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高效液相色谱实验报告高效液相色谱法，基本原理为影响柱效的主要因素是涡流扩散和传质阻抗。
分为液固吸附色谱法，流动相为液体，固定相是固体吸附剂；液分配色谱法，固定相几乎全是化学键合硅胶，又称化学键合相色谱法等。
（二）塔板理论：塔板理论方程式（高斯方程式）：理论塔板式数：理论塔板高度：（三）速率理论： h=a+b/u+cu影响塔板高度的因素：1、涡流扩散 2、纵向扩散 3、传质阻抗二、气相色谱仪：（1）色谱柱：固定相与柱管组成。
填充柱、毛细管柱；分配柱、吸附柱（2）紧固液：低沸点的液体，操作方式下为液态。
甲基硅油、聚乙二醇等选择原则：按相似性、按主要差别、按麦氏差别选择。
（3）载体：化学惰性的多孔性微粒（4）毛细管色谱柱：开管型、填充型（5）检测器：1、浓度型检测器：热导检测器和电子捕捉检测器2、质量型检测器：氢焰离子化检测器中国药典对气相色谱规定：除检测器种类、紧固液品种及特定选定的色谱柱材料严禁任一修改外，其他均可适度发生改变，色谱图于30min内记录完。
第四节高效液相色谱法1、基本原理：影响柱效的主要因素就是涡流蔓延和传质电阻。
分类：1、液固吸附色谱法：流动相为液体，固定相是固体吸附剂。
2、液——液分配色谱法：紧固二者几乎全系列就是化学键再分硅胶，又称化学键再分相色谱法。
按固定相和流动相的极性2又分：正相色谱法和反相色谱法正相色谱法：流动二者极性大于紧固二者极性的色谱法。
用作拆分溶有机溶剂的极性及中等极性的分子型物质，用作所含相同官能团物质的拆分。
极性强组分先流入反相色谱法：……………大于……………………… 用于分离非极性至中等极性的分子型化合物2、高效率液相色谱仪：1、高压输液泵2、色谱柱3、进样阀4、检测器：紫外稀释检测器、荧光检测器、热法折光检测器、电化学检测中国药典对高效液相色谱法规定：除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意更改外，其余均可适当改变，色谱图于20min内记录完毕。
第五节色谱系统适用性试验和定量分析方法一、系统适用性试验1、色谱柱的理论板数：2、分离度：应大于1.53、重复性3、拖尾声因子：0.95-1.05之间二、定量测定法：1、内标法加较正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量2、外标法测量供试品中某个杂质或主成分含量3、加较正因子的主成分自身对照法不加较正因子的主成分自身对照法。
第八章高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatograph)第一节概述（Generalization）以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法（HPLC）。
HPLC是20世纪70年代初发展起来的一种新的色谱分离分析技术。
具有分离效能高、选择性好、灵敏度高、分析速度快、适用范围广（样品不需气化，只需制成溶液即可）的特点，适用于高沸点、热不稳定有机及生化试样的分离分析。
HPLC基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂泵入装有填充剂的色谱柱，经进样阀注入的样品被流动相带入色谱柱内进行分离后依次进入检测器，由记录仪、或数据处理系统记录色谱信号再进行数据处理而得到分析结果。
高效液相色谱法按固定相不同可分为液－液色谱法和液－固色谱法；按色谱原理不同可分为分配色谱法（液－液色谱）和吸附色谱法（液－固色谱）等。
目前，化学键合相色谱应用最为广泛，它是在液－液色谱法的基础上发展起来的。
将固定液的官能团键合在载体上，形成的固定相称为化学键合相，具有固定液不易流失的特点，一般认为有分配与吸附两种功能，常以分配作用为主。
C18（ODS）是最常使用的化学键合相。
根据固定相与流动相极性的不同，液-液色谱法又可分为正相色谱法和反相色谱法，当流动相的极性小于固定相的极性时称正相色谱法，主要用于极性物质的分离分析；当流动相的极性大于固定相的极性时称反相色谱法，主要用于非极性物质或中等极性物质的分离分析。
《中国药典》中有50种中成药的定量分析采用HPLC法，在中药制剂分析中，大多采用反相键合相色谱法。
一、高效液相色谱法的特点目前经典LC主要用于制备，若用于分析则采用脱机或非连续检测。
经典LC填料缺陷，通常是填料粒度大、范围宽、不规则，不易填充均匀，扩散和传质阻力大，谱带展宽加大。
它存在致命弱点：速度慢、效率低和灵敏度低。
HPLC填料（高效固定相）颗粒细、直径范围窄、能承受高压。
0721维生素A测定法本法是用紫外-可见分光光度法（通则0401）或高效液相色谱法（通则0512）测定维生素A 及其制剂中维生素A的含量，以单位表示,每单位相当于全反式维生素A醋酸酯0.344μg或全反式维生素A醇0.300μgo测定应在半暗室中尽快进行。
