1.微生物纯培养技术和显微技术

干燥保藏法 将菌种置于土壤、细纱、滤纸、硅胶等干燥材料 上保藏。 如砂土管保藏法，适用于放线菌、芽孢菌和某些真 菌保藏，保藏时间几至几十年。
几种常用菌种保藏方法的比较
方法名称 斜面低温保藏法 石蜡油封存法 主要特点 传代培养，4℃保藏 石蜡油隔绝空气，室温或 4℃保藏 沙土管作载体，干燥器中抽 真空，室温或4℃保藏 适用范围 各种微生物的短期保藏。 各种微生物的中短期保藏， 不适用某些能分解烃类的菌 种。 产孢子微生物和芽孢细菌的 长期保藏，不适用对干燥敏 感的微生物 保藏期 1-6个月 1-2年
微生物学
第二章 微生物的纯培养和显微技术
基本概念
1、微生物的纯种分离：
将多种混杂的微生物，经某种技术或方法分离 或纯化的过程。
2、微生物的培养物（culture)：
在人为规定的条件下培养、繁殖得到的微生物 群体。 纯培养物（pure culture)：在人为规定的条件下 培养、繁殖得到的只有一种微生物的培养物。
方
法
1、传代培养保藏方法
①斜面低温保藏法
方法：菌种管置4℃冰箱保藏，定时传代 原理：低温下，微生物代谢强度明显下降 。 低温可减缓生长速度，单细胞仍有一定的活动条
件，一般4～6个月必须传代一次。
优点：方便，不受条件限制，各类微生物均可。 缺点：时间短、传代多、易退化。
②石蜡油低温保藏法：
原理：在长好的斜面菌上覆盖灭菌的液体石蜡， 达到菌体与空气隔绝，使菌处于生长和代谢停止状态， 同时石蜡油还防止水分蒸发，
第一节 微生物的分离和纯培养
一、无菌技术（aseptic technique）
在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他
微生物污染，其自身也不污染操作环境的技术被称为

纯培养技术可用于病原微生物的分离、鉴 定和药物敏感性试验，为临床诊断和治疗 提供依据。
微生物纯培养技术
02
的基本原理
微生物的分离与纯化
微生物的分离
通过选择合适的培养基和培养条件， 将混合的微生物群体分离成单一的微 生物个体。
微生物的纯化
通过反复划线、稀释接种等方法，获 得纯培养的微生物，即同一菌种或纯 种微生物的培养。
微生物的培养基
培养基的组成
培养基是由水、碳源、氮源、无机盐 等组成，根据不同微生物的需求，培 养基的成分和比例会有所不同。
培养基的制备
根据配方和操作步骤，将各种成分混 合在一起，经过灭菌处理后，制成适 合微生物生长的培养基。
微生物的培养条件
温度
不同微生物对温度的需求不同，适宜的 温度可以促进微生物的生长和代谢。
生理生化特性分析
测定微生物的生理生化特性，如氧化酶试验 、糖发酵试验等。
应用前景探讨
探讨微生物纯培养技术在生产、科研等领域 的应用前景和潜在价值。
微生物纯培养技术04Fra bibliotek的应用实例
在医学领域的应用
抗生素生产
01
微生物纯培养技术用于分离和培养具有抗生素产生能力的菌株
，为医学领域提供大量抗生素。
疾病诊断
《微生物纯培养技术》 ppt课件
目 录
• 微生物纯培养技术概述 • 微生物纯培养技术的基本原理 • 微生物纯培养技术的实验操作 • 微生物纯培养技术的应用实例 • 微生物纯培养技术的挑战与展望
微生物纯培养技术
01
概述
微生物纯培养技术的定义
01
微生物纯培养技术是指通过一定 的物理、化学手段，将自然界中 混杂的微生物群体分离出来，获 得纯种微生物的技术。

