瘦肉精的检测步骤(精)
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瘦肉精快速检测方法
瘦肉精(俗称瘦肉精)是一种被禁止在食品中使用的药物残留物,它用于提高牲畜肌肉生长速度和提高养殖效益。
由于其严重的健康风险,瘦肉精的使用和检测成为全球范围内食品安全的关注焦点之一。
为了保障食品中瘦肉精残留量的安全,各国纷纷制定了严格的检测标准,并研发了多种快速检测方法。
以下是一些常见的用于快速检测瘦肉精残留的方法:
1. 酶联免疫吸附法(ELISA):该方法利用酶标技术,在试剂盒中固定抗体,使其与瘦肉精结合,形成固定复合物。
通过比色或发光的底物反应,来间接检测瘦肉精的存在。
该方法具有操作简单、快速、灵敏度高等优点。
2. 高效液相色谱法(HPLC):该方法利用高效液相色谱仪分离和定量瘦肉精。
通过样品的提取、净化和色谱分析等步骤,可以达到高灵敏度和高精确度的检测效果。
该方法需要使用复杂的设备和试剂,操作相对复杂,但具有准确度较高的优点。
3. 荧光免疫分析法(FIA):该方法集成了免疫学和荧光检测技术,具有高灵敏度、快速性和自动化程度高的特点。
它利用荧光素标记的抗体与瘦肉精结合,并通过荧光检测器来定量测定瘦肉精的含量。
总的来说,这些快速检测方法都在不同程度上提高了瘦肉精检测的速度和准确度。
然而,由于检测方法和设备的不同,结果
可能有所差异,因此在实际应用中需要选择合适的方法,并参照相关标准制定严格的监管措施。
这样才能保证食品中瘦肉精残留量的安全,保障消费者的健康。
瘦肉精(沙丁胺醇)速测卡使用说明书方法编号:CDC-10131.适用范围:本产品适用于猪的肌肉组织中沙丁胺醇的快速筛查。
对猪的肝脏、肺脏、肾脏组织,以及尿液中沙丁胺醇的快速筛查具有一定的参考价值。
2.检测原理:沙丁胺醇快速检测卡是基于竞争法胶体金免疫层析技术,将检测液加入速测卡上的样品孔,检测液中的沙丁胺醇与试纸卡上的抗体结合形成复合物,若浓度低于灵敏度值,逐渐凝集成一条可见的T线;若浓度高于灵敏度值,则不会再形成可见T线而形成可见的C线。
3.灵敏度: 5ppb4.测试步骤4.1取4g剪碎或捣碎的样本(肉泥/去脂肪)于大离心管中,盖紧管盖。
4.2将装有样品的离心管放入水浴锅中水浴加热10分钟,或将装有样品的离心管放入杯子中,10分钟内更换几次90℃以上的热水,使组织样本析出液体。
4.3如果析出的液体较清澈,可直接取上清液作为待测样液使用,如果析出的液体较混浊,可用吸管将液体移入小离心管中,静置或离心后取上清液作为待测样液。
4.4取出测试卡平放于桌面,用测试卡袋中的滴管吸取待测样液,逐滴加入3滴样液于测试卡椭圆形孔中,如到30秒时在长方形观测窗中无液体移行,可补加1滴样液,在5~10分钟内判断结果。
5.结果解释阳性:C线显色,T线不显色,判为阳性。
阴性:C线显色,T线肉眼可见,无论颜色深浅均判为阴性。
无效:C线不显色,无论T线是否显色,该试纸均判为无效。
6. 备注与注意事项6.1所有试纸启封后1小时内使用。
6.2本品为一次性产品,请勿重复使用。
6.3本品为筛选试剂,任何可疑结果请用其它方法作进一步确认。
6.4使用本品检测100ug/ml莱克多巴胺、群勃龙醋酸酯、磺胺类、氯霉素类、大环内酯类、氨基糖苷类、β-内酰胺类、氟喹诺酮类和四环素类等药物,结果均呈阴性。
检测5ng/ml以上的盐酸克仑特罗呈阳性。
如果检测样品呈阳性时,建议进行克仑特罗的检测。
7.包装:试纸卡、1.5ml离心管和3ml吸管各5个。
