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大肠菌群最可能数(MPN)检索表1

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大肠菌群最可能数（MPN）检索表

阳性管数 MPN 95%可信限 阳性管数 MPN 95%可信限

0.1 0.01 0.001 上限 下限 0.1 0.01 0.001 上限 下限

0 0 0 <3.0 —— 9.5 2 2 0 21 4.5 42

0 0 1 3.0 0.15 9.6 2 2 1 28 8.7 94

0 1 0 3.0 0.15 11 2 2 2 35 8.7 94

0 1 1 6.1 1.2 18 2 3 0 29 8.7 94

0 2 0 6.2 1.2 18 2 3 1 36 8.7 94

0 3 0 9.4 3.6 38 3 0 0 23 4.6 94

1 0 0 3.6 0.17 18 3 0 1 38 8.7 110

1 0 1 7.2 1.3 18 3 0 2 64 17 180

1 0 2 11 3.6 38 3 1 0 43 9 180

1 1 0 7.4 1.3 20 3 1 1 75 17 200

1 1 1 11 3.6 38 3 1 2 120 37 420

1 2 0 11 3.6 42 3 1 3 160 40 420

1 2 1 15 4.5 42 3 2 0 93 18 420

1 3 0 16 4.5 42 3 2 1 150 37 420

2 0 0 9.2 1.4 38 3 2 2 210 40 430

2 0 1 14 3.6 42 3 2 3 290 90 1000

2 0 2 20 4.5 42 3 3 0 240 42 1000

2 1 0 15 3.7 42 3 3 1 460 90 2000

2 1 1 20 4.5 42 3 3 2 1100 180 4100

2 1 2 27 8.7 94 3 3 3 >1100 420 ——

注1：本表采用3个稀释度【0.1g(mL)、0.01g(mL)和0.001g(mL)]，每个稀释度接种3管。

注2：表内所列检样量如改用1g(mL)、0.1g(mL)和0.01g(mL)时，表内数字应相应降低10倍；如改用0.01g(mL)、0.001g(mL)0.0001g(mL)时，则表内数字应相应提高10倍，其余类推。表内数字应相应提高10倍，其余类推。 大肠菌群最可能数（MPN）检索表

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mpn法测大肠菌群实验报告

mpn法测大肠菌群实验报告

mpn法测大肠菌群实验报告

MPN 法测大肠菌群实验报告

一、实验目的

大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一。本次实验旨在采用

MPN 法（最可能数法）准确测定样品中的大肠菌群数量，以评估样品的卫生状况，并为相关产品的质量控制提供科学依据。

二、实验原理

MPN 法是基于统计学原理，利用一定数量的样品在特定条件下培养后，根据阳性管数来推算样品中大肠菌群最可能数的一种方法。大肠菌群在特定的培养基中生长并发酵乳糖产酸产气，通过观察培养基的变化来判断是否存在大肠菌群。

三、实验材料与设备

（一）实验材料

1、 待检样品：＿____

2、 月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤培养基

3、 煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤培养基

（二）实验设备

1、 恒温培养箱：能够保持温度在 36℃±1℃。 2、 无菌移液管：1mL、10mL 规格。

3、 无菌培养皿

4、 超净工作台

四、实验步骤

（一）样品处理

1、 固体样品：称取 25g 样品，加入 225mL 无菌生理盐水，充分均质。

2、 液体样品：用无菌移液管吸取 25mL 样品，加入 225mL 无菌生理盐水，混匀。

（二）初发酵试验

1、 用 10mL 无菌移液管吸取 10mL 样品匀液，注入 3 支装有 10mL

LST 肉汤培养基的试管中，另用 1mL 无菌移液管吸取 1mL 样品匀液，注入 3 支装有 10mL LST 肉汤培养基的试管中，再用 1mL 无菌移液管吸取 1:10 的样品匀液 1mL，注入 3 支装有 10mL LST 肉汤培养基的试管中。

2、 将接种后的 LST 肉汤培养基放入 36℃±1℃恒温培养箱中培养

24h±2h，观察产气情况。

（三）复发酵试验

1、 对初发酵试验中所有产气的 LST 肉汤管进行转种。用接种环从产气的 LST 肉汤管中分别取培养物一环，移种于 BGLB 肉汤管中。 2、 将 BGLB 肉汤管放入 36℃±1℃恒温培养箱中培养 48h±2h，观察产气情况。

mpn法测大肠菌群实验报告 2

mpn法测大肠菌群实验报告 2

mpn法测大肠菌群实验报告

MPN 法测大肠菌群实验报告

一、实验目的

大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一。本实验旨在通过

MPN 法（Most Probable Number，最大可能数法）测定样品中的大肠菌群数量，以评估样品的卫生状况。

二、实验原理

MPN 法是基于统计学原理，通过对不同稀释度的样品进行培养和观察，根据阳性管数查 MPN 检索表，得出样品中大肠菌群的最可能数。大肠菌群在特定的培养基和培养条件下会产生特征性的生化反应，从而判断其存在与否。

