瘦肉精的快速检测免疫胶体金法

瘦肉精检测中文名：瘦肉精；克伦特罗；学名盐酸克伦特罗；是一种平喘药。

该药物既不是兽药，也不是饲料添加剂，而是肾上腺类神经兴奋剂。

盐酸双氯醇胺；克喘素；氨哮素；氨必妥；氨双氯喘通；氨双氯醇胺。

英文名：Clenbuterol; Spiropent; Planipart; NAB365；4-Amino-3,5-dichloro-alpha-(((1,1-dimethylethyl)amino)methyl)benzene m e t h a n o l CAS号：37148-27-9分子式：C12-H18-Cl2-N2-O理化特性白色或类白色的结晶粉末，无臭、味苦，熔点161℃，溶于水、乙醇，微溶于丙酮，不溶于乙醚。

编辑本段瘦肉精检测方法GB/T 5009.192-2003 动物性食品中克伦特罗残留量的测定气相色谱-质谱法（GC-MS）GC-MS法优点是把色谱高效快速的分离效果和质谱高灵敏度的定性分析有机合起来，能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析，而且具更高的检测极限。

Fente C. A 等用GC-MS法检测牛毛中CLB的残留，最低检测限为5ng/g；Pteer Batioens应用气相色谱－串联质谱法(GC-MS-MS)对牛、羊、猪组织中的CLB含量进行检测，最低检测限为2ng/g；刘琪等用GC-MS法（EI离子源）检测猪尿中的CLB，检测限为0.5ng/mL；VanRhijin等用三甲基硅基或2-二甲基硅基吗啉衍生物检测尿提取物中的CLB，衍生物用电脉冲方式或化学离子化方式扫描，会产生更高的灵敏度。

另外，GC-MS法与HPLC法相比，检测灵敏度更高，假阳性率更低。

因此，我国将GC-MS法定为检测CLB的确证性方法（NY/T468~2001）。

高效液相色谱法（HPLC）HPLC适合测定热不稳定和强极性的β-激动剂及其代谢产物，而且，HPLC可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱(MS)等系统联用，容易实现分析过程的自动化。

瘦肉精（沙丁胺醇）速测卡使用说明书方法编号：CDC-10131.适用范围：本产品适用于猪的肌肉组织中沙丁胺醇的快速筛查。

对猪的肝脏、肺脏、肾脏组织，以及尿液中沙丁胺醇的快速筛查具有一定的参考价值。

2.检测原理：沙丁胺醇快速检测卡是基于竞争法胶体金免疫层析技术，将检测液加入速测卡上的样品孔，检测液中的沙丁胺醇与试纸卡上的抗体结合形成复合物，若浓度低于灵敏度值，逐渐凝集成一条可见的T线；若浓度高于灵敏度值，则不会再形成可见T线而形成可见的C线。

3.灵敏度： 5ppb4.测试步骤4.1取4g剪碎或捣碎的样本（肉泥/去脂肪）于大离心管中，盖紧管盖。

4.2将装有样品的离心管放入水浴锅中水浴加热10分钟，或将装有样品的离心管放入杯子中，10分钟内更换几次90℃以上的热水，使组织样本析出液体。

4.3如果析出的液体较清澈，可直接取上清液作为待测样液使用，如果析出的液体较混浊，可用吸管将液体移入小离心管中，静置或离心后取上清液作为待测样液。

4.4取出测试卡平放于桌面，用测试卡袋中的滴管吸取待测样液，逐滴加入3滴样液于测试卡椭圆形孔中，如到30秒时在长方形观测窗中无液体移行，可补加1滴样液，在5～10分钟内判断结果。

5.结果解释阳性：C线显色，T线不显色，判为阳性。

阴性：C线显色，T线肉眼可见，无论颜色深浅均判为阴性。

无效：C线不显色，无论T线是否显色，该试纸均判为无效。

6. 备注与注意事项6.1所有试纸启封后1小时内使用。

6.2本品为一次性产品，请勿重复使用。

6.3本品为筛选试剂，任何可疑结果请用其它方法作进一步确认。

6.4使用本品检测100ug/ml莱克多巴胺、群勃龙醋酸酯、磺胺类、氯霉素类、大环内酯类、氨基糖苷类、β-内酰胺类、氟喹诺酮类和四环素类等药物，结果均呈阴性。

检测5ng/ml以上的盐酸克仑特罗呈阳性。

如果检测样品呈阳性时，建议进行克仑特罗的检测。

7.包装：试纸卡、1.5ml离心管和3ml吸管各5个。

饲料中“瘦肉精”的检测方法及注意事项饲料中“瘦肉精”的检测方法及留意事项马爱平马丽Y市畜牧产品质量检验检测站1·“瘦肉精”的危害“瘦肉精”是肾上腺类神经兴奋剂，属β－兴奋剂类激素，是指能够促进瘦肉生长的药物添加剂。

