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新疆奶牛子宫内膜炎大肠杆菌进化分群及耐药特性研究

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河南农业科学ꎬ２０１８ꎬ４７(７):１１６￣１２３ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｅｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓｄｏｉ:１０.１５９３３/ｊ.ｃｎｋｉ.１００４￣３２６８.２０１８.０７.０１９

收稿日期:２０１８－０１－１９基金项目:兵团中青年科技创新领军人才计划项目(２０１６ＢＣ００１)ꎻ国家十三五重点研发计划项目子课题(２０１６ＹＦＤ０５００９００)ꎻ新疆自治区研究生科研创新项目(ＸＪＧＲＩ２０１６０４０)ꎻ乌鲁木齐市科技局渝乌科技合作项目(Ｙ１６１２２０００１)作者简介:马　帅(１９９３－)ꎬ男ꎬ河南遂平人ꎬ在读硕士研究生ꎬ研究方向:病原分子生物学ꎮＥ－ｍａｉｌ:１７５６２６０７８９＠ｑｑ.ｃｏｍ∗通讯作者:孟庆玲(１９６９－)ꎬ女ꎬ江苏徐州人ꎬ教授ꎬ博士ꎬ主要从事畜禽病原分子生物学研究ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｘｊｍｑｌｑｊ＠ｓｉｎａ.ｃｏｍ

新疆奶牛子宫内膜炎大肠杆菌进化分群及耐药特性研究

马　帅１ꎬ乔　军１ꎬ孟庆玲１∗ꎬ伍晔晖１ꎬ王熙凤１ꎬ郭　晶１ꎬ蔡扩军２ꎬ王登峰３ꎬ才学鹏４(１.石河子大学动物科技学院ꎬ新疆石河子８３２００３ꎻ２.乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心ꎬ新疆乌鲁木齐８３００６３ꎻ３.新疆畜牧科学院兽医研究所ꎬ新疆乌鲁木齐８３００００ꎻ４.中国农业科学院兰州兽医研究所ꎬ甘肃兰州７３００４６)

摘要:为了探究新疆地区奶牛子宫内膜炎大肠杆菌进化分群及耐药特性ꎬ对新疆奶牛子宫内膜炎临床样品进行大肠杆菌的分离ꎬ采用ＰＣＲ技术对大肠杆菌分离株进行种系分群、耐药基因检测ꎬ测定分离株对抗菌药物的敏感性ꎬ并对产ＥＳＢＬｓ菌株携带质粒进行了分析ꎮ结果显示ꎬ从奶牛临床样品中成功分离到２１０株大肠杆菌ꎻ种群分析表明ꎬＢ１群(４８.１％)分布最多ꎬ其次分别是Ａ群(２８.６％)、Ｃ群(１２.９％)、Ｅ群(６.７％)、Ｄ群(３.８％)ꎮ２１０株分离株对１６种抗菌药物呈现出不同

程度的耐药性ꎬ其中对红霉素的耐药率最高ꎬ为９５.２％ꎬ其次是氨苄西林(８３.３％)、庆大霉素(７３.８％)、头孢氨苄(７１.９％)ꎬ而对诺氟沙星耐药率最低ꎬ为６.２％ꎬ然后是复方新诺明(６.７％)、

氯霉素(１０.０％)、多西环素(１０.５％)ꎮ所有的分离株对不同的抗菌药物耐药ꎬ其中多重耐药性主要集中在４~１０耐ꎬ且耐药表型与基因型基本一致ꎮ对产ＥＳＢＬｓ菌株携带质粒分析表明ꎬ同一质粒可以携带多种耐药基因ꎬ这些质粒可介导菌株的多重耐药ꎮ提示新疆地区奶牛子宫内膜炎大肠杆菌流行株已经对多种临床常用药物产生了较严重的耐药性ꎬ且分离株的耐药性与耐药质粒的转移密切相关ꎮ关键词:奶牛ꎻ子宫内膜炎ꎻ大肠杆菌ꎻ系统进化分群ꎻ耐药性ꎻ质粒中图分类号:Ｓ８５２.６１ 文献标志码:Ａ 文章编号:１００４－３２６８(２０１８)０７－０１１６－０８

ＰｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃＧｒｏｕｐｉｎｇａｎｄＤｒｕｇＲｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｆｒｏｍＸｉｎｊｉａｎｇＣｏｗｓｗｉｔｈＥｎｄｏｍｅｔｒｉｔｉｓ

ＭＡＳｈｕａｉ１ꎬＱＩＡＯＪｕｎ１ꎬＭＥＮＧＱｉｎｇｌｉｎｇ１∗ꎬＷＵＹｅｈｕｉ１ꎬＷＡＮＧＸｉｆｅｎｇ１ꎬＧＵＯＪｉｎｇ１ꎬＣＡＩＫｕｏｊｕｎ２ꎬＷＡＮＧＤｅｎｇｆｅｎｇ３ꎬＣＡＩＸｕｅｐｅｎｇ４

(１.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬＳｈｉｈｅｚｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＳｈｉｈｅｚｉ８３２００３ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＡｎｉｍａｌＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＤｉａｇｎｏｓｉｓＣｅｎｔｅｒｉｎＵｒｕｍｑｉꎬＵｒｕｍｑｉ８３００６３ꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＸｉｎｊｉａｎｇＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅꎬＵｒｕｍｑｉ８３００００ꎬＣｈｉｎａꎻ４.ＬａｎｚｈｏｕＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅꎬＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＬａｎｚｈｏｕ７３００４６ꎬＣｈｉｎａ)

Ａｂｓｔｒａｃｔ:ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｇｒｏｕｐｉｎｇａｎｄｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｆｒｏｍＸｉｎｊｉａｎｇｃｏｗｓｗｉｔｈｅｎｄｏｍｅｔｒｉｔｉｓꎬｔｈｅＥ.ｃｏｌｉｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｃｌｉｎｉｃａｌｓａｍｐｌｅｓꎬｔｈｅＰＣＲｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｇｒｏｕｐｉｎｇａｎｄｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｇｅｎｅｓｏｆＥ.ｃｏｌｉｓｔｒａｉｎｓꎬａｎｄｔｈｅｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｔｏａｎｔｉｍｉ￣ｃｒｏｂｉａｌａｇｅｎｔｓａｎｄｔｈｅＥＳＢＬｓｐｌａｓｍｉｄｓｗｅｒｅｔｅｓｔｅｄａｎｄａｎａｌｙｚｅｄ.Ａｔｏｔａｌｏｆ２１０Ｅ.ｃｏｌｉｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｉｓｏｌａ￣ｔｅｄｆｒｏｍｄａｉｒｙｃｏｗｓａｍｐｌｅｓ.ＴｈｅｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｇｒｏｕｐｉｎｇａｎａｌｙｓｅｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｓｏｆｇｒｏｕｐＢ１ꎬＡꎬＣꎬＥꎬＤｗｅｒｅ４８.１％ꎬ２８.６％ꎬ１２.９％ꎬ６.７％ａｎｄ３.８％ꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.Ｔｈｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｎａｌｙｓｅｓｓｈｏｗｅｄ

