葡萄糖酸钙检验操作规程

无水葡萄糖质量标准目的：制定无水葡萄糖的质量标准。

适用范围：无水葡萄糖的检验责任人：化验员、化验室主任、质量部长。

内容：【标准依据】《中国兽药典》2010年版一部本品为D-（+）-吡喃葡萄糖。

【性状】本品为无色结晶或白色结晶性粉末；无臭、味甜。

本品在水中易溶，在乙醇中微溶。

比旋度取本品约10g，精密称定，置50ml量瓶中，加水适量与氨试液2. 0ml 溶解后,加水稀释至刻度,摇匀,放置60分钟,在25℃时,依法测定,比旋度为+52.6º至+53.2º。

【鉴别】取本品约0.2g,加水5ml溶解后,缓缓滴入微热的碱性酒石酸铜试液中,即生成氧化亚铜的红色沉淀。

【检查】酸度取本品2.0g,加水20ml溶解后,加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)0.20ml,应显粉红色。

溶液的澄清度与颜色取本品5.0g,加热水溶解后,放冷,用水稀释至10ml,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液比较,不得更浓；如显色,与对照液(取比色用氯化钴液3ml，比色用重铬酸钾液3ml与比色用硫酸铜液6ml加水稀释成50ml)1.0ml加水稀释至10ml比较,不得更深。

乙醇溶液的澄清度取本品1.0g,加乙醇20ml,置水浴上加热回流约40分钟,溶液应澄清。

氯化物取本品0.60g,依法检查,与标准氯化钠溶液6.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0．01﹪）。

硫酸盐取本品2.0g,依法检查,与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对照液比较,不得更浓(0.01%)。

亚硫酸盐与可溶性淀粉取本品1.0g,加水10ml溶解后,加碘试液1滴,应即显黄色。

干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,减失重量不得过1.0%。

炽灼残渣不得过0.1%。

蛋白质取本品1.0g,加水10ml溶解后,加磺基水杨酸溶液(1→5)3ml,不得发生浑浊或沉淀。

钡盐取本品2.0g，加水20ml溶解后，将溶液分成2等份，1份中加稀硫酸1ml,另一份中加水1ml，摇匀，放置15分钟，两液均应澄清。

葡萄糖试剂盒（氧化酶法）标准操作程序1. 摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清样本中葡萄糖的含量。

2. 适用范围程序适用于AU5811自动生化分析仪检测血清样本中葡萄糖的含量。

3. 职责使用AU5811自动生化分析仪进行测定葡萄糖浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行，室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的葡萄糖试剂盒采用的是氧化酶法(GOD-POD)。

5. 原理葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下与水分子和氧分子反应生成葡萄糖酸和双氧水,最后双氧水在过氧化物酶的催化下与色原底物、4-氨基安替比林和苯酚反应生成红色化合物醌亚胺。

由于醌亚胺在波长500nm 处有吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 500nm 处吸光度的变化值与样本中葡萄糖的含量成正比。

O H O H O H O O H 22222224+−−−→−+-++−−−−→−++醌亚胺苯酚氨基安替比林葡萄糖酸葡萄糖过氧化物酶葡萄糖氧化酶6. 仪器AU5811自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分：R1：磷酸盐缓冲液、过氧化物酶、苯酚、防腐剂；R2：磷酸盐缓冲液、葡萄糖氧化酶、4-氨基安替比林、防腐剂；校准品：葡萄糖、防腐剂7.3 试剂稳定性：试剂于2℃-8℃避光保存，有效期为一年。

开瓶后存放在生化分析仪试剂仓中可稳定14天。

8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用科华公司的校准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品：罗氏公司提供的生化复合定值质控血清作为室内质控品。

每日在测定前做一次质控加试剂后做一次质控。

该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。

范围：无水葡萄糖职责：检验室对本规程的实施负责正文：1.性状——本品为无色结晶或白色结晶性粉未；无臭，味甜。

本品在水中易溶，在乙醇中微溶。

1.1比旋度——取本品约10g，精密称定，置50ml容量瓶中，加水适量与氨试液2.0ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，放置60分钟，在25℃依法测定并计算，比旋度为+52.6°至+53.2°。

1.1.1执行SOP-QM-419《旋光度测定标准操作规程》。

1.1.2执行SOP-EM-302《WZZ－2B型自动指示旋光仪标准操作规程》。

1.1.3计算公式旋光度×50比旋度=称样量×（1-水份）2.鉴别2.1取本品0.2g，加水5ml溶解后，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。

