“瘦肉精”检测卡试纸条质量验证试验

瘦肉精检测方法有哪些瘦肉精最早原用于治疗支气管哮喘，但是它对人体产生的副作用太大，所以在全球范围内早就被禁用了。

但很多肉品商家将其用于饲料中以降低成本，若人类长期食用有该残留物质的肉品，对心血管造成不良影响，从而诱发恶性肿瘤。

所以检测肉品中瘦肉精得从源头把控，目前检测方法有如下几种：★气相色谱-质谱法(GC-MS)GC-MS法优点是把色谱高效快速的分离效果和质谱高灵敏度的定性分析有机合起来，能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析，而且具更高的检测极限。

Fente C. A等用GC-MS法检测牛毛中CLB的残留，最低检测限为5ng/g;Pteer Batioens应用气相色谱-串联质谱法(GC-MS-MS)对牛、羊、猪组织中的CLB含量进行检测，最低检测限为2ng/g;刘琪等用GC-MS法(EI离子源)检测猪尿中的CLB，检测限为0.5ng/mL;VanRhijin等用三甲基硅基或2-二甲基硅基吗啉衍生物检测尿提取物中的CLB，衍生物用电脉冲方式或化学离子化方式扫描，会产生更高的灵敏度。

另外，GC-MS法与HPLC 法相比，检测灵敏度更高，假阳性率更低。

因此，我国将GC-MS 法定为检测CLB的确证性方法(NY/T468~2001)。

★高效液相色谱法(HPLC)HPLC适合测定热不稳定和强极性的β-激动剂及其代谢产物，而且，HPLC可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱(MS)等系统联用，容易实现分析过程的自动化。

黄士新等(1995)应用紫外检测器，在λ=243nm，色谱柱:shimpackCLC-ODS150×6.0mn，流速:1mL/min，柱温:室温30℃的条件下检测猪肝脏和猪肉中的CLB残留，最低检测限可达2ng/g。

国外有人应用HPLC (二极管阵列检测器)测定动物性食品中CLB残留，测得最低检测限为1.26ng/g，回收率达98.9%。

目前，我国已将HPLC法作为检测CLB残留的半确证性方法，最低检测限范围为1~15ng/g，其优点是专属性好、选择性强、检测精确度较高，而且假阳性率低;缺点是样品处理时间长，检测过程烦琐、难于操作，需贵重仪器，在实际应用中受到一定的限制。

既快速又精确目前检测瘦肉精的方法有以下几种，胶体金快检卡是最快速简单的一种方法，适用于多种流通领域和各种实验室一般企业会采用自己检测与外部有资质的机构测试相结合，因为样品数量巨大，如果均外部测试一是费用非常高，二是送样、检测、获得结果的周期长，效率低，无法满足实际应用的需求，所以自检也是顺应企业高效节约的宗旨的，对自己用检测出值得怀疑的样本再送检测机构检测。

一."瘦肉精"快速检测新方法初获成功盐酸克伦特罗（俗称瘦肉精），是一种饲料添加剂，能改进脂肪性动物肉和脂肪的比例，加速动物生长，但是它能够长期残留在动物体内，一般的烹饪加热不能将其消除。

人们一旦食用了含有瘦肉精残留的动物性食品，便会对人们的健康造成严重危害。

目前已有的快速检测方法（试剂条等），均不能定量，而定量的检测手段，大都依赖于酶联免疫（ELLSA）和高效液相色谱（HPLC）等技术，这些方法有些步骤繁琐，非常耗时，有些则需要昂贵的仪器和熟练的操作人员，并且都不能实时地监视动态反应过程等。

研制的HPSPR－6000 表面等离子共振生物分析仪用于盐酸克伦特罗快速检测，有效地克服了现有方法的缺点，其优点有：（1）盐酸克伦特罗的最低检出限约为1.0ppb，接近和达到了高效液相色谱和酶联免疫等现行的方法的检出限（0.05～1.0ppb）；（2）每个样品检测时间为10min，与目前常规方法最低需要2～3h 相比，检测时间缩短10 倍以上；（3）样品前处理简单、免标记；（4）能够实时监控相互作用分子的结合、解离等动力学信息。