目前，常见的被称为“瘦肉精”的药物添加剂主要有莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇、特布他林、西布特罗、西马特罗、齐帕特罗、氯丙那林、马布特罗、溴布特罗、班布特罗等11种，其代表物主要是克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇。

另外，近期在饲料中检测出的“瘦肉精”新品种苯乙醇胺A，再次敲响食品安全的警钟。

“瘦肉精”添加到饲料中，不但可以提高动物饲料转化率、生长速度，还可以使动物的肥肉削减，瘦肉增加，胴体瘦肉率可提高10%以上。

但作为饲料添加剂，使用剂量是人用药剂量的10倍以上，才能达到提高瘦肉率的效果。

其用量大、使用的时间长、代谢慢，所以直至屠宰前到上市，“瘦肉精”在猪体内的残留量都很大。

残留的药物通过食物进入人体，就会使人体蓄积中毒，因此目前被禁用。

但个别人为谋取暴利，仍在饲料中添加“瘦肉精”。

“瘦肉精”进入动物体内会在组织中形成残留，尤其是在肝脏等内脏器官残留较高。

食用含有“瘦肉精”的肉和内脏组织会对身体产生危害，常见的有恶心、头晕、四肢无力、手颤等中毒症状，特殊对心脏病、高血压、甲亢、前列腺肥大等疾病患者危害更大，长期食用则可能导致染色体基变，诱发恶性肿瘤，严重的可导致死亡。

2·饲料中“瘦肉精”的检测试验室中主要检测的是克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇3种。

检测方法有胶体金免疫层析法、酶联免疫吸附法（ELISA）以及仪器法。

现就以上几种检测方法浅谈试验过程中的几点留意事项。

3·胶体金免疫层析法胶体金免疫层析法为竞争抑制法，适用于饲料中“瘦肉精”的快速筛选检测，克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇这3种的检测卡较为常见。

检测卡含有被事先固定于硝酸纤维膜测试区（T）的抗原和掌握区（C）的Ⅱ抗以及固定于结合垫上的金标抗体。

莱克多巴胺（瘦肉精）快速检测卡——胶体金法(血清)一、简介“瘦肉精”快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理，样本中的“瘦肉精”在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和硝酸纤维素膜（NC膜）检测线上“瘦肉精”-蛋白偶联物的结合。

如果样本“瘦肉精”含量≥3ppb/ml，检测线不显颜色，结果为阳性。

反之，检测线显红色，结果为阴性。

本产品是检测莱克多巴胺（瘦肉精）的快速筛选试剂，整个检测过程只需5-10分钟，适用于尿液样品的检测。

二、试剂组成1、莱克多巴胺免疫胶体金快速检测卡（50份/盒）；2、一次性塑料吸管（1个/袋）；3、干燥剂（1片/袋）；4、使用说明书（1张/盒）。

三、标本收集用干燥、洁净的离心管或适当容器采集血清。

如果不立即检测，可将血清冷冻保存；血清在2-8℃冷藏可保存24小时，要注意避免腐败造成失效或污染。

如果血清出现沉淀或浑浊物，请离心后再检测。

四、操作步骤1、在进行测试前先完整阅读使用说明书，使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温。

2、撕开装有莱克多巴胺检测卡的包装袋，小心取出检测卡，水平放置于实验台上。

3、用塑料吸管吸2-3滴血清样本加入样本孔中。

4、5-8分钟内观察结果，10分钟后结果无效。

五、结果判定1、阳性结果：出现一条红色质控线（C）。

2、阴性结果：出现质控线（C）和反应线（T）两条红线。

3、无效结果：无红线出现，表明检测结果无效，需重新实验。

六、注意事项1、检测卡在保质期内一次性使用。

4℃冰箱中保存的检测卡检测前应平衡至室温后再开袋使用，否则会影响检测结果。

2、谨防检测卡受潮，铝箔包装袋受损或检测卡受潮后。

检测卡不能使用。

3、尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面，检测时避免阳光直射。

4、塑料吸管不可混用，以免交叉污染；5、出现阳性结果，应用本卡复查并作阳性对照实验，必要时送实验室进一步定量。

6、铝箔包装袋中的小包是干燥剂，不可误服。

7、自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。

既快速又精确目前检测瘦肉精的方法有以下几种，胶体金快检卡是最快速简单的一种方法，适用于多种流通领域和各种实验室用于大量筛查，但便宜略低，尿液约胶体金快检简单3ppb;肉类1ppb ;饲短需要确证方法料5-10ppb一般企业会采用自己检测与外部有资质的机构测试相结合，因为样品数量巨大，如果均外部测试一是费用非常高，二是送样、检测、获得结果的周期长，效率低，无法满足实际应用的需求，所以自检也是顺应企业高效节约的宗旨的，对自己用检测岀值得怀疑的样本再送检测机构检测。

