粗脂肪的提取和定量测定--(精)

11/4/2019
一、油重法测粗脂肪含量
2．原理
它是利用溶剂的回流和虹吸原理， 对固体混合物中所需成分进行连续 提取。当抽提管中回流下的溶剂的 液面超过索氏提取器的虹吸管时， 抽提管中的溶剂流回圆底烧瓶内， 即发生虹吸。随温度升高，再次回 流开始，每次虹吸前，固体物质都 能被纯的热溶剂所萃取,溶剂反复利 用，缩短了提取时间，所以萃取效 率较高。
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一、油重法测粗脂肪含量
3. 试剂
无水乙醚或石油醚（分析纯）
4. 仪器设备
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一、油重法测粗脂肪含量
4．测定步骤
（1）索氏提取器应干燥无水。抽提瓶(内有沸石数粒)在 105±2℃烘箱(4.5)中烘干60min，干燥器中冷却30min，称 重。再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于 0.0008g为恒重。
一、油重法测粗脂肪含量
5．测定结果的计算
计算见下式： 粗脂肪(％)＝〔(m2－m1)／m〕×100 式中：m ——风干试样重量，g；
m1——已恒重的抽提瓶重量，g； m2——已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，g。
6．重复性
每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果。 粗脂肪含量在10％以上(含10％)允许相对偏差为3％。 粗脂肪含量在10％以下时，允许相对偏差为5％。
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一、油重法测粗脂肪含量
1．适用范围
适用于多种单一饲料、混合 饲料、浓缩饲料和配合饲料的 分析。
2．原理
索氏（Soxhlet）脂肪提取器 中用乙醚反复浸提饲料样品， 使其中脂类物质溶于乙醚，并 收集于盛醚瓶中，然后将所有 的浸提溶剂加以蒸发回收，直 接称量盛醚瓶中的脂类物质重， 即可计算出饲料样品中的粗脂 肪含量。

索氏提取法
利用溶剂回流和虹吸原理，使固体物 质连续不断地被纯溶剂萃取，直到有 效成分几乎全部被提取完。
使用比重瓶-重量法进行测定
比重瓶法
通过测量一定体积的样品在空气中和 水中的重量，计算出样品的比重，再 根据比重和密度之间的关系，推算出 样品的粗脂肪含量。
重量法
将样品中的粗脂肪与其他组分分离， 然后测量粗脂肪的质量，计算粗脂肪 的含量。
粗脂肪的重要性
粗脂肪是食品中重要的营养成分之一，对于食品的口感、风味和稳定性起着重 要作用。同时，粗脂肪含量的多少也直接影响着食品的质量和营养价值。
粗脂肪提取的方法
索氏提取法
索氏提取法是一种常用的粗脂肪提取方法，其原理是利用有机溶剂在回流和冷凝 的作用下重复萃取样品，将粗脂肪从样品中分离出来。
其他提取方法
药物代谢研究
通过索氏提取法，可以研 究药物在体内的代谢过程 ，了解药物的作用机制和 效果。
医学研究
在医学研究中，索氏提取 法用于提取和测定生物样 品中的粗脂肪，为医学研 究提供数据支持。
索氏提取法的改进和展望
自动化与智能化
未来索氏提取法的发展方向可能 是自动化和智能化，提高提取效
率，减少人为误差。
索氏提取法的特点
索氏提取法具有操作简便、准确度高、重现性好等优点，同 时对样品的处理量较大，适用于实验室和工业生产中大量样 品的处理。此外，索氏提取法还可以根据需要选择不同的溶 剂进行提取。
02
索氏提取法的操作流程
实验材料和仪器的准备
材料
样品（粗脂肪含量较高的物质） 、无水乙醚或石油醚（分析纯） 。
数据处理
数据处理是实验结果分析的重要环节，需要对实验数据进行清洗、整理和计算，以得出可靠的结论。

