可滴定酸检测试剂盒(滴定法)
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可滴定酸(TA)检测试剂盒(滴定法)
简介:
有机酸存在于多种生命体中,植物组织或果实中有机酸种类和数量因植物组织或果实
种类和品种而异,进而影响果实的口味、酸糖比、耐储性,植物组织或果实中含有苹果酸、
柠檬酸、酒石酸、草酸等多种有机酸。
Leagene可滴定酸(TA)检测试剂盒(滴定法)检测原理是根据酸碱中和原理进行的,即
用已知的氢氧化钠溶液滴定待测样品,根据氢氧化钠的消耗量计算待测样品中可滴定酸的
含量。该试剂盒主要用于定量检测植物组织或果实中可滴定酸(如苹果酸、柠檬酸、酒石酸、
草酸等),该50T试剂盒可以检测约47-48次样本。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于
临床诊断或其他用途。
组成:
自备材料:
1、 实验材料:桃子、李子、苹果、杏等果实或其他植物组织
2、 研钵或匀浆器
3、 离心管或试管
4、 滤纸或纱布
5、 滴定管
操作步骤(仅供参考):
1、 配制TA Lysis buffer工作液:取适量的TA Lysis buffer(10×),TA Lysis buffer(10×):
蒸馏水按一定的比例混合,即为TA Lysis buffer工作液。
2、 取果实或其他植物组织,洗净,擦干,称取剪碎的新鲜样品,置于研钵或匀浆器,加入
TA Lysis buffer工作液,充分研磨或匀浆后转入离心管或试管,用少量TA Lysis buffer
工作液冲洗研钵或匀浆器,一并转入离心管或试管,补加TA Lysis buffer工作液,混
匀,静置,用滤纸或纱布滤出滤液,留取滤液,即为可滴定酸提取液,保存待用。
编号 名称 TC2303
50T
Storage
试剂(A): TA Lysis buffer(10×) 250ml RT
试剂(B): TA滴定液(0.1M) 500ml RT
试剂(C): TA标定液 120ml RT
试剂(D): 酚酞显色液 5ml RT 避光
使用说明书 1份
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3、 标定TA滴定液:取TA标定液,滴加酚酞显色液,用TA滴定液滴定至溶液呈粉红色。
按如下公式计算TA滴定液准确浓度:
TA滴定液准确浓度(M)=0.24/(TA滴定液所用毫升数×0.204)
4、 滴定测定:取10ml可滴定酸提取液加至三角瓶中,滴加酚酞显色液,用已经标定好的
TA滴定液进行滴定至溶液初现粉红色并在内不褪色为终点,记录TA滴定液的用量。以
蒸馏水代替可滴定酸提取液进行滴定,作为空白对照。
计算:
根据TA滴定液消耗量,计算样品中可滴定酸含量,计算公式如下:
可滴定酸含量(μg/ml·g·h)={V×C×f×(V
1-V2)}/(W×VS
)
式中:V=样品提取液总体积(ml)
V=滴定时所取滤液体积(ml)
C=标定后的TA滴定液摩尔浓度(M)
V1=滴定提取液所用的TA滴定液的体积(ml)
V0=滴定蒸馏水所用的TA滴定液的体积(ml)
W=样品鲜重(g)
f=折算系数,常按照果实中主要的有机酸进行折算,苹果、梨、桃、杏、李、
番茄、莴苣等果实中主要含苹果酸,折算系数为0.067;柑橘类果实中主要含柠檬酸,其折
算系数为0.07;葡萄果实主要含酒石酸,其折算系数为0.075。其他样品的折算系数参考
上述。
注意事项:
1、 实验材料应尽量新鲜,如取材后不立即使用,应存于-20。
2、 果实中含酸量较少时,可将TA滴定液适当稀释后使用,可考虑用0.05-0.01M TA滴
定液进行滴定。
3、 TA滴定液含量计算公式中V0为3次空白测定的平均值。
4、 如果所测样本的浓度过高,应用TA Lysis buffer工作液稀释样品后重新测定。
有效期:
12个月有效。
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