第７期马　帅等:新疆奶牛子宫内膜炎大肠杆菌进化分群及耐药特性研究ｔｈａｔ２１０Ｅ.ｃｏｌｉｓｔｒａｉｎｓｐｏｓｓｅｓｓｅｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｅｇｒｅｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏ１６ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｓꎬｏｆｗｈｉｃｈｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｒａｔｅｏｆｅｒｙｔｈｒｏｍｙｃｉｎｗａｓ９５.２％ꎬｆｏｌｌｏｗｅｄｂｙａｍｐｉｃｉｌｌｉｎ８３.３％ꎬｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ７３.８％ꎬｃｅｐｈａｌｅｘｉｎ７１.９％ꎬｔｈｅｌｏｗｅｓｔｒａｔｅｗａｓｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ６.２％ꎬｆｏｌｌｏｗｅｄｂｙｃｏｔｒｉｍｏｘａｚｏｌｅ６.７％ꎬｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ１０.０％ꎬａｎｄｄｏｘｙ￣ｃｙｃｌｉｎｅ１０.５％.Ｔｈｅｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｒａｎｇｅｗａｓｍｏｓｔｌｙ４—１０ｋｉｎｄｓꎬａｎｄｔｈｅｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｐｈｅｎｏ￣ｔｙｐｅｗａｓｂａｓｉｃａｌｌｙｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔｗｉｔｈｔｈｅｇｅｎｏｔｙｐｅ.ＴｈｅＥＳＢＬｓｐｌａｓｍｉｄａｎａｌｙｓｅｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔａｐｌａｓｍｉｄｃｏｕｌｄｃａｒｒｙｍｕｌｔｉｐｌｅｄｒｕｇ￣ｒｅｓｉｓｔａｎｔｇｅｎｅｓꎬｗｈｉｃｈｃｏｕｌｄｍｅｄｉａｔｅｔｈｅｍｕｌｔｉ￣ｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆｓｔｒａｉｎｓ.ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｉｇｎｉｆｉｅｄｔｈａｔｔｈｅｅｐｉｄｅｍｉｃｓｔｒａｉｎｓｏｆＥ.ｃｏｌｉｉｎＸｉｎｊｉａｎｇｃｏｗｅｎｄｏｍｅｔｒｉｔｉｓｈａｄｄｅｖｅｌｏｐｅｄｓｅｖｅｒｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｇａｉｎｓｔｄｒｕｇｓｕｓｅｄｉｎｃｌｉｎｉｃａｌｐｒａｃｔｉｃｅａｎｄｔｈｅｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆｔｈｅｉｓｏｌａｔｅｓｗａｓｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｔｒａｎｓｆｅｒｏｆｄｒｕｇ￣ｒｅｓｉｓｔａｎｔｐｌａｓｍｉｄ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＣｏｗꎻＥｎｄｏｍｅｔｒｉｔｉｓꎻＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉꎻＰｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｇｒｏｕｐｉｎｇꎻＲｅｓｉｓｔａｎｃｅꎻＰｌａｓｍｉｄ

