荧光偏振法测定红细胞膜脂流动性
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膜的流动性(membrane fluidity)
膜的流动性是指构成膜的脂和蛋⽩质分⼦的运动性。
膜的流动性不仅是膜的基本特性之⼀,也是细胞进⾏⽣命活动的必要条件。
■流动性的表现形式
●膜脂的运动⽅式
脂的流动是造成膜流动性的主要因素,概括起来,膜脂的运动⽅式主要有四种。
①侧向扩散(lateral diffusion);
②旋转运动(rotation);
③伸缩运动(flex);
④翻转扩散(transverse diffusion),⼜称为翻转(flip-flop)。
●膜蛋⽩的运动由于膜蛋⽩的相对分⼦质量较⼤,同时受到细胞⾻架的影响,它不可能象膜脂那样运动。
主要有以下⼏种运动形式(图3-37):
①随机移动有些蛋⽩质能够在整个膜上随机移动。
移动的速率⽐⽤⼈⼯脂双层测得的要低。
②定向移动有些蛋⽩⽐较特别,在膜中作定向移动。
例如,有些膜蛋⽩在膜上可以从细胞的头部移向尾部。
③局部扩散有些蛋⽩虽然能够在膜上⾃由扩散,但只能在局部范围内扩散。
膜的流动性的⽣理意义何在?
■膜流动性的研究⽅法
●⼈、⿏细胞融合实验
1970年,L. David Frye 和Michael Edidin 进⾏了⼈、⿏细胞融合实验,令⼈信服地证明膜蛋⽩的流动。
荧光标记法是一种常用的流动性测试方法,通常用于测量液体或固体的流动性。
这种方法的基本原理是将一种荧光标记剂添加到样品中,并使用荧光显微镜观察标记剂的流动情况。
根据标记剂的流动情况,可以推断出样品的流动性。
荧光标记法流动性测试常用于化学、制药、食品和化妆品等行业,用于测量液体或固体的流动性、粘度、黏度等性质。
这种方法可以提供准确、可重复的流动性测量数据,并且可以快速进行。
荧光标记法流动性测试的主要优点是可以在实验室条件下进行,并且可以提供准确、可重复的流动性测量数据。
此外,这种方法还可以快速进行,适用于大批量样品的测试。
但是,荧光标记法流动性测试也有一些局限性,例如标记剂可能会对样品的性质造成影响,并且荧光显微镜的使用要求较高。
在荧光标记法流动性测试中,常用的荧光标记剂包括荧光素、荧光增白剂和荧光染料等。
这些标记剂可以在液体或固体中溶解或分散,并且在受到紫外线照射后发出荧光。
荧光标记剂的流动情况可以通过荧光显微镜观察,并根据标记剂的流动情况推断出样品的流动性。
在荧光标记法流动性测试中,通常需要进行以下步骤:1.准备标记剂和样品:将荧光标记剂添加到样品中,使其完全溶解或分散。
2.设置荧光显微镜:调节荧光显微镜的光路,使其适合测量样品的流动性。
3.观察标记剂的流动情况:在荧光显微镜下观察标记剂的流动情况,根据标记剂的流动情况推断出样品的流动性。
4.记录流动性数据:记录样品的流动性数据,例如流动时间、流动速率等。
荧光标记法流动性测试是一种常用的流动性测试方法,可以提供准确、可重复的流动性测量数据,并且适用于大批量样品的测试。
但是,这种方法也有一些局限性,例如标记剂可能会对样品的性质造成影响,并且荧光显微镜的使用要求较高。
此外,荧光标记法流动性测试通常只能用于实验室条件下进行,无法在实际应用中直接使用。
除了荧光标记法流动性测试,还有许多其他流动性测试方法可供选择,例如粘度计测试、滴定法测试、压缩率测试等。
细胞膜流动性(f1uidity)PDA荧光检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途细胞膜流动性(f1uidity)PDA荧光检测试剂是一种旨在通过苯并在癸酸荧光染料,选择性地与细胞膜整合,并与之产生空间交互作用,形成激基缔合物,其荧光散发波长的转移,即荧光比值的增强或减弱,来分析膜流动性的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种人体或动物贴壁或悬浮细胞膜流动性的动力学检测。
产品严格无菌,即到即用,活体检测,操作简易,性能稳定。
技术背景细胞膜和细胞质微管以及微丝的动力学特征和微泡和囊泡内脂质的流动动力学,即流变学(rheo1ogica1)细胞功能,受到细胞膜流动性(f1uidity)或粘性(Visssity)调节,包括细胞膜酶系的活化,微管和微丝的特定装配或流动,化学引诱物受体亲和力的强化,膜结构和功能的作用等。
一旦调节失衡,会导致病理演变或膜性变异。
苯并花癸酸(PyrenedeCanOiCaCid:PDA)为多环芳香IS(po1ycyc1icaromatichydrocarbon)化合物,一种亲脂性苯并花荧光探针染料,用于膜生物物理学研究:第一,具有亲脂性;第二,与细胞膜脂质具有类似性(ana1og),可以与细胞膜整合;第三,进入膜结构空间后,与之产生交互作用,形成激基缔合物(eximer),其荧光散发波长山372nm转移到470nm,通过缔合物和单体的荧光比值(ratio),分析膜流动性强弱,包括动力学,影响因子等。
产品内容染色液(Reagen1A)微升稀糅液(Reagen1B)毫升清理液(Reagen1C)毫升强化液(Reagen1D)微升产品说明书1份保存方式保存清理液(ReagentC)在4℃冰箱里,其余的保存在一20℃冰箱里;染色液(Reagen1A)避免光照; 有效保证6月用户自备胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(GMS12024):用于细胞脱离操作完全细胞培养液(GMS12052):用于细胞脱落操作1.5毫升离心管:用于样品操作的容器微型台式离心机:用于样品操作培养箱:用于染色孵育(共聚焦)荧光显微镜:用于荧光定性分析比色皿或黑色96孔板:用于荧光定量分析的容器荧光分光光度仪或荧光酶标仪:用于荧光定量分析细胞流式仪:用于荧光分析实验步骤实验开始前,将一20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(ReagentA)置.入冰槽里融化,稀释液(Reagentin和强化液(ReagentD)放进25℃恒温水槽里预热。
川芎嗪对小鼠红细胞膜的影响
张学贤;齐娟娟;韩豫峰;沈子威;赵南明