目前,检测瘦肉精的方法主要有四种,即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱一质谱法(GC -MS)、毛细管区带电泳法(CE)和免疫分析技术(IA)。
而我国结合自己的实际情况,2001年农业部首先组织制定了饲料中盐酸克伦特罗的测定标淮。
该标准选择确定了两种:即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱一质谱法(GC-MS)。
其中将HPLC法作为检测瘦肉精的半确证性方法,其最低检测限为0.05μg/kg,优点是检测精确度高,而且假阳性率低;缺点是检测过程烦琐、检测时间长,需贵重仪器、难于操作、价格昂贵。
而GC一MS法优点是能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析。
GC-MS 法与HPLC法相比,检测灵敏度更高,假阳性率更低,已将GC-MS法定为检测瘦肉精的确证性方法。
GC-MS法的缺点同HPLC相似。
(1)试剂和材料以下所有试剂,除特别注明外,均为分析纯试剂;水为符合GB/T6682规定的二级水。
①盐酸克伦特罗对照品:含盐酸克伦特罗不得少于98.5%②盐酸③无水甲醇④氢氧化钠⑤磷酸二氢钾⑥磷酸⑦盐酸溶液取盐酸4.2ml,加水至1000ml,即得。
⑧o.5mol/L磷酸二氢钾溶液取磷酸二氢钾68g,加水800ml溶解并用磷酸调pH值至3.O,用水稀释至1000ml,即得。
⑨0.05mol几磷酸二氢钾溶液取磷酸二氢钾6.88,加水800ml溶解并用磷酸调pH 值至3.0,用水稀释至1000mi,即得。
a.氢氧化钠溶液取氢氧化钠48,加水使溶解成100mi,即得。
b.盐酸克伦特罗对照品储备液(1mg/mi) 准确称取28.3mg盐酸克伦特罗对照晶至25ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至25ml,一20~C以下保存,有效期1年。
⑩盐酸克伦特罗对照品工作液(10ttg/mi) 取lmg/mi储备液o.5ml到50mi量瓶中,加水至50mi,2~8~C保存,有效期1个月。
⑾盐酸克伦特罗对照溶液(100ng/m1) 取1(ug/m1工作液o.5ml到:50mi量瓶中水至50mi,2~8~C保存,有效期1个月。
瘦肉精监测工作原理
瘦肉精监测是通过检测样品中的瘦肉精残留量来判断是否存在瘦肉精的工作。
其原理主要包括样品处理、提取、纯化和检测。
1. 样品处理:将待测样品制成均匀的混合物,确保样品的代表性。
2. 提取:利用适当的提取试剂将样品中的瘦肉精提取出来。
常用的提取试剂包括甲醇、乙腈等。
提取的过程需要充分混合和振荡,以保证瘦肉精的充分提取。
3. 纯化:提取的混合液经过一系列纯化步骤,去除干扰物质,以获得纯净的瘦肉精溶液。
纯化的方法包括减压蒸馏、液液萃取等。
4. 检测:利用高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)或气
相色谱-质谱联用技术(GC-MS)等方法对样品中的瘦肉精进
行定性和定量分析。
这些技术可以测定瘦肉精在样品中的浓度,一般以毫克/千克或微克/千克为单位。
通过以上步骤,可以准确地检测样品中的瘦肉精残留水平,以判断是否存在瘦肉精。
生猪宰前瘦肉精检测方案一、引言瘦肉精(瘦肉加速素)是一种用于促进猪体育肉瘦肉率的药物。
然而,过量使用瘦肉精可能对人体健康造成威胁。
为了保证消费者的食品安全,对生猪宰前进行瘦肉精检测是非常必要的。
本文将介绍一种适用于生猪宰前瘦肉精检测的方案。
