复方丹参片中四种成分的高效液相色谱-电化学检测-紫外检测法分析
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中药制剂有效成分含量测定中高效液相色谱法的应用分析中药类型包括中药成方制剂、中成药、单味制剂等,与西药相比,中药制剂不良反应小,用量少,且具有一定持久性和高效性。
但中药制剂所含成分较多,制备工艺复杂,在中药制剂质量控制上很难做到面面俱到,造成中药制剂质量良莠不齐。
为保证中药制剂质量,该研究采用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)对中药制剂有效成分含量测定中的应用与发展进行分析研究,并提出观点,以供参考。
标签:中药制剂;含量测定;高效液相;色谱法中药制剂质量检测中,一般将具有生理活性的化学成分作为控制标准与质量评价,以衡量产品是否稳定、质量是否达标等。
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种具有分析速度快、检测灵敏度高、分离效率高、应用范围广、操作方便、重现性高等诸多特点的成分含量测定方法,可用于分析样品沸点、大分子量有效成分、热不稳定性等,已成为目前控制中药制剂有效成分的重要手段。
该研究对HPLC法在中药制剂中药苷类、萜类、黄酮类、生物碱类、醌类、木脂素类、香豆素类、有机酸类等8种有效成分含量测定应用进行介绍。
1 中药苷类成分含量测定苷类在是天然药物研究中不可忽视的一类成分,其广泛分布于中药界,生理活性多样,结构不一,国内外均有对采用HPLC法测定中药苷類成分含量的文献报道[1]。
高广慧等[2]采用HPLC法对中芍药苷含量进行测定,将提取与分离工艺优化,有效分离芍药苷成分,方法准确可靠,能够较好控制中成药、中药材中芍药苷质量。
苏晓楠等[3]通过HPLC法,快速、准确测定了芒果苷、新芒果苷及知母皂苷成分的含量,为中药材质量控制的全面性奠定了坚实基础。
陈华等[4]用HPLC法测定黄芩苷含量,通过精密度、稳定性、重复性、加样回收率试验及样品含量测定,结果显示样品分离度及重现性好,峰型佳,无杂质峰干扰,保留时间稳定,精密度、稳定性、重复性均符合标准。
中草药粉末成分鉴定是一种对中草药粉末进行化学分析和检测,以确定其主要成分和含量的方法。
以下是一些常见的中草药粉末成分鉴定方法:
1. 高效液相色谱法(HPLC):这是一种常用的分析方法,可以对中草药粉末中的多种成分进行分离和检测。
通过将样品注入HPLC系统,可以得到不同成分的峰形图谱,从而确定其含量和纯度。
2. 气相色谱法(GC):这是一种用于分析挥发性成分的方法。
通过将样品注入GC系统,可以得到不同成分的气相色谱图谱,从而确定其含量和纯度。
3. 红外光谱法(IR):这是一种用于分析分子结构的方法。
通过将样品照射到红外光谱仪上,可以得到不同成分的红外光谱图谱,从而确定其分子结构和含量。
4. 紫外-可见分光光度法(UV-Vis):这是一种用于分析有机化合物的方法。
通过将样品照射到紫外-可见分光光度计上,可以得到不同成分的吸收光谱图谱,从而确定其含量和纯度。
以上是一些常见的中草药粉末成分鉴定方法,不同的方法适用于不同的成分分析。
在实际应用中,通常会采用多种方法结合使用,以提高分析结果的准确性和可靠性。
高效液相色谱在中药含量测定中的应用白梓静【摘要】The components contained in traditional Chinese medicine and traditional Chinese medicine preparation containing composition are complicated ,and their interference is serious .With the continuous improvement of people’s living standard ,and health carereforming ,pharmaceutical analysis is playing a more and more important role .The high performance