2.2本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集702图）一致。

2.2.1执行SOP-QM-421《红外分光光度法标准操作规程》。

2.2.2执行SOP-EM-309《TJ270-30A型红外分光光度计标准操作规程》。

3.检查3.1酸度——取本品2.0g，加水20ml溶解后，加酚酞指示液3滴与 0.02mol/L氢氧化钠溶液0.2ml，应显粉红色。

3.2溶液的澄清度与颜色——取本品5g，加热水溶解后，放冷，用水稀释至10ml，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液比较，不得更浓；如显色，与对照液 ( 取比色用氯化钴液3ml，比色用重铬酸钾液3ml与比色用硫酸铜液 6ml加水稀释至50ml) 1.0ml加水稀释至10ml比较，不得更深。

3.3乙醇溶液的澄清度——取本品1.0g，加乙醇20ml，置水浴上加热回流约40分钟，溶液应澄清。

3.4氯化物——取本品0.60g，依法检查，与标准氯化钠溶液6.0ml制成的对照液比较不得更浓(0.01%)。

第 1 页共2页3.5硫酸盐——取本品2.0g，依法检查，与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对照液比较，不得更浓(0.01%)。

一.目的：建立葡萄糖浆出厂检验的标准操作程序，使操作过程规范化。

二.范围：适用于葡萄糖浆的检验操作。

三.责任者：质量主管、检验人员四.正文1.感官检查1.1外观、色泽取30ml葡萄糖浆样品倒入洁净、干燥的50ml小烧杯中，置于明亮处，观察其色泽、透明度、肉眼可见杂质等，并做好记录。

1.2气味用煮沸的蒸馏水配制干物质为4%的葡萄糖浆100ml，立即嗅其气味，并做好记录。

1.3滋味清水漱口后品尝1.2中样品的口味特征，并记录其滋味特征。

2.干物质（固形物）2.1仪器WYA-2S型数字阿贝折射仪2.2分析步骤打开仪器开关，检查上下棱镜表面，并用水或酒精清洁其表面，用玻璃棒沾取葡萄糖浆-～2滴放在棱镜工作表面上，然后将上面的进光棱镜盖上。

旋转聚光照明部件的转臂和聚光镜筒使进光表面得到均匀照明。

通过目镜观察视场，同时调节手轮使明暗分界线落在交叉线视场中并准确对准交叉线的交点。

按READ键，显示窗中0000消失，显示被测样品的折射率、温度校正后干物质（BX-TC）、锤度（BX）、温度（℃），做好检验原始记录。

测量结束后用酒精或水对棱镜进行小心清洁。

3.DE 值3.1 试剂和溶液费林试剂：按GB/T603配制；葡萄糖标准溶液（2g/L ）：称取于100℃±2℃烘干至恒重的优级纯无水葡萄糖0.5g ，用水溶解，稀释至250ml 。

3. 2操作方法 3.2.1样品制备称取一定量的样品，用蒸馏水稀释至100ml ，摇匀备用。

3.2.2预滴定依次吸取费林试剂乙液、甲液各5ml 于250ml 锥形瓶中，加入20ml 水，用50ml 滴定管预加入一定量的样液将锥形瓶置于电炉上加热至沸，并保持微沸。

以样液继续滴定至蓝色消失为终点。

3.2.3正式滴定依次吸取费林试剂乙液、甲液各5ml 于250ml 锥形瓶中，加入20ml 水，加入比预滴定时耗用量约少1ml 的样液于锥形瓶中，置于电炉上加热至沸，并保持微沸。

以样液继续滴定至蓝色消失为终点。

食品钙含量检验规标准操作程一、目的：建立钙（Ca ）含量检验操作规程，保证分析结果的准确性。

二、依据：GB/T 5009.92-2003《食品中钙的测定》三、范围：本规程适用于本公司成品中钙（Ca ）含量检验操作四、职责：质量检验员对本标准的实施负责五、正文：1、试制和溶液1.1 1.25 mol/L氢氧化钾溶液：精确称取70. 13 g氢氧化钾，用水稀释至1000 mL。

1.2 10 g/L氰化钠溶液：称取1.0 g氰化钠，用水稀释至100 mL1.3 0.05 mol/L柠檬酸钠溶液：称取14. 7 g 柠檬酸钠(Na, Cs Hs 07·2H,0 ，用水稀释至1000mL1.4 混合酸消化液:硝酸+高氯酸=4+11.5 EDTA溶液：准确称取4.50 gEDTA(乙二胺四乙酸二钠，用水稀释至1000 mL，贮存于聚乙烯瓶中，4℃保存。