奶牛子宫内膜炎是奶牛饲养过程中常见的产科病ꎬ主要由于奶牛产后子宫内膜受损后受外来微生物的入侵ꎬ致使奶牛子宫黏膜发生炎症ꎬ可降低奶牛繁殖率ꎬ影响奶牛生产性能[１￣２]ꎮ该病在奶牛场普遍存在ꎬ因地理位置和饲养模式的不同ꎬ不同奶牛场子宫内膜炎的发病率也存在较大的差异ꎬ我国奶牛子宫内膜炎的发病率为２０％~５０％[３]ꎮ病原学调查发现ꎬ大肠杆菌是引起奶牛子宫疾病最常见的病原菌之一[４]ꎮＳｈｅｌｄｏｎ等[５]认为ꎬ从产后奶牛子宫中分离的大肠杆菌主要集中在Ａ群和Ｂ１群ꎬ而Ａ群和Ｂ１群的大肠杆菌是与宿主共生的大肠杆菌ꎮ目前ꎬ防治奶牛子宫内膜炎的主要方法是大量使用抗菌药物ꎮ然而ꎬ随着抗菌药物的大量使用ꎬ大肠杆菌极易产生耐药性ꎬ甚至成为人和动物体内耐药决定因子的“贮藏库”ꎮ同时ꎬ耐药性大肠杆菌可以通过可移动元件中的转座子、质粒等将耐药基因进行水平转移ꎬ导致耐药性广泛扩散[６]ꎮ奶牛子宫内膜炎严重制约着奶牛业的发展ꎬ新疆作为我国重要的奶牛养殖基地之一ꎬ受到了严重威胁ꎮ为了探究新疆地区奶牛子宫内膜炎大肠杆菌分离株的系统分群和耐药特性ꎬ本研究对其进行系统进化分群、耐药特性及携带质粒分析ꎬ以了解新疆地区奶牛子宫内膜炎大肠杆菌的耐药水平及多重耐药质粒的传播ꎬ为临床合理用药提供科学依据ꎮ１　材料和方法１.１　临床样品采集２０１６年９月至２０１７年８月从新疆石河子、奎屯、塔城、乌鲁木齐等地区规模化奶牛场采集患有临床型子宫内膜炎奶牛子宫分泌物样品ꎮ样品采集时用干净温水清洗奶牛外阴后用７５％乙醇棉球擦拭干净ꎬ使用直肠检查法触压子宫壁ꎬ弃除最初流出阴道内的子宫黏液ꎬ收集中间或后面流出的黏液于灭菌离心管中ꎬ放入冰盒带回实验室进行细菌分离培养ꎮ１.２　试剂与菌株１６种药敏纸片和头孢他啶/克拉维酸(ＣＺＶꎬ３０/１０μｇ)、头孢噻肟/克拉维酸(ＣＸＶꎬ３０/１０μｇ)均购于杭州微生物试剂有限公司ꎻ伊红美蓝、麦康凯、ＭＨ药敏试验培养基和ＬＢ营养琼脂培养基购于北

京奥博星生物技术有限公司ꎻＤＮＡＭａｒｋｅｒ、ＰＣＲ反应试剂、ｐＭＤ１９－Ｔ购于宝生物工程(大连)有限公司ꎻ细菌基因组ＤＮＡ提取试剂盒购于天根生化科技(北京)有限公司ꎻ受体菌株Ｅ.ｃｏｌｉＤＨ５α由石河子

大学动物科技学院寄生虫实验室提供ꎻ大肠杆菌质控菌ＡＴＣＣ２５９２２购自中国兽医药品监察所ꎮ１.３　大肠杆菌分离鉴定

用灭菌接种环沾取少量样品接种到液体ＬＢ中ꎬ在水平摇床培养８ｈꎻ然后在伊红美蓝培养基上划线培养ꎬ置于３７℃细菌培养箱１２~１６ｈꎻ挑取平板上呈现紫黑色且有金属光泽的单菌落ꎬ划线于麦康凯培养基上ꎬ置于３７℃细菌培养箱１２~１６ｈꎻ挑取平板上的单菌落ꎬ参照文献[７]中１６ＳｒＤＮＡ测序法进行扩增和测序比对ꎮ采用引物１６Ｓ－Ｆ:５′－ＧＣＧＧＡＣＧＧＧＴＧＡＧＴＡＡＴＧＴ－３′ꎻ１６Ｓ－Ｒ:５′－

ＴＣＡＴＣＣＴＣＴＣＡＧＡＣＣＡＧＣＴＡ－３′ꎬ引物由北京六合

华大基因科技股份有限公司合成ꎮＰＣＲ反应条件:９４℃预变性５ｍｉｎꎻ９４℃变性３０ｓꎬ５９℃退火３０ｓꎬ

７２℃延伸３０ｓꎬ３２个循环ꎻ７２℃延伸１０ｍｉｎꎮ１.４　大肠杆菌系统进化分群

按照ＴＩＡＮＧＥＮ公司基因组ＤＮＡ提取试剂盒的操作步骤提取分离菌株的基因组ＤＮＡꎮ设计并合成的相关引物(表１)与四重ＰＣＲ反应条件及判定标准均参照文献[８]:首先使用四重ＰＣＲ方法检测ｃｈｕＡ、ｙｊａＡ、ＴｓｐＥ４.Ｃ２和ａｒｐＡ４种基因的存在和缺