二、样品采集1. 样品来源:样品来自于养殖场的生猪。
在选择样品时,应根据养殖场的规模和猪群数量确定样品数量和采样方法。
2. 采样方法:采样人员应戴好口罩和手套,以避免样品的污染。
选择新鲜的猪肉样品,通过剖腹解剖的方式采集肌肉组织,并将样品放入密封袋中。
根据实际需要,可以采集多个部位的样品,以增加检测的准确性。
3. 样品保存:样品应立即送往实验室,并在运输过程中保持冷藏状态,以保证样品的稳定性。
三、瘦肉精检测方法1. 瘦肉精检测方法的选择:(1)免疫试剂法:利用瘦肉精的免疫原性质,通过相应的抗原抗体反应来检测瘦肉精的含量。
此方法简便快捷,适用于大量样品的快速筛查。
(2)液相色谱-质谱联用法:利用液相色谱将瘦肉精从样品中分离出来,然后通过质谱的检测来确定瘦肉精的含量。
此方法准确度高,适用于瘦肉精含量的精确测定。
(3)其他方法:如快速检测试纸法、核酸适体酶联免疫吸附测定法等,都可以根据实际需要进行选择。
2. 检测操作流程:(1)样品制备:将采集的样品进行样品提取,根据实际检测方法的要求进行样品的预处理。
(2)试剂配置:根据具体的检测方法,配制相应的试剂和缓冲液。
(3)实验操作:按照检测方法的要求,将样品和试剂按照一定比例混合,进行相应的反应与测定。
(4)数据处理:根据检测结果,采用相应的统计学方法进行数据处理,得出瘦肉精的含量。
四、质量控制1. 样品质量控制:在检测过程中,应选取一定数量的样品进行复测或者与其他实验室进行对比,以保证检测结果的准确性和可靠性。
2. 实验室质量控制:实验室应建立完善的质控制度,包括实验设备的校准、试剂的质量控制和实验操作的规范化等。
并且应定期进行内外质量评价,确保实验室的检测能力和水平。
瘦肉精的性质特点及危害检测瘦肉精(Ractopamine),是一种被广泛用于家禽、猪和牛等畜禽养殖中的生长激素类药物。
它能够促进动物生长,提高肌肉的比例,增加肉类产量和肌肉的质量。
然而,瘦肉精的使用也引发了一系列的争议和风险,导致人们对其性质特点及危害进行深入研究和严格的监测。
一、瘦肉精的性质特点1. 化学性质:瘦肉精属于β-受体激动剂,化学名称为4-羟基-3-甲氧基苯丙酸苯丙胺盐酸盐。
它主要通过活化β2-肾上腺素能受体,刺激肌肉生长并抑制脂肪堆积。
2. 使用特点:瘦肉精在畜禽养殖过程中主要添加于饲料中,通过进食被动物摄入。
它能够促进肌肉生长,减少脂肪含量,提高肉类质量。
然而,合理使用剂量能够改善生产效益,但过量或滥用可能带来潜在的风险。
二、瘦肉精的危害1. 食品安全问题:瑞典有关瘦肉精的研究发现,摄入含有瘦肉精的肉类可能会对人体健康造成潜在风险,如心脏疾病、神经系统问题等。
尤其是某些人群(如孕妇、老年人、儿童)对于瘦肉精摄入可能更为敏感。
2. 法律法规限制:由于瘦肉精使用存在风险,许多国家和地区已经实施了严格的限制和监管措施,禁止或者严格限制将瘦肉精应用于食品生产。
这是为了保护公众的健康和维护食品安全。
三、瘦肉精的危害检测1. 检测方法:为了确保食品安全,各国相关机构开发出了不同的瘦肉精检测方法,包括高效液相色谱法(HPLC)、质谱联用技术(MS)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。
这些方法能够准确、快速地检测出瘦肉精的残留量。
2. 监测体系:为了保障瘦肉精的监测工作能够有效进行,各国建立了完善的瘦肉精残留监测体系。
这些体系包括监测网络的建立、制定标准和限值、加强对兽药生产和使用的监管等。
只有通过全面有效的监测,才能及时发现和控制瘦肉精的危害。
