医学微生物学实验报告[DOC]

测定细菌生长曲线一、实验目的1．了解细菌生长曲线特征，测定细菌繁殖的代时；2．学习液体培养基的配制以及接种方法；3．反复练习无菌操作技术；4．了解不同细菌，不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同；5．掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法；二、实验原理将一定量的菌种接种在液体培养基内，在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数做纵坐标，以培养时间做横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线。

单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整期（迟滞期）、对数期（生长旺盛期）、平衡期（稳定期）、死亡期（衰亡期）。

生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的的全过程动态。

不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。

因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。

测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法。

本实验才用比浊法，由于细胞悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的菌液的浓度。

将所测得的光密度值（OD600）与对应的培养时间做图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。

注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌和死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。

从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间，即代时，以G表示，其计算公式为：G＝（t2-t1）/[(lgW1-lgW2)/lg2]式中t2和t1为所取对数期两点的时间，W1和W2分别为对应时间测得的细胞含量或OD。

三、实验器材大肠杆菌，枯草杆菌菌液及平板；培养基(100mL/250mL三角瓶×10瓶/大组):牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基；取液器(5000ul, 1000ul 各一支)，无菌1000ul吸头若干，无菌5000ul吸头若干，比色皿10个及共用参比杯一个，培养箱3台，722s分光光度计；四、实验步骤1．活化菌种将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中，37℃振荡培养18h，另外准备单菌落平板各1块；2．接种6人大组分为3个小组，按表1接种。

微生物实验报告寄生虫实验目的：本实验旨在观察和研究寄生虫对微生物的寄生现象。

实验材料：1. 寄生虫样本2. 微生物培养基3. 显微镜4. 温箱5. 培养皿和培养瓶等实验室用具实验步骤：1. 准备寄生虫样本：根据实验要求选择合适的寄生虫样本，例如蚴虫、蠕虫等，并进行必要的处理和筛选。

2. 培养微生物：准备适当的微生物培养基，并根据具体的实验设计接种相应的微生物菌株。

3. 寄生虫接种：将寄生虫样本接种到含有微生物的培养基中，然后放置在恰当的环境下（如温箱中），使寄生虫开始寄生并生长。

4. 寄生观察：使用显微镜观察寄生虫在微生物上的寄生情况，并记录寄生虫的数量、分布、生长状态等关键信息。

5. 寄生现象研究：通过对寄生虫与微生物的相互作用进行观察和分析，研究寄生现象对微生物生长、数量、代谢等方面的影响。

6. 数据分析与结果讨论：根据观察和记录的数据，结合相关背景知识进行数据分析，进一步讨论寄生现象对微生物的影响，并推断可能的机制和原因。

7. 结论：总结实验结果和研究发现，阐述寄生虫对微生物的寄生现象对于生态系统和细菌学研究的意义和价值。

实验注意事项：1. 实验过程中应注意个人卫生和实验室安全，遵守相关实验操作规范。

2. 实验材料和设备的选择要与具体的研究目的和方法相符合。

3. 在实验过程中应注意记录和整理实验数据，保证数据的准确性和可重复性。

4. 实验后要及时清洗和消毒使用过的实验器材，以免交叉感染和污染。

实验结果和讨论：【在这里填写实验结果和数据分析的内容，具体根据实际情况进行描述，突出寄生虫对微生物的寄生现象和影响。

】结论：【在这里总结实验结果和研究发现，说明寄生虫对微生物的寄生现象对生态系统和细菌学研究的意义和价值。

】。

［实验名称］:沉淀反应 ［实验目的］:通过单向琼脂扩散测定待测血清Ig 含量［实验材料］: 打孔器(1)将溶解后的离子琼脂冷却到4 5 °C ，加入适当浓度的抗原混 合均匀，吸取3—4毫升加在载玻片上，使其均匀布满载玻片 而又不流失。