第一法（紫外-可见分光光度法）由于维生素A制剂中含有稀释用油和维生素A原料药中混有其他杂质，采用紫外-可见分光光度法测得的吸光度不是维生素A独有的吸收。
在以下规定的条件下，非维生素A物质的无关吸收所引人的误差可以用校正公式校正，以便得到正确结果。
校正公式采用三点法，除其中一点是在吸收峰波长处测得外，其他两点分别在吸收峰两侧的波长处测定，因此仪器波长应准确，在测定前，应对仪器波长进行校正。
测定法取供试品适量，精密称定，加环己烷溶解并定量稀释制成每ImI中含9〜15单位的溶液，照紫外-可见分光光度法（通则0401）,测定其吸收峰的波长，并在下表所列各波长处测定吸光度，计算各吸光度与波长328nm处吸光度的比值和波长328nm处的（E陵）值。
如果吸收峰波长在326〜329nm之间，且所测得各波长吸光度比值不超过表中规定的±0.02,可用下式计算含量：每Ig供试品中含有的维生素A的单位=（E怂）（328nm）×1900如果吸收波长在326〜329nm之间，但所测得的各波长吸光度比值超过表中规定值的±0.02,应按下式求出校正后的吸光度，然后再计算含量：4328（校正）=3.52（2A321-A3K-A340）如果在328nm处的校正吸光度与未校正吸光度相差不超过±3.0%,则不用校正，仍以未经校正的吸光度计算含量。
如果校正吸光度与未校正吸光度相差在一15%至一3%之间，则以校正吸光度计算含量。
如果校正吸光度超出未校正吸光度的一15%至一3%的范围，或者吸收峰波长不在326〜329nm 之间，则供试品须按下述方法测定。
高效液相色谱（HPLC）基础知识我国药典收载高效液相色谱法项目和数量比较表：方法项目数量1985年版1990年版1995年版2000年版HPLC法鉴别9 34 150 检查12 40 160 含量测定7 60 117 387鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。
I．概论一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。
又称为色层法、层析法。
色谱法最早是由俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，色谱法(Chromatography)因之得名。
后来在此基础上发展出纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法。
液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长（常有几个小时）。
高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。
它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)。
又因分析速度快而称为高速液相色谱法(High Speed Liquid Chromatography，HSLP)。
也称现代液相色谱。
二、HPLC的特点和优点HPLC有以下特点：高压——压力可达150~300 Kg/cm2。
色谱柱每米降压为75 Kg/cm2以上。
高速——流速为0.1~10.0 ml/min。
标准操作规程1目的：建立高效液相色谱测定法操作规程，以使检验操作规化。
2适用围：适用于高效液相色谱测定法检验操作全过程。
3责任：QC人员对本SOP实施负责。
4容高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。
注入的供试品，由流动相带入色谱柱，各组分在柱被分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。
4.1.对仪器的一般要求和色谱条件高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。
色谱柱径一般为3.9~4.6mm，填充剂粒径为3~10μm。
超高效液相色谱仪是适应小粒径（约2μm）填充剂的耐超高压、小进样量、低死体积、高灵敏度检测的高效液相色谱仪。
4.1.1.色谱柱反相色谱柱：以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。
常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等；常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。
正相色谱柱：用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。
常用的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。
氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作反相色谱。
离子交换色谱柱：用离子交换填充剂填充而成的色谱柱。