荧光显微镜
荧光：荧光素吸收紫外线会转放出可 见光，这就是荧光 荧光显微技术：把标本用不同的荧光 素作标记，在荧光显微镜下，经 过紫外线照射，标本会在黑暗背 景下表现出有光亮的物体。使标 本更便于观察。
透射电子显微镜
用电子波代替光源，最短波长的可见光 λ=450nm；而电磁波的波长最短可以达到 λ=0.005nm。所以，电镜的分辨率远高于光 学显微镜。
通冰箱冷冻室保存。

干燥保藏——砂土管保存法和冷冻真空干燥
保藏法

纸片保藏法、薄脉保藏法、寄主保藏法等
第二节 显微镜和显微技术
决定显微观察效果的两个重要因素：
分辨率：指能辨别两点之间最小距离的 能力 反差：指样品区别于背景的程度
一、显微镜的种类及原理
普通光学显微镜
光学显微镜的分辨率(最小分辨距)：
D=0.5λ/n sinθ
式中λ为光源波长； n为玻片到物镜介质的
折射率； θ为物镜镜口角的半数，它取决于物镜 的直径和工作距离。 n sniθ叫作数值孔径。不 同介质的折射率：空气为n=1.0 ；水n=1.33；香 柏油n=1.55。因此，油镜的分辨率高。
暗视野显微镜
暗视野显微镜利用特殊聚光器实现 给样品斜射照明，由样品反射或折射的

非细胞型微生物：病毒、类病毒、朊病毒
一、细菌和古生菌
•细菌的形态和排列
形态：球状—球菌，杆状—杆菌，螺旋状——螺菌和 弧菌。 排列：单个、成对、链状、成簇 特殊形态的细菌 如柄细菌有柄、菌丝、附器等 球衣菌有衣鞘 支原体无细胞壁，只有细胞膜，故柔软形态多变 有些细菌不同生长阶段具有不同形态：如放线菌 形成营养菌丝、气生菌丝和孢子丝。 细菌的形态也受环境条件的影响，培养时间、培 养温度等均能引起形态的改变。

微生物考研名词解释汇总【2013年】1.纯培养物（pure culture）：由一种微生物组成的细胞群体，通常是由一个单细胞生长、繁殖所形成。

【2章微生物的纯培养和显微技术】2.负染色（negative staining）：染料使背景颜色加深而样品没有着色的染色法。

【2章微生物的纯培养和显微技术】（2013、2007）3.糖被(glycocalyx)：指包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的胶状物质。

糖被有数种：1.形态固定、层次厚的为荚膜。

2.形态固定、层次薄的为微荚膜。

3.形态不固定、结构松散的为粘液层。

4.包裹在细胞群体上有一定形态的糖被称为菌胶团。

糖被的主要功能是保护菌体免受干旱损伤或宿主免疫活性细胞的吞噬。

荚膜的功能：1、保护作用2、贮藏养料3、保护屏障4、表面附着5、信息识别6、堆积代谢物【3章微生物细胞的结构域功能】4.PHB（poly-β-hydroxybutyrate，聚β-羟丁酸）:PHR是存在于许多细菌细胞质内属于类脂性质的碳源类贮藏物。

具有贮藏能量、碳源和降低细胞内渗透压的作用。

是细菌独有的可作为医用材料。

【3章微生物细胞的结构域功能】5.原养型微生物（prototroph）：与自然发生的同种其他个体一样，具有相同营养需求的微生物。

【4章微生物的营养】6.基因转位（group translocation）：物质通过载体帮助，在一个较复杂的运输系统的作用下进行的跨膜主动运输，被运输物质在该过程中化学性质发生改变。

【4章微生物的营养】（2013、2011、2009）7.对数生长期(logarithmic phase)：微生物经过延滞期后，以最大的速度进行生长和分裂至微生物数量呈对数增加的时期。

在对数生长期微生物各成分按比例有规律增加，微生物呈平衡生长。

（也称指数生长期或指数期。

）【6章微生物的生长繁殖及其控制】（2013、2010）8.同步培养（synchronous culture）：使群体中不同步的细胞转变成能同时进行生长或分裂的群体细胞的培养方法称为同步培养。