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Cell Counting Kit（CCK试剂盒）产品简介：Cell Counting Kit简称CCK 试剂盒，为MTT法的替代方法，是一种基于WST（水溶性四唑盐，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
CCK法与其它检测方法之间的比较：CCK用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验操作说明：一、制作标准曲线（测定细胞具体数量时）1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。
2、按比例（例如：1/2比例）依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔。
3、接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值，制作出一条以细胞数量为横坐标（X轴），OD值为纵坐标（Y轴）的标准曲线。
根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间。
）二、细胞活性检测1、在96孔板中接种细胞悬液（100μL/孔）。
将培养板放在培养箱中预培养（在37℃,5% CO2的条件下）。
2、向每孔加入10 μL的CCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5、如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10 μL0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS 溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。
在24小时内吸光度不会发生变化。
三、细胞增值-毒性检测1、在96孔板中配置100μL的细胞悬液。
将培养板在培养箱预培养24小时（在37℃，5% CO2的条件下）。
2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。
3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24或48小时）。
cck8原理CCK8原理。
CCK8（Cell Counting Kit-8）是一种常用于细胞增殖和毒性测定的试剂盒，其原理是利用细胞还原代谢产生的水溶性黄色化合物在酶作用下产生的可溶性产物，进而测定细胞数量和活力。
本文将对CCK8原理进行详细介绍。
CCK8试剂盒的原理主要基于细胞还原代谢产生的黄色产物的检测。
在CCK8试剂盒中，试剂的主要成分是WST-8（2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium, monosodium salt），WST-8是一种水溶性的黄色化合物。
当WST-8与细胞内的还原型辅酶NADH（或NADPH）作用时，会产生一种橙黄色的产物formazan，这个反应是在细胞色素P450存在的情况下进行的。
产生的formazan是可溶性的，可以直接通过细胞培养液中的吸光度来测定。
CCK8试剂盒的使用非常简便，只需要将试剂按照说明书中的比例与培养基混合，然后加入到细胞培养板中，培养一定时间后即可通过酶标仪或多功能酶标仪进行检测。
在实验中，我们通常会设立一个对照组和不同浓度的处理组，通过比较各组的吸光度值来评估细胞的增殖情况或者毒性效应。
CCK8试剂盒的原理使其在细胞学和毒理学研究中得到了广泛的应用。
通过CCK8试剂盒，我们可以快速、准确地测定细胞的数量和活力，而且相比传统的显微镜计数法，CCK8试剂盒不需要繁琐的操作步骤，大大提高了实验效率。
除了在细胞学和毒理学研究中的应用，CCK8试剂盒还可以用于其他领域，比如药物筛选、生物学研究等。
随着科研技术的不断发展，CCK8试剂盒的原理也在不断完善和改进，使其在细胞生物学研究中发挥着越来越重要的作用。
总之，CCK8试剂盒的原理是基于细胞还原代谢产生的水溶性黄色化合物在酶作用下产生的可溶性产物来测定细胞数量和活力。
其简便、快速、准确的特点使其在细胞学和毒理学研究中得到了广泛的应用，并且在其他领域也有着重要的意义。
CCK-8检测
实验原理
Cell Counting Kit 简称 CCK-8 试剂盒，是一种基于 WST-8 （化学名： 2- （ 2- 甲氧
基 -4- 硝基苯） -3- （ 4-硝苯基） -5- （ 2,4- 二磺基苯） -2H- 四唑单钠盐）的广泛用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
WST-8 在电子耦合试剂存在的情况下可以被线粒体内的脱氢酶还原成高度水溶性的黄色甲臜产物。
颜色的深浅与细胞的增殖成正比，与细胞毒性成反比。
使用酶标仪在 450nm 波长处测定 OD 值，间接反映活细胞数量。
技术应用
CCK-8 用途非常广泛，适合于高通量药物筛选，应用于细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。
实验流程
实验结果
CKK-8 检测 HO-8910PM 细胞增殖抑制结构统计图。