二．快检卡：猪肉方面，目前使用胶体金试纸，只需要取一些猪肉样品，放在离心管中，在水浴中煮10分钟，将煮出的汁液加同样体积的配套缓冲液，混匀，用于检测即可，几个ppb（μg/Kg，ng/g）的瘦肉精就能被测出。

北京华安麦科生物技术有限公司自主研发生产的瘦肉精类快检卡可的检出限可达到1ppb，全程只需十几分钟。

盐酸克伦特罗(瘦肉精)快速检测试剂盒采用间接竞争酶联免疫吸附法，在微孔条上预包被克仑特罗的单抗，克仑特罗的标准品（或样本中的残留物克仑特罗胺药物）与酶标记克仑特罗抗原竞争结合包被的莱克多巴胺抗体，酶标记物放大信号后，加入底物显色，终止液终止反应，酶标仪450 nm测定其吸光值。

既快速又精确目前检测瘦肉精的方法有以下几种，胶体金快检卡是最快速简单的一种方法，适用于多种流通领域和各种实验室一般企业会采用自己检测与外部有资质的机构测试相结合，因为样品数量巨大，如果均外部测试一是费用非常高，二是送样、检测、获得结果的周期长，效率低，无法满足实际应用的需求，所以自检也是顺应企业高效节约的宗旨的，对自己用检测出值得怀疑的样本再送检测机构检测。

一."瘦肉精"快速检测新方法初获成功盐酸克伦特罗（俗称瘦肉精），是一种饲料添加剂，能改进脂肪性动物肉和脂肪的比例，加速动物生长，但是它能够长期残留在动物体内，一般的烹饪加热不能将其消除。

人们一旦食用了含有瘦肉精残留的动物性食品，便会对人们的健康造成严重危害。

目前已有的快速检测方法（试剂条等），均不能定量，而定量的检测手段，大都依赖于酶联免疫（ELLSA）和高效液相色谱（HPLC）等技术，这些方法有些步骤繁琐，非常耗时，有些则需要昂贵的仪器和熟练的操作人员，并且都不能实时地监视动态反应过程等。

研制的 HPSPR－6000 表面等离子共振生物分析仪用于盐酸克伦特罗快速检测，有效地克服了现有方法的缺点，其优点有：（ 1）盐酸克伦特罗的最低检出限约为1.0ppb，接近和达到了高效液相色谱和酶联免疫等现行的方法的检出限（0.05～1.0ppb）；（ 2）每个样品检测时间为 10min，与目前常规方法最低需要 2～3h 相比，检测时间缩短 10 倍以上；（ 3）样品前处理简单、免标记；（ 4）能够实时监控相互作用分子的结合、解离等动力学信息。

二．快检卡：猪肉方面，目前使用胶体金试纸，只需要取一些猪肉样品，放在离心管中，在水浴中煮10分钟，将煮出的汁液加同样体积的配套缓冲液，混匀，用于检测即可，几个ppb（μg/Kg，ng/g）的瘦肉精就能被测出。

北京华安麦科生物技术有限公司自主研发生产的瘦肉精类快检卡可的检出限可达到1ppb，全程只需十几分钟。

关于“动物性食品中克伦特罗(瘦肉精)残留的检测”的实验分析LINK链接猪肉是否含瘦肉精的迅速推断办法看该猪肉的脂肪(猪油)，如该猪肉在皮下就是瘦肉或仅有少量脂肪，则该猪肉就可能含有“瘦肉精(CLB)”。