一."瘦肉精”快速检测新方法初获成功盐酸克伦特罗（俗称瘦肉精），是一种饲料添加剂，能改进脂肪性动物肉和脂肪的比例，加速动物生长，但是它能够长期残留在动物体内，一般的烹饪加热不能将其消除。

人们一旦食用了含有瘦肉精残留的动物性食品，便会对人们的健康造成严重危害。

目前已有的快速检测方法（试剂条等），均不能定量，而定量的检测手段，大都依赖于酶联免疫（ELLSA ）和高效液相色谱（HPLC）等技术，这些方法有些步骤繁琐，非常耗时，有些则需要昂贵的仪器和熟练的操作人员，并且都不能实时地监视动态反应过程等。

研制的HPSPR-6000表面等离子共振生物分析仪用于盐酸克伦特罗快速检测，有效地克服了现有方法的缺点，其优点有：（1）盐酸克伦特罗的最低检出限约为 1.0ppb，接近和达到了高效液相色谱和酶联免疫等现行的方法的检出限（0.05〜1.0ppb）;（2）每个样品检测时间为10min，与目前常规方法最低需要2〜3h相比，检测时间缩短10倍以上；（3）样品前处理简单、免标记；（4）能够实时监控相互作用分子的结合、解离等动力学信息。

二•快检卡：猪肉方面，目前使用胶体金试纸，只需要取一些猪肉样品，放在离心管中，在水浴中煮10分钟，将煮出的汁液加同样体积的配套缓冲液，混匀，用于检测即可，几个ppb （g g/Kg, ng/g ）的瘦肉精就能被测岀。

北京华安麦科生物技术有限公司自主研发生产的瘦肉精类快检卡可的检岀限可达到1ppb，全程只需十几分钟。

瘦肉精快速检测方法
首先，免疫分析法是一种常用的瘦肉精快速检测方法。

该方法
利用特定的抗体与瘦肉精结合，形成抗原-抗体复合物，然后通过测
定复合物的光学密度来检测瘦肉精的含量。

这种方法操作简便，检
测结果准确可靠，适用于大批量样品的快速检测。

其次，质谱法也是一种常用的瘦肉精快速检测方法。

该方法利
用质谱仪对样品中的瘦肉精进行分析，通过分子的质量和荷电量来
确定瘦肉精的含量。

这种方法具有高灵敏度、高分辨率和高准确性
的特点，可以快速准确地检测出样品中的瘦肉精含量。

另外，生物传感器技术也被广泛应用于瘦肉精的快速检测。

生
物传感器是一种利用生物材料对特定物质进行识别和检测的技术，
通过测定生物材料与目标物质的相互作用所产生的生物信号来实现
对瘦肉精的快速检测。

这种方法具有操作简便、检测速度快的特点，适用于现场快速检测。

除了以上介绍的几种方法外，近年来还出现了基于光学、电化
学和生物技术的新型瘦肉精快速检测方法。

这些新方法在提高检测
灵敏度和准确性的同时，也更加符合环保要求，逐渐成为瘦肉精快
速检测的发展方向。

总的来说，瘦肉精的快速检测方法在食品安全监管中起着至关
重要的作用。

各种快速检测方法的不断发展和完善，将有助于提高
食品安全监管的效率和水平，保障人民群众的身体健康。

希望各相
关部门和科研人员能够不断加强瘦肉精快速检测方法的研究和应用，为食品安全保驾护航。

下种植等，创新种植方式，这样即使市场上橡胶的价格不理想，也可通过其他的经济作物获得一定的经济效益，能够有效降低橡胶种植价格不理想所带来的种植风险。

3.2　建立经济合作组织，提高专业化水平西双版纳橡胶种植业发展的过程中，需要政府大力支持，但是其在发展建设过程中，不能仅满足于政府的支持，在发展橡胶种植业时，种植户也需要通过自身努力，在政府引导和支持下，由种植者加入，成立合作组织。

