醋酸纤维素膜
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醋酸纤维素薄膜电泳法分离鉴定三种腺苷酸一、目的掌握醋酸纤维素薄膜电泳法分离带电颗粒原理;观察核苷酸类物质的紫外吸收现象。
二、原理带电粒子在电场中向着与其自身带相反电荷的电极移动的现象,称为电泳。
控制电泳条件(如pH 等),使混合试样中的不同组分带有不同的净电荷,各组分在电场中移动的速度或方向各不相同,从而达到分离各组分的目的,这就是电泳分析法。
以醋酸纤维素薄膜作支持物进行电泳分析的方法称为醋酸纤维素薄膜电泳法。
在pH4.8 电泳缓冲液条件下,带有不同量磷酸基团的AMP、ADP、ATP 解离之后,带有负电荷量的顺序为:ATP>ADP>AMP,它们在电场中移动速度不同,从而得到分离。
又利用核苷酸类物质的碱基具有紫外吸收性质,将分离后的电泳醋酸薄膜放在紫外灯下,可见暗红色斑点,参照标准样品在同样条件下的电泳情况,对混合试样分离后的各组分进行鉴定。
三、仪器与试剂1.仪器(1)电泳仪、电泳槽(平板式)(2)紫外灯(3)电吹风、医用镊子(4)醋酸纤维素薄膜(8 cm×12cm)(5)微量进样器(10μl 或50μl)2.试剂(1)柠檬酸缓冲液(pH4.8):称取柠檬酸8.4g,柠檬酸钠17.6g,溶于蒸馏水,稀释到2000ml。
(2)标准腺苷酸溶液:用蒸馏水将纯AMP、ADP、ATP 分别配成100mg/ 10mL 溶液。
其中AMP 需略加热助溶。
置冰箱备用。
(3)混合腺苷酸溶液:分别取上述标准液AMP、ADP、ATP 各1 份等量混匀。
置冰箱备用。
四、操作步骤1.点样:将醋酸纤维素薄膜放入pH4.8 柠檬酸缓冲液中,待膜完全浸透(约0.5h)后用镊子取出,夹在清洁的滤纸中间,轻轻吸去多余的缓冲液,仔细辨认薄膜无光泽面,用微量进样器在无光泽面上点样。
点样点距薄膜一端1.5cm,样点之间距离1.5cm。
点样量为2~3μl,按少量多次原则分2~3 次点完。
2.电泳:向两个电泳槽内注入pH4.8 的柠檬酸缓冲液,缓冲液的高度约为电泳槽深度的3/4。
醋酸纤维素薄膜电泳
醋酸纤维素薄膜电泳是一种高效、快速和准确的分离和鉴定分子的技术。
这种技术被广泛应用于生物化学、医学、环境科学等领域。
醋酸纤维素薄膜电泳是一种基于毛细管电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳的分离技术。
该技术将醋酸纤维素质地的薄膜作为分离介质,样品通过电泳移动分离在薄膜的表面。
这种技术具有高分辨率、高灵敏度、高通量和半制备规模的优点。
醋酸纤维素薄膜电泳技术的应用范围广泛,包括但不限于以下方面:
1、蛋白质分离和鉴定。
醋酸纤维素薄膜电泳技术可以对蛋白质进行高分辨率的分离和鉴定,对于寻找新的蛋白质、筛选生物标志物和新药物的作用非常重要。
2、核酸分离和鉴定。
醋酸纤维素薄膜电泳技术还可以高效地分离和纯化核酸,对于对基因筛选和遗传学研究非常重要。
3、药物分析和质量控制。
对于药物制剂的分析和质量控制,醋酸纤维素薄膜电泳技术可以快速准确地检测出药物中的有效成分和有害成分。
4、环境分析。
醋酸纤维素薄膜电泳技术也可以用于环境分析,例如分析水体中的有机物和无机物质。
在应用这种技术时,需要注意以下几点:
1、选择合适的样品前处理方法,以保证样品的纯度和完整性。
2、选择合适的运行条件,如电场强度、分离介质pH值、电泳时间等,以获得最佳的分离效果。
3、选择合适的检测方法,如荧光检测、吸收光谱检测等,以达到最优的检测灵敏度和选择性。
总之,醋酸纤维素薄膜电泳技术在生物化学、医学、环境科学等领域中具有广泛的应用前景。
