生物膜干涉技术(BLI) 常见问题解答（第二版）目录缩写说明 (2)动力学相关术语 (2)传感器和仪器相关术语 (2)生化相关术语 (3)1 实验基本常识 (3)1.1如何自学 (3)1.2关于动力学 (3)1.3关于耗材与样品要求 (5)1.4关于生物膜干涉技术 (7)1.5软件与硬件性能参数 (8)1.6关于应用 (11)1.7关于基本操作 (11)2 动力学实验设计与操作 (15)2.1 关于固化和传感器的选择 (15)2.2 关于结合和解离 (19)2.3 关于传感器再生 (20)2.4 小分子检测 (21)2.5 动力学实验操作 (23)2.6 动力学实验数据处理 (29)2.7实验常见问题（动力学部分） (39)3 定量实验设计与操作 (44)3.1定量实验设计 (44)3.2 定量实验操作 (46)3.3定量实验数据处理 (48)3.4实验常见问题（定量部分） (51)4 仪器维护与硬件问题 (51)5 联系我们 (55)缩写说明动力学相关术语k on或k a：结合速率常数，单位M-1s-1k off或者k d：解离速率常数，单位s-1K D：亲和力常数（解离平衡常数），单位Mk obs：表观结合常数[C]：分析物浓度Ligand：配体，即固化在传感器上的物质Analyte：分析物，即与固化物质结合的物质R max：理论上分析物结合信号的最大值，即所有ligand均被analyte结合后所获得的信号Req：分析物结合达到平衡时的信号值Initial slope：起始斜率BLI：生物膜干涉技术Baseline：平衡步骤Association：结合步骤Dissociation：解离步骤Loading：固化步骤传感器和仪器相关术语SA：链霉亲和素传感器SSA：超级链霉亲和素传感器APS：氨基丙基硅烷传感器AR2G：氨基偶联传感器AHC：抗人免疫球蛋白Fc段传感器AHQ：人免疫球蛋白定量传感器AMQ：鼠免疫球蛋白定量传感器AMC：抗鼠免疫球蛋白Fc段传感器NTA：镍离子传感器anti-His：抗组氨酸标签传感器anti-GST：抗GST标签传感器Capture类传感器：除去SA，SAX，SSA，AR2G，APS外的传感器Octet：Octet家族仪器，包含Octet RED，RED96，QK，QKe，QK384，RED384，HTX，K2RED系列仪器：RED，RED96，RED384，K2QK系列仪器：QK，QKe，QK384生化相关术语EDC：1-(3-二甲基氨丙基) -3-乙基-碳化二亚胺NHS：N-羟基琥珀酰亚胺HRP：辣根过氧化物酶DAB：二氨基联苯胺，一种HRP的底物，在HRP催化后可以生成金属沉淀EMSA：电泳迁移率实验，用来研究DNA和蛋白的结合Epitope binning：表位分析His-tag：组氨酸标签Co-IP：免疫共沉淀PBS：磷酸盐缓冲液BSA：牛血清白蛋白hIgG：人免疫球蛋白mIgG：鼠免疫球蛋白1:1反应：一份的ligand与一份的analyte形成一份的产物，即两者只有一个结合位点2:1反应：Ligand上有2个可以和analyte的结合位点，并且两者独立1:2反应：Analyte上有2个可以和ligand结合的位点，并且两者独立1 实验基本常识1.2关于动力学1.2.1 k on, k off, K D值各代表什么意义？生物分子间的相互作用一般视为可逆反应。
分子互作仪 biacore t200 参数Biacore T200 是一种用于研究分子间相互作用的仪器，其参数主要包括以下几个方面：1.检测原理：Biacore T200 使用表面等离子共振（SPR）技术来检测分子间的相互作用。
当分子与芯片表面上的涂层结合时，会引起SPR 信号的变化，从而实现对分子相互作用的实时监测。
2.样本容量：Biacore T200 有一个样本池，可容纳 260 微升的样本，以及一个废液池，用于收集废液。
3.分辨率：Biacore T200 的分辨率非常高，能够检测到纳摩级别（nanomolar）的亲和力常数（Kd）。
这使得Biacore T200 在研究低亲和力相互作用时具有很高的灵敏度。
4.运行速度：Biacore T200 的运行速度很快，每小时可以完成多个独立的亲和测定。
5.灵活性：Biacore T200 支持各种不同的芯片和试剂选择，用户可以根据自己的需求进行定制。
同时，仪器也支持多种数据采集模式和动力学模型，能够满足用户对不同类型分子相互作用的测定需求。
6.自动化的样品处理：Biacore T200 具有自动化的样品处理功能，能够实现样品的自动稀释、浓度梯度制备和多通道进样等操作。
这大大简化了实验流程，提高了实验效率和结果的准确性。
7.数据分析和报告：Biacore T200 的配套软件可以提供完整的数据分析工具，包括动力学拟合、亲和力参数计算、浓度推算等。
用户可以根据需要选择不同的数据分析方法和报告格式。
8.环境条件：Biacore T200 的工作环境温度为18-28℃，相对湿度为40-80%。
在仪器运行过程中，需要保持室内环境稳定，避免大幅度的温度和湿度波动。
9.电源要求：Biacore T200 需要连接到一个稳定的电源，输入电压为100-240V，50/60Hz。
在仪器运行过程中，建议使用专用的接地电源，以确保仪器的稳定性和安全性。
10.其他参数：Biacore T200 的重量约为 66 千克，尺寸为 447 x 333 x 187毫米（宽x 深x 高）。