如可尝试成立橡胶专业合作社或专业的服务中心，充分发挥农场栽培、割胶和植保方面的人才优势，对当地胶农进行科学技术指导，提高胶农的种植技术和病虫害防治水平，开展橡胶和其他作物、养殖的生产技术培训班，为构建多元复合生态模式胶园做好准备工作。

动物生产“瘦肉精”现场快速检测技术研究进展刘映雪，王　虎（辽宁省畜产品安全监察所，辽宁 沈阳　110003）人们生活水平日益提高，对食品安全的关注愈发强烈，2011年央视曝光双汇“瘦肉精”事件后，对“瘦肉精”的专项整治工作推到一个前所未有的高度。

“瘦肉精”是β肾上腺受体激动剂类化合物的统称，包括盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺等10余种物质，用于治疗支气管哮喘、慢性支气管炎和肺气肿等疾病，有促生长、减少脂肪含量、提高瘦肉率等功效。

食用含有“瘦肉精”的食物对人体有害，主要危害是出现肌肉震颤、心慌、战栗、头疼、恶心、呕吐等症状，对高血压、心脏病、甲亢和前列腺肥大等疾病患者危害更大，可导致死亡。

使用“瘦肉精”属于违法行为，世界各国法规禁止将“瘦肉精”用于畜禽养殖，因“瘦肉精”价格低廉、效果显著，有不法分子铤而走险，使用“瘦肉精”的新闻报道依然出现。

如何快速准确的检测“瘦肉精”成分，通过现场检测快速筛查成为一项重要的监督手段。

本文将对“瘦肉精”现场快速检测技术进行综述。

1　“瘦肉精”现场快速检测的概念短时间内出具体检测结果的行为称之为快速检测，“瘦肉精”现场快速检测技术主要是通过现场收集动物尿液（猪尿、牛尿、羊尿），不需要样品前处理，利用快速检测试纸条进行检测。

既快速又精确目前检测瘦肉精的方法有以下几种，胶体金快检卡是最快速简单的一种方法，适用于多种流通领域和各种实验室一般企业会采用自己检测与外部有资质的机构测试相结合，因为样品数量巨大，如果均外部测试一是费用非常高，二是送样、检测、获得结果的周期长，效率低，无法满足实际应用的需求，所以自检也是顺应企业高效节约的宗旨的，对自己用检测出值得怀疑的样本再送检测机构检测。

一."瘦肉精"快速检测新方法初获成功盐酸克伦特罗（俗称瘦肉精），是一种饲料添加剂，能改进脂肪性动物肉和脂肪的比例，加速动物生长，但是它能够长期残留在动物体内，一般的烹饪加热不能将其消除。

人们一旦食用了含有瘦肉精残留的动物性食品，便会对人们的健康造成严重危害。

目前已有的快速检测方法（试剂条等），均不能定量，而定量的检测手段，大都依赖于酶联免疫（ELLSA）和高效液相色谱（HPLC）等技术，这些方法有些步骤繁琐，非常耗时，有些则需要昂贵的仪器和熟练的操作人员，并且都不能实时地监视动态反应过程等。

研制的HPSPR－6000 表面等离子共振生物分析仪用于盐酸克伦特罗快速检测，有效地克服了现有方法的缺点，其优点有：（1）盐酸克伦特罗的最低检出限约为1.0ppb，接近和达到了高效液相色谱和酶联免疫等现行的方法的检出限（0.05～1.0ppb）；（2）每个样品检测时间为10min，与目前常规方法最低需要2～3h 相比，检测时间缩短10 倍以上；（3）样品前处理简单、免标记；（4）能够实时监控相互作用分子的结合、解离等动力学信息。

二．快检卡：猪肉方面，目前使用胶体金试纸，只需要取一些猪肉样品，放在离心管中，在水浴中煮10分钟，将煮出的汁液加同样体积的配套缓冲液，混匀，用于检测即可，几个ppb（μg/Kg，ng/g）的瘦肉精就能被测出。

北京华安麦科生物技术有限公司自主研发生产的瘦肉精类快检卡可的检出限可达到1ppb，全程只需十几分钟。

盐酸克伦特罗(瘦肉精)快速检测试剂盒采用间接竞争酶联免疫吸附法，在微孔条上预包被克仑特罗的单抗，克仑特罗的标准品（或样本中的残留物克仑特罗胺药物）与酶标记克仑特罗抗原竞争结合包被的莱克多巴胺抗体，酶标记物放大信号后，加入底物显色，终止液终止反应，酶标仪450 nm测定其吸光值。