瘦肉精(盐酸克伦特罗)快速检测卡
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瘦肉精(沙丁胺醇)速测卡使用说明书方法编号:CDC-10131.适用范围:本产品适用于猪的肌肉组织中沙丁胺醇的快速筛查。
对猪的肝脏、肺脏、肾脏组织,以及尿液中沙丁胺醇的快速筛查具有一定的参考价值。
2.检测原理:沙丁胺醇快速检测卡是基于竞争法胶体金免疫层析技术,将检测液加入速测卡上的样品孔,检测液中的沙丁胺醇与试纸卡上的抗体结合形成复合物,若浓度低于灵敏度值,逐渐凝集成一条可见的T线;若浓度高于灵敏度值,则不会再形成可见T线而形成可见的C线。
3.灵敏度: 5ppb4.测试步骤4.1取4g剪碎或捣碎的样本(肉泥/去脂肪)于大离心管中,盖紧管盖。
4.2将装有样品的离心管放入水浴锅中水浴加热10分钟,或将装有样品的离心管放入杯子中,10分钟内更换几次90℃以上的热水,使组织样本析出液体。
4.3如果析出的液体较清澈,可直接取上清液作为待测样液使用,如果析出的液体较混浊,可用吸管将液体移入小离心管中,静置或离心后取上清液作为待测样液。
4.4取出测试卡平放于桌面,用测试卡袋中的滴管吸取待测样液,逐滴加入3滴样液于测试卡椭圆形孔中,如到30秒时在长方形观测窗中无液体移行,可补加1滴样液,在5~10分钟内判断结果。
5.结果解释阳性:C线显色,T线不显色,判为阳性。
阴性:C线显色,T线肉眼可见,无论颜色深浅均判为阴性。
无效:C线不显色,无论T线是否显色,该试纸均判为无效。
6. 备注与注意事项6.1所有试纸启封后1小时内使用。
6.2本品为一次性产品,请勿重复使用。
6.3本品为筛选试剂,任何可疑结果请用其它方法作进一步确认。
6.4使用本品检测100ug/ml莱克多巴胺、群勃龙醋酸酯、磺胺类、氯霉素类、大环内酯类、氨基糖苷类、β-内酰胺类、氟喹诺酮类和四环素类等药物,结果均呈阴性。
检测5ng/ml以上的盐酸克仑特罗呈阳性。
如果检测样品呈阳性时,建议进行克仑特罗的检测。
7.包装:试纸卡、1.5ml离心管和3ml吸管各5个。
瘦肉精〔莱克多巴胺〕试纸卡使用说明书
1 适用范围:本产品适用于猪的肌肉组织中莱克多巴胺的快速筛查。
对猪的肝脏、肺脏、肾脏组织,以及尿液中莱克多巴胺的快速筛查具有一定的参考价值。
2 检测原理:莱克多巴胺快速检测卡是基于竞争法胶体金免疫层析技术,将检测液参加速测卡上的样品孔,检测液中的莱克多巴胺与试纸卡上的抗体结合形成复合物,假设浓度低于灵敏度值,逐渐凝集成一条可见的T线;假设浓度高于灵敏度值,那么不会再形成可见T线而形成可见的C线。
3 灵敏度:5L盐酸克伦特罗、群勃龙醋酸酯、氯霉素类、大环内酯类、氨基糖苷类、β-内酰胺类、氟喹诺酮类和四环素类等药物,结果均呈阴性。
使用本品检测1μg/mL沙丁胺醇,结果显示均呈阴性。
7 包装:试纸卡、离心管和3mL吸管各5个。
15mL离心管1个〔清洗后可反复使用〕。
8 保存和稳定性:4~30℃阴凉枯燥处保存,不可冷冻,防止阳光直晒,生产日期起18个月内有效。
瘦肉精的查禁和检测方法瘦肉精,顾名思义就是一种可以用来提高瘦肉率的药物,它的学名叫“盐酸克伦特罗(Clen butero,CLB)”,化学名为“2-「(叔丁氨基)甲基」-4-氨基-3,5-二氯苯甲醇盐酸盐”,是一种从天然儿茶酚胺衍生合成的化合物,曾是名为氨哮素、克喘素等平喘药的主要成份。
它的主要作用机理是作为一种强效激动剂,选择性的作用于肾上腺素年受体上,缴活腺音酸环化酶(cAMP),使环磷腺吉增加,加强脂肪分解,促进蛋白质合成,实现动物营养再分配,故又将瘦肉精称作“生长促进剂(growthpromotef)”和营养“重分配剂【partitioning agent)”。
一、瘦肉精的发现和应用上世纪80年代初,美国脂胺公司的研究人员意外地发现,将一定量的盐酸克伦特罗添加在饲料中,能够改变营养物质的代谢途径,促进动物肌肉特别是骨胳肌蛋白质的合成,同时对脂肪合成有一定的抑制作用,从而可以促进动物生长,增加瘦肉率,并根据一定试验得出,如果在饲料中添加适量的盐酸克伦特罗,可以提高饲料转化率、生长速率、购体瘦肉率10%以上。