Cell Counting Kit（CCK试剂盒）产品简介：Cell Counting Kit简称CCK 试剂盒，为MTT法的替代方法，是一种基于WST（水溶性四唑盐，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
CCK法与其它检测方法之间的比较：CCK用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验操作说明：一、制作标准曲线（测定细胞具体数量时）1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。
2、按比例（例如：1/2比例）依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔。
3、接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值，制作出一条以细胞数量为横坐标（X轴），OD值为纵坐标（Y轴）的标准曲线。
根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间。
）二、细胞活性检测1、在96孔板中接种细胞悬液（100μL/孔）。
将培养板放在培养箱中预培养（在37℃,5% CO2的条件下）。
2、向每孔加入10 μL的CCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5、如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10 μL0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS 溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。
在24小时内吸光度不会发生变化。
三、细胞增值-毒性检测1、在96孔板中配置100μL的细胞悬液。
将培养板在培养箱预培养24小时（在37℃，5% CO2的条件下）。
2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。
3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24或48小时）。
水凝胶cck8测试方法水凝胶CCK-8测试方法引言：水凝胶（hydrogel）是一种具有三维网络结构的高分子材料，具有良好的吸水性和渗透性。
CCK-8（Cell Counting Kit-8）是一种常用的细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒，用于评估细胞的代谢活性和细胞毒性。
本文旨在介绍水凝胶CCK-8测试方法，包括实验步骤、数据分析和结果解读。
一、实验步骤1. 准备工作：a. 预先制备CCK-8试剂：按照说明书中的要求将CCK-8试剂与培养基按比例混合制备出适量的CCK-8工作液。
b. 准备待测水凝胶样品：根据实验需要，制备出一定规格和形状的水凝胶样品。
2. 实验操作：a. 将待测水凝胶样品置于培养皿中，并加入足够的培养基，使水凝胶完全浸泡在培养基中。
b. 在培养皿中加入一定数量的细胞悬液，使细胞均匀分布于水凝胶中。
c. 将培养皿置于恒温培养箱中，以维持适宜的温度和湿度条件。
d. 在培养指定的时间点，取出培养皿，将培养基从水凝胶表面抽取掉。
e. 向每个培养皿中加入适量的CCK-8工作液，并将其继续培养一段时间。
f. 使用分光光度计测量吸光度，记录下各个时间点的吸光度值。
二、数据分析1. 数据处理：a. 将各个时间点的吸光度值进行平均，并计算相对于初始时间点的增加率。
b. 绘制吸光度与时间的曲线图，观察细胞的增殖情况。
2. 结果解读：a. 若吸光度值随时间的增加而逐渐增加，说明细胞在水凝胶中具有较好的增殖能力。
b. 若吸光度值随时间的增加而逐渐降低，说明水凝胶对细胞有一定的毒性或抑制作用。
c. 若吸光度值保持稳定不变，说明细胞在水凝胶中没有明显的增殖或凋亡。
三、注意事项1. 实验中应注意避免水凝胶样品受到外界污染，尽量保持无菌状态。
2. 实验前应对水凝胶样品进行充分的滴水或浸泡，以确保水凝胶能够充分吸收培养基。
3. 实验过程中应注意细胞悬液的均匀分布，避免出现聚集现象。
4. 实验结果的解读应结合实际情况和已有研究结果，尽量避免主观臆断和片面结论。
CCK8佥测细胞增殖/毒性的原理、方法及注意事项、CCK8检测细胞增殖/毒性的原理Cell Counting Kit-8 （简称CCK-8）试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。
其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-（2-甲氧基 4 硝基苯基）-3-（4- 硝基苯基）-5-（2,4- 二磺酸苯）-2H-四唑单钠盐】，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS 的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物Formazan dye）。
生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。
