大量提取绞股蓝总皂苷做豚鼠E一花环实验,镜下观察花环的形成率.通过实验得到绞股蓝总皂苷的的最佳条件:R倍量(16mL)80%的的甲醇溶液回流提取3次,每次2h;最高花环的形成率为27.5%.关键词:正交实验;绞股蓝总皂苷;Tcell免疫作用中图分类号:R282.710.5;R285.5文献标识码:A文章编号:1004—0935(2006)07—0373—03绞股蓝(Gynostemmapentaphyllum),又名七叶胆,小苦药等,系葫芦科绞股蓝属多年生草质藤本植物uJ,因与吉林人参有异物同功之效,故有"南方人参","第二人参"之美称,同时也被中外学术界誉为"绿色的金子","人参宝草".主要药效成分为绞股蓝皂苷,其他尚有多糖类,黄酮类,氨基酸,维生素以及锌,铜,铁,锰等.绞股蓝皂苷主要通过加强对机体的免疫,明显的抑制癌细胞的增殖,临床上绞股蓝可用于肺癌等20多种癌症,此外其抗氧化作用能防治心血管疾病,还防治肝炎, 肝硬化,胃和十二指肠溃疡,治疗偏头痛,白发,失眠症等,从而展现了广阔的药用前景.本实验通过用绞股蓝总皂苷对豚鼠Tcell的作用,考察绞股蓝总皂苷调节豚鼠的免疫器官的能力.1实验部分1.1试验仪器及药品紫外一可见分光光度计(日本岛津),电动单项绞碎机,电热恒温水浴锅.人参皂苷对照品(纯度为99.99%),冰醋酸,石油醚,香草醛,正丁醇,E一花环药品及仪器.样品:七叶绞股蓝干叶绞股蓝;七叶绞股蓝茎叶混合物(均产自四川卧龙地区).1.2试验步骤1.2.1制备标准曲线精密称取人参皂苷对照品10嘴置于10mL容量瓶中,用甲醇溶液(AR)溶解稀释并定容成浓度为1.0mg/mL的皂苷储备液.精密量取该储备液1.0mL置于25mL容量瓶中,用甲醇溶液(AR) 稀释定容至刻度.分别吸取该液体0.0mL,0.5 mL,1.0mL,2.0mL,3.0mL,4.0mL,5.0mL置于10mL容量瓶中,定容后精密量取绞0.1mL置于试管中,80℃水浴蒸干溶剂.加入0.2mL新配制的5%香草醛一冰醋酸溶液,再加入0.8mL高氯酸,充分混匀发现溶液略显紫红色,于70℃电热恒温水浴锅中水浴15rrIin(溶液呈现深紫红色) 后取出,冷水冲冷至室温.再次加入5.0mL冰醋酸,摇匀,560nm为测定吸收度A.同时做空白对照,稳定性考察:溶液的吸收度的变化和是否出现沉淀是稳定性考察的重要指标.1.2.2绞股蓝总皂苷含量测定方法3绞股蓝中含有皂苷,多糖,脂类,蛋白质的成分,因此,总皂苷的提取过程就是逐步将其他杂质剔除的过程.收稿日期:2006-03436作者简介:张慧丽(1970一),女.讲师.374辽宁化工2006年7月以样品(2)为例.将其有粉碎机磨成粉末状.精确称量该样品2.000g置于锥形瓶中,同时加入16mL80%的甲醇溶液充分混匀.置于回流器中进行回流提取,2h后移出提取液,并再次加入16 mL80%的甲醇溶液充分混匀,如此回流提取3 次,合并提取液.将提取液(约45mL)置于烧杯中,于80℃电热恒温水浴锅中蒸干(约2h).取出烧杯,加入15mL热水(70℃)充分溶解,加入同体积的石油醚,摇匀.倒入分液漏斗进行萃取,待分层稳定后将水层(下层)移入锥形瓶中,石油醚层(上层)倒入回收容器中,如此重复2—3次.将水层溶液中加入15mL水饱和的正丁醇,充分摇匀,倒入分液漏斗中萃取,待分层稳定后将水层(下层)移入锥形瓶中,正丁醇层(上层)倒入烧杯中.再在水层溶液中加入15mL水饱和的正丁醇溶液,重复萃取实验,至正丁醇层无色为止, 大约4—5次,合并正丁醇提取液.将盛有正丁醇提取液的烧杯放入80℃电热恒温水浴锅中蒸干,出现的淡黄色物质即为绞股蓝总皂苷粉末.用甲醇(AR)充分溶解并移至25 mL容量瓶中定容至刻度.