分子史上的经典事件？答：1953watson 和crick 提出的DNA分子双螺旋模型在科研过程中，要具有清醒的宏观洞察力、非凡的科学想像力和严密的逻辑思维能力，选择正确的研究路线，广泛借鉴他人的研究成果并加以综合性的科学思考。
3，分子生物学的理论基础是？主要的研究策略有？答：1958年，克里克提出两个学说，奠定了分子生物学的理论基础。第一个学说是“序列学说”，它认为一段核酸的特殊性完全由它的碱基序列决定，碱基序列编码一个特定蛋白质的氨基酸序列，蛋白质的氨基酸序列决定了蛋白质的三维结构。第二个学说是“中心法则”，遗传信息只能从核酸传递给核酸，或核酸传递给蛋白质，而不能从蛋白质传递给蛋白质，或是从蛋白质传回核酸。
研究策略：体内和体外实验的结合将遗传和DNA联系起来。体内（In vivo）实验：在活体内进行的实验，包括在培养的细胞或组织。
体外（In vitro）实验：在细胞提取物中，或者是人工合成的细胞成分混合物中
4分子与其他学科关系？生物学离不开生物学技术？
答：分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以至信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的。现代生物学的发展越来越多的应用分子生物学的理论和方法进行研究。
5，什么是分子生物学？
广义的概念：分子生物学是研
究核酸、蛋白质等生物大分子
形态、结构特征及其重要性、
规律性和相互关系的科学。狭
义的概念：从分子水平研究生
物大分子的结构与功能从而
阐明生命现象本质的科学，
主要指遗传信息的传递（复
制）、保持（损伤和修复）、基
因的表达（转录和翻译）与调
控等，也称之为基因的分子生
物学。
1 DNA分子在结构上为什么最
适合作为遗传信息载体？
化学性质比较稳定，DNA复制
时严格遵守碱基互补配对原
则，且为半保留复制；四种脱
氧核糖核苷酸可以组成不同
的长链，可以携带大量遗传信
息。
2 DNA提取操作要点是?提取原
则：保持一级结构的完整性，
将其他生物大分子的污染降
到最低。提取流程：破碎细胞；
DNA释放到水相；去垢剂或蛋
白变性剂抽提；除去蛋白等杂
质 DNA沉淀 DNA溶解
和保存
3 DNA提取和鉴定的相关操作
中需要注意什么？
1）DNA分子较大应注意防止机
械张力将其打断，所以操作要
轻柔，离心速度要控制。
2）要灭活DNA酶，采用0.01M
的EDTA或者柠檬酸钠处理，
或者用去垢剂（SDS）、蛋白变
性剂（苯酚、氯仿等）就可以
基本灭活，此外，55 ℃处理
也经常用于灭活残余的DNA
酶。
3）除去蛋白质等杂质时酚抽
提要彻底，上清要去尽，吸取
上清时不要带有沉淀。
4）鉴定时注意电泳时的电压，
电泳缓冲液的浓度，pH；选用
合适的凝胶以及凝胶的浓度
2. 简述RNA的功能。
（1）RNA 是一些病毒的遗传
物质。
（2）与蛋白质合成有关，mRNA
在功能上是基因和蛋白合成
机器之间的中介；tRNA在功能
上是mRNA上密码子和氨基酸
之间的衔接分子。
（3）有些RNA具有催化活性
（核酶）。例如研究发现，
四膜虫的26s rRNA的单个内
含子在体外具有自我剪接功
能；RNase P中的RNA组分在
体外能对tRNA前体进行加工。
（4）RNA可以通过多种途径调
节基因表达。调解途径包括不
同的RNA折叠，核糖开关，与
非编码RNA有关的RNA干扰现
象、X染色体随机失活现象等。
3. 获得高质量RNA的操作应
注意什么？
RNA一般分子量较小，不易被
机械拉力打断；最重要的是抑
制RNA酶（RNase）的活性，
防止RNA被降解。因此，要创
造一个严格的无RNA酶环境
首先要防止外源RNase污染:
洁净实验室环境一次性手套，
勤换；操作时可以带口罩。环
境洁净（避免飞尘中细菌、真
菌产生外源性RNA酶污染，无
空气对流）
玻璃和塑料器皿处理玻璃：
常规洗净后，200℃干烤4小时塑料器皿（离心管、枪头等）：用0.1%的DEPC水常温浸泡过夜，灭菌干燥后使用。溶液配制：加0.1%DEPC处理的双蒸水配制，高压除去残留的DEPC。
其次，抑制内源RNase的活性。抑制剂有β-巯基乙醇，异硫氰酸胍，十二烷基肌酸钠，1.简述蛋白质的功能和活性调控主要层次。
1）构成组织与修补组织。蛋白质是构成组织细胞的主要材料。2）构成酶和某些激素的成分。3增强机体抵抗力，构成抗体调节渗透压供给热能。
转录水平翻译水平翻译后水平
2. 什么是蛋白质组学？简述蛋白质组学研究的一般流程。沿着双向电泳—质谱—蛋白质数据库检索这一典型的蛋白质组学研究技术路线。蛋白质组学是应用各种技术手段研究蛋白质组的一门新兴科学。A)整体角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成成分、表达水平与修饰状态B)了解蛋白质之间的相互作用与联系；
c)揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律。
2. 比较以下概念：
外显子和内含子
外显子(extron)：成熟的mRNA 或蛋白质中存在的序列。（在DNA或mRNA中都存在的序列）。内含子(intron)：在DNA上存在，而在mRNA（或cDNA）中不存在的序列，初级转录产物加工成成熟mRNA时被切除的间隔序列。
基因编码区和cDNA编码区
基因编码区既包括外显子还
包括内含子，cDNA编码区只是
外显子的拼接
启动区和终止区
启动区是位于编码区上游的
非编码区，包括增强子，TATA
box等一些转录起始元件，终
止区是位于编码区下游的非
编码区，包括终止子。
初级转录产物和成熟mRNA
初级转录产物是由DNA转录出
来的mRNA前体，还没有经过
加工修饰，里面还有内含子序
列转录出来的产物。成熟mRNA
就是初级转录产物切去内含
子对应部分的序列，最终编码
蛋白质的序列。
1.如何理解DNA复制是一个
复杂的过程？与DNA复制有关
的蛋白质（包括酶）主要有哪
些，有什么作用？
DNA分子是反向平行的两条互
补链；DNA双链解旋需要能量
和；解旋形成的DNA单链有形
成链内碱基配对的趋势，需要
单链结合蛋白的参与；DNA复
制需要多种酶参与，如：引物
酶，DNA聚合酶，解旋酶，拓
扑异构酶等；复制中偶尔出
错，需要校正机制；无论环状
DNA还是大分子量的DNA对复
制系统都有物理限制
拓扑异构酶：去除DNA 解旋时
在复制叉部分产生的超螺旋
解旋酶：解开DNA双链。引
物酶：在单链DNA处合成引物，
形成引物模版接头。
DNA聚合酶：合成DNA，修复
DNA。单链结合蛋白：与单
链DNA结合，防止DNA复性
滑动夹蛋白：增强DNA聚合酶
的延伸能力 DNA连接酶：连
接相邻DNA链
RNA酶：去除RNA引物。
2.DNA复制的半保留特性和半
不连续特性是怎样发现的？
DNA半保留复制最初是由沃森
和克里克提出的，1958年，
Matthew Meselson和
Franklin W. Stahl的实验确
定了DNA的复制是半保留方
式。
采用含非放射性的15N的培养
基培养细菌若干代，被15N标
记的大肠杆菌转入14N为氮源
的培养基中，完成第一代、第
二代繁殖时，通过CsCl密度
梯度离心分离DNA，由于DNA
的密度不同，形成在260nm紫
外光下可见的不同位置的条
带。
Okazaki的脉冲标记和脉冲追
踪的实验发现DNA是半不连续
复制的。材料是受T4噬菌体
感染的大肠杆菌吗，用3H标
记的脱氧胸苷进行脉冲标记，
再加入大量非同位素标记的
脱氧胸苷进行追踪，在不同的
时段，收集大肠杆菌，抽取
DNA，碱变性处理，超离心，
分离大小不同的DNA，进行密
度梯度离心，离心管底部和上
部均有放射性，表明复制过程
中形成的有大片段也有小片
段。证明了复制的半不连续
性。
3.分子生物学中的工具酶在
使用时需要注意什么？请举
例说明。
要注意温度和缓冲液用量，例
如T4 DNA连接酶，酶量1 μ
l,缓冲液用量2.5 μl，反应
温度是16 ℃