四、对瘦肉精使用的管理与控制1. 严禁滥用:各国要采取严格的管理措施,对瘦肉精的滥用进行监督和打击,加强兽药的生产、销售和使用环节的监管。
通过严禁滥用,可以减少瘦肉精对人体健康的危害。
瘦肉精检测原理及操作步骤[5篇范文]第一篇:瘦肉精检测原理及操作步骤瘦肉精检测原理及操作步骤?时间:2011-03-22 来源:作者:一、测定原理“瘦肉精”克仑特罗竞争酶标免疫检测方法快速测定的基础是抗原抗体反应。
酶联板的微孔包被有针对兔抗克仑特罗特异性抗体的羊抗体(第二抗体)。
加入兔抗克仑特罗特异性抗体(第一抗体)与第二抗体结合而被固定,洗涤后加入标准液或样品溶液与酶结合物(酶标记抗原),标准液或样品中的游离抗原与酶标抗原竞争兔抗克仑特罗特异性抗体上有限的结合位点。
通过洗涤除去没有与特异性抗体结合的酶标抗原,加入酶基质(过氧化脲)和发色剂(四甲基联苯胺)并孵育,结合到板上的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的底物。
加酸终止反应后,颜色由蓝色转变为黄色。
在单波长450 nm处测吸光度,吸收光强度与样品中的克仑特罗浓度成反比。
二、试剂盒的组成每个盒中(包括标准分析孔)材料如下:(1)1×96孔板(12排×8孔),包被有第二抗体(兔IgG抗体);(2)6个标准液(300ul/瓶)为克仑特罗水溶液。
浓度分别为0 ng/kg、100 ng/kg、300 ng/kg、900 ng/kg、2700 ng/kg、8100 ng/kg;(3)1个克仑特罗过氧物酶标记物浓缩液12 ml(红色帽);(4)1个克仑特罗抗体浓缩液12 ml(黑色帽);(5)1个酶基质/发色剂11 ml(蓝色帽);(6)1个反应停止液,1 mol/L硫酸14 ml(黄色帽);(7)1个缓冲液25 ml,酶标记物及抗体浓缩液稀释用。
三、试验材料1、设备微孔板酶标仪(450 nm)、均质器、冷冻离心机、离心管(50 ml)、微量可调移液器(单道、八道)、RIDAC18柱、滤纸(0.45μm)。
2、试剂甲醇(分析纯、100%)、50 mmol/LHCL、10 mmol/LHCL、50 mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.0)、500 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.0)、1 mol/LNaOH。
畜 产 品 加 工中国畜牧兽医文摘 2011年 27卷 第3期2.3 料重比每增重1 kg体重平均消耗混合料2.85 kg。
其中1组2.93 kg,2组2.84 kg,3组2.64 kg,对照组3.06 kg。
详见表4。
3 小结与讨论(1)为检验无花果蛋白酶对饲料蛋白质利用率的影响,采用了统一营养标准,中等蛋白质水平的饲喂试验。
从结果来看,中等营养水平前期粗蛋白17%,中期粗蛋白16%,后期粗蛋白15%的营养标准下,仍能获得较好的饲料报酬和增长速度。
全期料重比1组2.93,2组2.84,3组2.64,对照组3.06。
日增重1组632 g,2组666 g,3组763 g,对照组628 g。
证明无花果蛋白酶在中等蛋白水平的情况下,对育肥猪饲料中的蛋白质有效利用率提高明显,同时也能获得较好的生长速度和饲料报酬。
在育肥猪生产中,饲料内添加无花果蛋白粉有着较高的经济效益。
(2)饲料中添加无花果蛋白酶2%、3%和4%的不同比例,经试验4%的效果最好,料重比2.64∶1,对照组3.06∶1,提高15.90%。
日增重763 g,对照组628 g,提高21%。