实验三粗脂肪的提取和定量测定—索氏提取法一、实验目的1、掌握粗脂肪的提取方法，熟悉索氏提取法的操作。

2、学习如何测定样品的粗脂肪含量。

3、加深对生物大分子的认识，了解脂肪在生物体中的重要性。

二、实验原理1、粗脂肪提取脂肪具有亲油性，可以被有机溶剂提取。

索氏提取法是一种常用的粗脂肪提取方法。

在索氏提取法中，采用乙醚/醋酸乙酯（1：1）的溶液作为提取剂。

样品加入一定量提取剂中，经过适当的震荡、离心、蒸发浓缩和干燥等步骤，得到脂肪提取物。

将脂肪提取物加入硫酸中，经过酸解、加热、冷却和干燥等步骤后，得到脂肪酸甲酯。

通过气相色谱仪测定脂肪酸甲酯的含量，进而计算出样品中粗脂肪的含量。

三、实验操作（1）取适量已干燥样品，称重，记录质量。

（2）将样品放入索氏提取器的提取篮中，加入10mL乙醚/醋酸乙酯（1：1）溶液。

（3）起动提取器，以回流的方式进行提取，搅拌速度要适中，避免溅出溶液。

（4）提取30分钟后关闭提取器，将提取篮取出，用5mL提取液将其冲洗，并将提取篮放置于洗涤瓶上，使其流干。

（5）将提取篮置于已预热至100℃的蒸发皿内，用热风器将乙醚/醋酸乙酯挥发干燥。

（6）将蒸发皿置于70℃恒温箱中干燥至常重，取出，并记录质量。

（2）将粗脂肪提取物转移到20mL玻璃瓶中，加入2mL浓硫酸。

（3）在冷水浴上，加热约2小时，待样品变成棕色液体后取出，冷却。

（4）加入1mL冰醋酸冷却，混匀。

（5）加入0.2g氯化钠，混匀。

（6）转移待测样品到10mL移液管中。

（7）在10mL皮囊中，加入4mL正己烷，混匀。

（8）离心5分钟，取上层正己烷，并转移到气相色谱管中。

（9）气相色谱条件：柱：DB-23；FID检测器；柱温：120℃；检测器温：250℃。

（10）记录脂肪酸甲酯的含量，并计算出样品中粗脂肪的含量。

四、实验注意事项1、进行实验前，将索氏提取器和蒸发皿等器皿用乙醚或甲醇洗涤，并在烘箱中干燥。

2、在进行气相色谱柱装载前，必须将固定相和管柱内壁进行彻底清洗，以免污染样品。

提取后提取瓶的重量－提取前提取瓶的重量 粗脂肪＝ —————————————————— 样品重量
五、注意事项
本法使用石油醚（沸程 30 ～ 60 ℃）故加 热时不能用明火。 注意抽提瓶底部要与水位接触，防止烧坏 电加热器。 提升冷凝管时，必须先打开箱盖，防止打 破冷凝管
六、思考题
本实验装置磨口处为什么不能涂抹凡士林 或真空脂？ 索氏提取法提取的为什么是粗脂肪 ? 做好本实验应注意哪些事项 ?
二、实验原理
本法为重量法，用脂肪溶剂将脂肪提出后 进行称量。该法适用于固体和液体样品。 本法不能提取出样品中结合状态的脂类， 故此法又称为游离脂类定量测定法。
三、材料、仪器与试剂 材料、
1、实验材料 芝麻，油菜籽等。 2、仪器设备 索氏提取器，烧杯，电热恒温箱，干燥器， 脱脂滤纸，镊子，分析天平，恒温水浴， 脱脂棉，实验用粉碎机，玻璃棒。 3、试剂 石油醚（化学纯，沸程 30 ～ 60 ℃）。
索 氏 脂 肪 提 取 器
1. 浸提管 2. 通气管 3. 虹吸管 4. 小烧瓶 5. 冷凝管
四、实验步骤
实验前准备 样品准备：种子洗净、晾干，放入80－ 样品准备：种子洗净、晾干，放入80－ 100℃ 烘箱中烘4 100℃ 烘箱中烘4小时，取出移入干燥缸中， 待冷却后备用。 提取器准备：洗净索氏提取器，在105℃ 提取器准备：洗净索氏提取器，在105℃烘 箱内烘干1 箱内烘干1小时。
四、实验步骤
1、样品包扎 准确称取2 准确称取2－4g 样品，置于研钵中磨细，将研 好的样品放在脱脂滤纸上，并用脱脂棉擦净研钵， 将其与样品一并用脱脂滤纸包住，用丝线扎好， 勿让样品漏出。 2、样品装入提取管 将滤纸包放入索氏提取器的提取管内，最后再 用石油醚洗净研钵后倒入提取管内。注意勿使纸 包内样品高于提取管实验目的