1. 线性DNA的复制如何解决后随链上最后一个引物去除之后的缩短问题？简述机制。途径1：蛋白质代替RNA作为引物：具有线性染色体的细菌和某些具有线性染色体的病毒，以蛋白质代替RNA作为引物，“引物蛋白”利用氨基酸提供-OH。
途经2：端粒酶：染色体的末端结构——端粒的3‘端都突出成为单链DNA，可以募集端粒酶进行末端复制。
2. 端粒结合蛋白在线性染色体的复制和结构的维持上有什么作用
端粒结合蛋白可以调节端粒酶的活性，从而调控端粒序列的长度。与端粒双链区域结合的蛋白会精确的调控端粒的长度，这些蛋白作为弱的阻抑物可以抑制端粒酶的活性，抑制效应和端粒的长度正相关。端粒较短的时候，仅有少量的端粒结合蛋白，对端粒酶的抑制效应较弱，端粒酶可以延伸端粒的3‘端；当DNA合成机制完成双链中后随链的合成后，更多的端粒结合蛋白结合到端粒，提高了对端粒酶进一步延伸的抑制。
端粒结合蛋白形成t-loop结构，可以保护染色体末端。人类细胞中分离的端粒是环状结构，该结构叫做t-loop，是端粒3’单链DNA末端向端粒的双链DNA区域插入产生的，与端粒的长度控制有关，因为环状结构可以保护端粒不被DNA修复酶修复。似乎端粒结合蛋白和其他一些胞内蛋白促进了该结构的形成。
1.原核和真核DNA复制过程有
哪些共同点？与原核相比，真
核DNA复制有哪些特殊之处。
复制的原理相同；都是起始子
蛋白对复制器的识别,通过起
始子蛋白以及解旋酶装载器
将解旋酶募集到复制器上,解
旋酶产生单链DNA区域，作为
RNA引物合成的模板。
原核细胞DNA复制中，一旦起
始子蛋白和复制起点结合，
DNA解旋酶就会被招募到起
点，起始复制,真核细胞DNA
复制中，起点的选择和复制的
起始是分离的，这是通过形成
前复制复合物控制的。两个事
件的分离可以阻止基因组的
过度复制;真核细胞DNA的复
制有多个起点。
复制调节中，细菌是DnaA起
始蛋白与DNA的结合；真核生
物是MCM解旋酶和DNA的最初
结合上。与原核相比，真核解
决末端复制问题的途径多样。
2.细胞中参与DNA修复的聚合
酶为什么比参与DNA复制的聚
合酶要多，如何看待这一事
实。
维护DNA遗传信息的稳定性对
生物细胞来说是极其重要的。
作为一种能决定生命状态存
在和延续的生物大分子，DNA
分子的序列在遗传过程中必
需保持高度的精确性和完整
性，因此细胞中含有大量用于
修复DNA损伤的修复系统，DNA
修复系统是细胞进化出的保
证在损伤阻碍复制或者产生
突变之前就识别，并且修复损
伤的机制。可多修复机制可以
由不同的酶来发动，如切除修
复机制，能对各种DNA的损伤
进行修复，以保持每个世代遗
传信息的稳定性，因此细胞中
含有大量用于修复DNA损伤的
酶。参与修复的酶包括在复制
中以及在转录翻译中出现突
变进行修复的酶，因此细胞中
参与DNA修复的聚合酶比参与
DNA复制的聚合酶要多。
1. 转录和DNA的复制在化学
和酶学上有哪些相似性，有哪
些重要差别？
（1）转录过程需要的原料是
核苷酸，DNA复制过程需要的
原料是脱氧核苷酸；
（2）参与的酶不同：转录是
RNA聚合酶，复制是DNA聚合
酶；
（3）转录过程不需要引物，
复制过程需要引物；
（4）转录出来的RNA产物与
模板DNA不保持碱基互补配
对；
（5）转录缺乏广泛的校正机
制，错误率为10-4，复制的错
误率仅为10-7
（6）转录选择性的拷贝基因
组中的特定部分，基因组的不
同部分转录的程度不同，DNA
复制是对全基因组的复制。
2.概括原核转录终止的主要
机制。
一是需要蛋白质因子ρ（Rho）
的参与：ρ是六个亚基组成
的环状的单链RNA结合蛋白，
具有ATP酶活性，一旦结合转
录物，利用水解ATP的能量诱
发将RNA从酶-模板复合物中
夺取，使转录终止。终止是由
ρ蛋白接近RNA的能力控制
的，该蛋白和富含C的位点
——rut位点结合，当聚合酶
停止在终止子的茎环结构时，ρ蛋白赶上RNA聚合酶，使DNA-RNA杂合体解旋，引起所有组分的释放；二是不依赖ρ因子的转录终止机制：终止子中含有共有的反向重复的保守序列，在RNA聚合酶转录到最后一个碱基时形成8bp的茎环结构，这一结构使转录泡不稳定而解体；反向重复序列之后有7-8个富含U的核苷酸，RNA中的U和DNA序列中A互补配对的能力是最弱的。
3.真核细胞和原核细胞在转录机制和过程上有何异同？转录机制的差异：（1）有三种不同的RNA聚合酶
（2）具有种类繁多的转录因子
（3）体内转录依赖DNA结合蛋白、中介蛋白复合物、染色质修饰酶等参与。
过程的差异：真核生物DNA有很多调控元件， DNA元件通过和调控蛋白的结合，激活或者抑制基因的转录。转录过程会形成前起始复合物，与启动子的脱离依靠聚合酶C末端结构域磷酸化，起始时需要中介复合物的参与，延伸过程中还有延伸因子，终止后真核细胞的RNA需要通过剪接才能成为成熟的RNA。
4.原核s因子在转录中有什么作用？
σ因子的功能是降低RNA聚合酶与模板的非特异性结合。识别启动子，起始转录
1.与其他的生物大分子相比，DNA分子的序列精确性为什么最重要？哪些因素会影响DNA 分子序列的精确性和完整
性？
作为一种能决定生命状态存
在和延续的生物大分子，DNA
在遗传过程中必需保持高度
的精确性和完整性，而且这种
性能是细胞中任何一种分子
都无法与之相比的此外，DNA
还会受到各种物理和化学因
素的损伤。这些差错和损伤如
果不被修复，将会产生严重的
细胞学后果，因为DNA分子本
身是无法替代的，一个细胞通
常只有1-2套基因组DNA，而
不像蛋白质和RNA分子那样，
能利用DNA中的遗传信息不断
产生新的分子来替代受损伤
的分子。
DNA损伤如：点突变（转换，
颠换，错义突变，无义突变，
移码突变）缺失和插入突变，
染色体的变异包括染色体结
构和数量的变化
2.DNA突变的类型有哪些？可
能产生的结果有哪些？
DNA突变有体细胞突变和生殖
细胞突变，体细胞突变不会遗
传给下一代，生殖细胞突变会
遗传给下一代。
1.点突变同义突变，错义突
变
无义突变，终止密码子突变，
起始密码子突变
2缺失和插入突变
3染色体结构的整体重排(染
色体畸变)
1.细胞采用怎样的策略应对
DNA的错配或损伤？比较一下
几种DNA修复主要机制的异同
点。
1.直接修复（1）光复活作用：
DNA光解酶在300～600nm可见
光照射下，酶获得能量，断裂
连接毗邻嘧啶的共价键，去除
嘧啶二聚体结构。（2）烷基转
移修复：甲基转移酶将甲基基
团从甲基化鸟嘌呤上转移到
自身的一个半胱氨酸上，使之
从鸟嘌呤残基上去除。此后该
甲基转移酶丧失活性。
2.切除修复（1）碱基切除修
复：通过DNA糖苷酶识别水解
糖苷键，通过弹出机制除去受
损碱基,再通过AP核酸内切酶
和核酸外切酶的切割将受损
的核苷酸从骨架上完全除去，
缺口由DNA聚合酶I填补。（2）
核苷酸切除修复：核苷酸切除
修复酶能够识别双螺旋形状
上的扭曲，酶在损伤两侧切割
受损的DNA ,含有损伤的一小
段单链片段被去除，然后由
DNA聚合酶以未受损的链为模
板对单链缺口进行修复，恢复
原始的核苷酸序列。
3.错配修复:错配碱基存在于
新合成的子代链中，错配修复
是按模板的遗传信息来修复
错配碱基的。
4.重组修复：重组修复是通过
双链断裂修复途径从姐妹染
色体中获得序列信息
5.SOS修复（1）避免差错的修
复：诱导光复活切除修复和重
组修复中的某些关键酶和蛋
白质的产生，加强其修复能
力。
（2）倾向差错的修复（移损
合成）：诱导产生缺乏校正功
能的DNA聚合酶，在DNA损伤
部位进行复制而避免个体的
死亡，但是带来了高突变率。
2.转座因子有哪些主要类
型？转座的机制是怎样的？
（1）DNA转座子
非复制性移位的机制：剪切-粘贴机制
结合：转座酶结合到转座子两端的反向重复序列上，形成转座体。
切除：转座DNA从基因组的原始位置上切下。
插入：转座子的3‘-OH进攻靶DNA，将转座子共价连接到靶DNA上
重组：DNA修复蛋白对缺口进行修复。
（2）类病毒反转录转座子
转录和反转录：反转录转座子（或反转录病毒）DNA 序列转录成RNA，再反转录成cDNA。
整合： cDNA被整合酶（与DNA 转座子的转座酶同属一个蛋白家族）识别重组到新位点，步骤类似DNA转座子。