精密吸取0.1mL该溶液,水浴蒸干该溶剂后,按"2.1"项下步骤测定吸收度A,通过"2.2"项下的标准曲线或回归方程求出溶液的浓度,进而求出溶液绞股蓝总皂苷的百分含量百分比.1.2.3优化试验一正交设计L4J选取4个因素设计正交试验,4个因素分别是甲醇浓度,回流时间,甲醇用量,回流次数.每个因素又分别选取了3个水平进行研究.取样品按正交表和"1.2.2"的步骤进行试验.表1因素水平表1.2.4E一花环实验按50—200mg/kgE]注射豚鼠.分别将绞股蓝总皂苷配制成如下浓度:2.5mg/mL,5.0mg/ mL,10mg/mL,取豚鼠20只,随机分成4组,5只一组.第一组为对照组注射0.9%的生理盐水;第二组注射绞股蓝总皂苷2.5mg/mL;第三组注射绞股蓝总皂苷5.0mg/mL;第四组注射绞股蓝总皂苷10mg/mL.腹腔注射,一天注射1次,每次注射0.2mL,共注射5天,得免疫豚鼠.高倍镜下记数200个淋巴细胞,凡结合3个或3个以上的兔红细胞即为阳性,计算花环形成细胞的百分率.成环数如表2,每个实验结果为两次平均值.2试验结果2.1绞股蓝总皂苷回归方程由表2可做标准曲线并求出回归方程:A=1.625C+0.080.表2绞股蓝总皂苷浓度与吸收度对照表l23456由表3可见吸收度A值在1h内基本稳地定并且溶液没有出现沉淀,表明该溶液是稳定的.2.2正交试验结果表4t9(3)正交试验结果(下转第393页)一一一一一一一值脯度第35卷第7期李元鹏,等:蒙特卡罗仿真方法在水处理中的应用研究进展393 tionmethodsforozonedisinfectionkinetics.Wat.Res.1995.29(2):679—686[4]A.Oliviefi,D.Eisenberg,J.Soller.Eta1.Estimationof pathogenremovalinanadvancedwatertreatmentfacilityus—ingMontoCarlosimulation.Wat.Sci.Tech.1999,40(4—5):223—233[5][6]G.Boeije.P.V anrolleghemandM.Matthies.Ageo—rd- ereneedaquaticexposurepredictionmethodologyfordown—the—drainchemicals.Wat.Sci.Tech.1997,36(5):251—258Z.Syposs,0.ReiehartandL.Meszaros.Mierebiological riskaBsessrnentinthebeverageindustry.FoodControl,2005(16):515—521ProgressoftheMonte—-CarloMethodonTreatmentofWasteWater/2Yuan-peng,GUOHuan,TANGYu-lan,DINGDa—li(1.PanjinmunicipalBureauofFinance,Panjin124000,China;2.ShenyangArchiecturalUniv.,Shenyang110168,China;3.Armyunit65547,Haicheng11 0168,China)Abstract:OnthefoundationofintroducingthebasicprincipleoftheMonte—Carlomethod,theCou_r~oftheconcreteabsorption,disin- feetionofthesrinkandthedeeptreatmenttothewaterwascompared.Fromthecou.rseofthewa terpollutionbythechemicalcomposition inthedomesticsewageandthecontrolofthemicroorganisminthefoodindustry.tlIeprogress