人血清晚期糖基化终末化产物受体的表达与肺癌的关系
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广东医学2013年12月第34卷第23期 Guangdong Medical Journal Dec.2013,Vo1.34,No.23
郭军红,蒲传强.糖尿病周围神经病的病理与电生理研究进 展[J].中国康复理论与实践,2009,15(1):8—1O. 钱荣立.关于糖尿病的新诊断标准与分型[J].中国糖尿病杂 志,2000,8(1):5—6. 卢祖能,曾庆杏,李承晏,等.实用肌电图学[M].北京:人 民卫生出版社,2000:339—345. TRUJILLO HERNANDEZ B,HUERTA M,PEREZ VARGAS D, et a1.Blink reflex alterations in recently diagnosed diabetic pa— tients『J].J Clin Neurosci,2003,10(3):306—309. KAZEM S S,BEHZAD D.Role of blink reflex in diagnosis of sub- clinical cranial neuropathy in diabetic mellitus typeⅡ『J].Am J ・3593・
Phys Med Rehabil,2006,85(5):449—452. [7] 石晓花,冯雪玲,甘欢炊.瞬目反射对糖尿病颅神经亚临床损害 早期诊断的价值[J].心脑血管病防治,2010,10(1):39—41. [8] 杨炼红,刘军,陶恩祥,等.瞬目反射对糖尿病患者颅神经亚 临床损害的诊断价值[J].中华物理医学与康复杂志,2005, 27(3):165—167. [9]杨明正,徐大雄.糖尿病患者神经损害及其危险因素分析 [J].华西医学,2011,26(2):242—243. [10]覃彦平.糖化血红蛋白检测及临床应用研究进展[J].白求恩 军医学院学报,2011,9(1):48—5O. (收稿13期:2013—07一O5编辑:罗劲娜)
人血清晚期糖基化终末化产物受体的表达与
肺癌的关系 :l:
刘健雄,刘志辉,马志明,谢贝,薛宗锡,高健齐,游佩涛,邵峥
广东省广州市胸科医院外科、广东省广州市肺部疾病研究所、呼吸疾病国家重点实验室结核病研究室
(广州510095)
【摘要】 目的探讨人血清晚期糖基化终末化产物受体(RAGE)的表达及与肺癌的相关性。方法 采用 ELISA法检测40例肺癌患者(包括无远处转移的I A~ⅢB期患者18例、有远处转移的Ⅳ期患者22例)和40例 健康对照者的血清RAGE表达水平,比较肺癌患者与健康对照者、I A一ⅢB期患者与Ⅳ期患者间血清RAGE表
达水平的差异。结果肺癌患者、健康对照者血清RAGE水平[M(P ,P7 )]分别为530(755,2 210)pg/mL和 610(935,3 350)pg/mL(z:一0.856,P=0.392);I A~ⅢB期患者与Ⅳ期患者间血清RAGE水平分别为590 (830,5 400)pg/mL和457(803,2 220)pg/mL,行Wilcoxon秩和检验,两者间血清RAGE表达水平差异无统计学意
义(Z=一0.394,P=0.693)。结论血清RAGE水平与肺癌关系并不密切,可能不能预示肺癌是否有远处转移。
【关键词】 晚期糖基化终末化产物受体;肺癌;肿瘤转移
晚期糖基化终末化产物受体(receptor for advanced
glycation—end products,RAGE)是一种免疫球蛋白家族
多配体成员,在肺组织有高度表达,但有研究显示在癌
性肺组织中表达减少 。也有研究表明RAGE与肿
瘤的恶化、转移等密切相关 。众所周知,人体体循环
血液均须由右心房人右心室后通过肺循环完成气体交
换功能后流回左心房,且肺脏血容量较大,癌性肺组织
RAGE表达的变化可否反映到血液之中?目前鲜见文献
报道。我们采用ELISA法对包括无远处转移的I A~
ⅢB期患者18例、有远处转移的Ⅳ期患者22例肺癌
患者和40例健康对照者的血清RAGE水平进行了检
测和分析,结果报告如下。
1资料与方法
1.1 一般资料按配对设计原则从“广州地区结核病
生物样本库”中采用随机数字表法随机抽取肺癌患者
血清40例和健康对照血清40例。根据生物样本库样
国家“十二五”传染病防治重大科技专项(编号:2012ZX10004 903),广东省科技计划项目(编号:2011B080702008) 本供体信息资料显示:40例肺癌患者(男30例、女10
例)中,无远处转移的I A~ⅢB期患者18例,有远处
转移的Ⅳ期患者22例,年龄34~80岁,平均(57±11)
岁;40例健康对照(男28例,女12例)中,年龄30~75
岁,平均(51±12)岁;样本采集时间为2012年2月至
2013年4月,根据生物样本库要求均于一80℃低温冰
箱冻存。
1.2材料与方法
1.2.1 试剂和仪器双抗体夹心法RAGE ELISA检
测试剂购自广州市恒生科技有限公司,ELISA结果检