含有“瘦肉精”的瘦肉外观特殊鲜红，纤维比较疏松，切成二三指宽的猪肉比较软，不能立于案，瘦肉与脂肪间有黄色液体流出，脂肪特殊薄。

而普通健康的瘦猪肉是淡红色，肉质弹性好，瘦肉与脂肪间没有任何液体流出。

购买时一定要看清该猪肉是否盖有检疫印章和检疫合格证实。

一、样品迅速检测办法 1.胶体金检测卡法(1)特点①操作容易、检测速度快，尿样检测时光约5min，组织约10min。

②无需其他仪器设备。

③样品量需求少。

④适用于大量样本的迅速步筛。

⑤结果推断容易明白。

(2)推断结果①阴性:C线条显色，T线条肉眼可见，无论色彩深浅均判为阴性。

②阳性:C线条显色，T线条不显色，判为阳性。

③无效:C线条不显色，无论T线条是否显色，该试纸均判为无效。

(3)检测对象猪尿液、组织；猪饲料；猪肉制品。

(4)适用单位生殖养殖场、屠宰场，农业、贸易等主管部门。

2.酶联免疫(ELISA)法(1)检测原理测定的基础是抗原抗体反应。

微孔板包被有针对克伦特罗IgG的包被抗体。

克伦特罗抗体被加入，经过孵育及洗涤步骤后，加入竞争性酶标志物、标准或试样溶液。

克伦特罗与竞争性酶标志物竞争克伦特罗抗体，没有与抗体衔接的克伦特罗酶标志物在洗涤步骤中除去。

将底物(过氧化尿素)和发色剂(四甲基联苯胺)加入孔中孵育，结合的标志酶将无色的发色剂转化为蓝色产物。

加入反应停止液后使色彩由蓝色改变为黄色。

在450nm处测量吸光度值，吸光度壁纸与克伦特罗浓度的自然对数成反比。

(2)试剂磷酸二氢钠、高氯酸、异丙醇、乙酸乙酯、0.1mol/L高氯酸溶液、1mol/L氢氧化钠溶液、pH=6的0.1mol/L磷酸二氢钠缓冲溶液、异丙醇+乙酸乙酯(40+60)、针孔式微孔过滤膜(0.45μm，水相)、克伦特罗酶联免疫试剂盒、96孔板(12调×8孔)包被有针对克伦特罗IgG的包被抗体、克伦特罗系列标准液(最少5倍比稀释第1页共4页。

市售瘦肉精三联快速检测卡质量检测刘少宁;陈智;曹淑强;姚震;程瑞红【摘要】为评价和控制瘦肉精三联快速检测卡的质量，本试验配制系列标准添加浓度的猪尿样品，经 UP-LC －MS ／MS 方法确证后，对6个厂家生产的瘦肉精三联快速检测卡的检测限、准确率进行测定，并与仪器方法进行比较。

结果表明：大多数厂家生产的瘦肉精三联快速检测卡不完全与其标示检测限相吻合；实际检测阈值高于标示检测限的情况较多；6个厂家生产的检测卡都存在一定的假阴性率（2％～14％）和假阳性率（2％～8％）；与仪器方法进行比较发现两者的符合率介于75％～100％之间。

总之，不同厂家生产的瘦肉精三联快速检测卡质量存在明显差异。

%To investigate and evaluate the quality of different commercially available rapid detection tri-ple cards of lean meat powder,a serial standard concentration samples of pig urine were prepared and con-formed by UPLC -MS /MS method.The detection limit and accuracy rate of detection cards from six compa-nies were detected and compared with instrument method.The results showed that the detection thresholds of most detection cards were not fully consistent with their labeled detection limits,and most were higher.All the detection cards existed a certain amount of false negative rate (2% ~14%)and false positive rate (2%~8%).Compared with instrument method,the coincidence rate was between 75% ~100%.In short,there were significant differences in the quality of detection cards made by different companies.【期刊名称】《山东农业科学》【年(卷),期】2015(000)012【总页数】5页(P96-100)【关键词】瘦肉精;UPLC -MS /MS;三联快速检测卡【作者】刘少宁;陈智;曹淑强;姚震;程瑞红【作者单位】山东省兽药质量检验所/山东省畜产品质量安全监测与风险评估重点实验室，山东济南 250022;山东省农业科学院/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室，山东济南 250100;沂水县畜牧局，山东沂水 276400;德州职业技术学院，山东德州 253034;昌乐县畜牧局，山东昌乐 262400【正文语种】中文【中图分类】TS251.7瘦肉精是一类人工合成的β-受体激动剂，因其可以提高瘦肉率和促进动物生长，而被一些畜牧养殖户和养殖企业作为养殖促进剂使用[1]。