(2) 琼脂凝固后制成凝胶板，然后隔适当距离打孔。

(3) 在孔内滴加待测可溶性抗体。

(4) 将凝胶平板放入带盖瓷盘中，下面垫一湿纱布以保持湿度，置 于37 °0恒温箱中2 4小时，观察沉淀环。

单向琼脂扩散是一种定量试验，主要用来测定标本中各种免疫球蛋白或补体成分的含量。

在孔中加入待测抗体使其向四周扩散，经一定时间后抗体与琼脂中抗原相遇，在比例适宜处生成白色沉淀环。

沉淀环直径与抗体浓度成正比。

根据测试样品沉淀环直径的大小，可从已知的标准曲线中查出样品中抗体的含量。

实验二［实验名称］:间接凝集抑制试验（妊娠试验）［实验目的］:测定待检尿液中是否含HCG （绒毛膜促性腺激素）以诊断妊娠［实验材料］:孕妇尿液、非孕妇尿液、HCG 致敏乳胶抗原、抗HCG 血清、载实验一1%离子琼脂、白喉类毒素、白喉抗毒素、载玻片、毛细吸管［试验步骤］: ［实验结果］: (沉淀环直径) 测量沉淀环直径:毫米［实验分析］玻片等［试验步骤］:（1）取一片载玻片，标记出左右。

（2）在载玻片左侧加一滴待检尿液，右侧加一滴非孕妇尿液。

（3）在两侧尿液中分别加一滴抗HCG血清，摇动混匀2 —3分钟。

（4）在两侧液滴中分别再加一滴HCG致敏乳胶抗原，摇动混匀2 — 3分钟。

（5）观察判定结果。

［实验结果］:（凝集和非凝集的描述）左侧（待检尿液侧）呈现均匀的乳状液状态，无凝集颗粒。

间接凝集抑制阳性。

右测（非孕妇尿液侧）出现明显的凝集颗粒。

间接凝集抑制阴性。

［实验分析］:（结合实验原理）孕妇尿液中的HCG含量显著增高。

尿液中的HCG与加入的抗HCG结合, 抗HCG被消耗，使得加入的HCG乳胶抗原不能再与抗HCG结合，不出现乳胶抗原间接凝集反应（凝集被抑制），所以液滴呈现均匀乳状液，为乳胶间接凝集抑制阳性反应。

年级：2009 专业：医学检验班级：一班姓名：赵富海学号：2009221792实验八、细菌的药物敏感试验【K-B法】菌种（均为幼龄菌）：金黄色葡萄球菌1.5×108/ml、大肠埃希菌1.5×108/ml药物纸片：青霉素、庆大霉素、新诺明、环丙沙星方法：1.涂菌（棋盘划线法），室温放10min；2.贴药敏纸片，注意间距（大于24mm）和边距（大于15mm）；3.置35℃ 24h判读结果。

结果如图所示：金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌抗菌药物敏感性试验评价结果实验结论：金黄色葡萄球菌对青霉素耐药，对庆大霉素、新诺明、环丙沙星敏感。

【试管稀释法】菌种：金黄色葡萄球菌1.5×108/ml、大肠b1.5×108/ml抗生素：庆大霉素32u/ml方法：1.对倍稀释抗生素2.加菌液0.1ml/管，摇均35℃ 16—18h3.判读MIC试验操作如下图所示：注意 :设立对照管(肉汤对照管,待测菌生长对照管和质控菌生长对照管) 结果判断: 不出现肉眼可见生长的最低药物浓度为该药对该细菌的MIC. 如图：实验结论：MIC=原药物浓度(32u/ml) ×稀释倍数(1:24)=2u/ml【联合药敏试验】（示教）金黄色葡萄球菌大肠b结果判断：金黄色葡萄球菌联合药敏试验结果判读：①青+链=青单+链单→相加作用②青+红=青单+红单→相加作用③青+万=青单+万单→相加作用④青+林＞青单+林单→协同作用大肠b联合药敏试验结果判读：①青+红=青单+红单→相加作用②青+链=青单+链单→相加作用③青+林=青单或林单→无关作用④青+南＞青单+南单→协同作用【实验讨论】1．K-B法原理将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上。

纸片中所含有的药物吸取琼脂中的水分溶解后便不断地向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度。

在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成透明的抑菌圈。

抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度。