测应用RT一6000酶标分析仪进行。
1.2.2 实验方法 在96孔酶标反应板上设置空白
孔、7个浓度的标准品(4 500、3 000、2 000、1 000、500、
250、125 pg/mL)各2孔及每个待检样品各1孑L,严格
按试剂和仪器使用说明书进行。主要包括:5倍稀释
待检血清样品;取50 各浓度标准品、血清稀释样品
加入酶标反应板孔底部(空白孔不加),37℃温育30
min;弃去孔中液体甩干,重复5次,洗涤干净后,除空
白孔外每孑L加入酶标试剂50 txL,37qC温育30 min;弃 ]1 1J 1j
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去孔中液体甩干,重复5次,洗涤干净后,每孔先后加
入显色剂A、B各50 L,轻轻振荡混匀,37cC避光显色
15 min;每孑L加终止液50 L,终止反应,此时孔中液体 由蓝色转为黄色;在终止反应15 min内以空白孔调
零,450 nm波长依序测量各反应孔的吸光度(OD值);
以标准品浓度(取2孔均值)为横座标、OD值为纵座
标,应用CurveExpe ̄1.3绘制标准曲线和导出RAGE
浓度与OD值关系方程式;根据待测样品OD值在标准
曲线上查出或由关系方程式计算出相应的浓度,再乘
以稀释倍数即为待测样品的实际RAGE浓度。
1.3统计学方法应用SPSS 19.0统计软件,分别以
肺癌患者与健康对照者、I A~ⅢB期患者与Ⅳ期患者
血清RAGE水平为两独立样本计量资料,然后对分组
资料进行两样本的方差齐性F检验,总体方差相等者
对两样本均数行t检验、不相等者行完全随机化设计
两独立样本的秩和检验(Wilcoxon秩和检验)。
2结果
2.1 RAGE浓度与OD值关系4 500、3 000、2 000、
l 000、500、250、125 pg/mL RAGE标准品检测的OD值
分别为3.500 0、2.793 0、2.056 5、1.187 0、0.537 0、
0.277 5、0.296 0,RAGE浓度(用Y表示)与OD值(用
表示)关系方程式为Y=0.029 9+0.001 2x一(9×
10 ) ,由于(9×10 ) 项对计算影响极小,可近似 为Y=0.001 2x+0.029 9的一条直线,从标准曲线图
也可以观察到这一点,见图1。
毫
鑫 蓄 塞
图1 RAGE浓度标准曲线图 O.O
2.2 肺癌患者与健康对照者的血清RAGE水平比较
40例肺癌患者的血清RAGE水平为140~11 785 pg/
mL,中位数(四分位数范围)[ (P P )]为530
(755,2 210)pg/mL;40例健康对照者的血清RAGE浓
度为175~8 735 pg/mL,M(P 5,P7 )为610(935,3 350)
pg/mL。两者比较差异无统计学意义(Z=一0.856,
P=0.392)。 2.3 I A~ⅢB期肺癌患者与Ⅳ期肺癌患者血清
RAGE水平比较l8例无远处转移的I A~ⅢB期肺
癌患者的RAGE水平为260~8 735 pg/mL,M(P…
P, )为590(830,5 400)pg/mL;22例有远处转移的Ⅳ
期肺癌患者的血清RAGE水平为140~5 800 pg/mL。
M(P: ,P )为457(803,2 220)pg/mL。两者比较差异
无统计学意义(z=一0.394,P=0.693)。 3讨论
RAGE参与多种肿瘤细胞的增殖、浸润和转移已为
许多研究所证实 ,而我们的研究结果则显示:两样本
中位数比较差异无统计学意义,即血清RAGE水平与
肺癌或是否发生转移的相关性不大。结论看似相悖,
但仔细分析我们则不难看出,目前RAGE参与多种肿
瘤细胞的增殖、浸润和转移的研究证据大多来自免疫
组化的检测分析,目前对于血清RAGE水平与肿瘤的 相关性研究还远未深入。当然,研究样本含量较小、配
对设计原则下的样本匹配尚欠严谨也值得我们注意,
但从目前相关研究进展和本文分析结果综合来看应该
不会是问题的主要方面。
目前人们已经清楚:RAGE由404个氨基酸组成,
其完整的结构包括胞外域、跨膜区和胞内域3部分,是
一种具有多配体的跨膜信号转导受体,属细胞表面分
子中免疫球蛋白超家族成员之一 。作为横跨细胞膜
的RAGE分子整体,一般无法自由脱离细胞,除非组织
细胞死亡或凋亡而进入血液或相关体液。这当是我们
的分析报告与免疫组化研究结论相左的根本原因。继
之而来的问题是我们检测到的血清RAGE从何而来,
概因血液循环系统中可正常表达RAGE的中性粒细
胞、单核一巨噬细胞、血管内皮细胞等新陈代谢的结
果。因此,我们可以认为血清RAGE与肺癌不具密切
相关性。值得一提的是目前有研究显示血清可溶性
RAGE形式可能成为一种新的肺癌生物标志物 ,它
提示RAGE在体内具有多种存在形式和作用方式而与
肺癌的发生发展密切联系,值得人们深入探讨,我们正
在进行相关工作。
参考文献
一一~ 一~ 一一一一一一~ 一1 2
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