氨基酸和维生素对白僵菌生长的影响
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第３０卷第２期 Ｖｏ１．３０Ｎｏ．２ 唐山师范学院学报 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＴａｎｇｓｈａｎ Ｔｅａｃｈｅｒｓ Ｃｏｌｌｅｇｅ ２００８年３月
Ｍａｒ．２ｏｏ８
氧基酸和维生素对白僵菌生长的影响
张淑红，段晓静，王建伟
（唐山师范学院生命科学系，河北唐山０６３０００）
摘要：探讨了氨基酸和维生素对白僵菌菌丝生长及分生孢子形成的影响。Ｌ．苯丙氨酸最有利于液生分生孢
子形成，产孢量为３．９１４５×１０ 个，Ｌ；Ｌ．脯氨酸可明显促进白僵菌菌丝生长，生物量为５．５ｌｇ／Ｌ。一定浓度的维生
素可抑制菌丝生长，但能不同程度地刺激白僵菌孢子生成．复合维生素Ｂ对菌丝生长抑制作用较明显。单一维生
素刺激孢子生成最适浓度均在ｌ５ ，Ｌ左右，复合维生素Ｂ对白僵菌产孢促进作用最大，其最适浓度为６０ 『几。
关键词：白僵菌；氨基酸；维生素
中图分类号：Ｑ９３９．９ 文献标识码：Ａ 文章编号：ｌ００９－９１ １５（２００８）０２．００５ １．０２
一ｎ 一‘‘‘‘’ … ‘ ～ 一 一 ‘一一 ＩｎｎＵｅｎＣｅｓ ｏｌＡｍｍｏ Ａｃｉｄｓ ａｎｄ Ｖｉｔａｍｉｎ Ｏｎ Ｇｒｏｗｔｈ ０ｔ Ｂｅａｕｖｅｒｉａ Ｂａｓｓｉａｎａ
ＺＨＡＮＧ Ｓｈｕ－ｈｏｎｇ，ＤＵＡＮ Ｘｉａｏｏｊｉｎｇ，Ⅵ ＮＧ Ｊｉａｎ－ｗｅｉ
（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｔａｎｇｓｈａｎ Ｔｅａｃｈｅｒｓ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｈｅｂｅｉ Ｔａｎｇｓｈａｎ ０６３０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｅｔ：Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ ｏｆＡｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ ａｎｄ Ｖｉｔａｍｉｎ ｏｎ Ｇｒｏｗｔｈ ｏｆＢｅａｕｖｅｒｉａ Ｂａｓｓｉａｎａ ｈａｖｅ ｂｅｅｎ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ
ｔｈａｔ Ｌ－ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ ｗａｓ ｆａｖｏｒａｂｌｅ ｔｏ ｓｕｂｍｅｒｇｅｄ ｃｏｎｉｄｉｕｍ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｃｏｎｉｄｉａ Ｗａｓ叩ｔＯ ３．９１４５￣１０ ｓｐｏｒｅｓ／Ｌ，ａｎｄ ｔｈｅ Ｌ－Ｐｒｏｌｉｎｅ
ａｃｉｄ Ｗａｓ ｆａｖｏｒａｂｌｅ ｔｏ ｍｙｃｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ，ｔｈｅ ｂｉｏｍａｓｓ ｗａｓ ｕｐ ｔｏ ５．５ ｌｇ／Ｌ．Ｉｔ ａｌｓｏ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ａ ｃｅｒｔａｉｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｇ ｏｆ ｖｉｔａｍｉｎｓ
ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｍｙｃｅｌｉａｌ，ａｎｄ ｃｏｕｌｄ ｓｔｉｍｕｌａｔｅ ｔｈｅ ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｓｉｎｇｌｅ ｖｉｔａｍｉｎ ａｎｄ ｖｉｔａｍｉｎ Ｂ
ｃｏｍｐｌｅｘ ｗｅｒｅ １ ５“ｇ，Ｌ ａｎｄ ６０１￣ｇ／Ｌ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄ ｔｈｅ ｖｉｔａｍｉｎ Ｂ ｃｏｍｐｌｅｘ Ｗａｓ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｉｎ ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ；ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ；ｖｉｔａｍｉｎ
氮源对于白僵菌的生长发育是不可缺少的，它的主要作
用是合成各种关键的细胞组分【Ｉ Ｊ。作为氮源的物质主要以较
易吸收的蛋白质降解产物形式存在，而降解产物尤其是氨基
酸可通过转氨作用直接被机体利用。宋漳 研究发现以不同 氨基酸为氮源的培养基对金龟子绿僵菌菌丝生长及液生分 生孢子形成影响极大。另外白僵菌的生长还需要少量有机物 质，包括维生素和一些生长调节剂等。 ｌ材料和方法 １．１试验材料 １．１．１供试菌株 白僵菌（ＡＣＣＣ３０１ ｌ１）由中国农科院植保所提供。 １．１．２培养基 基础液体培养基 Ｊ：基础盐：１．５０ ｇ，Ｌ ＫＨ２ＰＯ４，０．５ ｇ，Ｌ ＭｇＳＯ４・７Ｈ２０，０．０１ ｇｅｌ ＣａＣＩ２。微量元素：３０ ，Ｌ Ｈ３ＢＯ４， ４０ ，Ｌ ＭｎＳＯ４‘４Ｈ２０，５０ ，Ｌ Ｎａ２ＭｏＯ４‘２Ｈ２Ｏ，８０ ，Ｌ ＣｕＳＯ４’５Ｈ２０，４００ Ｌ ＺｎＳＯ４ ７Ｈ２０，５００ ，Ｌ ＦｅＣＩ３‘６Ｈ２０。 ０．１％吐温．８０；碳源：２５ ｇ／Ｌ蔗糖。 基础固体培养基【ｑＪ：蔗糖３０ｇ，ＮａＮＯ３ ３ｇ，ＫＣ１ ０．５ｇ，
ＭｇＳＯ４ ０．５ｇ，ＫＨ２ＰＯ４ ｌｇ，ＦｅＳＯ４ ０．０１ｇ，琼脂粉２０ｇ，Ｈ２０
１０００ｍｌ。ＰＤＡ培养基：马铃薯２００ｇ，葡萄糖２０ｇ，琼脂４２ｇ，
水１０００ｍｌ。 ，
１．２试验方法
１．２．１ 氮源对白僵菌菌丝生长及分生孢子形成的影响
白僵菌在ＰＤＡ培养基上２５±ｌ℃条件培养１０ｄ后，用
０．５％吐温８０配制浓度为ｌ×１０￣／ｍｌ孢子悬液。以不同的氨
基酸作为氮源，将各处理培养液的最终含氮量设定为每升培
养液净含氮素０．４２５ｇ。并同时以无机氮源（ＫＮＯ３、
（ＮＨ４）２ＳＯ４）和有机氮源（蛋白胨）作比较试验。向装有４９ｍｌ
基金项目：唐山市重点实验室课题（０４３６０７０１Ｂ－４）。
收稿日期：２００７．０７．１ｌ
作者简介：张淑红（１９７８．），女，河北赞皇县人，硕士，讲师。从事生物化学与分子生物学方向研究。 －５１．
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第３Ｏ卷第２期 唐山师范学院学报 ２００８年３月
基础液体培养基的三角瓶中分别接入ｌｍｌ孢悬液，设３个重
复，置２５±ｌ℃恒温摇床中，振荡培养１２０ｈ，频率为１３０ｒ／ｍｉｎ，
每隔１２ｈ取样观察，用血球计数板记录培养过程中液生分生
孢子的数目，并用干物质称量法测定自僵菌生物量。
１．２．２维生素对白僵菌菌丝生长及分生孢子形成影响
配制浓度为ｌ×１０ ／ｍｌ孢子悬液，取孢子悬液５００１ａＬ，
加入到己灭菌的基本培养基平板上，置于２５±ｌ℃的恒温培养
箱中培养５ｄ待用。用ｄ＝５ｍｍ的打孔器移种菌龄为５ｄ的菌
丝块到含有维生素的平板中央，置恒温培养箱中培养，于接