因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验CCK8的优点：・使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂；* CCK-8法能快速检测；* CCK-8法的检测灵敏度很高，甚至可以测定较低细胞密度；* CCK-8法的重复性优于MTT法；・CCK-8法对细胞毒性小；・CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。
CCK8的缺点：•与MTT法相比，CCK8和XTT的价格比较贵。
* CCK8试剂的颜色为淡红色，与含酚红的培养基颜色接近，不注意的话容易产生漏加或多加。
与以往的增殖/毒性测定试剂相比较:现配现用即开即用即开即用使用方法配成溶液后使用二、CCK8检测细胞增殖/毒性的方法实验一：细胞增殖分析1、 制备细胞悬液：细胞计数2、 接种到96孔板中：根据合适的铺板细胞数，每孔约100ul 细胞悬液， 同样的样本可做3个重复。
3、 37C 培养箱中培养：细胞接种后贴壁大约需要培养2-4小时，如果 不需要贴壁，这步可以省去。
4、 加入10ul CCK8 :由于每孔加入CCK8量比较少，有可能因试剂沾在 孔壁上而带来误差，建议 在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀。
或 者直接配置含10%CCK8的培养基，以换液的形式加入。
Peptides, Inhibitors, AgonistsProduct Data Sheet产品名: Cell Counting Kit-8 (CCK-8)产品编号: GK10001功能属性应用: 1) 细胞增殖测定-GlpBio细胞计数试剂盒-8（CCK-8）是水溶性的，在培养中是稳定的，并且是无毒的。
2) 细胞活力测定-代谢活性和染料产生与改变的活力成比例地变化。
3) 细胞因子测定-测量细胞因子诱导的增殖。
如果需要，可以在研究结束时回收细胞并扩增。
4) 细胞毒性测定-来自细胞毒性化学物质的细胞死亡对颜色发展没有影响，只有活细胞将试剂转化为比色指示剂。
试剂本身具有可忽略的毒性，并且通常对细胞是安全的。
运输方式: 蓝冰运输。
储存条件: 储存在4°C避光，可稳定长达12个月。
储存在-20°C避光，可稳定长达2年。
实验参考方法细胞数量确定1.将细胞悬浮液（100μL/孔）接种在96洞孔板中。
将板在潮湿的培养箱中预孵育（例如，在37℃，5％CO2下）。
2.向板的每个孔中加入10μLCCK-8溶液。
注意不要在孔洞中引入气泡，因为它们会干扰O.D.读数。
3.将培养板在培养箱中孵育1-4小时。
4.使用酶标仪测量450 nm处的吸光度。
细胞增殖和细胞毒性测定1.将种子细胞以104-105个细胞/孔的密度在96孔板中在100μL培养基中培养，含有或不含有待测化合物。
将细胞在CO2培养箱中于37℃培养24小时。
2.将10μL不同浓度的待测物质加入板中。
3.将培养板在培养箱中孵育适当的时间（例如，6,12,24或48小时）。
4.使用重复移液器向板的每个孔中加入10μLCCK-8溶液。
注意不要在孔洞中引入气泡，因为它们会干扰O.D.读数。
5.将培养板在培养箱中孵育1-4小时。
6.在读取印版之前，重要的是在轨道振动器上轻轻混合1分钟，以确保颜色均匀分布。
7.使用酶标仪测量450 nm处的吸光度。
实验专栏丨一文掌握CCK-8细胞增殖与毒性检测法，你值得了解！今天小编要为大家介绍的是：CCK-8实验的操作步骤和注意事项。
CCK-8，英文全称是Cell Counting Kit-8。
CCK-8试剂盒可用于简便而准确的细胞增殖和细胞毒性分析。
实验原理CCK-8试剂盒中，最主要化学药品是WST-8【化学名为2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）存在的情况下，能够被细胞线粒体内的一些脱氢酶还原成具有高度水溶性的橙黄色甲臜染料(Formazan)。
也就是说，活细胞数量越多，生成的甲臜量就越多，相应地颜色也就越深。
因此可以用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析：细胞增殖越快，颜色越深；细胞毒性越大，颜色则越浅。
（对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
）使用酶标仪在450nm波长处测OD值，可间接性反应活细胞的数量。
是一种高灵敏度，无放射性的比色检测法。
（CCK-8实验原理）因此，CCK-8实验可用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。
操作步骤（一）实验材料及试剂：酒精灯、移液枪、酶标仪（带有450nm滤光片）、96孔培养板、CO2培养箱、CCK-8、细胞计数板、PBS等。
（二）绘制标准曲线1.制备细胞悬液：选取生长状态良好的对数生长期细胞制作细胞悬液，并计数。
2.在96孔板中接种细胞悬液(100 μL/孔) ：按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做5-7个细胞浓度梯度（比如，稀释10倍，100倍......），每组4-6个复孔。
3.绘制标准曲线：接种后培养一定时间待细胞贴壁后，然后每100μL培养基加10μL（10%）CCK-8试剂培养一定时间后测定OD 值，制作出一条以细胞数量为横坐标，OD值为纵坐标的标准曲线。
cck-8原理CCK-8（Cell Counting Kit-8）是一种常用的细胞增殖和毒性检测试剂盒，广泛应用于细胞生物学研究中。