（3）多聚腺苷酸反转录转座子（Poly-A retrotransposons）,
结合：转座酶和转座子DNA形成转座体。
断裂：转座子的末端DNA断裂，仅两个3’-OH的DNA末端释放。
中间体的形成：类似复制叉
两拷贝的转座子生成
1. 起始密码子在翻译中起什么作用？在起始密码子附近存在哪些特定序列，被哪些结构识别？
在翻译中被核糖体小亚基和起始tRNA识别，并开始翻译的三联体密码；在原核生物中是RBS位点也叫SD序列，核糖体小亚基可以特异性识别并结合；真核生物是Kozak序列，通过与起始tRNA和小亚
基识别。
2.tRNA是如何被负载的？是
如何同一种氨基酸负载到同
工tRNA 上的？
首先是氨基酸的腺苷酰化，氨
基酸通过高能酰基连接到
tRNA的3’端的腺苷酸上，使
tRNA负载。氨酰tRNA合成酶
识别同工tRNA的独特结构保
证正确负载，通过识别tRNA
分子上的受体臂，反密码子环
和第二遗传密码来保证正确
负载。
3.mRNA序列中信息的正确解
码是由哪些因素保证的？
密码子和反密码子的正确配
对；
正确配对使结合氨酰tRNA的
EF-Tu与因子结合中心相互作
用；正确配对的氨酰tRNA在
肽键形成中旋转入位，保证与
核糖体的结合。
4核糖体在翻译的周期性变
化？
核糖体在翻译过程中构成核
糖体循环，指在细胞内构成核
糖体的大小两种亚单位（沉淀
系数为50S或60S的大亚单位
和30S或40S的小亚单位）在
蛋白质开始合成时会合，合成
后又分离的这一反复循环而
言。核糖体在不合成蛋白时，
分离成亚单位，这是由于多肽
链起始因子之一与小亚单位
结合，而抑制了与大亚单位的
结合。这种状态的小亚单位，
如果与其它起始因子、起始
tRNA、mRNA结合，则形成多肽
链起始复合体。随着与大亚单
位结合，在多肽链延长因子存
在下进行多肽链延长反应。多
数的核糖体在一分子mRNA顺
次移动（参见多核糖体）。当
终止信号出现时，由于多肽链
终止因子的作用，多肽链合成
终止，核糖体从mRNA脱离，
重新分离成大小二个亚单位。
这些反应都要利用鸟苷三磷
酸（GTP）水解所产生的能量。
5. 核糖体在翻译中的主要作
用是什么？为什么说核糖体
的功能主要由RNA组分承担？
核糖体是细胞内一种核糖核
蛋白颗粒,主要由RNA和蛋白
质构成功能是按照RNA的指令
将氨基酸合成蛋白质多肽链,
所以核糖体是细胞内蛋白质
合成的分子机器肽基转移酶
中心完全由rRNA组成。负载
tRNA的反密码环和mRNA的密
码子都是和16S rRNA发生作
用，而不与小亚基的核糖体蛋
白相互作用。大多数的核糖体
蛋白位于核糖体的周边。核糖
体的核心功能结构域完全或
几乎完全由RNA组成。3.真核
mRNA前体的加工事件有哪
些？这些加工对mRNA功能的
体现有什么意义？
5’端加帽 :为核糖体识别
mRNA提供信号，增加mRNA的
稳定性，与某些RNA病毒的正
链RNA的合成有关。 3’端加
尾：防止mRNA被降解。 mRNA
剪接：可能与性别决定有关。
mRNA的编辑：是充分发挥生
理功能所必须的。
4.与翻译相关的结构有哪
些？试论述这些结构在翻译
中承担的作用。
核糖体：蛋白质生物合成的部
位，有mRNA结合部位，新渗
入的氨酰-tRNA的结合位点；
肽酰-tRNA的结合位点；卸载tRNA排出位点；肽酰基转移部位及形成肽键的部位，与起始因子、延伸因子、释放因子等相结合的部位；tRNA：是密码子和氨基酸之间的衔接子
5.你如何理解转录水平的调控是最为经济、灵活，又是最为重要、复杂的调控？转录调控的基本要素有哪些？
因为转录具有选择性，只对特定的基因组或基因进行转录，因为在基因组内，只有部分基因在某一类型的细胞中或在某一发育阶段能被转录，随着细胞的不同生长发育阶段和细胞内外条件的改变将转录不同的基因。转录时只对被转录基因的转录区进行转录，因为启动子是不被转录的，因此转录水平的调控是最为经济、灵活，又是最为重要、复杂的调控。启动子的选择决定；特异的DNA调节序列：如原核生物操纵子调控区中的启动序列、操纵序列、CAP蛋白结合位点和真核基因的启动子、增强子和沉默子等；调节蛋白 :如原核生物的阻遏蛋白和CAp蛋白、真核生物的基本转录因子和特异转录因子等。RNA聚合酶：DNA调节元件和调节蛋白可以通过影响RNA聚合酶的活性来调接基因转录激活。
1.PCR技术的原理和DNA复制有怎样的联系？
PCR技术就是DNA复制原理的应用。PCR就是让目的DNA片段在体外大量复制。其原理是通过加热使目的DNA变性为单
链，与一对特异性引物退火，
并在耐热的DNA聚合酶催化下
合成新链，如此循环数十次，
使目的DNA得以富集。DNA复
制也需要解旋酶解开双链，
RNA引物结合，然后是在DNA
聚合酶下合成新链。
2.PCR扩增体系中包含哪些组
分？这些组分的作用是什
么？
模板DNA：提供复制的模板
特异引物：保证扩增产物的
特异性，提供3端-OH
底物(原料)dNTP:提供原料
耐热性DNA聚合酶
（如:TaqDNA聚合酶）
含有Mg2+的缓冲液：提供反
应环境。
PCR技术主要解决哪些问题？
（1）目的基因的克隆：可以
利用特异性引物以cDNA或基
因组DNA为模板获得已知目的
基因片段, 或与逆转录反应
相结合，直接以组织和细胞的
mRNA为模板获得目的片段。
（2）基因改造：利用PCR技
术可以随意设计引物在体外
对目的基因片段进行嵌和、缺
失、点突变等改造。
（3）DNA和RNA的微量分析：
PCR技术高度敏感，对模板DNA
的量要求很低，是DNA和RNA
微量分析的最好方法。
（4）DNA序列测定：将PCR
技术引入DNA序列测定，使测
序工作大为简化，也提高了测
序的速度；待测DNA片段既可
克隆到特定的载体后进行序
列测定，也可直接测定。
（5）基因突变分析：PCR与其
他技术的结合可以大大提高
基因突变检测的敏感性。
概括核酸电泳技术的原理、类
型和应用。原理：核酸是一类
带负电荷的生物大分子，在电
场作用下可由负极向正极移
动, 因此可用电泳的方法进
行分离、鉴定和纯化。在一定
的电场强度下，核酸的电泳迁
移率取决于核酸分子的大小
和构型。类型：根据凝胶介质
不同：琼脂糖凝胶电泳；聚丙
烯酰胺凝胶电泳。根据外加电
场不同：常规电泳，脉冲场电
泳。根据样品不同：DNA电泳，
RNA电泳。应用：分离、鉴定、
纯化核酸。
1.DNA克隆的一般流程是什
么？怎样筛选和鉴定重组DNA
分子？
1.目的基因的获得
2. 重组
DNA分子的构建3,载体和目的
基因的连接,4重组DNA分子的
筛选和鉴定 5含有重组DNA分
子的受体细胞的筛选和鉴定
一般是根据重组子的某些特
征进行的，例如：载体的特征、
目的基因序列或者产物的特
征等。（1）根据载体特征：
在筛选细菌转化子时，常使用
抗药性标记和β-半乳糖苷酶
显色（蓝白斑筛选），其中抗
药性筛选确定的是含有载体
的细菌转化子，蓝白斑筛选则
可以确定细菌转化子中是否
为重组载体。（2）根据目的
基因序列重组DNA分子由于在
载体上插入了外源DNA片段，
与载体分子量相比会增加。所
以一般筛选流程是提取重组
DNA，经酶切、电泳分离，通
过与线性化的载体比较大小，
就可以初步确定重组DNA分子中是否插入的外源DNA是预期大小的片段，最终通过DNA测序确认。（3）根据产物特征：如果重组DNA在宿主细胞中表达为蛋白质，可以根据免疫化学的方法筛选出含有重组DNA 的菌落或噬菌斑。
免疫筛选法的程序和菌落杂交类似，但是使用的不是核酸探针，而是抗体来鉴定含有抗原编码基因的菌落或噬菌斑。1基因敲除和RNAi技术在基因功能鉴定中的作用机制是什么？基因敲除分为完全基因敲除和条件型基因敲除两种。完全基因敲除是指通过同源重组法完全消除细胞或者动物个体中的靶基因活性。
条件型基因敲除是指通过定位重组系统实现特定时间和空间的基因敲除。
引发RNAi是dsRNA，它们通过一种胞质内特定的RNase III，即Dicer切割为21-26nt的短RNA，叫做小干扰RNA(siRNA)。siRNA的反义链作为RISC识别和切割互补mRNA的模板，进而被降解掉。