我们需要不断地探索和创新,以推动这种技术的发展和应用。
第36卷第2期2008年2月化 工 新 型 材 料N EW CH EM ICA L M A T ERIA LS V ol .36N o .2·39·基金项目:陕西省教育厅专项(06JK244)作者简介:刘登峰(1978-),男,硕士,讲师,主要从事功能高分子材料的研究。
醋酸纤维素均质膜的制备及性能研究刘登峰1 付登洲2 杨志远1(1.西安科技大学化学与化工系,西安710054;2.西安交通大学理学院,西安710049)摘 要 分别以丙酮(A C )和四氢呋喃(T HF )为溶剂来制取不同浓度的醋酸纤维素(CA )均质膜。
通过对膜溶胀度、拉伸强度、酸碱使用范围、分离性能的测试,发现AC -CA 膜比T H F -CA 膜在乙醇中的溶胀度大;AC -CA 膜比T HF -CA 膜的分离效果好。
均质膜的拉伸强度随铸膜液中醋酸纤维素含量的增加而增加,均质膜的酸碱使用范围为6~8。
聚合物浓度为18%时,A C -CA 膜的分离效果最好;而对于T H F -CA 膜,聚合物浓度为15%时,膜的分离效果最好。
关键词 醋酸纤维素,溶胀度,渗透通量,分离系数Study on preparation and properties of cellulose acetate homogeneous membraneLiu Deng feng 1 Fu Dengzhou 2 Yang Zhiy uan 1(1.Depar tment of Chemistry and Chemical Engineering ,Xi 'an University of Science andTechnolo gy ,Xi 'an 710054;2.Cho ol o f Science ,Xi 'an Jiao to ng U niversity ,Xi 'an 710049)A bstract Ce llulose acetate homog eneo us membrane with diffe rent concentratio n w as prepared by acet and tetr a -hy dr ofuran as so lv ent individual .Swelling deg ree and te nsile strength and acid base range and separate pro per ty the mem -br ane of w ere tested .It w ere fo und tha t the swelling deg ree o f AC -CA membr ane w as higher than T H F -CA membrane in ethanol ,the sepa ratio n effect o f AC -CA membr ane wa s better than T HF -CA membrane ,the tensile st reng th of membr ane was consistent w ith the content of cellulo se ace ta te ,the acid base r ang e of membrane w as 6~8,the sepa ratio n effec t of AC -CA membrane w as the best w hen the concentra tion of cellulose ace ta te w as 18%,but the separa tion ef fect of T HF -CA membr ane w as the best when the co ncentration of Cellulose ace tate was 15%.Key words ce llulose ace ta te ,swelling deg ree ,penetration flux ,sepa ratio n coefficient 醋酸纤维素(CA )是目前广泛应用的膜材料。