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奶牛子宫内膜炎的防治

奶牛子宫内膜炎的防治

奶牛子宫内膜炎的防治作者：宋俊杰来源：《当代畜禽养殖业》 2017年第5期宋俊杰新疆石河子总场兽医站 832011奶牛子宫内膜炎是兽医产科的一种常见病，多因分娩、流产、胎衣不下、子宫脱出或难产助产过程中子宫内膜过度损伤及感染引起，是导致奶牛繁殖障碍的主要原因。

临床表现为奶牛的子宫内和阴道内存在并不断排出炎性分泌物，子宫颈和子宫变硬、变粗，屡配不孕。

在产后10天左右，90%以上的奶牛发生子宫感染，产后30天左右感染率降低到40%，60天以后还有20%左右。

子宫内膜炎对奶牛机体的影响主要表现在产后初次发情时间延迟和配种次数增加方面。

1 发病原因病原微生物感染引起子宫内膜炎；助产时消毒不仔细、助产方法不当导致产道受伤；胎衣不下，滞留子宫；配种方法不当使阴道及子宫黏膜损伤，或操作不当引起子宫污染。

根据临床症状该病可分为急性子宫内膜炎、脓性子宫内膜炎、卡他性子宫内膜炎和隐性子宫内膜炎4种类型。

（1）急性子宫内膜炎。

黏液从红褐色转为灰褐色、灰白色黏液，子宫颈充血、肿胀，子宫颈口稍开张，子宫角粗大、壁厚。

此类子宫内膜炎严重时需要全身性消炎，然后向子宫投消炎药，2~3个疗程可以治愈。

（2）脓性子宫内膜炎。

从阴道内排出大量脓性分泌物，尤以卧地后排出量更多，脓性分泌物黏稠、呈灰白色或黄褐色，恶臭。

直肠检查子宫角肥大，子宫壁薄厚不匀，收缩反应极其微弱。

（3）卡他性子宫内膜炎。

奶牛的性周期、发情和排卵均正常，就是屡配不孕，或胚胎早期死亡，阴道内积有少量浑浊黏液，发情时从子宫流出混有絮状的黏液。

（4）隐性子宫内膜炎。

奶牛不表现临床症状，发情正常但屡配不孕。

发情时子宫排出的分泌物较多，有时分泌物不清亮透明，略微浑浊。

2 治疗方案（1）前提条件。

对产后早期子宫内膜炎而且体温正常的牛用10%NaCl 500mL、土霉素原粉、催产素60单位混合子宫注射,每日按摩子宫,或驱赶运动10分钟,重复用药3～5次,每次间隔2天。