使用时稀释10倍即可。

1.6 钙标准溶液：准确称取0.1248g 碳酸钙(纯度大于99.99%,105℃~-110℃烘干2 h，加20 mL水及3 mL0. 5 mol/L盐酸溶解，移入500 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，贮存于聚乙烯瓶中，4℃保存。

此溶液每毫升相当于100ug 钙。

1.7 钙红指示剂：称取0.1g 钙红指示剂(C2107N 2 SH 14 ，用水稀释至100 mL,溶解后即可使用。

贮存于冰箱中可保持一个半月以上。

2、测定方法2.1 标定EDTA 浓度吸取0.5 mL 钙标准溶液，以EDTA 滴定，标定其EDTA 的浓度，根据滴定结果计算出每毫升EDTA 相当于钙的毫克数，即滴定度(T2.2 试样及空白滴定分别吸取0.1 mL~0.5 mL (根据钙的含量而定试样消化液及空白于试管中，加1滴氰化钠溶液和0. 1 mL柠檬酸钠溶液，用滴定管加1. 5 mL 1. 25 mol/L氢氧化钾溶液，加3滴钙红指示剂，立即以稀释10倍EDTA 溶液滴定，至指示剂由紫红色变蓝为止。

无水葡萄糖检验操作规程1.目的：建立无水葡萄糖检验操作规程，便于检验人员的规范操作。

2.范围：适用于无水葡萄糖的检测。

3.责任：质检科化验员对实施本规程负责。

4.程序本品为D —（+）—吡喃葡萄糖。

分子式为：C6H12O6，180.16。

4.1 性状4.1.1本品为无色结晶或白色结晶性粉末，无臭、味甜。

4.1.2本品在水中易溶，在乙醇中微溶。

4.2比旋度4.2.1测定范围：+52.6°～+53.2°4.2.2试剂和溶液氨试液。

4.2.3操作步骤取本品约10g，精密称定，置50ml容量瓶中，加水适量与氨试液2.0ml，溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，放置60分钟，在25℃时，依法检查（见自动旋光仪标准操作程序）。

4.2.4计算[α]tD =100αlc式中：[α]为比旋度；上D 为钠光谱的D线；t 为测定时的温度；l 为测定管长度，dm；α为测得的旋光度；c 为每100ml溶液中含有被测物质的重量，g（按干燥品或无水物计算）。

4.2.5注意事项4.2.5.1每次测定前应以溶剂作空白校正，测定后，再校正一次，以确定在测定时零点有无变动，如第二次校正时发现零点有变动，则应重新测定旋光度。

4.2.5.2配制溶液及测定时，均应调节温度至20±0.5℃(或各品种项下规定的温度)。

4.2.5.3 供试的液体或固体物质的溶液应充分溶解，供试液应澄清。

4.2.5.4物质的比旋度与测定光源、测定波长、溶剂、浓度和温度等因素有关。

因此，表示物质的比旋度时应注明测定条件。

4.3鉴别4.3.1试剂和溶液碱性酒石酸铜试液。

4.3.2 操作步骤4.3.2.1取本品0.2g，加水5ml溶解后，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。

4.3.2.2本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集702图）一致。

4.4酸度4.4.1试剂和溶液4.4.1.1酚酞指示液；4.4.1.2氢氧化钠溶液，0.02mol/L。

葡萄糖检测作业指导书1 检验目的规范葡萄糖（GLU）检测试验，确保检测结果准确性和重复性。

2 测定方法己糖激酶法。

3 检测原理在有三磷酸腺苷 (ATP) 和镁离子存在的情况下，葡萄糖被己糖激酶 (HK) 磷酸化，产生 6-磷酸葡萄糖和二磷酸腺苷 (ADP)。

6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6P-DH) 特异性地氧化6-磷酸葡萄糖为 6-磷酸葡糖酸，同时 NAD+ 被还原为NADH。