liquid chromatography because of its characteristics of high efficiency ,high speed ,high sensitivity ,is used widely in drug analysis .This article reviews the principles of high performance liquid chromatography ,composition and its determination in terms oftradi‐tional Chinese medicine study ,and prospects HPLC applications in pharmaceutical analysis .%中药材和中药制剂所含成分复杂,相互干扰较为严重。
随着人民生活水平的不断提高,医疗卫生的改革,药品分析正发挥着越来越重要的作用。
而高效液相色谱法以其高效、高速、高灵敏度的特点,在药品分析中的应用越来越广泛。
2020版《中国药典》⾼效液相⾊谱法检验操作规程⼀、⽬的:制订详尽的⼯作程序,规范检验操作,保证检验数据的准确性。
⼆、范围:本操作规程适⽤于⾼效液相⾊谱法的检验操作。
三、职责:1、检验员:严格按操作规程操作,认真、及时、准确地填写检验记录;2、化验室负责⼈:监督检查检验员执⾏本操作规程。
四、内容:简述:⾼效液相⾊谱法系采⽤⾼压输液泵将规定的流动相泵⼊装有填充剂的⾊谱柱,对供试品进⾏分离测定的⾊谱⽅法。
注⼊的供试品,由流动相带⼊⾊谱柱内,各组分在柱内被分离,并进⼊检测器检测,由积分仪或数据处理系统记录和处理⾊谱信号。
1、对仪器的⼀般要求和⾊谱条件⾼效液相⾊谱仪由⾼压输液泵、进样器、⾊谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。
⾊谱柱内径⼀般为2.1~4.6mm,填充剂粒径为2~10µm。
超⾼效液相⾊谱仪是耐超⾼压、⼩进样量、低死体积、⾼灵敏度检测的⾼效液相⾊谱仪。
1.1⾊谱柱1.1.1⾊谱柱的类型1.1.1.1反相⾊谱柱:以键合⾮极性基团的载体为填充剂填充⽽成的⾊谱柱。
常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等;常⽤的填充剂有⼗⼋烷基硅烷键合硅胶、⾟基硅烷键合硅胶和苯基硅烷键合硅胶等。
1.1.1.2正相⾊谱柱:⽤硅胶填充剂,或键合极性基团的硅胶填充⽽成的⾊谱柱。
常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。
氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可⽤作反相⾊谱。
1.1.1.3离⼦交换⾊谱柱:⽤离⼦交换填充剂填充⽽成的⾊谱柱。
有阳离⼦交换⾊谱柱和阴离⼦交换⾊谱柱。
1.1.1.4⼿性分离⾊谱柱:⽤⼿性填充剂填充⽽成的⾊谱柱。
1.1.2⾊谱柱的内径与长度,填充剂的形状、粒径与粒径分布、孔径、表⾯积、键合基团的表⾯覆盖度、载体表⾯基团残留量,填充的致密与均匀程度等均影响⾊谱柱的性能,应根据被分离物质的性质来选择合适的⾊谱柱。
1.1.3温度会影响分离效果,品种正⽂中未指明⾊谱柱温度时系指室温,应注意室温变化的影响。
通则0512高效液相色谱法高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱,对供试品进行分离测定的色谱方法。
注入的供试品,由流动相带入色谱柱内,各组分在柱内被分离,并进入检测器检测,由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。
1.对仪器的一般要求和色谱条件高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。
色谱柱内径一般为3.9~4.6mm,填充剂粒径为3~10μm。
超高液相色谱仪是适应小粒径(约2μm)填充剂的耐超高压、小进样量、低死体积、高灵敏度检测的高效液相色谱仪。
