沉渣分析显微镜操作规程

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沉渣分析显微镜操作规程1.检验目的:规范尿液沉渣操作,了解尿液有形成分的量。

2.方法原理:对尿液离心的沉渣用显微镜进行放大,通过操作人员进行辨认识别,以书面报告的形式告知临床医生。

3.方法认可4.标本类型:4.1.晨尿:适用于病房病人尿液常规检查4.2.随机尿:适用于门诊病人尿液常规检查4.3.尿液标本要求新鲜,检测要求在2小时内完成5.仪器和器材5.1仪器:离心机、显微镜。

5.2器材:专用离心试管、载玻片6.校准程序:定期对专业技术人员进行学习培训,考核上岗,保证检测结果的准确。

7.操作步骤:7.1 取待检混匀尿液10ml 于刻度离心管中,1500r/min 离心5min ,弃上清液,保留0.2ml 残留液备用。

7.2 将沉淀物混匀后,取50μl 滴人载玻片上,用18mm ×18mm (或22mm ×22mm)盖玻片覆盖后镜检。

先用低倍镜(10×10)观察20 个低倍视野(LP)的管型数。

再用高倍镜(10 ×40)计数10 个高倍视野(HP)的细胞数。

8.干扰因素:9.结果判定9.1报告形式细胞:以10 个视野中的最少数到最多数(××~××个细胞/HP)报告。

管型:以20 个视野的平均数(××个/LP)报告。

结晶:以每一高倍视野+、++、+++、++++等的半定量方式报告。

9.2注意事项9.2.1美国NCCLS 文件推荐使用一次性尿沉渣专用检测板,并以“××/μl”形式报告。

有条件的实验室应逐步实行尿沉渣专用检测板计数,并以“××/μl”的形式报告。

9.2.2无一次性尿沉渣专用检测板的实验室,可将显微镜检查结果换算为“××/μl”形式报告,其换算公式为:××/μl=××个/LP ×1350 (或2016)。

10.参考值红细胞:离心尿液0 ~2/HP白细胞:男性0 ~3/HP ,女性0 ~5/HP透明管型:0-1/LP上皮细胞:女性较多见,男性偶见。

11.警告值沉渣内查见腊样管型,肾衰管型,提示严重的肾功能衰竭。

12.医学解释12.1.细胞能在尿液中检测到的细胞有红细胞、白细胞、上皮细胞和精子等,正常尿液中除了上皮细胞之外只能检到少许白细胞,而尿中细胞数量不同程度增加均有其相应的临床意义。

12.1.1 红细胞:高倍镜下红细胞为淡黄色,呈中央凹陷的盘片状。

红细胞随尿液渗透浓度的改变而变形,低渗透浓度时细胞形态不一;高渗透浓度时细胞皱缩成锯齿形。

另外,红细胞的来源不同,其形态也不同,非肾性血尿中红细胞呈均一性且大多形态正常;而肾性血尿中则出现非均一性的变形细胞;两者兼有者称为混合性血尿(详见本章第六节尿红细胞形态检验)。