所以,当时认为这是一种不可多得的饲料药物添加剂,并在世界各地进行推广应用,而我国也于80年代后期,在一些大专院校、科研院所进行了研发试验和推广试验,经过证明其作用效果十分明显,并把盐酸克伦特罗简称瘦肉精。
虽然这种饲料添加剂一直没有得到国家主管部门的认可,但是在利益的驱使下,我国许多地区的饲料加工企业和养殖户都开始推广应用。
二、瘦肉精中毒事件第一例由其引起的中毒事件发生在西班牙,据报道1990年,西班牙有43个家庭135人因食用饲喂瘦肉精的牛肝后发生食物中毒现象;而我国最早的瘦肉精中毒事件发生在香港,1998年5月,香港有17名居民因食用内地供应的猪内脏而致中毒,同时广东省高明市人民医院也在回周内接待了7例因喝猪肺汤而中毒的患者。
从此以后,因食用添加瘦肉精饲喂动物产品而中毒的事件,就接连不断地在全世界出现了。
“瘦肉精”检测方法报告系别:化学系班级:08.7班小组成员:杨丽冰、闫丽君、梁文涛、于冰、朱文瀚一、前言引言瘦肉精是一类药物,而不是某一种特定的药物,任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。
在中国,通常所说的瘦肉精是指克伦特罗(Clenbuterol,CLB),而普通消费者则把此类药物统称为瘦肉精。
当它们以超过治疗剂量5—10倍的用量用于家畜饲养时,即有显著的营养“再分配效应”——促进动物体蛋白质沉积、促进脂肪分解抑制脂肪沉积,能显著提高胴体的瘦肉率、增重和提高饲料转化率,因此,β—受体激动剂被大量非法用于畜牧生产,其中最常用的有克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等。
“瘦肉精”中毒的症状表现比较特别,主要是心慌、肌肉震颤、头痛以及脸部潮红等,临床表现主要有话多、心跳过快、过度兴奋、心慌手抖等,常见有恶心、头晕、四肢无力、手颤等中毒症状。
一般来说不会有大问题,健康的成年人如果得到及时医治,问题不会太过严重,但如果中毒的人本身患有心脑血管等慢性疾病,瘦肉精中毒甚至有可能致命。
特别是对心脏病、心率失常、高血压、青光眼、糖尿病、甲状腺机能亢进等疾病的患者有较大危害,长期食用则有可能导致染色体畸变,会诱发恶性肿瘤。
盐酸克伦特罗(Clenbuteerol,CLB) ,又名克喘素、氨哮素、双氯醇胺,俗名瘦肉精,化学名为α—[ (叔丁氨基) 甲基]—4—氨基—3,5—二氯苯甲醇盐酸盐,分子式为C12 H18Cl12N2O•HCl ,相对分子质量为313.65。
白色或类白色的结晶粉末,无臭、味苦,熔点161℃,溶于水、乙醇,微溶于丙酮,不溶于乙醚。
二、“瘦肉精”的检测方法1.高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱法不需要衍生,是利用β-肾上腺素能激动剂分子可与C18或C8固定相分子相互作用。
1.1 紫外检测器检测法紫外检测器价格便宜,最为普及,但其选择性不好,在分离效果不好的情况下易受干扰,且灵敏度不高,该检测器常用于检测组织中高浓度的盐酸克伦特罗。
莱克-克伦-沙丁三联卡说明书【产品简介】本产品用于快速检测尿液中的莱克-克伦-沙丁残留,灵敏度分别为5ppb、3ppb、5 ppb,整个检测过程只需要3-5分钟,适用于各类企业及检测机构。
【检测原理】莱克-克伦-沙丁免疫金标应用竞争抑制免疫层析的原理,样本中的莱克-克伦-沙丁在侧向移动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合,抑制了抗体和NC膜检测线上莱克-克伦-沙丁-BSA偶联物的结合。
如果样本中莱克-克伦-沙丁含量分别大于5ppb、3ppb、5 ppb,检测线不显颜色,结果为阳性;反之,检测线显红色,结果为阴性。