分子生物学：研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学。 C值反常：也称c值谬误，指c值往往与种系进化复杂性不一致的现象，及基因组的大小与遗传复杂性之间没有必然的联系，某些较低等的生物c值却很大。DNA重组技术：又称基因工程。将不同的DNA片段按照预先的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状的技术。 GU-AG法则：多数细胞核mRNA前体中内含子的5’边界序列为GU，3’边界为AG，因此，GU表示供体衔接点的5’端，AG 表示接纳点的3’端序列，习惯上，把这种保守序列模式称为GU-AG法则。 RNA干涉：是利用双链小RNA高效，特异性降解细胞内同源MRNA，从而阻断体内靶基因的表达，使细胞内出现靶基因缺失表性的方法。 摆动假说：crick为解释反密码子中子某些稀有成分的配对（如I）以及许多氨基酸中有两个以上密码子而提出的假设。编码链/有义链：在DNA双链中，与mRNA 序列（除t/u替换外）和方向相同的那条DNA，又称有义链 模板链：指双链DNA中能够作为模板通过碱基互补原则指导mRNA前体的合成的DNA链，又称反义链 操纵子：原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控原件组成的基因表达单元。 反式作用因子：能直接或间接识别或结合在各类顺式作用元件中核心序列上参与调控靶基因转录效率的pro。 基因定点突变：向靶DNA片段中引入所需的变化，包括碱基的添加，删除，或改变基因家族：在基因组进化中，一个基因通过基因重复发生了两个或更多的拷贝，这些基因即构成一个基因家族，是具有显著相似性的一组基因，编码相似的蛋白质产物 基因敲除技术：针对一个序列已知打包功能未知的基因，从DNA水平上设计实验，彻底破坏该基因的功能或消除其表达机制，从而推测该基因的生物学功能 基因组DNA文库：某一生物体全部或部分基因的集合，将某个生物的基因组DNA 或cDNA片段与适当的载体体外重组后，转化宿主细胞，所谓的菌落或噬菌体的集合即为…… 基因治疗：是将具有治疗价值的基因即“治疗基因“装配于带有在人体细胞中表达所必备元件的载体中，导入人体细胞，通过靶基因的表达来治疗遗传疾病 聚合酶链反应：指通过模拟体内DNA复制方式在体外选择性的将DNA某个特定区域扩增出来的 魔斑核苷酸：在应急反应过程中，由大量GTP合成的ppGpp和pppGpp，它们的主要作用可能是影响RNA聚合酶与启动子结合的专一性，诱发应急反应，帮助细菌度过难关 弱化子：原核生物操纵子中能明显减弱甚至终止转录作用的一段核苷酸序列 同工tRNA：几个代表AA，能够被一个特殊的氨酰—tRNA合成酶识别的Trna 顺式作用元件：存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列，包括启动子，增强子等，本身不编码任何pro，仅提供一个作用位点，与反式作用因子相互作用参与基因表达调控 原位杂交技术：用标记的核苷酸探针，经放射自显影或非放射检测体系，在组织，细胞及染色体水平上对核苷酸进行定位和相对定量研究的手段 转座/移位：遗传信息从一个基因座转移至另一个基因座的现象，由可移问位因子介导的遗传物质的重排 管家基因：维持细胞正常生长发育的必需基因，所以细胞中均需表达的一类基因转座子：是存在染色体上的可自主复制和移位的基本单位，参与转座子易位及DNA 链整合的酶称为转座酶 原癌基因：正常细胞中与病毒癌基因具有显著同源性的基因，本身没有致癌作用，但是经过致癌因子的催化下激活成为致 癌基因，使正常细胞向恶性转化。 SP序列：mRNA中用于结合原核生物核糖 体的序列 无义突变：在蛋白质的结构基因中，一个 核苷酸的改变可能是代表某个AA的密码 子变成终止密码子（UAG UGA UAA），使 pro合成提前终止，合成无功能或无意义 的多肽，这称— 错义突变：由于结构基因中某个核苷酸的 变化使一种AA的密码子变成另外一种AA 的密码 指导RNA：与已正确编码的RNA序列互补 的一小段RNA，被用来作为向未经编辑的 RNA中插入碱基的模板。 上游启动子元件：将TATA区上游的保守 序列称为— 启动子：与基因表达启动相关的顺式作用 原件，是结构基因的重要成分。它是一段 位于转录起始位点5’端上游区大约 100~200bp以内的具有独立功能的DNA序 列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA 准确地相结合并具有转录起始的特异性。 细菌转化：是一种细菌菌株由于捕获了来 自供体菌株的DNA而导致性状特征发生 遗传改变的过程，提供转化DNA的菌株叫 做供体菌株，接受转化DNA的菌株被称作 受体菌株。 实时定量PCR技术：利用带荧光检测的 PCR仪对整个PCR过程中扩增DNA的累积 速率绘制动态变化图。 基因工程：在体外将核算分子插入病毒， 质粒或其他载体分子，构成遗传物质的新 组合，使之进入新的宿主细胞内并获得持 续稳定增殖能力和表达。 应答原件：能与某个（类）专一蛋白因子 结合，从而控制基因特异表达的DNA上游 序列。 增强子：是指能使与它连锁的基因转录频 率明显增加的DNA序列（1.5分）。它可 以在启动子的上游，也可以在启动子的下 游，绝大多数增强子具有组织特异性（1.0 分）。 分子伴侣：是结合其他不稳定蛋白质并稳 定其构象的一类蛋白质（1.0分）。通过 与部分折叠的多肽协调性地结合与释放， 分子伴侣促进了包括蛋白质折叠、寡聚体 装配、亚细胞定位和蛋白质降 负调控：阻遏蛋白结合在操作子位点，阻 止基因的表达。没有调节蛋白时操纵元内 结构基因是表达的，而加入调节蛋白后结 构基因的表达活性被关闭，这种调节称为 负调节。 应急因子：是指与核糖体相结合的蛋白质 RelA，当空载的tRNA进入A位时，它催 化GTP形成pppGpp或催化GDP形成 ppGpp。 信号肽：在蛋白质合成过程中N端有 15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质 的跨膜。 密码的简并性:由一种以上密码子编码同 一个氨基酸的现象称为密码的简并性 移码突变(frame-shift mutation)：在 mRNA中，若插入或删去一个核苷酸，就 会使读码发错误，称为移码，由于移码而 造成的突变、称移码突变 简答题 1原核生物与真核生物基因组的不同？ 答：原核基因组：常仅由一条环状双链DNA 分子组成，结构简单；基因组中只有一个复 制起点；具有操纵子结构，转录的RNA为多 顺反子；有重叠基因（1、基因内基因 2、部 分重叠基因 3、一个碱基重叠）;无内含子； 编码pro的DNA在基因组中所占比例较大； 结构基因为单贝 真核基因组：真核基因组庞大，一般都远 大于原核生物；真核基因组存在大量的重复 序列；真核基因组的大部分为非编码序列， 占整个基因组序列的90%以上；真核基因组的 转录产物为单顺反子；真核生物为断裂基因、 有内含子结构；真核基因组存在大量的顺式 作用原件；真核基因组中存在大量的DNA多 态性；真核基因组具有端粒结构。 2比较RNA转录与DNA复制的异同？ 答：相同：都以DNA链作为模板；合成方向 均为5’—3’；聚合反应均是通过核苷酸之间 形成的3’，5’—磷酸二酯建使核苷酸链延长 不同：复制转录 模板：两条链均复制；模板链转录（不对称 转录） 原料：dNDP ; NTP 酶：DNA聚合酶；RNA聚合酶 产物：子代双链DNA；mRNA,tENA,rRNA 配对：A---T ,G---C; A—U,T---A,G---C 引物：RNA引物；无 试比较转录与复制的区别。： 1，目的不同，所使用的酶、原料及其它辅助 因子不同，转录是合成RNA，复制是合成DNA； 2，方式不同：转录是不对称的，只在双链DNA 的一条链上进行，只以DNA的一条链为模板， 复制为半不连续的，分别以DNA的两条链为 模板，在DNA的两条链上进行；3，复制需要 引物，转录不需要引物；,4复制过程存在校 正机制，转录过程则没有；5转录产物需要加 工，复制产物不需要加工；6复制与转录都经 历起始、延长、终止阶段，都以DNA为模板， 新链按碱基互补原则，5'→3’方向合成。 