实验三_醋酸纤维素薄膜电泳法分离⾎清蛋⽩⼭东⼤学实验报告2011年3⽉27⽇姓名张⾏润系年级2009级⽣科4班学号200900140177 同组者于潜科⽬⽣物化学实验题⽬醋酸纤维素薄膜电泳法分离⾎清蛋⽩仪器编号105⼀、实验⽬的掌握醋酸纤维素薄膜电泳法分离⾎清蛋⽩的原理和⽅法。
⼆、实验原理蛋⽩质是两性电解质。
在pH值⼩于其等电点的溶液中,蛋⽩质为正离⼦,在电场中向阴极移动;在pH值⼤于其等电点的溶液中,蛋⽩质为负离⼦,在电场中向阳极移动。
⾎清中含有数种蛋⽩质,它们所具有的可解离基团不同,在同⼀pH的溶液中,所带净电荷不同,故可利⽤电泳法将它们分离。
⾎清中含有清蛋⽩、α-球蛋⽩、β-球蛋⽩、γ-球蛋⽩等,各种蛋⽩质由于氨基酸祖坟、⽴体构象、相对分⼦质量、等电点及形状不同,在电场中迁移速度不同。
由表可知,⾎清中5种蛋⽩质的等电点⼤部分低于pH值7.0,所以在pH8.6的缓冲液中,它们都电离成负离⼦,在电场中向阳极移动。
在⼀定范围内,蛋⽩质的含量与结合的燃染料量成正⽐,故可将蛋⽩质区带剪下,分别⽤0.4mol/L NaOH溶液浸洗下来,进⾏⽐⾊,测定其相对含量。
也可以将染⾊后的薄膜直接⽤光密度计扫描,测定其相对含量。
肾病、弥漫性肝损害、肝硬化、原发性肝癌、多发性⾻髓瘤、慢性炎症、妊娠等都可以使⽩蛋⽩下降。
肾病时α1、α2、β球蛋⽩升⾼,γ-球蛋⽩降低。
肝硬化时α2、β-球蛋⽩降低,⽽α1、γ-球蛋⽩升⾼。
三、实验器材1、醋酸纤维薄膜(2cm*8cm,厚度120µm)2、⼈⾎清;3、烧杯及培养⽫数只;4、点样器;5、⽵镊⼦;6、玻璃棒;7、电吹风;8、试管六只;9、恒温⽔浴锅;10、电泳槽;11、直流稳压电泳仪;12、剪⼑实验试剂1.电极缓冲液2.染⾊液(可重复使⽤,使⽤后回收)3.漂洗液(100ml每组):95%⼄醇45ml,冰醋酸5ml,⽔50ml。
4.透明液(20ml每组):⽆⽔⼄醇:冰醋酸=7:3。
简述醋酸纤维素薄膜电泳原理及优点
醋酸纤维素薄膜电泳是一种电泳分离技术,它是利用醋酸纤维素薄膜作为固定相,将荷电样品在电场作用下在薄膜表面进行分离和富集。
这种电泳技术广泛应用于生物学、化学等领域,在分离、纯化和表征化合物方面具有独特的优点。
醋酸纤维素薄膜电泳的原理是基于涂覆在玻璃或石英片表面的醋酸纤维素薄膜,通过电场使荷电物质在薄膜表面上移动,实现荷电物质的分离。
这种技术与传统的凝胶电泳相比,具有以下优点:
1.高分辨率
醋酸纤维素薄膜电泳是一种高分辨率的电泳技术,由于该技术的固定相为薄膜,因此可以提供一个大的有效表面积,以提高分离效率和分辨率。
与其他电泳技术相比,它可以实现更明显的分离和更清晰的图谱。
2.灵敏度高
醋酸纤维素薄膜电泳技术可以分离和检测非常低浓度的样品,对于物质的分离和检测具有高度的灵敏度。
这使得它成为生物学和化学研究中极为重要的技术。
3.简便易行
醋酸纤维素薄膜电泳技术具有简单易于操作的优点,使用起来非常方便,减少了许多样品前处理的步骤,提高了分析效率和速度。
4.适用广泛
醋酸纤维素薄膜电泳技术在生物学和化学领域有着广泛的应用,可以分离细胞质、蛋白质、核酸和药物化合物等不同的生化分子,成为分离、纯化和分析化合物的重要工具。
总之,醋酸纤维素薄膜电泳技术是一种独特的电泳分离技术,具有高分辨率、高灵敏度、简便易行和适用广泛等优点,在生物学和化学研究中有着广泛的应用前景。