【产品组成】莱克-克伦-沙丁免疫胶体金快速检测三联试剂板(40份/盒);说明书(1份/盒);塑料吸管(40个/盒)【一、尿样收集】尿液标本必须收集在洁净、干燥不含有任何防腐剂的塑料尿杯或玻璃容器内。
若不能及时送检,尿样标本在2ºC-8ºC冷藏可保存48小时。
长期保存需冷冻于-20ºC,忌反复冻融。
【二、组织样本收集】组织样本(包括精肉、肝脏、肺脏和肾脏)立即检测或收集在塑料袋中送检。
若不能及时检测,样本在2-8℃冷藏可保存24小时,-20℃冷冻保存1周,冷冻时忌反复冻融。
将组织样本剪碎,称取0.5g组织样本装入我公司提供的配套组织提取液中。
充分混匀,然后将离心管放入90℃以上沸水浴加热10min便有液汁浸出,取出此离心管放至室温,(如条件具备,将离心管放入小离心机中,4000转离心5分钟后,取上清为待检液),如果没有离心机,需将离心管静置15分钟,此离心管中的样本渗出液为待检样品,检测时应尽量取上清液。
【使用步骤】1、测试前请完整阅读使用说明书,并将试剂板和待检样本溶液恢复至常温。
2、从包装袋中取出试剂板后请尽快使用;3、用滴管吸取待检样品溶液,于加样孔中滴加3滴,加样后开始计时;4、结果应在5分钟时读取,30分钟后判读结果无效;5、读取结果时,试剂板水平置于观察者正面,水平放置,切勿将试剂板倒置。
影响猪尿“瘦肉精”快速检测卡准确性的因素及应对措施李毅财;韦强【期刊名称】《广西畜牧兽医》【年(卷),期】2016(032)005【总页数】3页(P272-273,274)【作者】李毅财;韦强【作者单位】来宾市动物疫病预防控制中心,广西来宾546100;广西柳州市鱼峰区洛埠镇水产畜牧兽医站,广西柳州545011【正文语种】中文【中图分类】S851.41“瘦肉精”是指β-肾上腺受体激动剂类化合物的俗称,主要包括盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、硫酸沙丁胺醇、盐酸多巴胺等十几种化学物质[1]。
“瘦肉精”的毒性较强,人体摄入过量后,会对心脏和神经系统有刺激作用,出现恶心、头晕、肌肉无力、震颤等中毒症状,反复食用还会产生耐受性,长期食用还可能引起染色体变异,诱发恶性肿瘤[2]。
我国政府对β-肾上腺受体激动剂类化合物的非法使用高度重视,在农业部第235号公告关于兽药最高残留限量中,要求克伦特罗(Clenbuterol)、沙丁胺醇( Salbutamol)、西马特罗( Cimaterol)和它们的盐、酯在所有食用动物的所有食用组织均不得检出[3]。
目前在基层监管人员对“瘦肉精”的检测方法主要是胶体金快速检测卡检测猪尿中盐酸克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺三种试纸条,其原理是利用竞争抑制免疫层析技术来测定动物尿液中的含量。
该方法具有灵敏度高、准确性高、可现场快速检测的特点,广泛的应用于对猪尿中违禁药物的初步筛选。
虽然胶体金快速检测具有操作简单、判读直观的优点,但检测操作时如果疏忽操作的细节,也会对检测结果有十分重要的影响。
下面就影响“瘦肉精”快速检测卡准确性的因素进行探讨及应对措施进行探讨。
1.1 被检动物当前生理情况生猪在养殖过程中:(1)由于疾病治疗的需要(例如治疗流行性脑膜炎、损伤性关节炎等),不可避免的会对生猪使用一些肾上腺激素类药物或硫酸锌,磺胺等药物,在进行检测时,都会对结果的准确性造成影响。
(2)由于新陈代谢的原因,饮用水量的多少,会决定生猪排放尿液多少,从而在一定程度上对尿液中“瘦肉精”含量起到稀释或者浓缩的作用。
竞争酶联免疫吸附法测定猪肉中的瘦肉精(试剂盒)盐酸克伦特罗俗名“瘦肉精”欧美等发达国家纷纷严禁此类药物在畜牧生产中的应用,FDA和WTO还制定了畜产品中瘦肉精的最高残留限量。
检测瘦肉精常用的方法有高效液相色谱法(GC-MS)、气质联机法(HLPC)和酶联免疫吸附法(ELISA),其中酶联免疫吸附法是目前最佳的检测方法。
ELISA检测方法有双抗体夹心法测抗原、间接法测抗体、竞争法测抗体等。