(1)色谱柱反相色谱柱:以键和非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。
常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等;常用的填充剂优十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。
正相色谱柱:用硅胶填充剂,或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。
常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。
氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作反向色谱。
离子交换色谱柱:用离子交换填充剂填充而成的色谱柱。
有阳离子交换色谱柱和阴离子交换色谱柱。
手性分离色谱柱:用手性填充剂填充而成的色谱柱。
色谱柱的内径和长度,填充剂的形状、粒径与粒径分布、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、载体表面基团残留量,填充的致密与均匀程度等均影响色谱柱的性能,应根据被分离物质的性质来选择合适的色谱柱。
温度会影响分离效果,品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温,应注意室温变化的影响。
为改善分离效果可适当提高色谱柱的温度,但一般不宜超过60℃。
残余硅羟基未封闭的硅胶色谱柱,流动相的pH值一般应在2~8之间。
残余硅羟基已封闭的硅胶、聚合物复合硅胶或聚合物色谱柱可耐受更广泛pH值的流动相,适合于pH值小于2或大于8的流动相。
(2)检测器最常用的检测器为紫外-可见分光检测器,包括二极管阵列检测器,其他常见的检测器有荧光检测器、蒸发光散射检测器、示差折光检测器、电化学检测器和质谱检测器等。
高效液相色谱法测定丹红注射液中成分的含量丹红注射液是由中药丹参、红花采用现代中药制药提取工艺制作而成的中药复方注射液,现代药理研究显示[1-2],丹红注射液中包含丹参素钠、原儿茶醛、尿苷、腺苷、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸羟基红花黄色素A(以下简称丹酚酸A)等有效成分,故其具有活血化瘀,理气通脉的功效,从而起到改善心肌缺血、抑制动脉粥样硬化,抗血小板凝聚、改善微小循环功能等作用,临床上常用于冠心病、心绞痛、心梗,缺血性脑卒中等瘀血闭阻所致诸证[7-9]。
虽然丹红注射液在临床上已经使用多年,且疗效良好,但是对其药物的有效成分进行定量分析的研究仍较少,未能有效的建立一个中药质量评定方法,不利于本品的产品质量控制。
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是目前在中药成分研究领域中最为广泛使用的分析方法之一,其具有应用范围广、检测分析快、药物分离、检出灵敏度高、操作自动简便等优点[10-11],本研究使用HPLC 对丹红注射液的各主要成分含量进行测定,现报道如下。
1 仪器与试药1.1 仪器Agilent高效液相(型号:1200型),其中该色谱系统还包括以下主要适配零件和系统,如二极管阵列DAD检测器(型号:G1315D型)、四元梯度泵(型号:G1311A型)、柱温箱(型号:G1316A 型)、在线脱气机和化学工作站(型号:G1322A型)。
购买于上海精密仪器仪表公司的电子分析天平(型号:*****型)和超声波清洗器(型号:KQ-100DE);购买于法国*****E公司的超纯水系统(型号:Mili-RO Plus型),上海科导超声仪器有限公司;双光束紫外可见分光光度计(型号:MQK-UV1800型)购买于上海米青科实业有限公司。
1.2 试药于北京谱析科技有限公司和中国药品生物制品检定所购买丹参素钠对照品、原儿茶醛对照品、咖啡酸对照品、迷迭香酸对照品、芦丁对照品、丹酚酸B对照品、丹酚酸A对照品,批号分别为*****-*****、*****-*****、***-*****、*****-*****、*****-*****、***-*****、***-*****。