证明无花果蛋白酶在饲料中的比例4%最好,能获得较好的饲料报酬和增长速度,3%和2%次之。
(3)在整个试验过程中,试验组整体发育良好,皮毛光亮,精神状态正常。
消化道疾病1组发生4头次,2组2头次,3组没有发病。
证明无花果蛋白酶对育肥猪消化道疾病有较好的预防效果。
4%的比例最佳,3%次之。
(4)从本次试验设计来看,4%的无花果蛋白酶比例最好。
5%、6%等比例的饲喂效果如何?没能进行验证,有待于继续进行试验研究。
瘦肉精,是指能够促进瘦肉生长的药物添加剂。
任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。
目前,能够实现这种功能的物质是一类叫做β-兴奋剂(β-agonist)的药物,比如在中国造成中毒的克化特罗(clenbuterol)和美国允许使用的莱克多巴胺或译为雷托巴胺(Ractopamine)。
瘦肉精快速检测方法瘦肉精是一种禁用的瘦肉类激素,它被广泛用于畜禽饲料中,以促进动物生长,增加肌肉含量。
然而,瘦肉精对人体健康有着严重的危害,长期摄入可能导致内分泌紊乱、免疫系统受损、甚至引发癌症等严重后果。
因此,瘦肉精的快速检测方法显得尤为重要。
目前,瘦肉精的快速检测方法主要包括生物传感器法、免疫分析法和色谱法等。
其中,生物传感器法是一种利用生物分子对瘦肉精进行特异性识别的方法,具有快速、灵敏、简便的特点。
免疫分析法则是通过特定抗体与瘦肉精结合产生免疫反应,再通过测定反应产物的含量来检测瘦肉精的方法。
而色谱法则是通过色谱柱将样品中的瘦肉精分离出来,再通过检测器进行定量分析。
在实际操作中,我们可以根据实际情况选择合适的检测方法。
生物传感器法适用于快速检测和现场监测,操作简便,适用于大规模的检测。
免疫分析法则具有高灵敏度和高特异性,适用于对瘦肉精含量要求较高的检测。
而色谱法则是一种准确性较高的检测方法,适用于实验室内对瘦肉精进行精准检测。
除了选择合适的检测方法外,我们还需要注意样品的处理和准备。
在进行瘦肉精检测时,样品的提取和前处理对检测结果有着至关重要的影响。
正确的样品前处理可以提高检测的准确性和灵敏度,而不当的前处理则可能导致检测结果失真。
因此,在进行检测之前,我们需要对样品进行适当的处理,以确保检测结果的准确性和可靠性。
总的来说,瘦肉精的快速检测方法是保障食品安全的重要手段。
通过选择合适的检测方法,正确处理样品,并严格按照检测操作规程进行操作,我们可以有效地检测出瘦肉精的含量,保障食品的安全。
希望各界人士能够重视瘦肉精的检测工作,共同为食品安全做出贡献。
羊瘦肉精检测操作方法
羊瘦肉精检测的操作方法如下:
1. 准备样品:从待检测的羊瘦肉中取一定的样品,尽量避免与外界环境接触。
2. 制备提取液:根据具体的检测方法,制备适当的提取液。
常用的提取液包括酸性溶液、碱性溶液等。
3. 样品提取:将样品放入提取液中,用适当的方法进行提取。
常见的提取方法包括液液萃取、固相萃取等。
4. 过滤:将提取液过滤,去除杂质和固体颗粒。
5. 清洗:对提取液进行适当的清洗处理,以去除干扰物质。
6. 浓缩:将清洗后的提取液进行浓缩处理,以增加对目标物质的检测灵敏度。
7. 检测方法选择:根据具体需要,选择适当的检测方法进行羊瘦肉中瘦肉精的检测。
常见的检测方法包括高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)等。
8. 样品分析:将浓缩后的样品进行分析,记录分析结果。
需要注意的是,瘦肉精是一种不合法的添加物,对人体健康有害。
为了确保食品安全,应该选择可靠的实验室或机构进行检测,遵循相关的国家标准和操作规范。