该次试验利用的是酶联免疫吸附法中的竞争法测抗体。
一、目的:限制瘦肉精在畜牧生产中的使用,对肉品卫生安全进行较好的监督。
二、原理:利用多克隆抗体既能与盐酸克伦特罗结合,也能与包被抗原结合。
这些包被抗原被固定在酶标板孔壁上,当样品中含有瘦肉精时,它与包被抗原竞争结合抗体中有限量的结合位点。
由于每一个孔中抗体的结合位点位点数相同,当样品中瘦肉精浓度低时,就有更多抗体的位点与包被抗原结合,更多的抗体被固定在酶标板壁上,就会与更多的酶标二结合,所以结果就呈现深蓝色。
相反,样品的瘦肉精浓度高,结果就呈现浅蓝色。
加入终止液后,蓝色相应变成黄色,然后用酶标仪进行测定。
三、实验材料与方法原料:无皮猪肉(易剔除杂质、脂肪)试剂:盐酸克伦特罗—酶联免疫试剂盒仪器:电热恒温水浴锅、DSY-1-2孔、酶标仪、离心机、匀浆机、微量加样器方法:1原料的处理:将精肉用高速捣碎机捣碎混合均匀,放置冰箱冷冻备用。
取捣碎的样品5g,加入25ml,50mmlHCL震动1.5h,以达到均质。
称取5g 均质物(相当于1g肝脏或肌肉),加入离心管中,1000r/min离心15min.取上清液至令一个离心管中,加1mol NaOH 300ul,混合15min.加入4ml,500mmolKH2PO4(pH3.0),迅速混匀置于4摄氏度的冰箱内保存至少1.5h.1000r/min,离心15min,分离上清液。
2洗板:所有试剂回温至室温。
将浓缩洗涤液用蒸馏水稀释10倍。
关于“动物性食品中克伦特罗(瘦肉精)残留的检测”的实验分析LINK链接猪肉是否含瘦肉精的迅速推断办法看该猪肉的脂肪(猪油),如该猪肉在皮下就是瘦肉或仅有少量脂肪,则该猪肉就可能含有“瘦肉精(CLB)”。
含有“瘦肉精”的瘦肉外观特殊鲜红,纤维比较疏松,切成二三指宽的猪肉比较软,不能立于案,瘦肉与脂肪间有黄色液体流出,脂肪特殊薄。
而普通健康的瘦猪肉是淡红色,肉质弹性好,瘦肉与脂肪间没有任何液体流出。
购买时一定要看清该猪肉是否盖有检疫印章和检疫合格证实。
一、样品迅速检测办法 1.胶体金检测卡法(1)特点①操作容易、检测速度快,尿样检测时光约5min,组织约10min。
②无需其他仪器设备。
③样品量需求少。
④适用于大量样本的迅速步筛。
⑤结果推断容易明白。
(2)推断结果①阴性:C线条显色,T线条肉眼可见,无论色彩深浅均判为阴性。
②阳性:C线条显色,T线条不显色,判为阳性。
③无效:C线条不显色,无论T线条是否显色,该试纸均判为无效。
(3)检测对象猪尿液、组织;猪饲料;猪肉制品。
(4)适用单位生殖养殖场、屠宰场,农业、贸易等主管部门。
2.酶联免疫(ELISA)法(1)检测原理测定的基础是抗原抗体反应。
微孔板包被有针对克伦特罗IgG的包被抗体。
克伦特罗抗体被加入,经过孵育及洗涤步骤后,加入竞争性酶标志物、标准或试样溶液。
克伦特罗与竞争性酶标志物竞争克伦特罗抗体,没有与抗体衔接的克伦特罗酶标志物在洗涤步骤中除去。
将底物(过氧化尿素)和发色剂(四甲基联苯胺)加入孔中孵育,结合的标志酶将无色的发色剂转化为蓝色产物。
加入反应停止液后使色彩由蓝色改变为黄色。
在450nm处测量吸光度值,吸光度壁纸与克伦特罗浓度的自然对数成反比。
(2)试剂磷酸二氢钠、高氯酸、异丙醇、乙酸乙酯、0.1mol/L高氯酸溶液、1mol/L氢氧化钠溶液、pH=6的0.1mol/L磷酸二氢钠缓冲溶液、异丙醇+乙酸乙酯(40+60)、针孔式微孔过滤膜(0.45μm,水相)、克伦特罗酶联免疫试剂盒、96孔板(12调×8孔)包被有针对克伦特罗IgG的包被抗体、克伦特罗系列标准液(最少5倍比稀释第1页共4页。
市售瘦肉精三联快速检测卡质量检测刘少宁;陈智;曹淑强;姚震;程瑞红【摘要】为评价和控制瘦肉精三联快速检测卡的质量,本试验配制系列标准添加浓度的猪尿样品,经 UP-LC -MS /MS 方法确证后,对6个厂家生产的瘦肉精三联快速检测卡的检测限、准确率进行测定,并与仪器方法进行比较。
