免疫荧光法及红外光谱法在食源性致病菌检测中的研究解析

免疫荧光法及红外光谱法在食源性致病菌检测中的研究

英文题名 The Research of Immunofluorescence and Infrared

Spectroscopy in Food-brone Pathogen Detection 关键词 致病菌; 纳米磁珠; 免疫量子点; 红外光谱; 统计分析; 英文关键词 pathogenic bacteria;

magnetic nanoparticles; immune QDs; FTIR; statistical analysis; 中文摘要 食源性致病菌是指以食物为载体而导致人类发生疾病的一大类细菌。食源性致病菌的检测一直是食品检测中的最总要的检测部分之一。随着科技的进步及食品检测中要求的提高,食品检测技术在不断的朝着准确化、效率化、多元化的方向发展。 纳米科技是是20世纪80年代兴起的一门新兴交叉学科,在生物、医学、化学、环境等方面有着广泛的应用前景,纳米材料的开发和利用一直是纳米科技发展的重点,尤其是近年来,将纳米技术与生物技术相结合所产生的纳米生物技术更成为纳米科技研究的焦点之一。 本文主要研究了一种新型的免疫荧光食源性致病菌检测技术,基于纳米免疫磁珠富集,免疫量子点标记,建立了一种快速检测食品中沙门氏菌含量的方法。本文同时通过红外光谱技术结合统计分析方法对食源性致病菌进行研究。 (1)采用反相微乳液法,通过二氧化硅包裹磁性γ-Fe2O3微粒,得到高分散性,粒径均匀的核壳型磁性纳米粒子。通过修饰氨基硅烷使磁性纳米粒子具有生物相容性,然后通过连接上多克隆抗体,使得制备出的磁性纳米粒子具有生物特异性。使用EDAC作为交联剂,NHSS作为保护剂,使表面修饰有羧基的荧光量子点与多克隆抗体交联,从而制备出免疫化的荧光量子点。实... 英文摘要 Food-borne pathogenic bacteria are a broad

spectrum of microbial pathogens and widely responsible for many food-borne diseases. Food-borne pathogenic bacteria are one of the

important parts in food testing. With the development of technology

and the requirements of food testing, food testing technology is

constantly improved in the direction of accuracy, efficiency, and

diversification. Nanotechnology is a new cross-disciplinary from the

1980s , which have a wide range of applications in the biology 摘要

6-8 ABSTRACT 8-10 第一章 文献综述 14-27 1.1 研究的意义 14-15 1.2 研究的进展 15-21 1.2.1 纳米生物技术在致病菌检测中的应用 15-16 1.2.2 核壳型磁性纳米粒子的合成及其在生物体系中的应用 16-17 1.2.3 有机荧光染料的研究进展及其在生物体系中的应用 17-18 1.2.4 量子点及其在生物领域的应用 18-20 1.2.5 量子点在致病菌检测中的应用

20 1.2.6 红外光谱技术在致病菌检测中的应用 20-21 1.3 实验方法和表征手段 21-25 1.3.1 反相微乳液法制备超顺磁性纳米粒子 22 1.3.2 透射电子显微镜（TEM） 22-23 1.3.3 紫外分光光度计 23-24 1.3.4 荧光显微镜 24-25 1.3.5 荧光分光光度计 25 1.4 本论文的研究目的及主要内容 25-27 第二章 核壳型磁性纳米粒子在沙门氏菌富集中的研究 27-38 2.1 引言 27-28 2.2 实验方法与研究 28-30 2.2.1 试剂与仪器 28 2.2.2 磁性γ-Fe_20_3 的合成

28 2.2.3 磁性纳米粒子的合成及其表面氨基化 28-29 2.2.4 磁珠的免疫化 29 2.2.5 致病菌的培养 29 2.2.6 菌液的磁性富集 29-30 2.3 实验结果与讨论 30-37 2.3.1 磁性纳米粒子的表征 30-31 2.3.2 磁珠表面氨基化分析 31-32 2.3.3

免疫化磁珠的制备 32-33 2.3.4 菌株的磁性富集分析 33-37 2.4 实验小结 37-38 第三章 基于量子点的荧光特性在致病菌检测中的研究 38-51 3.1 引言 38-39 3.2 实验方法与研究 39-43 3.2.1 试剂与仪器 39 3.2.2 免疫量子点的制备及其纯化 39-40 3.2.3 致病菌的培养与计数和检验样品的制备 40-41 3.2.4 单种免疫量子点对致病菌的标记