吸光度在 340nm 处的增加与样本中的葡萄糖浓度成正比。

反应原理：4 样本血清、肝素或EDTA抗凝血浆，处理方法见生化标本采集程序。

稳定性：2～ 8℃稳定1天。

5 仪器和试剂5.1 仪器：美国贝克曼-库尔特DXC800、AU5811全自动生化仪、迈瑞BS800M生化分析仪。

5.2 试剂：由武汉元景商贸公司提供原装贝克曼-库尔特试剂及迈瑞公司提供的生化试剂（详见试剂说明书），超过失效期的试剂不能使用。

5.3 校准物：Rodan混合校准品，符合WHO标准，贮存、准备严格遵照其说明书。

5.4 质控物：Rodan正常值及病理值质控品，符合WHO 标准，贮存、准备严格遵照说明书。

6 校准6.1 仪器校准：每年由该仪器维修工程师参照厂方的技术规范对仪器进行一次校准。

6.2 项目校准：试剂盒在仪器上放置稳定期后；试剂批号更换后；由质控结果随时决定。

7 操作步骤上机操作，操作程序、质量控制程序见相应生化仪操作程序。

8 参考范围3.8～6.1mmol/L。

9 警告/危急值≤2.8 mmol/L或≥30 mmol/L。

10 性能指标10.1 线形上限：28mmol/L。

10.2 精密度：≤5%。

10.3 准确度:不准确度≤5%。

10.4 空白吸光度:在546nm处，应小于0.2。

10.5 试剂贮存:本试剂2～8℃密闭、避光贮存可稳定12个月；启用后于2～8℃可稳定一个月。

11 干扰因素及变异的潜在来源11.1溶血对本法有干扰作用，样本为了避免溶血，抽血后，应迅速将血清或血浆与红细胞分离，以避免糖酵解。

本次实训旨在通过实际操作，深入了解葡萄糖酸钙片的制备工艺、质量控制及临床应用，提高我们对药学专业知识的实践能力，培养我们的动手操作技能和团队协作精神。

二、实训时间2023年X月X日至2023年X月X日三、实训地点XX制药厂四、实训内容1. 葡萄糖酸钙片的制备工艺（1）原料及辅料的选择：葡萄糖酸钙、淀粉、硬脂酸镁、滑石粉等。

（2）制备过程：将葡萄糖酸钙溶解于适量水中，加入淀粉、硬脂酸镁、滑石粉等辅料，搅拌均匀，制成浆状物，然后进行压片、包衣等工艺流程。

2. 葡萄糖酸钙片的质量控制（1）外观检查：观察片剂的外观，要求表面光滑，色泽均匀。

（2）重量差异检查：按照规定方法，对一定数量的片剂进行称重，计算重量差异，要求重量差异在规定范围内。

（3）崩解时限检查：按照规定方法，对一定数量的片剂进行崩解试验，要求崩解时限在规定范围内。

（4）含量测定：采用高效液相色谱法对片剂中的葡萄糖酸钙含量进行测定，要求含量在规定范围内。

3. 葡萄糖酸钙片的临床应用（1）适应症：用于治疗钙缺乏症，如佝偻病、骨质疏松症等。

（2）用法用量：口服，成人一次1-2片，一日3次。

（3）禁忌症：对本品过敏者禁用。

1. 准备工作（1）熟悉实训设备和原料，了解葡萄糖酸钙片的制备工艺和质量控制要求。

（2）穿戴好个人防护用品，如口罩、帽子、手套等。

2. 制备过程（1）按照配方要求称取葡萄糖酸钙、淀粉、硬脂酸镁、滑石粉等原料。

（2）将葡萄糖酸钙溶解于适量水中，加入淀粉、硬脂酸镁、滑石粉等辅料，搅拌均匀，制成浆状物。

（3）将浆状物进行压片、包衣等工艺流程。

3. 质量控制（1）对制备好的片剂进行外观检查，确保表面光滑，色泽均匀。

（2）进行重量差异检查，计算重量差异，确保在规定范围内。

（3）进行崩解时限检查，确保崩解时限在规定范围内。

（4）采用高效液相色谱法对片剂中的葡萄糖酸钙含量进行测定，确保含量在规定范围内。

4. 总结与反思（1）总结实训过程中的经验教训，找出存在的问题，并提出改进措施。

1 感官要求取10g被测样品，置于洁净的白瓷盘中，用肉眼在自然光线下观察其色泽、组织形态、杂质，品尝其滋味，嗅其气味。

2一般规定本标准所用试剂除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和 GB/T 6682—2008中规定的三级水。

试验方法中所需标准滴定溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T 601、GB/T 603之规定制备。

3 鉴别试验3.1 试剂和材料3.1.1 亚铁氰化钾溶液：100g/L。

3.1.2 盐酸溶液：1+4。

3.1.3 苯肼。

3.1.4 冰乙酸。

3.2 鉴别试验3.2.1 锌盐鉴别3.2.1.1 方法提要锌盐与亚铁氰化钾试液反应生成白色沉淀，沉淀在稀盐酸中不溶解，以此鉴别锌离子。

3.2.1.2 分析步骤称取 1.0 g实验室样品，精确至 0.01 g，置于 50 mL试管中，加入 20 mL 水溶解，必要时加热使溶解，加亚铁氰化钾溶液，即发生白色沉淀，分离，沉淀在稀盐酸中不溶解。