结果表明:大多数厂家生产的瘦肉精三联快速检测卡不完全与其标示检测限相吻合;实际检测阈值高于标示检测限的情况较多;6个厂家生产的检测卡都存在一定的假阴性率(2%~14%)和假阳性率(2%~8%);与仪器方法进行比较发现两者的符合率介于75%~100%之间。
总之,不同厂家生产的瘦肉精三联快速检测卡质量存在明显差异。
%To investigate and evaluate the quality of different commercially available rapid detection tri-ple cards of lean meat powder,a serial standard concentration samples of pig urine were prepared and con-formed by UPLC -MS /MS method.The detection limit and accuracy rate of detection cards from six compa-nies were detected and compared with instrument method.The results showed that the detection thresholds of most detection cards were not fully consistent with their labeled detection limits,and most were higher.All the detection cards existed a certain amount of false negative rate (2% ~14%)and false positive rate (2%~8%).Compared with instrument method,the coincidence rate was between 75% ~100%.In short,there were significant differences in the quality of detection cards made by different companies.【期刊名称】《山东农业科学》【年(卷),期】2015(000)012【总页数】5页(P96-100)【关键词】瘦肉精;UPLC -MS /MS;三联快速检测卡【作者】刘少宁;陈智;曹淑强;姚震;程瑞红【作者单位】山东省兽药质量检验所/山东省畜产品质量安全监测与风险评估重点实验室,山东济南 250022;山东省农业科学院/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南 250100;沂水县畜牧局,山东沂水 276400;德州职业技术学院,山东德州 253034;昌乐县畜牧局,山东昌乐 262400【正文语种】中文【中图分类】TS251.7瘦肉精是一类人工合成的β-受体激动剂,因其可以提高瘦肉率和促进动物生长,而被一些畜牧养殖户和养殖企业作为养殖促进剂使用[1]。
“瘦肉精”快速检测卡在畜产品质量安全检测中的应用作者:阿力腾才斯克,萨仁高娃,史梅来源:《畜牧兽医科学》 2020年第15期阿力腾才斯克,萨仁高娃,史梅(新疆维吾尔自治区兽药饲料监察所,乌鲁木齐 830063)摘要:瘦肉精也被称为克伦特罗,属于一种兴奋剂药物。
通过在畜禽中使用瘦肉精,能显著提升畜禽体内的瘦肉转化率,曾经被广泛应用在畜禽饲料中。
在畜产品中残留的瘦肉精被人类食用后会导致人们出现头晕目眩、恶心呕吐及心悸和发烧等情况,因此目前该药品已被严禁使用。
但仍然部分养殖人员在养殖中使用瘦肉精,必须重视畜产品质量安全检测工作的开展。
在畜产品质量安全检测中,通过对瘦肉精快速检测卡的应用,能大幅度提升检测效率和准确性,目前已在大批量的畜产品检测中得到广泛应用。
该文主要论述瘦肉精快速检测卡在畜产品质量安全检测中的应用。