三、实验材料与设备

1、 样品：＿____（注明样品的来源和种类）

2、 培养基

月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤

煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤

3、 试剂

无菌生理盐水 4、 仪器设备

恒温培养箱

无菌移液管（1mL、10mL）

无菌试管

超净工作台

四、实验步骤

1、 样品制备

称取或吸取一定量的样品，放入装有适量无菌生理盐水的均质袋中，充分均质，制成 1:10 的样品匀液。

用无菌生理盐水依次进行 10 倍系列稀释，制备成不同稀释度的样品匀液。

2、 接种

选择 3 个连续的适宜稀释度，每个稀释度接种 3 管 LST 肉汤。

用无菌移液管吸取 1mL 稀释后的样品匀液，加入到 LST 肉汤管中。

3、 培养

将接种后的 LST 肉汤管置于 36±1℃恒温培养箱中培养 48±2h。

4、 观察与记录 培养结束后，观察 LST 肉汤管的产气情况。如有产气，表明可能存在大肠菌群。

5、 复发酵试验

从产气的 LST 肉汤管中取培养物，转接至 BGLB 肉汤管中。

将 BGLB 肉汤管置于 36±1℃恒温培养箱中培养 48±2h。

6、 结果判定

培养结束后，观察 BGLB 肉汤管的产气情况。若产气，则确认为大肠菌群阳性。

7、 查 MPN 检索表

根据不同稀释度的阳性管数，查阅 MPN 检索表，得出样品中大肠菌群的 MPN 值。

10食品中大肠菌群计数测定的标准操作规程

10食品中大肠菌群计数测定的标准操作规程

1目的

规范食品中大肠菌群计数测定的标准操作规程。

2范围

本标准规定了食品中大肠菌群（Coliforms）计数的方法。

本标准适用于食品中大肠菌群的计数。

3术语和定义

3.1 大肠菌群coliforms

在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。

3.2 最可能数most probable number，MPN

基于泊松分布的一种间接计数方法。

4责任

质量部组织制订、化验室负责实施。

5内容

5.1 设备和材料

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：

5.1.1 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃。

5.1.2 冰箱：2 ℃～5 ℃。

5.1.3 恒温水浴箱：46 ℃±1 ℃。

5.1.4 天平：感量0.1 g。

5.1.5 均质器。

5.1.6 振荡器。

5.1.7 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。

5.1.8 无菌锥形瓶：容量500 mL。 xxxxx公司

食品中大肠菌群计数测定的标准操作规程 编号

起草人 日期

审核人 日期

批准人 日期

实施日期

第 版 文件密级 5.1.9 无菌培养皿：直径90 mm。

5.1.10 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。

5.1.11 菌落计数器。

5.2培养基和试剂

5.2.1 月桂基硫酸盐胰蛋白胨（Lauryl Sulfate Tryptose，LST）肉汤：见附录A 中A.1。

5.2.2 煌绿乳糖胆盐（Brilliant Green Lactose Bile，BGLB）肉汤：见附录A 中A.2。

5.2.3 结晶紫中性红胆盐琼脂（Violet Red Bile Agar，VRBA）：见附录A 中A.3。

5.2.4 磷酸盐缓冲液：见附录A 中A.4。

5.2.5 无菌生理盐水：见附录A 中A.5。

5.2.6 无菌1 mol/L NaOH：见附录A 中A.6。

大肠菌群

大肠菌群

题目：生菜中大肠菌群MPN的测定

摘要：本实验采用GB/T4789.3-2010的检测方法测定生菜中的大肠菌群MPN。将不同倍数的检样稀释液接种到LST肉汤发酵管中，经一定温度、时间发酵，若均不产气者则可报告为阴性；如有产气者，则需要接种至BGLB肉汤中做实证实验，依据产气情况，查取MPN检索表，报告出每ml（g）大肠菌群的最近似数。本次实验测得每克生菜中大肠菌群为>1100MPN。因此，生菜在没有洗净前的大肠菌群是很多的，人们吃用前一定要洗净或煮熟。

关键词： 大肠菌群 MPN检验法 生菜

前 言

食品的被污染程度可以用大肠菌群数来表示。大肠菌群系指一群在36度条件下培养48h能发酵乳糖，产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌[1]。它与肠道致病菌的来源相同，并且在相同的来源中普遍存在和数量甚多，是适合做食品是否已被肠道致病菌污染及其污染的程度的指标菌的。由于大肠菌群数量很多，适宜用一个近似值来代替菌群的确切数量。大肠菌群MPN是基于泊松分布的一种间接计数方法，指在每克食品检样中所含的大肠菌群的最近似或最可能数。

1 材料与方法

1.1实验材料与仪器： 10g 生菜，无菌水，灭菌三角瓶若干，灭菌试管若干，玻珠若干，移液枪，灭菌吸管，酒精灯，试管架，恒温培养箱，天平，PH试纸，灭菌锅

1.2培养基和试剂：

1.2.1无菌生理盐水：称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中。每组配制200mL，分装90mL于1瓶带有玻璃珠的250mL三角瓶和9mL于18支试管内，加硅胶塞，包扎，做好本组标记，121度高压灭菌15分钟。

1.2.2 LST肉汤：称取35.6g，加蒸馏水1L，加热煮沸至完全溶解，分装带小导管的试管，每支9mL，每组20支，包装，标记，121度灭菌15分钟。 1.2.3 BGLB肉汤：称取40g，加蒸馏水1L，加热煮沸至完全溶解，分装带小导管的试管，每支9mL，每组14支，包装，标记，121度灭菌15分钟。