种后第１２ｄ用十字交叉法测量菌落直径，并用血球计数板测
其孢子含量。
２结果与分析
２．１氮源对白僵菌菌丝生长及分生孢子形成的影响
表ｌ不同氨基酸对白僵菌生长的影响
由表ｌ可知，不同的氨基酸对白僵菌菌丝生长及分生孢
子的形成具有不同影响。在以Ｌ－苯丙氨酸为氮源的培养基
中，液生分生孢子产孢量最大，其次是ＤＬ．胱氨酸。
Ｏ￣ＨＯ２Ｓ０４较ＫＮＯ３更有利于液生分生孢子形成。在以Ｌ－
脯氨酸为氮源的培养基中，生物量最多，其次是ＤＬ－色氨酸。
２，２维生素对白僵菌菌丝生长及分生孢子形成的影响
图ｌ 不同浓度维生素对白僵菌菌丝生长的影响
图ｌ显示，１５￣ｔｇ／Ｌ、６０１ａｇ／Ｌ浓度泛酸钙能够促进白僵菌
的生长，其他维生素在各个浓度下均不不同程度抑制了白僵
菌的生长，其中复合维生素Ｂ在各个浓度下对白僵菌菌丝生
长的抑制作用均比较明显。
供试维生素在各个浓度下对白僵菌的产孢量具有不同
．
５２．
程度的影响。图２显示，各种维生素均能促进白僵菌的孢子
生成，但所需最适浓度不同，分别处在５￣ｔｇ／Ｌ～６０ ｇ，Ｌ之间。
供试的６种单一维生素有效促进产孢量的浓度均在１５ｔｔｇ／Ｌ
左右，而复合维生素Ｂ最适浓度为６０ ｇ，Ｌ，且对白僵菌产
孢量的促进作用最大；各种供试维生素在１００ ｇ，Ｌ浓度条件
下对白僵菌的产孢均具有明显的抑制作用。
图２供试维生素对白僵菌产孢的影响
３讨论
氨基酸作为氮源的培养基对白僵菌菌丝生长及液生分
生孢子形成有一定影响。Ｌ－苯丙氨酸和ＤＬ．胱氨酸有利于液
生分生孢子的形成，而Ｌ・脯氨酸和ＤＬ．色氨酸显然有利于白
僵菌菌丝生长。有些氨基酸如Ｌ．谷氨酸、Ｌ－谷氨酰胺产孢量
低，但生物量却较高，这可能是由于某一氮源尽管对菌丝的
营养生长很好，但可能不适于繁殖Ｉ 。
维生素作为生长辅助因子一般都是辅酶的成分或充当
辅酶的功能。在培养基中添加一定浓度的维生素可以抑制窗
丝生长，但适宜浓度的维生素可以不同程度地刺激白僵菌孢
子的生成，只是所需最适浓度不同。各种供试维生素在
１００ｇｇ／Ｌ浓度条件下对白僵菌的产孢均具有抑制作用，高浓
度维生素不利于白僵菌孢分生孢子的产生。复合维生素Ｂ
可以极大地刺激白僵菌产孢，可能是因为多种维生素的协同
作用。氨基酸的复配或维生素之间的复配对白僵菌孢子生成
的影响尚有待进一步的研究和探讨。
【参考文献】
【ｌ】邢来君，李明春．普通真菌学【Ｍ】．北京：高等教育出版社，
１９９９，５９－６４，１２６－１２７．
【２】宋漳，江英成，饶如春．氨基酸维生素对绿僵菌液生分生孢
子形成影响【Ｊ】．福建林学院学报，２０００，２０（３）：２５１－２５４，
【３】宋漳．液体深层培养绿僵菌分生孢子的研究【Ｊ】．林业科学，
２００１，３７（５）：１３４－１３９．
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ｂｅｔｗｅｅｎ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｏｆ ｍｅｔａｒｒｈｉｚｉｕｍ
ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ ｉｎ ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｅｒｏｉｄ［Ｊ］．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ
ｏｆＴｉａｎｊｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００１，７（１）：１－５．
（责任编辑、校对：李春香）
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