3、 RNA转录的基本过程？ 转录的基本过程包括：模板识别、转录起始、 转录的延伸和终止。 模板识别：RNA聚合酶与启动子DNA双链相互 作用并与之结合； 转录起始：RNA聚合酶结合在启动子上以后， 是启动子附近的DNA双链解旋并解链，形成 转录泡以促使底物核糖核苷酸与模板DNA的 碱基配对，当RNA链上第一个核苷酸键产生 标志着转录的起始，一旦RNA聚合酶成功地 合成9个以上核苷酸并离开启动子区，转录 就进入正常的延伸阶段。 转录的延伸：RNA聚合酶释放因子离开启动子 后，核心酶沿模板DNA链移动并使新生成RNA 链不断伸长，在解链区形成RNA—DNA杂合物。 转录终止：当RNA链延伸到转录终止位点时， RNA聚合酶不再形成新的磷酸二酯建，DNA— RNA杂合物分离，转录泡瓦解，DNA恢复成双 链状态，DNA聚合酶和RNA链都从模板上释放 出来，转录终止。 4.DNA复制的过程和机制? 答：分三个阶段：即复制的起始、延伸、终 止。 复制的起始：DNA解旋解链，形成复制叉，引 发体组装，然后在引发酶的催化下以DNA链 为模板合成一段短的RNA引物。 延伸：DNA链的延伸由DNA聚合酶催化以亲代 DNA链为模板引发体移动，从5’—>3’方向 聚合子代DNA链，前导键的合成以5’—>3’ 方向随着亲本双链体的解开而连续进行复 制，后随链在合成过程中，一段亲本DNA单 恋首先暴露出来，然后以与复制叉移动相反 方向，按5’—>3’方向合成一系列冈崎片段。 终止：当子链延伸到终止位点时，DNA复制终 止，切除RNA引物，填充缺口，在DNA连接 酶的催化下将相邻的DNA片段连接起来形成 完整的DNA长链。 5、真核生物与原核生物在翻译的起始过程中 有哪些区别？ 答：真核生物的起始tRNA是met-tRNA met 原核是fmet-tRNA fmet； 真核生物核糖体小亚基识别mRNA的帽子结 构，而原核生物通过与mRNA的SD序列结合； 真核生物小亚基先与met-tRNAmet结合再与 mRNA结合，而原核生物小亚基先与mRNA结合 再与fmet-tRNAfmet结合；真核生物有较多 的起始因子参与，且核糖体较大为80S，而原 核生物有较少的起始因子参与，且核糖体较 小为70S 6.简述蛋白质生物合成过程。，以大肠杆菌为 例： (1)氨基酸的活化：游离的氨基酸必须经过活 化以获得能量才能参与蛋白质合成，由氨酰 -tRNA合成酶催化，消耗1分子ATP，形成氨 酰-tRNA。 (2)肽链合成的起始：由起始因子参与，mRNA 与30S小亚基、50S大亚基及起始甲酰甲硫氨 酰-tRNA(fMet-tRNAt)形成70S起始复合物， 整个过程需GTP水解提供能 (3)肽链的延长：起始复合物形成后肽链即开 始延长。首先氨酰-tRNA结合到核糖体的A 位，然后，由肽酰转移酶催化与P位的起始 氨基酸或肽酰基形成肽键，tRNA f 或空载tRNA 仍留在P位．最后核糖体沿mRNA5’→3’方 向移动一个密码子距离，A位上的延长一个氨 基酸单位的肽酰-tRNA转移到P位，全部过程 需延伸因子EF-Tu、EF-Ts，能量由GTP提供 (4)肽链合成终止，当核糖体移至终止密码 UAA、UAG或UGA时，终止因子RF-1、RF-2 识别终止密码，并使肽酰转移酶活性转为水 解作用，将P位肽酰-tRNA水解，释放肽链， 合成终止。 7.试比较真核生物与原核生物mRNA转录的主 要区别。 答：转录单元：原核生物常为多顺反子转录， 真核生物常为单顺反子转录。酶：RNA聚合酶 核心酶加p因子，原核生物为RNA聚合酶Ⅱ 聚合酶加转录因子。转录产物：真核生物不 需加工与翻译相偶联真核生物需加工与翻译 分开。转录过程：无核小体的结局和组装的 过程，原核生物有核小体的结局和组成的过 程。转录终止“原核生物两种方式分别是依 赖P因子的终止和不依赖P因子的终止，真 核生物转录的终止加尾修饰同步进行。反应 部位：原核生物在类核，真核生物在核内。 8.比较原核和真核生物mRNA的区别？ 答：（1）、原核生物mRNA5’端无帽子结构，3’ 端没有或只少较短的polyA结构，真核生物 5’端存在帽子结构，3’端具有polyA尾巴. （2）、许多原核生物mRNA可能以多顺反子形 式存在，而真核生物几乎都是单顺反子(3)原 核生物mRNA的半衰期短，转录与翻译是紧密 相连的，两个过程不仅发生在同一细胞间里， 而且几乎是同步进行的，真核生物mRNA的录 翻译是发生在不同空间和时间范畴内的。(4) 原核生物以AUG作为起始密码有时以GUG， UUG作为起始密码，真核几乎永远以AUG作为 起始密码。 9.乳糖操纵子调控机理 答：是大肠杆菌中控制半乳糖苷酶诱导合成 的操纵子。包括调控元件P（启动子）和O（操 纵基因）阻遏子（I），以及结构基因lacZ（编 码半乳糖苷酶）、lacY（编码通透酶）和lacA （编码硫代半乳糖苷转乙酰基酶）。转录时 RNA聚合酶首先与启动子结合，通过操纵区向 右转录，转录从O区中间开始，按Z→Y→A 方向进行，每次转录出来的一条mRNA上都带 有这3个基因，转录的调控是在启动区和操 纵区进行的。 1、无乳糖时，调节基因lacI编码阻遏蛋白， 与操纵子基因O结合后抑制结构基因转录， 不产生代谢乳糖的酶。 2、只有乳糖存在时，乳糖可以与lac阻遏蛋 白结合，而使阻遏蛋白不与操纵基因结合， 诱导结构基因转录，代谢乳糖的酶产生以代 谢乳糖。 3、葡萄糖和乳糖同时存在时，葡萄糖的降解 产物能降低cAMP的含量，影响CAP与启动基 因结合，抑制结构基因转录，抑制代谢乳糖 的酶产生。 10、色氨酸操纵子及机制？ 答：负责色氨酸的生物合成，当培养基中有 足够的色氨酸时，这个操纵子自动关闭，缺 乏时操纵子打开，trp基因表达，色氨酸或与 其代谢有关的某种物质在阻遏过程中起作 用。由于trp体系参与生物合成而不是降解， 它不受葡萄糖或cAMP-CAP的调控。 弱化作用：当色氨酸达到一定浓度、但还没 有高到能够活化R使其起阻遏作用的程度时， 产生色氨酸合成酶类的量已经明显降低，而 且产生的酶量与色氨酸的浓度呈负相关。先 导序列起到随色氨酸浓度升高降低转录的作 用，这段序列就称为衰减子或弱化子。在trp 操纵元中，对结构基因的转录阻遏蛋白的负 调控起到粗调的作用，而衰减子起到细调的 作用。 11.原核生物和真核生物复制的差异？ 答：原核真核 复制起点：一般为单复制起点；一般为多复 制起点 主要的酶：DNA聚合酶Ⅲ；DNA聚合酶& 单链复制叉复制速度：快；慢 复制的延伸：无核小体的解聚及诚信组装； 有核小体…… 终止：两个复制叉相遇终止复制（环形DNA）； 端粒酶复制末端完成复制（线性DNA） 12原核细胞和真核细胞在合成蛋白质的 起始过程有什么区别。 ．(1)起始因子不同：原核为IF-1，IF-2， IF-2，真核起始因子达十几种。 (2)起始氨酰-tRNA不同：原核为 fMet-tRNA f ，真核Met-tRNAi (3)核糖体不同：原核为70S核粒体， 可分为30S和50S两种亚基，真核为80S 核糖体，分40S和60S两种亚基
结合着下载的资料复习吧~~~~ 绪论 分子生物学的发展简史 Schleiden和Schwann提出“细胞学说” 孟德尔提出了“遗传因子”的概念、分离定律、独立分配规律 Miescher首次从莱茵河鲑鱼精子中分离出DNA Morgan基因存在于染色体上、连锁遗传规律 Avery证明基因就是DNA分子，提出DNA是遗传信息的载体 McClintock首次提出转座子或跳跃基因概念 Watson和Crick提出DNA双螺旋模型 Crick提出了“中心法则” Meselson与Stah用N重同位素证明了DNA复制是一种半保留复制 Jacob和Monod提出了著名的乳糖操纵子模型 Arber首次发现DNA限制性内切酶的存在 Temin和Baltimore发现在病毒中存在以RNA为模板，逆转录成DNA的逆转录酶 哪几种经典实验证明了DNA是遗传物质? (Avery等进行的肺炎双球菌转化实验、Hershey 利用放射性同位素35S和32P分别标记T2噬菌体的蛋白质外壳和DNA) 第二章染色体与DNA 第一节染色体 一、真核细胞染色体的组成 DNA：组蛋白：非组蛋白：RNA = 1：1：(1-1.5)：0.05 （一）蛋白质（组蛋白、非组蛋白） （1）组蛋白：H1、H2A、H2B、H3、H4 功能：①核小体组蛋白（H2A、H2B、H3、H4）作用是将DNA分子盘绕成核小体