41 3.2.5 三种免疫量子点对致病菌的免疫标记过程 41-42 3.2.6 荧光免疫复合物图和复合峰的分解 42-43 3.3 实验结果与讨论 43-50 3.3.1 免疫量子点的制备和表征 43-45 3.3.2 单种免疫量子点对致病菌的标记

45-46 3.3.3 复合物的荧光图和复合峰的分解 46-50 3.4 结论 50-51 第四章 红外光谱技术在致病菌检测中的应用 51-61 4.1 引言 51-52 4.2 实验方法与研究试剂和仪器 52-53 4.2.1 试剂与仪器 52 4.2.2 菌株样品的制备 52-53 4.2.3 菌株红外光谱的测定

53 4.2.4 菌株红外光谱数据的处理 53 4.3 实验结果与讨论 53-58 4.3.1 红外光谱结果 53-58 4.4 实验结论与小结与展望 58-61 致谢 61-62 参考文献 62-69 2.2.3

磁性纳米粒子的合成及其表面氨基化 28-29 2.2.4 磁珠的免疫化 29 2.2.5 致病菌的培养 29 2.2.6 菌液的磁性富集 29-30 2.3 实验结果与讨论 30-37 2.3.1 磁性纳米粒子的表征 30-31 2.3.2

磁珠表面氨基化分析 31-32 2.3.3 免疫化磁珠的制备 32-33 2.3.4 菌株的磁性富集分析 33-37 2.4 实验小结

37-38 第三章 基于量子点的荧光特性在致病菌检测中的研究 38-51 3.1 引言 38-39 3.2 实验方法与研究 39-43 3.2.1 试剂与仪器 39 3.2.2 免疫量子点的制备及其纯化 39-40 3.2.3 致病菌的培养与计数和检验样品的制备 40-41 3.2.4 单种免疫量子点对致病菌的标记

41 3.2.5 三种免疫量子点对致病菌的免疫标记过程 41-42 3.2.6 荧光免疫复合物图和复合峰的分解 42-43 3.3 实验结果与讨论 43-50 3.3.1 免疫量子点的制备和表征 43-45 3.3.2 单种免疫量子点对致病菌的标记

45-46 3.3.3 复合物的荧光图和复合峰的分解 46-50 3.4 结论 50-51 第四章 红外光谱技术在致病菌检测中的应用 51-61 4.1 引言 51-52 4.2 实验方法与研究试剂和仪器 52-53 4.2.1 试剂与仪器 52 4.2.2 菌株样品的制备 52-53 4.2.3 菌株红外光谱的测定 53 4.2.4 菌株红外光谱数据的处理 53 4.3 实验结果与讨论 53-58 4.3.1 红外光谱结果 53-58 4.4 实验结论与小结与展望 58-61 致谢 61-62 参考文献 62-69 2.2.3

磁性纳米粒子的合成及其表面氨基化 28-29 2.2.4 磁珠的免疫化 29 2.2.5 致病菌的培养 29 2.2.6 菌液的磁性富集 29-30 2.3 实验结果与讨论 30-37 2.3.1 磁性纳米粒子的表征 30-31 2.3.2

磁珠表面氨基化分析 31-32 2.3.3 免疫化磁珠的制备 32-33 2.3.4 菌株的磁性富集分析 33-37 2.4 实验小结

37-38 第三章 基于量子点的荧光特性在致病菌检测中的研究 38-51 3.1 引言 38-39 3.2 实验方法与研究 39-43 3.2.1 试剂与仪器 39 3.2.2 免疫量子点的制备及其纯化 39-40 3.2.3 致病菌的培养与计数和检验样品的制备 40-41 3.2.4 单种免疫量子点对致病菌的标记

41 3.2.5 三种免疫量子点对致病菌的免疫标记过程 41-42 3.2.6 荧光免疫复合物图和复合峰的分解 42-43 3.3 实验结果与讨论 43-50 3.3.1 免疫量子点的制备和表征 43-45 3.3.2 单种免疫量子点对致病菌的标记

45-46 3.3.3 复合物的荧光图和复合峰的分解 46-50 3.4 结论 50-51 第四章 红外光谱技术在致病菌检测中的应用 51-61 4.1 引言 51-52 4.2 实验方法与研究试剂和仪器 52-53 4.2.1 试剂与仪器 52 4.2.2 菌株样品的制备 52-53 4.2.3 菌株红外光谱的测定