食品中主要营养成分的检测方法分析食品中主要营养成分的检测方法分析摘要:食品中主要营养成分的检测方法对于食品安全和质量的控制至关重要。
本文将对食品中主要营养成分的检测方法进行分析和总结,包括蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素和矿物质的检测方法。
为了实现准确、快速、可靠的检测结果,需要使用一系列仪器和技术手段,例如色谱、质谱、液相色谱、光谱分析等。
同时,还需要严格按照相关标准进行操作和分析,并对结果进行统计和分析。
关键词:食品检测;主要营养成分;蛋白质;脂肪;碳水化合物;维生素;矿物质引言:食品的主要营养成分对于人体的生长发育和健康至关重要。
因此,食品中主要营养成分的检测方法对于食品安全和质量的控制非常重要。
当前,食品中主要营养成分的检测已经成为食品行业的一个重要环节。
本文将分析和总结食品中主要营养成分的检测方法,为食品安全和质量的控制提供科学依据。
一、蛋白质的检测方法1. 理化性质法:根据蛋白质的理化性质,如溶解性、反应性等进行检测。
2. 紫外吸收光谱法:利用蛋白质在特定波长区域的紫外吸收特性进行检测。
3. 免疫学法:利用抗体与特定蛋白质结合的特性进行检测。
4. 氨基酸分析法:通过分析蛋白质降解产生的氨基酸种类和含量来确定蛋白质含量。
二、脂肪的检测方法1. 重量法:通过称量样品和提取物的重量差来确定脂肪含量。
2. 溶剂提取法:利用溶剂将食品中的脂肪溶解,并通过蒸发和称量来确定脂肪含量。
3. 气相色谱法:通过气相色谱仪对食品中的脂肪进行分析和检测。
4. 差热分析法:通过测量食品样品和相应提取物之间的温度差异来确定脂肪含量。
三、碳水化合物的检测方法1. 高效液相色谱法:利用液相色谱仪对食品中的碳水化合物进行检测和分析。
2. 酶法:利用特定的酶对食品中的碳水化合物进行酶解和测定。
3. 分光光度法:利用食品中的碳水化合物在特定波长的光线下吸收特性进行检测。
四、维生素的检测方法1. 高效液相色谱法:利用高效液相色谱仪对食品中的维生素进行分析和检测。
制药工程中常用药物检验方法的使用方法制药工程是一门综合性较强的学科,涉及到药物的研发、生产和质量控制等方面。
在制药工程中,药物的检验是非常重要的环节,它可以确保药物的质量和安全性。
本文将介绍制药工程中常用的药物检验方法及其使用方法。
1. 红外光谱法红外光谱法是一种常见的药物质量检验方法。
它利用药物分子的红外吸收特性来进行定性和定量分析。
使用红外光谱法时,首先需要准备样品,将样品放置于红外光谱仪中进行测试。
然后,通过观察红外光谱图,分析样品中不同化学键的吸收峰,从而确定样品的成分和质量。
2. 高效液相色谱法高效液相色谱法是一种常用的药物分析方法,适用于检测药物中各种成分的含量。
使用高效液相色谱法时,首先需要准备样品和色谱柱。
将样品注入色谱柱中,再通过改变流动相的组成和流速,使样品中的各种成分分离。
最后,通过检测样品在色谱柱中的峰值面积或浓度,来计算各种成分的含量。
3. 紫外可见光谱法紫外可见光谱法是一种常用的定量分析方法,适用于检测药物中某些有特定吸收特性的成分。
使用紫外可见光谱法时,首先需要准备样品溶液,并利用紫外光谱仪测定样品吸光度。
然后,通过比较样品的吸光度与标准曲线或已知浓度的参比溶液的吸光度之间的关系,来计算样品中特定成分的含量。
4. 气相色谱法气相色谱法是一种常用的药物分析方法,适用于检测药物中挥发性成分的含量。
使用气相色谱法时,首先需要准备样品和气相色谱仪。
将样品插入气相色谱仪中,通过升温使样品中的挥发性成分蒸发,并通过色谱柱分离。
最后,通过检测样品在色谱柱中的峰值面积或浓度,来计算挥发性成分的含量。
5. 核磁共振波谱法核磁共振波谱法是一种常用的定性和定量分析方法,适用于研究药物的结构和组成。
使用核磁共振波谱法时,首先需要准备样品,并放置于核磁共振仪中进行测试。
通过观察样品的核磁共振谱图,可以分析样品中不同核的化学位移和相互作用,从而确定样品的结构和成分。
总结制药工程中常用的药物检验方法有红外光谱法、高效液相色谱法、紫外可见光谱法、气相色谱法和核磁共振波谱法。