有阳离子交换色谱柱和阴离子交换色谱柱。
手性分离色谱柱：用手性填充剂填充而成的色谱柱。
色谱柱的径与长度，填充剂的形状、粒径与粒径分布、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、载体表面基团残留量，填充的致密与均匀程度等均影响色谱柱的性能，应根据被分离物质的性质来选择合适的色谱柱。
温度会影响分离效果，品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温，应注意室温变化的影响。
为改善分离效果可适当提高色谱柱的温度，但一般不宜超过60℃。
残余硅羟基未封闭的硅胶色谱柱，流动相pH值一般应在 2〜8之间。
残余硅羟基已封闭的硅胶、聚合物复合硅胶或聚合物色谱柱可耐受更广泛pH值的流动相，适合于pH 值小于2或大于8 的流动相。
高效液相色谱法简介及其在药品检验中的应用摘要：在上个世纪的七十年代，高效液相色谱法出现在世界上，并因为其优良的应用效果，促使其在各个行业得到了广泛运用。
与此同时在持续的实践和创新过程中，该项技术不断发展和完善，如今已经逐步运用到药品检测的各个领域，并得到了较好的应用效果。
高水平的自动化以及较高的灵敏度，预示着该项技术拥有较好的分离效果。
通常情况下，高效液相色谱法主要应用到药品检测行业，再加上其技术的功效显著，慢慢变成药品安全监管的重要工具。
基于此，笔者在本篇主要针对高效液相色谱法展开相关介绍，并对其在药品检验中的相关运用进行一定的分析和讨论，希望能够为我国药品检验行业尽绵薄之力。
关键词：高效液相色谱法；简介；药品检验；运用引言：药品检验是医疗行业中重要的组成部分，并且该部分能够应用的手段有很多，其中比较常见的当属高效液相色谱法。
该技术早在上个世纪就已经应用在药品检验当中，同时也伴随着医药行业的发展而不断改进和完善，更是获得相关业内人士一致的赞誉和夸奖，在药品检验中也取得优良的效果和成绩。
一、高效液相色谱法的相关简介高效液相色谱是色谱法的关键组成内容，应用的手段主要依据高压输液泵、色谱柱、进样器以及检测器和馏分收集器来促进对药品相关信息的检测和反应。
高效液相色谱的第一次运用能够向上追寻到上个世纪的70年代，在当前发展阶段，该技术已经具备丰富娴熟的应用经验，因此能够在面对各种各样的工作状况时，可以尽快给出相应的解决办法。
与传统的的经典液相色谱对比，高效液相色谱既能够实现药品的固定检测，还可以有效细化所检测物质，确保被检测化学物质的精细化管理。
除此之外，在高效液相色谱工作的全过程中，可以推进药品检测的自动化顺利开展。
借助计算机语言，还能够大大降低可能出现的人力资源的浪费，有效提升检验结果的精准度[1]。
与此同时，还可以很好减少人工操作产生的偏差，使检测结论更趋向精确。
高效液相色谱是在经典液相色谱的基本上进一步改善和健全的。
高效液相色谱法测定药品含量时对照品的合理使用研究摘要：目的探讨使用HPLC法检测药品含量时，如何科学、合理的使用对照品。
方法使用《中国药典2015年版》高效液相色谱法分析药品含量的方法，采用2种对照品使用方法对6种药品进行检测。
方法1使用3份对照品检测3份药品的含量；方法2使用1份对照品检测3份药品的含量，比较两种方法对药品检测结果的影响。
结果方法1和方法2检测药品含量的RSD%均小于5%，符合HPLC法检测的要求，但方法2可以节省2份对照品。
结论采用高效液相色谱法检测药品含量，采用方法2检测结果可靠，节省对照品，可在药品含量检测中推广使用。
关键词：高效液相色谱法；含量测定；对照品高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC）是使用高压输液泵将不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂或缓冲液作为流动相泵入装有固定相的色谱柱，经过进样阀注入待测样品，由流动相带入柱内，各成分被分离后，依此进入检测器进行检测，实现对样品的分析。
在、化学、农业等多学科、多领域取得了广泛的应用[1]。
HPLC由于检测快速、准确、灵敏度高，已被中国药典收录，成为药品含量检测的标准方法，但该方法检测需要国家标准品作为参比对照，故经济成本较高[2]。
本着在不影响检测结果的同时能最大限度的节约对照品的原则，本研究拟采用一支对照品检测三份药品与三支对照品检测三份药品的方法进行比较，对两组检测结果进行比较，探讨本检测方法是否试用药品含量的检测。
1 材料与方法 1.1 材料（1）枸橼酸西地那非片（批准文号：H20143255c，广州白云山集团有限公司白云山制药总厂），枸橼酸西地那非对照品（CAS编号：171599-83-0，规格100mg/支，国家标准品网）。
（2）注射用环磷腺苷（批准文号：H20063307，辽宁格林生物药业集团有限公司），环磷腺苷对照品（CAS编号：60-92-4，规格50mg/支，国家标准品网）。