实验目的掌握醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白的原理和方法。
二、实验原理蛋白质是两性电解质。
在pH值小于其等电点的溶液中,蛋白质为正离子,在电场中向阴极移动;在pH值大于其等电点的溶液中,蛋白质为负离子,在电场中向阳极移动。
血清中含有数种蛋白质,它们所具有的可解离基团不同,在同一pH的溶液中,所带净电荷不同,故可利用电泳法将它们分离。
血清中含有白蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白等,各种蛋白质由于氨基酸祖坟、立体构象、相对分子质量、等电点及形状不同,在电场中迁移速度不同。
由表可知,血清中5种蛋白质的等电点大部分低于pH值7.0,所以在pH8.6的缓冲液中,它们都电离成负离子,在电场中向阳极移动。
蛋白质名称等电点相对分子质量白蛋白 4.88 69000α1-球蛋白 5.06 200000α2-球蛋白 5.06 300000β-球蛋白 5.12 90000~150000γ-球蛋白 6.85~7.50 156000~300000在一定范围内,蛋白质的含量与结合的染料量成正比,故可将蛋白质区带剪下,分别用0.4mol/L NaOH溶液浸洗下来,进行比色,测定其相对含量。
也可以将染色后的薄膜直接用光密度计扫描,测定其相对含量。
肾病、弥漫性肝损害、肝硬化、原发性肝癌、多发性骨髓瘤、慢性炎症、妊娠等都可以使白蛋白下降。
肾病时α1、α2、β球蛋白升高,γ-球蛋白降低。
肝硬化时α2、β-球蛋白降低,而α1、γ-球蛋白升高。
三、实验器材1、醋酸纤维薄膜(2cm*8cm,厚度120μm)2、人血清;3、烧杯及培养皿数只;4、点样器;5、竹镊子;6、玻璃棒;7、电吹风;8、试管六只;9、恒温水浴锅;10、电泳槽;11、直流稳压电泳仪;12、剪刀四、实验试剂1. 电极缓冲液: 巴比妥-巴比妥钠缓冲液(可重复使用,隔一星期过滤一次):,分别称取巴比妥钠12.76g和巴比妥1.66g溶解于1000ml蒸馏水中。
2. 染色液(可重复使用,使用后回收):取氨基黑10B 0.5g溶于100ml SDS-PAGE 电泳脱色液中。
微孔滤膜种类:
1、醋酸纤维素膜:适用于无菌滤过。
2、硝酸纤维素膜:不耐酸碱,溶于有机溶剂,可以在120℃、30分钟热压灭菌
3、聚酰胺(尼龙)膜:适用于滤过稀酸、弱酸、碱类和普通溶剂
4、醋酸纤维素和硝酸纤维素混合膜:与硝酸纤维素膜相同
5、聚四氟乙烯膜:用于酸性、碱性溶液与有机液体的滤过,可耐260℃高温
6、耐有机溶剂的专用微孔膜
7、聚偏氟乙烯膜:具有耐氧化性和耐热性能
G6号垂熔玻璃滤器和孔径0.22um的微孔滤膜可以用于热敏性药物的灭菌。
灭菌:是利用物理和化学方法将所有致病和非致病的微生物以及细菌的芽胞全部杀灭
防腐:是指用低温或化学药品防止和抑制微生物生长繁殖
消毒:是指利用物理和化学的方法将病原微生物杀死
灭菌方法:物理灭菌法、化学灭菌法(气体灭菌法,药液除菌法)、无菌操作法
物理灭菌法:干热灭菌法(火焰灭菌法,干热空气灭菌法)
湿热灭菌法(热压灭菌法,流通蒸汽灭菌法,煮沸灭菌法,低温间歇灭菌法)、
射线灭菌法(辐射灭菌法,紫外线灭菌法,微波灭菌法)
滤过除菌法
常用的压力和温度以及时间对应关系:115℃﹀﹀67kpa﹀﹀30min
121℃﹀﹀97kpa﹀﹀20min
126℃﹀﹀139kpa﹀﹀15min。