关键词:瘦肉精快速检测卡;畜产品;质量安全检测中图分类号:S859.84 文献标识码:B doi:10.3969/j.issn.2096-3637.2020.15.068Application of “Lean Meat Essence” Rapid Detection Card in Animal Products Quality and Safety DetectionAlitzczesk,Sarenkova,Shi Mei(Veterinary Drug and Feed Inspection Center of Xinjiang,Urumqi 830063,China)Abstract:Clenbuterol,also known as clenbuterol,is a stimulant.By using lean meat essence in livestock and poultry,the conversion rate of lean meat inlivestock and poultry can be increased obviously,which has been widely used in livestock and poultry feed.The residues of clenbuterol in animal products can lead to dizziness,nausea and vomiting,heart palpitations and fever after human consumption,so the drug has been banned.However,some breeders still use clenbuterol in animal production,so we must pay attention to the quality andsafety detection of animal products.In the detection of animal product quality and safety,the rapid detection card of clenbuterol can greatly improve the detection efficiency and accuracy,and has been widely used in large quantities of animal products detection.This paper mainly discusses the application of rapid detection card of clenbuterol in the quality and safety detection of livestock products.Key words:rapid detection card for clenbuterol,animal products,quality and safety detection0 引言瘦肉精具体是指一种类型的药物,而并不是特指某一种药物,这种药物能加速畜禽体内的瘦肉生长,同时也能对畜禽体内的肥肉生长进行抑制。
Q/SZ KJK苏州快捷康生物技术有限公司企业标准Q/SZ KJK0016-2019盐酸克伦特罗胶体金检测卡2019-7-15发布2019-8-15实施苏州快捷康生物技术有限公司发布前言依据《中华人民共和国标准化法》、《中华人民共和国产品质量法》、《企业标准体系要求》,制定本标准作为盐酸克伦特罗胶体金检测卡生产、检测、销售过程中的质量控制依据。
本标准编写依据GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》。
本标准由苏州快捷康生物技术有限公司提出及起草。
本标准主要起草人:盛相国。
盐酸克伦特罗胶体金检测卡1范围本标准规定了盐酸克伦特罗胶体金检测卡的原理、组成及规格、要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输、贮存。