当脓汁量少时,可直肠检查感觉子宫体积变小时用0.1%KMnO4500mL子宫注射,隔2天处理1次,每日2～3次。

奶牛乳源大肠杆菌耐药性、毒素基因鉴定及PFGE分型研究

奶牛乳源大肠杆菌耐药性、毒素基因鉴定及PFGE分型研究

奶牛乳源大肠杆菌耐药性、毒素基因鉴定及PFGE分型研究王晓;王新;郝丹;唐晓双;周传丽;王雅春;张胜利;张沅;俞英【期刊名称】《畜牧兽医学报》【年(卷),期】2014(045)003【摘要】通过采集中国北方地区某荷斯坦牛场生产群牛及乳房炎牛197份样品(195份奶样及2份洗布水样),分离出28株大肠杆菌菌株,并进行细菌药敏试验、毒力基因检测及PFGE分型,为牛场防治大肠杆菌型乳房炎提供数据支持.检测28株大肠杆菌对35种抗生素的敏感性发现,兽用临床抗生素庆大霉素和大观霉素应作为该奶牛场大肠杆菌型乳房炎的主要治疗药物.但该牛场出现了对非兽用广谱抗生素麦迪霉素的耐受性菌株,提示牛场在治疗奶牛大肠杆菌型乳房炎时应该注意用药问题.同时,洗布水样分离出的大肠杆菌的多重耐药性较强,也应引起重视,以便及时切断病菌传播途径.基于本研究在28株大肠杆菌中Ecs3703毒力基因的检出率为100％,证实所分离的大肠杆菌为肠出血性大肠杆菌(EHEC)而非肠毒素大肠杆菌(ETEC).细菌毒力基因Irp2和CNF2的检出则暗示携带这两类毒力基因的大肠杆菌极可能为奶牛乳房炎致病菌.【总页数】8页(P463-470)【作者】王晓;王新;郝丹;唐晓双;周传丽;王雅春;张胜利;张沅;俞英【作者单位】中国农业大学动物科技学院,北京100193;西北农林科技大学食品学院,杨凌712100;西北农林科技大学食品学院,杨凌712100;西北农林科技大学食品学院,杨凌712100;中国农业大学动物科技学院,北京100193;中国农业大学动物科技学院,北京100193;中国农业大学动物科技学院,北京100193;中国农业大学动物科技学院,北京100193;中国农业大学动物科技学院,北京100193【正文语种】中文【中图分类】S852.612【相关文献】1.乳房炎奶牛金黄色葡萄球菌毒素基因的检测及PFGE分型研究 [J], 王新;俞英;韦艺媛;张静;周婷;梁珍娟;杨保伟;席美丽;夏效东;孟江洪2.生产群奶牛金黄色葡萄球菌毒素基因检测及PFGE分型研究 [J], 王晓;王新;王雅春;张胜利;张沅;刘超;郝丹;唐晓双;卢振峰3.腹泻犊牛大肠杆菌血清型抗菌药物耐药性耐药基因鉴定及脉冲场凝胶电泳分型[J], 张陆;蒋月;盛鹏飞;张秀英4.猪源耐黏菌素大肠杆菌PFGE分型及耐药性研究 [J], 吴宁鹏;吕小月;于辉;周娟5.新疆牛源产志贺毒素大肠杆菌耐药性及其ESBLs基因鉴定 [J], 佟盼盼;马凯琪;刘争辉;谢金鑫;苏红;王栋;孙雪;高姣姣;苏战强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

畜炎宁治疗奶牛子宫内膜炎疗效试验

畜炎宁治疗奶牛子宫内膜炎疗效试验

夏长军宫大庆倪宏波黑龙江八一农垦大学动物科技学院;赫明雷高敬华邢桂珍廖建维浙江海正药业股份有限公司奶牛子宫内膜炎是奶牛产后主要由于细菌感染而引起的常见产科慢性、常发性疾病，给奶牛养殖业造成很大的经济损失。

采集患子宫内膜炎奶牛产后阴道分泌物进行细菌分离鉴定和药敏试验，了解子宫内膜炎病例中病原菌的种类及耐药情况。

在临床试验中，选用海正畜炎宁与野菊花、金银花、蒲公英等为主要成分的中草药进行对比疗效试验，通过治疗前后子宫及阴道恢复情况来确定治疗效果。

试验结果证实:该牛场引起子宫内膜炎的细菌主要是以大肠杆菌、绿脓杆菌、蜡样芽孢菌、链球菌和枯草芽孢杆菌为主，单一感染所占比例为24.4%，混合感染所占比例为75.6%;药敏试验结果表明海正畜炎宁最为敏感，临床试验也证实：肌肉注射畜炎宁组有效率最高，达到78.75%;子宫灌注畜炎宁组达到75%;而对照组子宫灌注组仅为50%，因此，在治疗牛子宫内膜炎时，海正畜炎宁可作为治疗药物的首选。