2023年生猪宰前瘦肉精检测方案引言近年来,瘦肉精作为一种非法添加剂,已经成为食品安全领域的一个重要问题。
为了保障消费者的健康权益,我们需要建立一套有效的瘦肉精检测方案。
本文将针对2023年生猪宰前瘦肉精检测提出一套2000字的方案。
一、实验室设备和仪器为了进行瘦肉精检测,我们需要配备先进的实验室设备和仪器。
以下是推荐的设备和仪器列表:1. 高效液相色谱仪(HPLC):用于分离、检测和定量分析瘦肉精。
2. 质谱仪:用于确定瘦肉精分子的质量和结构。
3. 光谱仪:用于测量各种化合物的吸收、发射和散射光谱。
4. 离子色谱仪:用于分离、测定和分析离子化合物。
5. 聚合酶链式反应仪(PCR):用于检测和扩增DNA序列。
6. 红外光谱仪:用于分析样品中分子的振动、转动和电子结构。
二、样品采集与准备在进行瘦肉精检测之前,我们需要收集猪肉样品,并进行适当的准备。
以下是样品采集与准备的步骤:1. 选择代表性样本:从不同猪圈中随机选择一定数量的猪肉样本。
2. 样品标识和记录:对每个样品进行标识,并记录样品的来源和采样日期。
3. 样品取样:从每个样品中取样,并确保样品的均匀性。
4. 样品保存:将样品放入密封的容器中,并存放在恒温环境下,以防止样品的污染和腐败。
5. 样品处理:根据需要,对样品进行处理,如去除骨头、皮肤和脂肪等。
三、瘦肉精检测方法为了准确检测瘦肉精,我们将采用多种方法进行检测,并使用不同的仪器和技术进行确认。
以下是一些常用的瘦肉精检测方法:1. 高效液相色谱法:利用HPLC分离和检测瘦肉精。
该方法具有高效、准确、快速的优点。
2. 质谱法:通过质谱仪对瘦肉精样品进行分析,检测瘦肉精的质量和结构。
3. 光谱法:利用光谱仪测量瘦肉精样品的吸收、发射和散射光谱,从而确定瘦肉精的存在和浓度。
4. 离子色谱法:利用离子色谱仪对瘦肉精样品进行分离、测定和分析,以检测瘦肉精的存在。
5. PCR法:通过PCR仪器对瘦肉精样品中的DNA序列进行扩增和检测,以确定瘦肉精的存在和浓度。
瘦肉精快速检测标准一、检测方法本标准采用酶联免疫吸附法(ELISA)快速检测瘦肉精。
该方法是一种灵敏、快速、简便的检测方法,适用于批量样品的快速检测。
二、检测样品本标准适用于肉类、肝脏及肾脏等组织中的瘦肉精残留量检测。
三、样品处理1.将待检测样品切成小块状,称取5g放入研磨器中研磨至匀浆状。
2.将研磨后的样品转移至10ml离心管中,加入5ml乙酸乙酯充分振摇,静止分层后收集上层乙酸乙酯相。
3.重复萃取一次,合并两次收集的乙酸乙酯相。
4.将合并后的乙酸乙酯相通过无水硫酸钠漏斗过滤,收集滤液。
5.将滤液旋转蒸发至近干,用乙酸乙酯定容至1ml,备用。
四、试剂准备1.酶联免疫吸附试剂盒:包括酶标板、抗体、酶标二抗等。
2.乙酸乙酯:分析纯。
3.无水硫酸钠:分析纯。
4.实验用水:蒸馏水或去离子水。
五、实验操作1.按照酶联免疫吸附试剂盒说明书,将抗体和酶标二抗用适量乙酸乙酯溶解并分别加入酶标板中,设置空白孔作为对照。
2.将处理好的样品溶液加入酶标板中,同时设置阳性对照孔。
3.封闭酶标板孔,室温孵育一定时间,一般建议30分钟至1小时。
4.洗板后加入显色剂,继续孵育一定时间,一般建议15-30分钟。
5.观察颜色变化并记录数据。
六、结果判定根据酶标板上的颜色变化和数据记录,进行结果判定。
一般情况下,样品溶液的OD值小于阳性对照孔OD值的50%时判定为阴性(-),样品溶液的OD值大于阳性对照孔OD值的50%时判定为阳性(+)。
对于可疑阳性样品,可采用其他方法进行确证。