②不参加核小体组建的组蛋白H1，在构成核小体时起连接作用 （2）非组蛋白：包括以DNA为底物的酶、作用于组蛋白的酶、RNA聚合酶等。常见的有（HMG蛋白、DNA结合蛋白） 二、染色质 染色体：分裂期由染色质聚缩形成。 染色质：线性复合结构，间期遗传物质存在形式。 常染色质（着色浅） 具间期染色质形态特征和着色特征染色质 异染色质（着色深） 结构性异染色质兼性异染色质 （在整个细胞周期内都处于凝集状态）（特定时期处于凝集状态）三、核小体 由H2A、H2B、H3、H4各2 分子组成的八聚体和绕在八聚体外的DNA、一分 子H1组成。八聚体在中央，DNA分子盘绕在外，由此形成核心颗粒。,H1结合在核心颗粒外侧DNA双链的进出口端，如搭扣将绕在八聚体外DNA链固定，核心颗粒之间的连接部分为连接DNA。 核小体的定位对转录有促进作用
分子生物学试题及答案
分子生物学试题及答案一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。
除了5’ 3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（ IF-2 ）和（IF-3 ）。4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。 5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（ DNA重组技术）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（ hnRNA在转变为mRNA 的过程中经过剪接，）、
分子生物学试题及答案 一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源DNA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16．蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。18．Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（IF-2）和（IF-3）。 4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、 （mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（ S2）开始，无G时转录从（ S1）开
Section A 细胞与大分子 简述复杂大分子的生物学功能及与人类健康的关系。 Section C 核酸的性质 1.DNA的超螺旋结构的特点有哪些？ A 发生在闭环双链DNA分子上 B DNA双链轴线高卷曲，与简单的环状相比，连接数发生变化 C 当DNA扭曲方向与双螺旋方向相同时，DNA变得紧绷，为正超螺旋，反之变得松弛为负超螺旋。自然界几乎所有DNA分子超螺旋都为负的，因为能量最低。 2.简述核酸的性质。 A 核酸的稳定性：由于核酸中碱基对的疏水效应以及电荷偶极作用而趋于稳定 B 酸效应：在强酸和高温条件下，核酸完全水解，而在稀酸条件下，DNA的核苷键被选择性地断裂生成脱嘌呤核酸 C 碱效应：当PH超出生理范围时（7-8），碱基的互变异构态发生变化 D 化学变性：一些化学物质如尿素，甲酰胺能破坏DNA和RNA二级结构中的 而使核酸变性。 E 粘性：DNA的粘性是由其形态决定的，DNA分子细长，称为高轴比，可被机械力和超声波剪切而粘性下降。 F 浮力密度：1.7g/cm^3,因此可利用高浓度分子质量的盐溶液进行纯化和分析 G 紫外线吸收：核酸中的芳香族碱基在269nm 处有最大光吸收 H 减色性，热变性，复性。 思考题：提取细菌的质粒依据是核酸的哪些性质？ 质粒是抗性基因，，在基因组或者质粒DNA中用碱提取法。 Sectio C 课前提问 1.在1.5mL的离心管中有500μL，取出10 μL稀释至1000 μL后进行检测，测得A260=0.15。 问（1）：试管中的DNA浓度是多少？ 问（2）：如果测得A280=0.078, .A260/A280=？说明什么问题？ (1)稀释前的浓度：0.15/20=0.0075 稀释后的浓度：0.0075/100=0.75ug/ml （2）0.15/0.078=1.92〉1.8，说明DNA中混有RNA样品。 2.解释以下两幅图
1.什么是转座? 转座因子在一个DNA分子内部或者两个DNA之间不同位置 间的移动。 2.病毒基因组有哪些特点?答：不同病毒基因组大小相差较大；不同病 毒基因组可以是不同结构的核酸；除逆转录病毒外，为单倍体基因组；病毒基因组有的是连续的，有的分节段；有的基因有内含子；病毒基因组大部分为编码序列；功能相关基因转录为多顺反子mRNA有基因重叠现象。 3.原核生物基因组有哪些特点?答：基因组由一条环状双链DNA组成； 只有一个复制起始点；大多数结构基因组成操纵子结构；结构基因无重叠现象；无内含子，转录后不需要剪接；基因组中编码区大于非编码区；重复基因少，结构基因一般为单拷贝；有编码同工酶的等基因；基因组中存在可移动的DNA序列；非编码区主要是调控序列。 4.真核生物基因组有哪些特点?答：每一种真核生物都有一定的染色 体数目；远大于原核基因组，结构复杂，基因数庞大；真核生物基因转录为单顺反子；有大量重复序列；真核基因为断裂基因；非编码序列多于编码序列；功能相关基因构成各种基因家族。 5.基因重叠有什么意义?答：利用有限的核酸储存更多的遗传信息，提 高自身在进化过程中的适应能力。 6.质粒有哪些特性? 答：在宿主细胞内可自主复制；细胞分裂时恒定地 传给子代；所携带的遗传信息能赋予宿主特定的遗传性状；质粒可以转移。 7.什么是顺式作用元件? 答：基因中能影响基因表达，但不编码RNA 和蛋白质的DNA序列。顺式作用元件主要包括启动子、增强子、负调控元件等。 8.简述原核基因表达的特点。答：(1)只有一种RNA聚合酶。(2)原核 生物的基因表达以操纵子为基本单位。(3)转录和翻译是偶联进行的。(4)mR
现代分子生物学总结(朱玉贤、最新版)
一、绪论 两个经典实验 1、肺炎球菌在老鼠体内的毒性实验：先将光滑型致病菌（S型）烧煮杀活性以后、以及活的粗糙型细菌（R型）分别侵染小鼠发现这些细菌自然丧失了治病能力；当他们将经烧煮杀死的S型细菌和活的R型细菌混合再感染小鼠时，实验小鼠每次都死亡。解剖死鼠，发现有大量活的S型细菌。实验表明，死细菌DNA 进行了可遗传的转化，从而导致小鼠死亡。 2、T2噬菌体感染大肠杆菌：当细菌培养基中分别带有35S或32P标记的氨基酸或核苷酸，子代噬菌体就相应含有35S标记的蛋白质或32P标记的核酸。分别用这些噬菌体感染没有放射性标记的细菌，经过1~2个噬菌体DNA 复制周期后进行检测，子代噬菌体中几乎不含带35S标记的蛋白质，但含30%以上的32P 标记。说明在噬菌体传代过程中发挥作用的可能是DNA而不是蛋白质。 基因的概念：基因是产生一条多肽链或功能RNA分子所必需的全部核苷酸序列。
二、染色体与DNA 嘌呤嘧啶 腺嘌呤鸟嘌呤胞嘧啶尿嘧啶胸腺嘧啶 染色体 性质：1、分子结构相对稳定；2、能够自我复制，使亲、子代之间保持连续性；3、能指导蛋白质的合成，从而控制生命过程；4、能产生可遗传的变异。 组蛋白一般特性：1、进化上极端保守，特别是H3、H4；2、无组织特异性；3、肽链上氨基酸分布的不对称性；4、存在较普遍的修饰作用；5、富含赖氨酸的组蛋白H5 非组蛋白：HMG蛋白；DNA结合蛋白；A24非组蛋白