醋酸纤维素薄膜作用电泳的支持物有何优缺点? [标签:基础知识]提问者:游客浏览次数:246 提问时间:2008-09-07 01:38姓名:笔名:等级:回答数: 0 次通过率: 0主营行业:公司:答案收藏答案收藏答案分享给好友最新回答者:mayibanjia110等级:列兵 (一级)回答的其他贡献者:mayibanj…>>醋酸纤维素薄膜电泳的特点:醋酸纤维素薄膜是由醋酸纤维素加工制成的。
醋酸纤维素薄膜作为是电泳支持体。
它有以下优点:①电泳后区带界限清晰;②通电时间较短(二十分钟至一小时);③它对各种蛋白质(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都几乎完全不吸附,因此无拖尾现象;④对染料也没有吸附,因此不结合的染料能完全洗掉,无样品处几乎完全无色。
它的电渗作用虽高但很均一,不影响样品的分离效果,由于醋酸纤维素薄膜吸水量较低,因此必需在密闭的容器中进行电泳,并使用较低有电流避免蒸发。
醋酸纤维素薄膜电泳已经广泛用于血清蛋白,血红蛋白,球蛋白,脂蛋白,糖蛋白,甲胎蛋白,类固醇及同工酶等的分离分析中,尽管它的分辨力比聚丙酰胺凝胶电泳低,但它具有简单,快速等优点。
根据样品理化性质,从提高电泳速度和分辨力出发选择缓冲液的种类,pH和离子强度。
选择好的缓冲液最好是挥发性强,对显色或紫外光等观察区带没有影响,若样品含盐量较高时,宜采用含盐缓冲液。
例如血清蛋白电泳可选用pH8.6的巴比妥缓冲液或硼酸缓冲液;氨基酸的分离则可选用pH7.2的磷酸盐缓冲液等。
电泳时先将滤膜剪成一定长度和宽度的纸条。
在欲点样的位置用铅笔做上记号,点上样品,在一定的电压,电流下电泳一定时间,取下滤膜,进行染色。
不同物质需采用不同的显色方法,如核苷酸等物质可在紫外分析灯下观察定位,但许多物质必须经染色剂显色。
醋酸纤维素薄膜电泳染色后区带可剪下,溶于一定的溶剂中进行光密度测定。
也可以浸于折射率为1.474的油中或其他透明液中使之透明,然后直接用光密度计测定。
三醋酸纤维素tac膜三醋酸纤维素TAC膜作为一种复合材料,已经应用于各种工业领域,如无机电子材料、航空航天材料、军用材料和电气材料等。
作为一种新型弹性材料,TAC膜具有优异的力学性能、耐腐蚀性、耐热性和耐紫外线性等众多优点,使其在金属结构涂料、阻燃材料、阻碍有害蒸气等应用中发挥着重要作用。
三醋酸纤维素TAC膜是一种复合材料,它是通过将纤维素、甲醛和三醋酸混合物经过膜化处理后形成的聚合物膜。
加工过程中,用可溶性水处理的棉麻絮作为纤维素的基质,由甲醛和三醋酸的混合物形成的聚合物膜与纤维素相结合,将它们经过蒸馏、滚压、电镀等处理后形成纤维素TAC膜。
三醋酸纤维素TAC膜具有良好的耐腐蚀性,它的耐腐蚀性能比其他材料要好很多,可以抵御各种溶剂、碱性和酸性溶液的腐蚀。
它还具有较强的抗紫外线性,能够在较高温度下受紫外线照射,有效抵抗紫外线辐射,从而抑制光致老化、防止淀粉样树脂失效以及防止外部环境对内部结构的破坏作用。
三醋酸纤维素TAC膜具有优异的力学性能,其抗张强度大于普通聚合物材料,耐压强度大于聚氯乙烯和低密度聚乙烯,而且具有良好的柔韧性,可以适应不同的应力荷载,从而可以满足金属制品表面的覆盖和防腐要求。
此外,三醋酸纤维素TAC膜具有良好的电绝缘性,耐电弧性能强,可防止电源引起的腐蚀和损坏,用于保护电缆和电子元件,延长产品的寿命。
三醋酸纤维素TAC膜的优良性能为它的应用开拓了广阔的前景。
它可以应用于电子、航空航天、军工领域以及建筑装饰等多个领域,尤其在船舶、汽车、火车、航空航天等交通工具上的使用更是不可或缺。
综上所述,三醋酸纤维素TAC膜具有良好的耐腐蚀性和耐紫外线性、优异的力学性能和电绝缘性,它的应用范围广,可以满足不同行业的需求。
它在船舶、汽车、火车、航空航天等交通工具上的使用大大提高了安全性和可靠性,而且带给大家无限的安全保障。