正常尿液仅在高倍镜下偶见红细胞(尿液离心后约0 ~3/HP),尿中红细胞增多称为血尿,可分为镜下血尿和肉眼血尿。

泌尿系统各部位的炎症,急、慢性肾小球肾炎,肿瘤,结石,结核,创伤,先天畸形及肾移植后排异反应均可导致不同程度的血尿。

某些全身性疾病如血小板减少性紫癜、血友病、弥散性血管内凝血、红斑狼疮等均可发生血尿。

前列腺炎、精囊炎、盆腔炎也可引起血尿。

12.1.2白细胞:正常尿液经离心后白细胞男性0 ~3/HP ,女性0 ~5/HP ,除肾移植后排异反应及淋巴细胞白血病可见淋巴细胞外,一般均为中性粒细胞。

尿液中白细胞比红细胞体积大,有核,但不一定能看清楚,炎症时白细胞发生变性或死亡,或为不规则、结构不清、成堆、含颗粒较多的脓细胞,其意义与白细胞相同。

白细胞增多是泌尿系统炎症的重要指标,细胞数量与炎症程度相关,尤其是细菌性感染。

如急、慢性尿路感染,前列腺炎,结核,结石,肿瘤并发感染。

女性阴道炎、宫颈炎、附件炎时分泌物进入尿中,也可导致尿白细胞增多。

12.1.3上皮细胞:由泌尿道各段上皮脱落混入尿中,这些部位病变时,尿液中上皮细胞增多。

12.1.3.1鳞状上皮细胞:大而扁平,呈多角形,有小而明显的核。

女性尿中可成片出现,无临床意义;如同时伴有大量的白细胞,则可能为泌尿生殖道炎症。

12.1.3.2移行上皮细胞:随脱落部位不同,有多种形态,如尾状上皮,含一个圆形或椭圆形的核,肾盂、输尿管炎症时可脱落。

12.1.3.3肾小管上皮细胞:来自肾小管,比中性粒细胞大1.5 ~2.0 倍,含一个较大的圆形核,胞质中有小空泡、颗粒或脂肪小滴,正常人尿液中少见,肾炎或先天性肾炎时可出现。