真核生物基因组DNA 真核细胞基因组最大特点是它含有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能蛋白质所隔开。人们把一种生物单倍体基因组DNA的总量称为C值，在真核生物中C 值一般是随着生物进化而增加的，高等生物的C 值一般大于低等动物，但某些两栖类的C值甚至比哺乳动物还大，这就是著名的C值反常现象。真核细胞DNA序列可被分为3类：不重复序列、中度重复序列、高度重复序列。 真核生物基因组的特点：1、真核生物基因组庞大，一般都远大于原核生物的基因组；2、真核基因组存在大量的的重复序列；3、真核基因组的大部分为非编码序列，占整个基因组序列的90%以上，这是真核生物与细菌和病毒之间的最主要的区别；4、真核基因组的转录产物为单顺反之；5、真核基因组是断裂基因，有内含子结构；6、真核基因组存在大量的顺式元件，包括启动子、增强子、沉默子等；7、真核基因组中存在大量的DNA多态性；8、真核基因组具有端粒结构。
试述乳糖操纵子的阻遏作用、诱导作用及正调控。 阻遏作用：阻遏基因lacl转录产生阻遏物单体，结合形成同源四体，即阻遏物。它是一个抗解链蛋白，当阻遏物与操纵基因O结合时，阻止DNA形成开放结构，从而抑制RNA聚合酶的功能。lacmRNA的转录起始受到抑制。 诱导作用：按照lac操纵子本底水平的表达，每个细胞内有几个分子的β-半乳糖苷酶和β-半乳糖苷透过酶。当加入乳糖，在单个透过酶分子的作用下，少量乳糖分子进入细胞，又在单个β-半乳糖苷酶的作用下转变为诱导物异构乳糖，诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之因不能与操纵基因结合而失活，O区没有被阻遏物占据从而激发lacmRNA 的合成。 调控作用：葡糖糖对lac操纵子的表达的抑制是间接的，不是葡萄糖本身而是其降解产物抑制cAMP的合成。cAMP-CAP复合物与启动子区的结合是lacmRNA转录起始所必须的，因为该复合物结合于启动子上游，能使DNA双螺旋发生弯曲。有利于形成稳定开放型启动子-RNA聚合酶结构。如果将葡萄糖和乳糖同时加入培养基中，lac操纵子处于阻遏状态，不能被诱导 试述E.coli的RNA聚合酶的结构和功能。 2个α亚基、一个β亚基、一个β’亚基和一个亚基组成的核心酶，加上一个亚基后则成为聚合酶全酶 α亚基：核心酶组装、启动子识别 β和β’亚基：β和β’共同形成RNA合成的催化中心 因子：存在多种因子，用于识别不同的启动子 试述原核生物DNA复制的特点。 1.原核只有一个起始位点。 2.原核复制起始位点可以连续开始新的复制，特别是快速繁殖的细胞。 3.原核的DNA聚合酶III复制时形成二聚体复合物。 4.原核的DNA聚合酶I具有5'-3'外切酶活性 DNA解旋酶通过水解ATP 产生能量来解开双链DNA 单链结合蛋白保证被解链酶解开的单链在复制完成前保持单链结构 DNA拓扑异构酶消除解链造成的正超螺旋的堆积，消除阻碍解链继续进行的这种压力，使复制得以延伸 真核生物hnRNA必须经过哪些加工才能成为成熟的mRNA，以用作蛋白质合成的模板？ （1）、在5’端加帽，5’端的一个核苷酸总是7-甲基鸟核苷三磷酸（m7Gppp）。 （2）、3’端加尾，多聚腺苷酸尾巴。准确切割，加poly（A）（3）、RNA的剪接，参与RNA剪接的物质：snRNA、snRNP（4）、RNA的编辑，编辑（editing）是指转录后的RNA 在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。 （5.）、RNA的再编码，mRNA有时可以改变原来的编码信息，以不同的方式进行翻译 （6.）、RNA的化学修饰，人细胞内rRNA分子上就存在106种甲基化和95种假尿嘧啶产物。
简答题 6．为什么利用RNAi抑制一个基因的表达较利用反义RNA技术更为彻底。 答：RNAi是外源或内源性的双链RNA 进入细胞后引起与其同源的mRNA特异性降解.dsRNA进入细胞后，在Dicer作用下，分解为21－22bp的SiRNA.SiRNA结合相关 酶，形成RNA介导的沉默复合物RISC.RISC在ATP作用下，将双链SiRNA变成单链 SiRNA,进而成为有活性的RISC,又称为slicer.slicer与靶mRNA结合，导致其断裂，进 而导致其彻底降解。 反义RNA是与靶mRNA互补的RNA，它通过与靶mRNA特异结合而抑制其翻译表达，反义RNA是与靶mRNA是随机碰撞并通过碱基互补配对，所以，mRNA不一定完全 被抑制。 8．简述真核基因表达的调控机制。 答：（1）DNA和染色质结构对转录的调控： ①DNA甲基化，②组蛋白对基因表达的抑制，③染色质结构对基因表达的调控作 用，④基因重排，⑤染色质的丢失，⑥基因扩增； （2）转录起始调控： ①反式作用因子活性调节，包括表达调节、共价调节，配体调节等蛋白质相互作用 调节），②反式作用因子与顺式作用原件结合对转录过程进行调控； （3）转录后调控： ①5’端加帽和3’端多核苷酸化调控，②选择剪接调控，③mRNA运输调控，④mRNA 稳定性调控； （4）翻译起始的调控： ①阻遏蛋白的调控，②对翻译因子的调控，③对AUG的调控，④mRNA 5’端非编 码区的调控，⑤小分子RNA； （5）翻译后加工调控： ①新生肽链的水解，②肽链中氨基酸的共价修饰，③信号肽调控。 9．简述mRNA加工过程。 答：（1）5′端加帽（由加帽酶催化5′端加入7-甲苷乌苷酸，形成帽子结构m7GpppmNP-）。（2）3′端加入Poly(A)尾（A、组蛋白的成熟mRNA无需加polyA尾；B、加尾信号包括AAUAAA和富含GU的序列；C、加尾不需模板；D剪切过程需要多种蛋白质因 子的辅助）。 （3）mRNA前体的剪接（剪接加工以除去内含子序列，并将外显子序列连接成为成熟的有功能的mRNA分子。内含子两端的结构通常是5′-GU……AG-3′。选择性剪接的作 用机制包括；A使用不同的剪接位点，B选择使用外显子，C、反式剪接，D、使用 不同的启动子，E、使用不同的多腺苷酸化位点）。 （4）RNA的编辑（发生于转录后水平，改编mRNA序列，C→U或A→G，增加遗传信息容量）。 10．简述生物的中心法则。 答：中心法则(genetic central dogma)，是指遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA传递给蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译的过程。也可以从DNA传递给DNA，即完成DNA的复制过程。
分子生物学 第一章绪论 分子生物学研究内容有哪些方面？ 1、结构分子生物学； 2、基因表达的调节与控制； 3、DNA重组技术及其应用； 4、结构基因组学、功能基因组学、生物信息学、系统生物学 第二章DNA and Chromosome 1、DNA的变性：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。 2、DNA复性：变性DNA在适当条件下，分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象。 3、Tm(熔链温度)：DNA加热变性时，紫外吸收达到最大值的一半时的温度，即DNA分子内50%的双链结构被解开成单链分子时的温度） 4、退火：热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，称为退火 5、假基因：基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。以Ψ来表示。 6、C值矛盾或C值悖论:C值的大小与生物的复杂度和进化的地位并不一致，称为C值矛盾或C值悖论(C-Value Paradox)。 7、转座：可移动因子介导的遗传物质的重排现象。 