【期刊名称】《中国药科大学学报》
【年(卷),期】1994(25)3
【摘要】用荧光偏振、圆二色谱和准弹性光散射等实验技术研究了中药有效成分川芎嗪对小鼠红细胞膜的作用。
川芎嗪能增大小鼠红细胞膜脂流动性、减少膜蛋白中α螺旋的含量、增加膜表面负电荷。
膜表面负电荷的增加有助于血液的抗凝和解凝。
【总页数】4页(P166-169)
【关键词】川芎嗪;小鼠;红细胞膜
【作者】张学贤;齐娟娟;韩豫峰;沈子威;赵南明
【作者单位】清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室,中国药科大学物理学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R285
【相关文献】
1.川芎嗪对哮喘小鼠肺组织Rho和Rho激酶的表达及小鼠气道炎症的影响 [J], 罗运春;项蔷薇;王强;林立;周晓聪;李昌崇
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3.龙葵多糖对H22荷瘤小鼠红细胞膜功能的影响 [J], 袁洪亮
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5.姜黄素对H22小鼠红细胞膜流动性和膜蛋白含量的影响研究 [J], 贾绍华;赵明春;曲海洋;曲中原;张秀娟;彭海生
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水蛭醇提物的抗血栓作用研究
吴喜国;肖光艳;韩志
【期刊名称】《牡丹江医学院学报》
【年(卷),期】2009(030)002
【摘要】目的:研究水蛭醇提物的抗血栓作用.方法:采用胶原蛋白-肾上腺素诱导的小鼠体内血栓和大鼠动-静脉旁路血栓形成的方法.观察水蛭醇提物的抗血栓作用;采用荧光偏振技术观察水蛭醇提物对红细胞膜脂和血小板膜脂流动性的影响.结果:水蛭醇提物对胶原蛋白-肾上腺素诱导的小鼠体内血栓和大鼠动-静脉旁路血栓形成有显著抑制作用,并能提高红细胞膜和血小板膜流动性.结论:水蛭醇提物有抗血栓作用,其机理与其提高红细胞膜脂和血小板膜脂流动性有关.水蛭素为抗血栓成分,水蛭的药理作用有着广泛的发展前景.
【总页数】3页(P35-37)
【作者】吴喜国;肖光艳;韩志
【作者单位】牡丹江友搏药业有限责任公司,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江友搏药业有限责任公司,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江友搏药业有限责任公司,黑龙江,牡丹江,157011
【正文语种】中文
【中图分类】R96
【相关文献】
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当归补血汤对吗啡戒断小鼠红细胞免疫功能的影响研究顾鸿;田维毅;梅颖【摘要】Objective To study the effect of Danggui Buxue Decoction on red cell immune function in mice with morphine abstinence syndrome. Methods 50 mice were randomly divided into normal group,positive control group, high, medium, low dose group,Hindlimb injection of morphine in morphine dependent mice model was established.Erythrocyte membrane were measured in five groups of mice micro viscosity, erythrocyte deformation index; Determination of red cell immune complex rosette rate using the method (CIC), red cell C3b receptor rosette rate;and to observe the five group of regulator factor enhance rate (RFER) and immune adherence inhibitor factor (RFIR) levels.Results Erythrocyte membrane microviscosity in model group were significantly higher than those in normal group, medium group and low group (P<0.05),red cell deformability index was lower than that of normal group, drug medium group and drug group low (P<0.05).Drug high group and medium group,immune complex rosette rate lower than in model group(P<0.05), C3b receptor rosette rate was significantly higher than that in the model group (P<0.05).Conclusion Low dose group and high dose group Danggui Buxue Decoction raises the red cell immune function in morphine withdrawal mice, improves the withdrawal symptoms, rapids rehabilitation of the body, has good clinical value.%目的:研究当归补血汤对吗啡戒断小鼠红细胞免疫功能的影响。