本标准适用于应用胶体金免疫层析反应原理,并采用包括盐酸克伦特罗抗原、盐酸克伦特罗抗体、硝酸纤维素膜、胶体金垫、样品垫、吸水纸、卡壳等相关组件组装而成的盐酸克伦特罗快速检测卡的质量检定。
本产品适用于各种组织、尿样及饲料中盐酸克伦特罗含量的现场快速检测。
2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T191包装储运图示标志GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备中华人民共和国商务部公告2012年第58号国家食品药品监督管理总局办公厅公开征求《水产品中孔雀石绿的快速检测胶体金免疫层析法》(征求意见稿)等6项食品快速检测方法意见DB34/T818-2008饲料中盐酸克伦特罗的测定胶体金免疫层析法3原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。
样品中盐酸克伦特罗与胶体金标记的特异性抗体结合,抑制抗体和检测卡中检测线(T线)上抗原的结合,从而导致检测线颜色深浅的变化。
通过检测线与控制线(C 线)颜色深浅比较,对样品中盐酸克伦特罗进行定性判定。
猪瘟抗体快速检测试剂盒
——(胶体金法)使用说明书
一、原理:本试纸采用酶联免疫原理和胶体金层析技术制成快速检测猪血清中的猪瘟抗体。
将猪瘟抗原包被在硝酸纤维素膜的检测线(T)上,兔抗猪瘟抗体包被在硝酸纤维素膜的质控线(C)上,用胶体金标记的猪瘟抗原干燥后置于玻璃纤维素膜下端。
当血清加入加样孔内,由于层析的原理,血清开始沿纸条移动,当遇上干燥的金标抗原,将其溶解,并带着金标抗原继续往上移动,至硝酸纤维素膜的检测线。
如果样品中有猪瘟抗体存在时,会与玻璃纤维素上的金标猪瘟抗原和包被在检测线上的猪瘟抗原,在检测上形成一个夹心的免疫复合物,呈一条紫红色线。
样品中的抗体越高,色线颜色越深,判定为阳性。
如果样品中没有猪瘟抗体,检测线(T)线上没有色带出现,判定为阴性。
样品和金标抗原继续往上移至质控线时,此处的兔抗猪瘟抗体将会同金标猪瘟抗原结合,在质控线(C)上形成一条紫红色线,证明本试纸有效。
整个试验仅需20分钟。
操作简便、快速、准确、灵敏度高,直观、结果容易判定。
二.产品组成:1、检测卡(1个):由一特制的塑料检测卡将猪瘟抗体检测试纸条夹于卡内,卡面上设有加样孔和观察孔。
加样孔作为加入待检血清,观察孔内为试剂检测线(T),试剂质控线(C)。
一个检测试剂卡用一个铝箔袋包装,内装干燥剂。
2、吸样管1个;3、5份塑料手套;4、使用说明书一份。
三.操作方法:1.用1.5ml样品管,采血0.5~1ml待检测血清自然析出或用离心机离心10分钟左右,使血清析出。
2.将检测卡平置于桌面上,用吸样管吸取被检血清,在检测卡的椭圆形加样孔内加入2滴约80~100ul。
在室温下反应20分钟判定结果。
(检测卡如在4℃保存,必须恢复至室温后方可进行检测)
四.结果判断:1.阳性:在检测线(T)处,质控线(C)处,各出现一条紫红色条带,判定为阳性;检测线(T)处条带色泽的深浅,依检测样品中猪瘟抗体效价的高低而变化,效价越高色带越深,反之越浅。
2.阴性:在质控线(C)处,出现一条紫红色条带,检测线(T)处未出现一条紫红色条带,说明检测样品中无猪瘟抗体存在。
3.无效:在检测线(T)处,质控线(C)处,都无明显条带出现,判定为试纸条无效。
五.诊断参考:被检样品加样后20分钟可与对照卡的色带滴度进行参考比较。
1.当被检样品检测线(T)条带的色泽≥对照卡中1:16效价时,说明检测样品中猪瘟抗体的滴度较高,暂不需要进行猪瘟疫苗的接种免疫。
2.当被检样品检测线(T)条带的色泽<对照卡中1:16效价时,说明检测样品中猪瘟抗体效价不能抵御猪瘟强毒攻击的最低保护滴度,为进行猪瘟疫苗接种时间。
3.当被检样品检测线(T)处无明显色带出现,说明被检测样品中没有猪瘟抗体。
如果猪群健康,应当及时进行猪瘟疫苗接种。