oftheMonte—Carlomethodontreatingwastewaterwasintroduced.Theapplicationprospectsinthewater—awardanddomesticsewageoftheprogressoftheMonte—Carlo methodontreatingwastewaterwereputforward.Keywords:Watertreatment;Monte—Carlomethod;Coagulation(上接第374页)根据各试验因素的总计数或平均数可以看出:A(甲醇浓度)取A3,B(回流时间)取B2,C(甲醇用量)取C2,D(回流次数)取Dl.即提取绞股蓝总皂苷的方案为A3B2C2D1,也就是有8倍量(16mL)80%的的甲醇溶液回流提取3次,每次2h.2.3淋巴细胞的成环率表5计算200个淋巴细胞的成环率实验结果显示,第一组(对照组,注射0.9%的生理盐水)的平均成环率为l4.5%,第二组(注射2.5mg/mL的绞股蓝总皂苷溶液)的平均成环率为l7.75%,第三组(注射5.0mr/mE的绞股蓝总皂苷溶液)的平均成环率为21.75%,第四组(注射10.0mr/mE的绞股蓝总皂苷溶液)的平均成环率为27.5%.表明绞股蓝总皂苷能够提高玫瑰花环的形成率,并且随着浓度梯度的提高,成环率也提高,因此可知绞股蓝总皂苷能多提高豚鼠的免疫调节能力J.参考文献中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M].第73卷第一分册.北京:科学出版社.1986.265—277肖东,顾振纶,钱曾年.绞股蓝的药理作用[J].中成药,1992.14(1):39—40张阿慧,安彩贤,侯鸿军,等.西北药学杂志.2001,12(16).6:252—253李春喜,王志和,王文林.生物统计学(第二版).科学出版社.2OO2沈杭军,潘红祥.中兽医学杂志,2003.1.42—44WLWHSAIO.Mechanisticstudyoftheanti—cancPA"effectof GynostemmapentaphylhunsaponinsinR6ibreblastcel1.Chi—neseJournalofPharmacologyandToxicology.2OO2,16(6) StudyonOrthogonalExtractionandImmunePharmacodynamicsonTceHofGypenosides ZHANGHui-li,JINBao-feng,/2Yu,/2UHong-sheng(1.DepartmentofLifeScience,LiaoningUniversity,Shenyang110036,China;2.InstituteForDrugandInstrumentControlofShengyangMilitaryCommendofPLA,Sheng yangl10o26,China)Abstract:Byorthogonalexperiment,thebestconditiontoextractgypenosideswasdetennine d.Theimmunepharmacodynamleseffectof thisgypenosidesonTcellwasinvestigated.ebestextractingconditionwasasfollows:the80% methylalcoholsolution:52mL,backflowwithdraws:3times.eachtime:2h.Theresu]toferythrocyterosefformationwas27. 5%.Keywords:Orthogonalexperiment;Gypenosides;ImmunePharmacodynamics……。