3.2.2 葡萄糖的鉴别 3.2.2.1 方法提要样品在乙酸介质中，与苯肼共热，生成黄色葡萄糖酰苯肼结晶。

3.2.2.2 分析步骤称取 0.5 g 实验室样品，精确至 0.01 g ，加 10 mL 水，溶解（必要时加热），取 5 mL ，加 0.7 mL 冰乙酸和 1 mL 新蒸馏的苯肼，在水浴上加热 30min ，放至室温，用玻璃棒摩擦试管内壁，则析出黄色结晶。

4 葡萄糖酸锌的测定 4.1 方法提要以铬黑 T 为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠标准滴定液滴定样品水溶液，根据乙二胺四乙酸二钠标准滴定液的用量，计算以 C12H22O14Zn 计的葡萄糖酸锌的含量。

4.2 试剂和材料4.2.1 氨—氯化铵缓冲溶液（pH ≈10）。

4.2.2 铬黑T 指示剂。

4.2.3 乙二胺四乙酸二钠标准滴定液：c(EDTA)=0.05 mol/L 。

4.3 分析步骤称取 0.5 g 实验室样品，精确至 0.000 1 g ，加 100 mL 水，使溶解（必要时加热），放至室温，加 5 mL 氨—氯化铵缓冲溶液，铬黑 T 指示剂少许，用乙二胺四乙酸二钠标溶液滴定至溶液由紫红色变为纯蓝色，并将滴定结果用空白试验校正，每 1 mL 的乙二胺四乙酸二钠滴定液（ 0.05 mol/L ）相当于 22.78 mg 的 C12H22O14Zn 。

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实验二葡萄糖酸钙的合成[教材] 实验二葡萄糖酸钙的合成一、实验目的1、掌握由葡萄糖、碳酸钙合成葡萄糖酸钙的原理及方法;2、学习氧化反应在药物合成中的应用二、实验原理葡萄糖是自然界分布最广且最为重要的一种单糖，它是一种多羟基醛，分子量为180，白色晶体，易溶于水，味甜，熔点146?。

分子中的醛基，有还原性，能与银氨溶液等弱氧化剂反应生成葡萄糖酸。

葡萄糖酸的制备方法一般有酶法、电解氧化法，空气催化氧化法和化学试剂氧化法。

工业上生产葡萄糖酸的方法，主要是酶法和电解氧化法。

本实验采用的氧化剂是双氧水，用过氧化氢作氧化剂，在无任何催化剂的作用下，把葡萄糖氧化成葡萄糖酸，不需进行葡萄糖酸的精制，然后再用碳酸钙中和生成的葡萄糖酸，结晶后就可得到葡萄糖酸的粗品。

葡萄糖酸钙是一种医药和精细化学品，作为药物，可促进骨骼及牙齿钙化，维持神经和肌肉正常兴奋，降低毛细血管渗透性的营养品。

可用于由于血钙降低而引起的手足抽搐症及麻症、渗出性水肿、瘙痒性皮肤病等疾病的治疗;作为精细化学品，它可作为食品添加剂、水质稳定剂和水泥助剂。

其反应的过程如下:HO CaCO3 22三、主要试剂与仪器试剂:葡萄糖、30%双氧水、碳酸钙、无水乙醇仪器:烧杯、滴管、量筒、磁力粒，过滤器、10ml的注射器、集热式磁力搅拌器，微孔滤膜四、实验步骤1、葡萄糖酸溶液的制备称取0(1mol(18g)葡萄糖，置于100ml三角烧杯中，加入 3倍量的30,双氧水(34ml)，在磁力搅拌器中沸水浴加热、搅拌得到无色透明的葡萄糖酸溶液(当氧化率达80,以上时(60min)，停止反应，把反应液冷却至60,70?待用(2、葡萄糖酸钙的制备在搅拌下，分批加人约0(05mol(5g)的碳酸钙至葡萄糖酸溶液中，直至无 CO2气体放出为止。

反应完全后，趁热用注射器把反应液注入装有0.22微米过滤器过滤，得澄清透明葡萄糖酸钙溶液。

3、结晶得到葡萄糖酸钙的粗品把上述葡萄糖酸钙溶液转入100ml三角烧杯冷却至室温，往烧杯中添加适量的无水乙醇(约1:1的比例)，得到不溶乙醇溶液，静置10min得到絮状沉淀，用已称过重量的滤纸抽滤得到白色粉末状葡萄糖酸钙粗品。