七、注意事项1.本标准仅适用于肉类、肝脏及肾脏等组织中瘦肉精残留量的快速检测,不能作为最终判定依据。
对于阳性样品,应采用其他方法进行确证。
2.酶联免疫吸附法是一种灵敏、快速、简便的检测方法,但存在假阳性或假阴性结果的可能。
因此,在批量检测时,应同时设置阳性对照孔和阴性对照孔进行比对,以提高检测结果的准确性。
瘦肉精快速检测方法简介瘦肉精是一类动物用药,有数种药物被称为瘦肉精,例如莱克多巴胺(Ractopamine)及克伦特罗(Clenbuterol)等。
将瘦肉精添加于饲料中,可以增加动物的瘦肉量、减少饲料使用、使肉品提早上市、降低成本。
瘦肉精,是一种非常廉价的药品,对于减少脂肪增加瘦肉作用非常好。
瘦肉精让猪的单位经济价值提升不少,但它有很危险的副作用,其不良反应主要有:全身乏力、头痛、心悸、心跳加速、手指震颤。
此外,还可引起代谢紊乱、血钾降低。
长期食用会对心血管造成不良影响,会诱发恶性肿瘤,上世纪八十年代,美国研究人员意外发现一类物质可促进生长、提高瘦肉率及达到减少脂肪的效果,于是此类药物被命名为“促生长剂”,被国际畜禽专家广泛研究,这就是瘦肉精,上此后瘦肉精被作为一种新型科技成果引入中国,并被推广到饲料产业中,90年代初有多个饲料企业由于此类饲料而发展壮大。
直到1997年,农业部正式下文严禁此类激素在饲料和畜牧生产中使用,但非法使用一直屡禁不止,1998年香港出现食用内陆猪内脏而引发的瘦肉精中毒;2006年上海发生多点多区的瘦肉精中毒;2009年广州出现多人瘦肉精中毒。
今年出现健美猪事件。
如果饲料中含有瘦肉精,动物就会进行吸收,主要存在于动物组织和内脏中,肝脏中残留最多,和动物的种属无关。
此类物质属于比较稳定的化学物质,肉类加工的处理方法无法有效地起到破坏和消除此类物质的作用,因此如原料有残留,则肉制品中还会含有残留。
所以检测瘦肉精还得从源头把控。
目前检测瘦肉精的方法有以下几种,胶体金快检卡是最快速简单的一种方法,适用于多种流通领域和各种实验室方面名称检测费用检测步骤检出限检测时间检测特点液质联用/气质联用很高复杂高,尿液、肉类大约0.5ppb(μg/kg),饲料10ppb长一般由检测机构实施,作为确证方法高效液相色谱法高复杂高,尿液、肉类大约0.5ppb(μg/kg)长一般由检测机构实施,作为确证方法酶联免疫试剂盒便宜较复杂高,尿液0.1ppb(μg/kg),肉类0.3- 0.5ppb,饲料5ppb较长用于大量筛查胶体金快检卡便宜简单略低,尿液约3ppb;肉类1ppb;饲料5-10ppb短用于大量筛查,但需要确证方法一般企业会采用自己检测与外部有资质的机构测试相结合,因为样品数量巨大,如果均外部测试一是费用非常高,二是送样、检测、获得结果的周期长,效率低,无法满足实际应用的需求,所以自检也是顺应企业高效节约的宗旨的,对自己用检测出值得怀疑的样本再送检测机构检测。
一、测定原理“瘦肉精”克仑特罗竞争酶标免疫检测方法快速测定的基础是抗原抗体反应。
酶联板的微孔包被有针对兔抗克仑特罗特异性抗体的羊抗体(第二抗体)。
加入兔抗克仑特罗特异性抗体(第一抗体)与第二抗体结合而被固定,洗涤后加入标准液或样品溶液与酶结合物(酶标记抗原),标准液或样品中的游离抗原与酶标抗原竞争兔抗克仑特罗特异性抗体上有限的结合位点。
通过洗涤除去没有与特异性抗体结合的酶标抗原,加入酶基质(过氧化脲)和发色剂(四甲基联苯胺)并孵育,结合到板上的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的底物。
加酸终止反应后,颜色由蓝色转变为黄色。