绞股蓝提取物制备工艺研究绞股蓝是一种常见的中草药，具有解热、消炎、镇痛等药效。

提取绞股蓝中的有效成分，可以更好地发挥其药用价值。

本文将介绍绞股蓝提取物的制备工艺研究。

绞股蓝提取物主要由绞股蓝中的有效成分提取而成。

在制备过程中，可以选择不同的提取方法，如水提法、醇提法、超声波提取法等。

对比不同的提取方法，可以确定最适合绞股蓝提取的方法。

在水提法中，首先将绞股蓝切碎，然后将其加入水中煮沸。

煮沸时间一般可根据实验需要进行调整，常见的煮沸时间为1小时左右。

煮沸后，使用滤纸过滤得到药液。

此时，可以对药液进行浓缩，将药液放置在低温下进行浓缩，直到得到理想的浓缩液。

在醇提法中，将绞股蓝切碎后，加入适量的乙醇，静置数天或进行反复的浸提。

浸提时间取决于绞股蓝中有效成分的溶出情况。

浸提后，使用滤纸过滤得到药液。

药液可以通过浓缩的方式得到提取物。

超声波提取法是近年来发展起来的一种提取方法，其原理是利用超声波的震荡作用来增加药物与溶剂之间的接触面积，从而实现更高效的提取。

在超声波提取法中，将绞股蓝和溶剂放入超声波器中，进行一段时间的超声波处理。

处理后，使用滤纸过滤得到药液，可以通过浓缩得到提取物。

制备绞股蓝提取物时，还需要对提取物的含量进行测定与分析。

常见的分析方法有紫外分光光度法、高效液相色谱法等。

通过这些分析方法，可以确定提取物中有效成分的含量，进一步评价提取物的质量。

绞股蓝提取物的制备工艺研究可以通过实验进行优化。

可以改变提取剂的种类与浓度、提取时间、提取温度等参数，通过对比不同条件下提取物的质量来确定最佳的工艺参数。

绞股蓝提取物的制备工艺研究对于提高绞股蓝的药用价值具有重要意义。

可以通过优化提取工艺，提高有效成分的提取效率，从而提高绞股蓝的药效。

绞股蓝总皂苷中单体皂苷的分离纯化孔玉琼;金凤燮;鱼红闪【摘要】The total gypenoside was separated and purified by silica gel column. Chloroform and methanol were used as mobile phase in gradient elution, the sample was determined by TLC. 7.87 g total saponin was obtained from 5000 g Gynostemma pentaphyllum by the process of extracted with alcohol, defatted with ligarine, leached with normal butanol, desugared with AB-8 macro porous resin, decolored with D-296 anion ion exchange resin. Three kinds of gypenoside monomer were obtained from 5 g total gypenoside by the proportion in 9.5∶0.5 and 9∶1 chloroform and methanol as mobile phase. The yields were 2.6％, 3.0％, 5.2％ and the purity was up to 88. 73％, 93.11％,78.54％ respectively. The result indicated that the silica gel column is a good separation function to gypenoside.%采用硅胶柱层析法分离绞股蓝总皂苷,以氯仿-甲醇混合液为流动相进行梯度洗脱,薄层层析法跟踪检测.5 000 g绞股蓝干草经乙醇提、石油醚脱脂、正丁醇萃取、AB-8大孔吸附树脂脱糖、D-296阴离子交换树脂脱色后得到总皂苷7.87 g.5 g绞股蓝总皂苷进行硅胶柱层析分离,在体积比为9.5:0.5和9:1的氯仿-甲醇洗脱液洗脱下得到3种较纯的绞股蓝皂苷的单体组分,得率分别为2.6%、3.0%和5.2%.经高效液相色谱检测其纯度,组分A、B、C纯度分别为88.73%、93.11%和78.54%.3种皂苷较粗品纯度得到很大提高,且洗脱液比例和体积的确定为大量制备这3种绞股蓝单体皂苷提供了理论依据.【期刊名称】《大连工业大学学报》【年(卷),期】2011(030)003【总页数】4页(P173-176)【关键词】绞股蓝皂苷;硅胶柱层析;高效液相色谱【作者】孔玉琼;金凤燮;鱼红闪【作者单位】大连工业大学生物工程学院,辽宁大连,116034;大连工业大学生物工程学院,辽宁大连,116034;大连工业大学生物工程学院,辽宁大连,116034【正文语种】中文【中图分类】TS218;Q556.20 引言绞股蓝中含有绞股蓝皂苷、氨基酸、蛋白质、脂肪、黄酮类、糖类、无机元素、纤维素和维生素等多种化学成分，其中以绞股蓝皂苷为主要的药理活性成分。