子宫内膜炎是导致奶牛不孕症的生殖系统疾病之一[1]。

该病主要由分娩或产后子宫感染病原微生物引起，影响奶牛繁殖甚至能造成不孕，进而影响奶牛泌乳量，增加饲养成本和淘汰率，给养牛业造成巨大的经济损失。

近几年发病率呈上升趋势，给奶牛养殖业的发展带来严重影响。

本病是引起奶牛不孕的主要因素，约占奶牛不孕病例的60%~92%[2]。

病原性细菌在奶牛子宫内膜炎的发生中起着最重要的作用。

从子宫内膜炎患牛子宫内分离到的细菌主要有葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌等[3-4]，也有报道见棒状杆菌、布氏杆菌、化脓性棒状杆菌等引起的感染[5]。

临床上多使用抗微生物药物对其进行治疗，在药物选择压力作用下，病原菌中的耐药菌株不断增多，不仅影响了畜牧业的良性发展，也给人类健康带来了严重威胁。

因此在对牛场引起子宫内膜炎的病原进行分离鉴定的基础上，进行药物敏感性分析，并进行有选择性和针对性的治疗，才能取得良好的治疗效果。

一、材料与方法(一)材料1. 试验药物畜炎宁;主要成分：克拉维酸钾和阿莫西林;批号：110401 ;海正药业股份有限公司生产。

奶牛子宫内膜炎临床症状及综合防治

奶牛子宫内膜炎临床症状及综合防治

Veterinary clinical science | 兽医临床科学48 ·2022.061.3 产道损伤奶牛在分娩过程中，由于胎儿过大或助产不当，就会造成阴门受伤，此时奶牛排泄的粪便、尿液及外面污水等就会趁机进入产道，对产道和子宫产生污染，病原微生物侵入感染子宫出现炎症。

1.4 配种或人工授精奶牛在配种或者人工授精过程中，如果使用器具或人员手臂消毒不严格，外界病菌就会携带进入奶牛生殖道内，导致病源微生物的侵入感染。

1.5 饲养管理如果奶牛圈舍活动场所较小，或冬季外界温度过低，都会影响怀孕奶牛的活动量，长期缺乏锻炼的奶牛，在分娩过程中容易出现难产而发生子宫内膜炎。

同时活动量少，奶牛膘情还会过于肥胖，易在奶牛产后发生子宫内膜炎。

如果饲养奶牛的圈舍卫生条件较差，地面蓄积粪便或污水过多，就会给病菌繁殖提供场所，奶牛分娩时这些病菌容易趁机感染生殖道而发生内膜炎[2]。

2 临床症状2.1 急性子宫内膜炎多数发生于产仔后1周内，病牛精神萎靡、采食量下降、体温升高、泌乳量减少。

病情严重者代谢紊乱、精神状态极差、出现败血症，多数继发严重的乳房炎。

病牛尾根、阴门沾有恶臭的阴道分泌物。

直肠检查可发现子宫内充满液体，呈松弛状态，个别病例子宫内有大量气体，致使子宫角充满液体、气体。

患急性子宫内膜炎的奶牛一般会出现前胃迟缓、食欲降低而继发真胃变位、奶牛酮病，有的病牛继发成重度乳房炎而明显降低母乳量。

2.2 慢性子宫内膜炎奶牛采食量和精神状况都比较正常，奶牛发情周期也正常，但当病牛发情时阴道有絮状黏液排出，影响正常配种。

并且子宫增大、子宫壁变厚而抑制胚胎着床，这样虽然发情周期正常，但常配不孕，且胚胎早期死亡率很高而极易发生流产现象[3]。

3 诊断治疗3.1 疾病诊断在生产中常采用直肠检查法来诊断子宫内膜炎，但要注意本病与子宫炎、化脓性子宫炎的鉴别诊断，临床症状相似，易发生混淆，要确诊应经过实验室检测。

3.2 治疗方法首先，根据化验室检测结果，针对不同病菌使用相应的高敏抗生素去治疗，不仅治愈率较高且效果理想，而且在临床方面也是常见的实用治疗方案。