在单波长450 nm处测吸光度,吸收光强度与样品中的克仑特罗浓度成反比。
二、试剂盒的组成每个盒中(包括标准分析孔)材料如下:(1)1×96孔板(12排×8孔),包被有第二抗体(兔IgG抗体);(2)6个标准液(300ul/瓶)为克仑特罗水溶液。
浓度分别为0 ng/kg、100 ng/kg、300 ng/kg、900 ng/kg、2700 ng/kg、8100 ng/kg;(3)1个克仑特罗过氧物酶标记物浓缩液12 ml(红色帽);(4)1个克仑特罗抗体浓缩液12 ml(黑色帽);(5)1个酶基质/发色剂11 ml(蓝色帽);(6)1个反应停止液,1 mol/L硫酸14 ml (黄色帽);(7)1个缓冲液25 ml,酶标记物及抗体浓缩液稀释用。
三、试验材料1、设备微孔板酶标仪(450 nm)、均质器、冷冻离心机、离心管(50 ml)、微量可调移液器(单道、八道)、RIDAC18柱、滤纸(0.45μm)。
2、试剂甲醇(分析纯、100%)、50 mmol/LHCL、10 mmol/LHCL、50 mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.0)、500 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.0)、1 mol/LNaOH。
四、储存条件试剂盒保存于2-8℃,不要冷冻。
不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与干燥剂一起重新密封。
瘦肉精快速检测卡操作步骤
一、【检测原理】
本试纸采用竞争抑制免疫层析技术的原理来测定动物尿液、组织和饲料中的盐酸克仑特罗。
试剂含有被预先固定于膜上检测带(T )的盐酸克仑特罗偶联物和被胶体金标记的抗盐酸克仑特罗单克隆抗体。
检测时样品和标记抗体竞争结合偶联物。
检测限为3ng/ml(3ppb )。
二、【样品制备】
肉:装入大约4克碎的肉样本(肉泥)于离心管中(酱猪牛肉加2ml 水或PBS ),盖紧管盖,在80℃左右的水浴锅中水浴10 分钟;吸取煮出的溶液到
1.5ml 的离心管中。
如有明显黄色浑浊请离心(3000rpm,5min ),取上清检测。
如果检测牛肉请吸出肉汤离心(3000rpm,5min,取上清检测。
三、【操作步骤】
1. 在进行测试前先仔细阅读使用说明书,使用前将本品和待检样本溶液恢复至室温。
2. 从原包装中取出试剂,打开后平放在桌面上,请在1小时内尽快使用。
3. 吸取待检样品溶液,缓慢滴加80~100μl(约2~3滴)于加样孔中,加样后开始计时。
4. 在5分钟内读取结果,超过5分钟的结果判读无效。
四、【结果判定】
阳性:位置C 显示出红色条带,位置T 无条带或颜色非常模糊时判为阳性。
阴性:位置C 显示出红色条带,位置T 同时出现红色条带时,判为阴性。
无效:
位置C 不显示出红色条带,则无论位置T 显示出红色条带与否,该试纸卡均判为无效。
【贮存及有效期】
冷藏,忌冷冻,有效期12个月。
【注意事项】
1. 请按照操作步骤进行测试,操作时请勿触摸试纸显示区。
2. 如购买时发现过期,破损,污染,无效的产品,请到购买处更换。
3. 本品为一次性产品,请勿重复使用。
4. 出现阳性结果,建议用本卡复查一次。
5. 自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。
6. 由于样品(尿和饲料)的差异,有的检测线可能偏淡或偏暗,但只要出现条带,就可判定为阴性结果。
7. 若需直接检测标准品,请用PBS 或阴性样品配制。