CCK-8原理是基于细胞还原能力的测定，通过将WST-8（2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium, monosodium salt）溶液加入到含有细胞的培养基中，WST-8会被细胞内的还原酶还原成橙色的水溶性甲苯胺盐，从而间接反映细胞的代谢活力和增殖能力。
首先，CCK-8试剂盒中的WST-8会被细胞内的还原酶还原成可溶于水的橙色产物，这一过程是在细胞内进行的。
当细胞代谢活跃、增殖能力强时，细胞内的还原酶活性高，能够迅速将WST-8还原成橙色产物，溶液颜色较深。
相反，代谢活力低、增殖能力弱的细胞则不能迅速还原WST-8，溶液颜色较浅。
其次，CCK-8试剂盒中的WST-8产生的橙色产物在光谱上的吸收峰位于450nm左右，因此可以通过分光光度计测定溶液的吸光度来间接反映细胞的代谢活力和增殖能力。
吸光度值越高，说明细胞内的还原酶活性越强，细胞代谢活力和增殖能力越高；反之，吸光度值越低，代谢活力和增殖能力越低。
最后，CCK-8试剂盒中的WST-8产生的橙色产物对细胞没有毒性，不会对细胞产生影响，因此可以在细胞培养过程中进行动态监测，不需要终止细胞培养过程。
这一特点使得CCK-8在细胞增殖和毒性检测中具有很大的优势，可以对细胞进行连续性监测，从而更准确地了解细胞的生长状态。
综上所述，CCK-8原理是基于细胞内还原酶活性的测定，通过测定细胞内还原酶对WST-8的还原能力来间接反映细胞的代谢活力和增殖能力。
CCK-8试剂盒具有操作简便、灵敏度高、重复性好、无毒性等优点，广泛应用于细胞生物学研究、药物筛选、毒性检测等领域。
希望本文能够对CCK-8原理有所了解，并在实验中正确使用CCK-8试剂盒提供帮助。
WST-8 是 MTT 的一种升级替代产品，和 MTT 或其它 MTT 类似产品，如 XTT、MTS 等相比有明显的优点。第一，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的 formazan 不是水溶性的，需要有特定的溶剂来溶解；而 WST-8 和 XTT 、MTS 产生的 formazan 都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。第二，WST-8 产生的 formazan 比 XTT 和 MTS 产生的 formazan 更易溶解。第三，WST-8 比 XTT 和 MTS 更加稳定，使实验结果更可靠。第四，WST-8 和 MTT、XTT 等相比线性范围更宽，灵敏度更高，并且更加稳定。WST-8 对细胞无明显毒性。加入 CCK-8 溶液显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，检测时间更加灵活，便于确定最佳测定时间。
产品编号HY-K0301-100THY-K0301-500THY-K0301-3000THY-K0301-12000T包装1 mL5 mL5 mL × 6(5 mL × 6) × 4
产品名称Cell Counting Kit-8Cell Counting Kit-8Cell Counting Kit-8Cell Counting Kit-8
Cell Counting Kit-81包装清单
产品概述Cell Counting Kit-8，简称 CCK-8 试剂盒，是一种基于 WST-8 而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度、无放射性的比色检测试剂盒。CCK-8 溶液可以直接加入到细胞样品中，不需要预配各种成分。WST-8 在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan (参考图1) 。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅 (生成的 formazan 量) 和细胞数目呈线性关系 (图2) 。
2
www.MedChemExpress.cnInhibitors, Agonists, Screening Libraries
MedChem ExpressMCE 中国Hotline: 400-820-3792
操作说明本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。
1. 制作标准曲线a. 先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞；b. 按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做 5-7 个细胞浓度梯度，每组 4-6 个复孔；
c. 接种后培养 2-4 小时使细胞贴壁，然后每 100 μL 培养基加 10 μL CCK-8 试剂培养一定时间后测定 OD 值，制作出一条以细胞数量为横坐标，OD 值为纵坐标的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量。使用此标准曲线的前提条件是试验条件完全一致。
2. 细胞活性检测a. 在 96 孔板中接种细胞悬液 (100 μL/孔) ，将培养板放在培养箱中预培养 24 小时；b. 向每孔加入 10 μL 的 CCK-8 溶液 (注意不要产生气泡) ；c. 将培养板置于培养箱内孵育 1-4 小时；d. 用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