高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量-药学论文-基础医学论文-医学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——阿司匹林肠溶片为非甾体类抗炎药，临床可用于抗血栓，也可用于治疗不稳定性心绞痛，是《国家基本药物目录》列入的品种。
本文采用高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量，该方法简单，快速，重现性好，回收率高，可用于该制剂的质量控制。
1 仪器与试药1.1 仪器：大连依利特P230 型高效液相色谱仪；UV230+紫外可见检测器；手动进样器；超声仪（型号KQ5200E，功率200W，频率40KHz）；电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司，0.0001g）。
1.2 试药：阿司匹林对照品（中国食品药品检定研究院，批号：100113）；阿司匹林肠溶片（亚宝药业太原制药有限公司，批号：131210；石家庄康力药业有限公司，批号：121037；神威药业集团有限公司，批号：1306072），甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果2.1 色谱条件：色谱柱为Hypersil ODS2 柱（250mm4.6mm，5m）；流动相：甲醇∶0.5%乙酸溶液（37∶63）；流速：0.8mlmin-1；柱温：25∶；检测波长：267nm；理论板数按阿司匹林计不得少于3000。
2.2 溶液的制备：对照品溶液的制备：精密称取一定量阿司匹林对照品，置100ml 量瓶中，加1%醋酸甲醇溶解并定容制成100gml-1的对照品溶液。
供试品溶液的制备：取供试品（石家庄康力药业有限公司，批号：121037）约0.03g，精密称定，置100ml 量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液溶解并定容，过滤，取续滤液，作为供试品溶液。
阴性样品溶液的制备：按处方比例取辅料制成空白制剂，按供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。
2.3 专属性实验：在2.1色谱条件下，分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性样品溶液各10L，注入液相色谱仪，记录色谱图。
高效液相色谱法测定多西紫杉醇脂质体药物含量及包封率【摘要】目的建立测定多西紫杉醇脂质体药物含量及包封率的HPLC法。
方法采用Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：甲醇乙腈水(体积比35∶40∶25)；紫外检测波长：230 nm。
结果在本色谱条件下多西紫杉醇与辅料及溶剂峰分离良好，多西紫杉醇在1.0～50.0 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9996，n=7)，平均回收率为101.51％，RSD为1.96％。
结论该方法准确可靠、简单快速，可用于多西紫杉醇脂质体含量及包封率的测定。
【关键词】多西紫杉醇脂质体含量测定包封率高效液相色谱法Analysis of content and entrapment efficiency of docetaxel in docetaxel liposomes by HPLCWANG Xiao ling,LU Zhu fen,CHEN Yan zhong,HUANG Hongbin,LIU Tao1.Guangdong College of Pharmacy，Guangzhou,Guangdong510240 ,China;2.Oncology Hospital of Sun Yat senUniversity,Guangzhou,Guangdong 510275,ChinaAbstract:Objective To establish an HPLC method for the determination of content and entrapment efficiency of docetaxel in docetaxel liposomes．Methods The analysis was performed on a C18 column (250 mm × 4.6 mm，5 μm). The mobile phase consisted of methanol acetonitrile water (35∶40∶25),and the detection wavelength was 230 nm. Results The linear range for docetaxel was 1.0～50.0 μg/mL (r=0.9996，n=7). The average recovery was 101.51％and RSD was 1.96％. Conclusion This method is simple，accurate,sensitive for measurement of content and entrapment efficiency of docetaxel in the liposomes．Key words:docetaxel liposomes；entrapment efficiency；HPLC多西紫杉醇(docetaxel，商品名为：泰索帝taxotere)是近年开发的新一代紫杉烷类抗肿瘤药物，分子式为C43H53NO14·3H2O，分子量为861.9。