12.1.4 肿瘤细胞:泌尿系统肿瘤(主要是膀胱肿瘤)患者出现血尿的同时尿中会检查到脱落的肿瘤细胞。

其形态不同于上皮细胞和白细胞。

为了提高肿瘤细胞检出率,可用甲醛作防腐剂,留取24h 尿沉渣浓集后检查。

12.2.管型由尿液蛋白在肾小管、集合管沉淀凝固而致,呈圆柱状结构。

根据其形状和内含物不同又可分成透明管型、颗粒管型、细胞管型和蜡样管型。

尿液中管型的出现具有重要尿液沉渣有形成分形态学特点及其临床意义的临床意义。

12.2.1 透明管型:呈柱状体,无色、半透明、两端钝圆,也可以内含或外附少量颗粒或细胞。

正常人尿液中偶见,全身或肾脏受刺激后可以增加。

大量出现见于急、慢性肾小球肾炎和其他肾病。

可以和其他管型同时出现在尿液中。

12.2.2细胞管型:管型内含有较多细胞即为细胞管型,如红细胞管型、白细胞管型等。

12.2.2.1红细胞管型:多见于肾单位内出血,如急性肾小球肾炎、慢性肾炎急性发作。

也可见于血型不合引起的输血反应及急性肾小管坏死、肾出血、肾移植排异反应。

在红斑狼疮和其他胶原性疾病、肾梗死、肾静脉栓塞形成等情况下,红细胞管型是其特征性表现。

12.2.2.2白细胞管型:由变性坏死的白细胞聚集而成,过氧化物酶染色呈阳性。

白细胞管型的出现表示肾实质有细菌性感染存在,常见于肾盂肾炎、间质性肾炎等。

狼疮性肾炎时也可见到。

12.2.2.3肾上皮细胞管型:管型内含有肾小管上皮细胞,过氧化物酶染色呈阴性,可与白细胞管型鉴别。

常见于肾小管病变如急性肾小管坏死、子痫、中毒、肾移植后排异反应等。

12.2.3 颗粒管型:管型内含大小不同颗粒占1/3 以上,是尿沉渣中最常见又最有意义的病理学改变。

颗粒可以来自变性细胞残渣,也可以由蛋白变性形成。

根据其颗粒大小又可分为粗颗粒管型和细颗粒管型。

可见于肾实质性病变如急、慢性肾小球肾炎,肾病,肾动脉硬化等。

12.2.4蜡样管型:不含颗粒,其质地和颜色像蜡一样呈淡黄色或灰色,质地厚,有切痕,由颗粒管型或细胞管型等长期滞留于肾小管中演变而来。

蜡样管型的出现提示肾小管有严重病变,预后差。

12.2.5其他管型:尿液中还能检测到的其他管型如宽大管型(亦称肾功能衰竭管型)、混合管型、脂肪管型和细菌管型等。

这些管型的检出均有临床意义。

但结晶管型与类管型应和上述病理性管型相区别:结晶管型粗大不一,结构粗糙、断裂,其与该类结晶的临床意义相同。

一些圆柱体、黏液质、纤维等形成的类管型与上述真管型不同,必要时可用染色法来鉴别。

12.3结晶尿液中有无结晶析出取决于该物质在尿液中的溶解度、浓度,尿液的pH 值、温度及胶体状况等因素。

尿液中大多结晶属代谢性,来自饮食,一般无重要临床意义。

12.3.1磷酸盐结晶:包括无定形磷酸盐、三联磷酸盐、磷酸镁铵、磷酸钙等,见于碱性尿中,一般属正常代谢产物。

如患者尿中长期出现磷酸盐结晶,应注意磷酸盐结石的可能,也有磷酸钙与草酸钙混合的结石。

12.3.2草酸钙结晶:为无色发光方形八面体,有两条对角线互相交叉,有时为较小颗粒呈哑铃状或饼状,需与红细胞区别。

少量草酸钙属正常尿液代谢排泄物,但又是尿路结石的主要成分之一,尿中出现较多草酸钙结晶且伴有血尿和肾绞痛者,应注意有结石的可能。

12.3.3尿酸盐结晶:尿酸为机体核蛋白中嘌呤代谢的终产物,以尿酸盐的形式排出。

多食含嘌呤的动物食品会导致尿中尿酸盐结晶增加;急性痛风患者肾小管对尿酸的重吸收障碍,也可导致高尿酸盐尿。

12.3.4 氨基酸结晶:主要有胱氨酸结晶,它由蛋白质分解而来,多由某些代谢性遗传病引起,长期胱氨酸尿可引起结石;尿液中的亮氨酸与酪氨酸结晶也是蛋白质分解产物,正常尿液中不易见到,它的出现可见于大量的组织坏死性疾病如急性肝坏死、急性磷中毒、糖尿病酮症酸中毒昏迷等情况。

12.3.5 胆固醇结晶:在尿液中呈方形薄片状,在尿沉渣中很少见到,可见于乳糜尿中。

12.3.6 磺胺类药物结晶:某些磺胺类药物在尿中析出结晶引起血尿或肾损伤。

不同的磺胺类药物在尿中结晶形态不同,除了在显微镜下识别之外,磺胺还可溶于丙酮溶液。

如在尿中查到大量的磺胺类药物结晶,同时有红细胞和管型存在,则表示药物对肾脏已有损害,应立即停药,并大量饮水、服用碱性药物使尿液碱化,可减轻肾损害。

12.4尿液中的其他有形成分12.4.1 寄生虫:尿液中的寄生虫主要是阴道毛滴虫,形态略大于白细胞,呈倒置梨状、有鞭毛,在新鲜尿液中会运动,一般伴有红细胞渗出。

滴虫可引起外阴部瘙痒、刺后或遗精者尿中可见,除鉴别作用外,一般无意义。

12.4.2 细菌:大量细菌和白细胞同时出现提示泌尿系统感染,但尿液中的细菌应通过培养确认是否为致病菌。

普通尿沉渣检查不适合细菌鉴别。

泌尿系统器官患结核时,结核杆菌可随尿液排出。

需做此项检查时可留取24h 尿液,以甲醛防腐,用沉淀浓集或有机溶剂(汽油)漂浮的方法,浓集漂浮后作抗酸染色。

要注意与尿液中常见的耻垢杆菌相区别。

12.4.3霉菌:某些长期应用抗生素治疗或器官移植后应用免疫抑制剂患者,新鲜尿中可检到霉菌的芽孢或菌丝,提示有霉菌生长。

13.安全防护措施:13.1临床尿液标本含有医学微生物等,应严格按照医疗废物进行处理。

13.2操作人员应作好相应的防护,实验时带上手套。

14.最常见的误差源:操作人员的识别能力差异。