3. 细胞增殖-毒性检测a. 在 96 孔板中接种细胞悬液 (100 μL/孔) ，将培养板放在培养箱中预培养 24 小时；b. 向培养板加入不同浓度的待测药物；c. 将培养板在培养箱孵育一段适当的时间；d. 向每孔加入 10 μL 的 CCK-8 溶液 (注意不要产生气泡)；
e. 将培养板置于培养箱内孵育 1-4 小时；
f. 用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
3Na+NN
N+N
NO2
NO2
OSOO-OSOOO-
NNNHN
NO2
NO2
SOO-OSO
OO-
O还原酶
NAD+NADH
EC-HEC
图1 WST-8 和 WST-8 formazan 的结构式
图2 CCK-8 的原理图WST-8colorless
WST-8 formazanorange color
CelldehydrogenasesNAD
electeon mediatorreduced form
electeon mediator(1-methoxy PMS)
NADH保存条件4°C 一年-20°C 两年长期保存，建议避光
4
MCE 中国 400-820-3792电话: 021-58955995传真: 021-53700325Email: tech@MedChemExpress.cn
4. 计算公式细胞存活率=[(As-Ab) / (Ac-Ab)] × 100%抑制率=[(Ac-As) / (Ac-Ab)] × 100%As: 实验孔吸光度 (含细胞、培养基、CCK-8 溶液和药物溶液) ；Ac: 对照孔吸光度 (含细胞、培养基、CCK-8 溶液，不含药物) ；Ab: 空白孔吸光度 (含培养基、CCK-8 溶液，不含细胞、药物) 。
Cell line : HEK293Medium : DMEM, 10% FBS Incubation : 37°C, 5% CO2, 2 hours
注：如果待测药物有氧化性或还原性，可在加入 CCK-8 之前更换新鲜培养基，去掉待测药物的影响。当待测药物影响比较小的情况下可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入待测药物后的空白吸收即可。
Cell line : U87, SK-HEP1 Medium : DMEM, 10% FBS Chemicals : 200 μM Cisplatin (DDP)Incubation : 37°C, 5% CO2, 2 hours
图3 CCK-8 试剂盒检测细胞活性NormalDDP (24 h)
0.00.20.40.60.8
1.0
450OD
U87SK-HEP1图4 CCK-8 试剂盒检测 DDP 细胞毒性
HEK293 cellsR2=0.9998
7500150002250030000Cell number
0.0
0.51.01.5450OD
注意事项1. CCK-8 的培养时间一般为 1-4 小时，但在培养 30 分钟左右即可取出肉眼观察显色程度，根据细胞种类而定，需要摸索条件，CCK-8 的最佳反应时
间以具体显色的最佳时间为准。2. 使用 96 孔板进行检测时，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发问题。一方面，由于 96 孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈
的办法，改加相同量的 PBS 、水或培养液；另一方面，可以把 96 孔板置
于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。3. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，所以还原剂 (例如一些抗氧化剂) 会干扰检测，如果待检测体系中存在较多的还原剂，需设法去除。 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。4. 加入药物中如含有金属，对 CCK-8 显色有影响。终浓度为 1 mM 的氯化
亚铅、氯化铁、硫酸铜会抑制 5% 、15% 、90% 的显色反应，使灵敏度降
低。如果终浓度是 10 mM 的话，将会 100% 抑制。
5. 培养基中的酚红不会影响实验结果，酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。6. 本产品可以检测 ，但不能检测酵母细胞。向 100 μL 培养液中加入 10 μL CCK-8 溶液，并培养 1-4 小时或过夜。
7. CCK-8 试剂对细胞的毒性非常低。它和活细胞内的脱氢酶持续反应使溶液颜色不断加深，OD 值不断增加 (注: 活细胞内的脱氢酶是持续产生的) 。
8. 要测定细胞的具体数量，建议同时做标准曲线。9. 建议采用多通道移液器，以减小平行孔间的差异。10. 以下方法可以终止 CCK-8 反应 (96 孔板) ：(a). 在显色反应后，将培养板放置 4°C 冰箱内。(b). 每孔加 10 μL 0.1 M HCl
溶液。(c). 每孔加 10 μL 1% (w/v) 的 SDS (十二烷基硫酸钠) 溶液。
注意：反应停止后，应在 24 小时内测定。11. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。12. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
5E.coliE.coli