8、转座子：染色体、质粒或噬菌体上可以转移位置的遗传成分 9、DNA二级结构的特点：1）DNA分子是由两条相互平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成；2）DNA分子中的脱氧核苷酸和磷酸交替连接，排在外侧，构成基本骨架，碱基排列在外侧；3）DNA分子表面有大沟和小沟；4）两条链间存在碱基互补，通过氢键连系，且A=T、G ≡ C（碱基互补原则）；5）螺旋的螺距为3.4nm，直径为2nm，相邻两个碱基对之间的垂直距离为0.34nm，每圈螺旋包含10个碱基对；6）碱基平面与螺旋纵轴接近垂直，糖环平面接近平行 10、真核生物基因组结构：编码蛋白质或RNA的编码序列和非编码序列，包括编码区两侧的调控序列和编码序列间的间隔序列。 特点：1）真核基因组结构庞大哺乳类生物大于2X109bp；2）单顺反子（单顺反子：一个基因单独转录，一个基因一条mRNA，翻译成一条多肽链；）3）基因不连续性断裂基因（interrupted gene）、内含子(intron)、外显子(exon)；4）非编码区较多，多于编码序列(9:1) 5）含有大量重复序列 11、Histon(组蛋白)特点：极端保守性、无组织特异性、氨基酸分布的不对称性、可修饰作用、富含Lys的H5 12、核小体组成：由组蛋白和200bp DNA组成 13、转座的机制：转座时发生的插入作用有一个普遍的特征，那就是受体分子中有一段很短的被称为靶序列的DNA会被复制，使插入的转座子位于两个重复的靶序列之间。 复制型转座：整个转座子被复制，所移动和转位的仅为原转座子的拷贝。 非复制型转座：原始转座子作为一个可移动的实体直接被移位。 第三章DNA Replication and repair 1、半保留复制：DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板(template)按碱
分子史上得经典事件？ 答:1９53waｔｓon 与cｒick 提出得DＮＡ分子双螺旋模型在科研过程中,要具有清醒得宏观洞察力、非凡得科学想像力与严密得逻辑思维能力,选择正确得研究路线,广泛借鉴她人得研究成果并加以综合性得科学思考。 分子生物学得理论基础就是？主要得研究策略有?(第一章) 答:1958年,克里克提出两个学说,奠定了分子生物学得理论基础。第一个学说就是“序列学说”,它认为一段核酸得特殊性完全由它得碱基序列决定,碱基序列编码一个特定蛋白质得氨基酸序列,蛋白质得氨基酸序列决定了蛋白质得三维结构。第二个学说就是“中心法则”,遗传信息只能从核酸传递给核酸,或核酸传递给蛋白质,而不能从蛋白质传递给蛋白质,或就是从蛋白质传回核酸。研究策略:体内与体外实验得结合将遗传与DＮA联系起来。体内(In v ｉvo)实验:在活体内进行得实验,包括在培养得细胞或组织。体外(In ｖｉtro)实验:在细胞提取物中,或者就是人工合成得细胞成分混合物中。 分子与其她学科关系?生物学离不开生物学技术? 答:分子生物学就是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以至信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来得。现代生物学得发展越来越多得应用分子生物学得理论与方法进行研究。 什么就是分子生物学？ 广义得概念:分子生物学就是研究核酸、蛋白质等生物大分子形态、结构特征及其重要性、规律性与相互关系得科学、 狭义得概念:从分子水平研究生物大分子得结构与功能从而阐明生命现象本质得科学,主要指遗传信息得传递(复制)、保持(损伤与修复)、基因得表达(转录与翻译)与调控等,也称之为基因得分子生物学。 DNA分子在结构上为什么最适合作为遗传信息载体？(第二章第一节) 化学性质比较稳定,DNＡ复制时严格遵守碱基互补配对原则,且为半保留复制;四种脱氧核糖核苷酸可以组成不同得长链,可以携带大量遗传信息。 ＤNA提取操作要点就是？(第二章第一节) 提取原则:保持一级结构得完整性,将其她生物大分子得污染降到最低。 提取流程:破碎细胞;DＮA释放到水相;去垢剂或蛋白变性剂抽提;除去蛋白等杂质。DNA沉淀, DNA溶解与保存。 ＤＮA提取与鉴定得相关操作中需要注意什么? 1)DNA分子较大应注意防止机械张力将其打断,所以操作要轻柔,离心速度要控制。 ２)要灭活DNＡ酶,采用0、01M得EDTA或者柠檬酸钠处理,或者用去垢剂(ＳDS)、蛋白变性剂(苯酚、氯仿等)就可以基本灭活,此外,５5 ℃处理也经常用于灭活残余得ＤＮA酶、3)除去蛋白质等杂质时酚抽提要彻底,上清要去尽,吸取上清时不要带有沉淀。 ４)鉴定时注意电泳时得电压,电泳缓冲液得浓度,ｐH;选用合适得凝胶以及凝胶得浓度。 简述RNＡ得功能、 (1)ＲNA就是一些病毒得遗传物质。 (2)与蛋白质合成有关,ｍRNA 在功能上就是基因与蛋白合成机器之间得中介;ｔRNA在功能 上就是mRＮＡ上密码子与氨基酸之间得衔接分子。 (３)有些RNA具有催化活性(核酶)。例如研究发现,四膜虫得26ｓrRNA得单个内含子在体外具有自我剪接功能;RNａse P中得RＮA组分在体外能对ｔRNA前体进行加工。(4)ＲＮA可以通过多种途径调节基因表达。调解途径包括不同得RNA折叠,核糖开关,与非编 码RNA有关得RNA干扰现象、X染色体随机失活现象等、 获得高质量RNA得操作应注意什么?
分子生物学总结完整版 1、结构分子生物学； 2、基因表达的调节与控制； 3、DNA重组技术及其应用； 4、结构基因组学、功能基因组学、生物信息学、系统生物学 第二章DNA and Chromosome 1、DNA的变性：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。 2、 DNA复性：变性DNA在适当条件下，分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象。 3、 Tm(熔链温度)： DNA加热变性时，紫外吸收达到最大值的一半时的温度，即DNA分子内50%的双链结构被解开成单链分子时的温度） 4、退火：热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，称为退火 5、假基因：基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。以Ψ来表示。 6、 C值矛盾或C值悖论:C值的大小与生物的复杂度和进化的地位并不一致，称为C值矛盾或C值悖论(C-Value Paradox)。 7、转座：可移动因子介导的遗传物质的重排现象。 8、转座子：染色体、质粒或噬菌体上可以转移位置的遗传成分
9、 DNA二级结构的特点：1）DNA分子是由两条相互平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成；2）DNA分子中的脱氧核苷酸和磷酸交替连接，排在外侧，构成基本骨架，碱基排列在外侧；3）DNA分子表面有大沟和小沟；4）两条链间存在碱基互补，通过氢键连系，且A=T、G ≡ C（碱基互补原则）；5）螺旋的螺距为 3、4nm，直径为2nm，相邻两个碱基对之间的垂直距离为0、34nm，每圈螺旋包含10个碱基对；6）碱基平面与螺旋纵轴接近垂直，糖环平面接近平行 10、真核生物基因组结构：编码蛋白质或RNA的编码序列和非编码序列，包括编码区两侧的调控序列和编码序列间的间隔序列。特点：1）真核基因组结构庞大哺乳类生物大于2X109bp；2）单顺反子（单顺反子：一个基因单独转录，一个基因一条mRNA，翻译成一条多肽链；）3）基因不连续性断裂基因（interrupted gene）、内含子(intron)、外显子(exon)；4）非编码区较多，多于编码序列(9:1) 5）含有大量重复序列1 1、Histon(组蛋白)特点：极端保守性、无组织特异性、氨基酸分布的不对称性、可修饰作用、富含Lys的H5 12、核小体组成： 由组蛋白和200bp DNA组成 13、转座的机制：转座时发生的插入作用有一个普遍的特征，那就是受体分子中有一段很短的被称为靶序列的DNA会被复