高效液相色谱法标准操作规程 目 的：建立高效液相色谱法标准操作规程，确保高效液相色谱法操作规范化。
适用范围：适用于高效液相色谱法的操作。
责 任 者：质量管理部经理、质量检验中心主任、质量检验员。
内 容：高效液相色谱法系采用髙压输液泵将规定的流动相泵人装有填充剂的色谱柱，对 供试品进行分离测定的色谱方法。
注入的供试品，由流动相带人色谱柱内，各组分在柱内被分离，并进人检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。
1.对仪器的一般要求和色谱条件髙效液相色谱仪由髙压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。
色谱柱内径一般为3.9〜4.6mm,填充剂粒径为3〜lOum 。
超高效液相色谱仪是适应小粒径（约2um)填充剂的耐超髙压、小进样量、低死体积、高灵敏度检测的高效液相色谱仪。
(1）色谱柱反相色谱柱：以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。
常见的载体有硅 胶、聚合物复合硅胶和聚合物等；常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。
正相色谱柱：用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。
常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。
氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作文件编码：SOP-QC-ZJ-6041-03题 目高效液相色谱法标准操作规程制定部门：质量检验中心 颁发部门：质量管理部 分发部门：质量管理部、质量检验中心制定人： 日期： 年 月 日审核人： 日期： 年 月 日批准人： 日期： 年 月 日生效日期： 年 月 日 变更历史：1.2003年3月制定；2.2005年7月执行《中国药典》2005年版第一次修订；3.2010年10月执行《中国药典》2010年版第二次修订；4.2015年12月执行《中国药典》2015年版第三次修订。
反相色谱。
离子交换色谱柱：用离子交换填充剂填充而成的色谱柱。
有阳离子交换色谱柱和阴离子交换色谱柱。
手性分离色谱柱：用手性填充剂填充而成的色谱柱。
各国药典色谱法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述色谱法是一种有效的分离和分析化学物质的方法。
在药学领域，药典中对药物的色谱法进行了详细的规定和说明。
不同国家的药典中对色谱法的要求和标准有所不同，这是由于各个国家在药物研发和生产方面的不同需求和特点所决定的。
本文将综合介绍各国药典中关于色谱法的规定和标准。
首先，我们将对各国药典进行整体概述，包括其出版机构、发布周期和权威性等方面的内容。
然后，我们将详细分析各国药典中对色谱法的要求，涵盖色谱技术、仪器设备要求、样品准备和柱填充剂等方面的内容。
另外，我们还将比较各国药典中对于色谱法方法验证、方法开发和方法转移的规定，探讨其异同点和实际应用。
本文的目的是为读者提供一个全面了解各国药典中色谱法的情况的视角，帮助读者更好地理解和运用色谱法进行药物分析。
同时，通过对各国药典的比较研究，我们也可以发现不同国家在药物分析方面的研究重点和发展趋势，为我国药物分析领域的发展提供借鉴和参考。
在接下来的章节中，我们将详细讨论各国药典中关于色谱法的规定和标准，并对其进行分析和总结。
通过对各国药典的比较研究，我们将为读者呈现一个全面、系统的各国药典色谱法的景象，希望能够为广大药学工作者提供有益的参考和指导。
1.2 文章结构文章结构部分的内容可以参考以下例子进行撰写：文章结构：本文主要分为引言、正文和结论三个部分。
引言部分概述了本文的主要内容和目的，介绍了各国药典色谱法的研究背景和重要性。
正文部分主要分为两个部分，第一部分介绍了各国药典的概念和作用，第二部分重点介绍了色谱法在药典中的应用和发展。
结论部分总结了各国药典色谱法的研究现状，展望了未来的发展方向。
引言部分的概述：引言部分将介绍各国药典色谱法的研究背景和重要性。
首先，药典是各个国家用来规范药品质量标准的重要参考资料，对保障人们的用药安全具有重要意义。
其次，色谱法作为一种常用的分析方法，在药典中被广泛应用。
其准确性、灵敏度和可靠性被广泛认可。
