植物病毒载体介导的sMMO-C在蚕豆植物中的表达

蚕豆萎蔫病毒2号安徽分离物全基因组序列测定与分析严丹侃;郑红英;张海珊;沈艳;顾江涛;章东方;燕飞【摘要】利用酶联免疫和RT-PCR技术对采自安徽地区的蚕豆病株进行检测,确定其病原为蚕豆萎蔫病毒2号Broad bean wilt virus 2(BBWV2).为明确BBWV2安徽分离物(BBWV2-AH)的分类地位,克隆了该分离物的全基因组序列,分析了其基因组特征.结果表明,BBWV2-AH RNA1全长为5 944 bp(GenBank登录号:KY606992),含有1个ORF;BBWV2-AH RNA2全长3 587 bp (GenBank登录号:KY606993),含有1个ORF.全序列核苷酸和氨基酸相似性分析显示,BBWV2-AH RNA1与BBWV2其他分离物的核苷酸、氨基酸相似性分别为78.4％～96％和87.1％～99％;BBWV2-AH RNA2与BBWV2其他分离物的核苷酸、氨基酸相似性分别为76.8％～95.5％和88.2％～98.3％.全基因组核苷酸序列系统发育分析显示,BBWV2-AH RNA1与中国的BBWV2-Hu-nan RNA1的亲缘关系最近,而BBWV2-AH RNA2与韩国的多个分离物聚集在一起,再与中国的分离物BBWV2-B935形成一个分支.%BBWV2 was detected from broad bean plants in Anhui Province by DAS-ELISA and RT-PCR.To further characterize the BBWV2 Anhui isolate (BBWV2-AH),complete nucleotide sequence of BBWV2-AH was determined.Sequence analysis suggested that BBWV2-AH RNA1 was comprised of 5 944 nucleotides,encoding one ORF (GenBank accession no.KY606992);BBWV2-AH RNA2 was comprised of 3 587 nucleotides,also encoding one ORF (GenBank accession no.KY606993).The comparison of nucleotide sequences suggested that RNA1 and RNA2 of BBWV2-AH shared 78.4％-96％ and 76.8％-95.5％ nucleotide sequence identity with those of other BBWV2 isolates,respectively.Furthermore,the comparison ofamino acid sequences suggested that RNA1 and RNA2 of BBWV2-AH shared 87.1％-99％ and 88.2％-98.3％ amino acid sequence identity with those of other BBWV2 isolates,respectively.Phylogenetic analysis based on nucleotide sequences showed that RNA1 of BBWV2-AH isolate was most closely related to BBWV2-Hunan isolate,while RNA2 of BBWV2-AH formed an independent branch with several Korean isolates,and was then closely related to BBWV2-B935 from China.【期刊名称】《植物保护》【年(卷),期】2018(044)001【总页数】7页(P67-73)【关键词】蚕豆萎蔫病毒2号;安徽分离物;基因组;序列分析【作者】严丹侃;郑红英;张海珊;沈艳;顾江涛;章东方;燕飞【作者单位】安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所,合肥230031;浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所,杭州310021;安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所,合肥230031;安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所,合肥230031;安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所,合肥230031;安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所,合肥230031;浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所,杭州310021【正文语种】中文【中图分类】S435.23蚕豆是我国重要的经济作物,据FAO统计,我国2014年蚕豆收获面积为92.5万hm2,总产量为159.5万t,是世界蚕豆生产第一大国,产量占世界蚕豆总产量的36.7%[1]。

VIGS实验方案VIGS（病毒诱导基因沉默）是一种基因沉默的技术，通过病毒载体介导的RNA干扰机制，靶向降低目标基因的表达。

VIGS技术广泛应用于植物研究领域，可以帮助我们理解基因与表型之间的关系。

下面是一个VIGS实验方案的示例，以帮助研究者深入了解该技术的应用。

实验目标：通过VIGS技术沉默目标基因，研究其在植物发育和抗逆过程中的功能。

实验步骤：1.构建VIGS载体：选择一个合适的病毒载体（如Tobacco Rattle Virus，TRV），并将目标基因的片段克隆到载体中，构建TRV:目标基因短暂表达载体。

2.病毒感染：将构建好的TRV:目标基因载体与辅助载体（如pTRV1）转化至Agrobacterium tumefaciens，并经过过夜培养。

3.生成病毒颗粒：分别用TRV:目标基因载体感染葡萄苗或拟南芥等模式植物的幼苗，通过渗透法或注射法将Agrobacterium harboring TRV:目标基因载体的细菌转化至植物体内。

然后将植物继续养护，直至观察到病毒症状。

4.分析基因沉默效率：在病毒感染后的适当时间点（通常是10-14天），收集叶片或其他组织样本，利用实时定量PCR或Northern blotting等方法，分析目标基因的表达水平。

与未感染的植物进行对照实验，以评估基因沉默的效率。

5.表型分析：观察病毒感染植株的表型变化，如外观、生长速度、营养状况等。

比较感染植株与对照植株的差异，以推断目标基因在发育和抗逆等生理过程中的功能。

6.RNA测序分析：收集沉默目标基因的植株样本，提取总RNA并进行测序分析。

通过与对照样本比较，鉴定沉默目标基因可能参与的信号通路和生物过程。

7.补充实验证实：根据RNA测序结果，选择一些重要的候选基因进行进一步验证实验，如RT-PCR、Western blotting以及表型复原分析等。

8.数据分析和结果呈现：对实验数据进行统计分析，使用图表、图片和表格等形式呈现实验结果。

豌豆蚜Jun蛋白的原核表达与抗体制备苏慧迪王文涛刘彦马力*（山西农业大学植物保护学院，山西晋中030801）摘要对豌豆蚜Jun蛋白进行原核表达进而进行抗体制备，可为探究JNK通路对靶基因的调控机制奠定材料基础。

本研究提取豌豆蚜的总RNA，经反转录、PCR扩增后进行原核表达与抗体制备，并用ELASA法测定其抗血清效价、Western-Blot法检测抗体特异性。

结果表明：本文所构建的pET-28a-SUMO表达载体能在大肠杆菌体内成功表达出Jun蛋白，并通过免疫兔子成功制备了多克隆抗体，其抗血清效价良好、抗体特异性较好。

本研究成功表达出豌豆蚜Jun蛋白，并成功制备出抗体，可用于下步试验，对进一步探究JNK通路对靶基因的调控机制具有重要意义。

关键词豌豆蚜；Jun蛋白；原核表达；抗体制备中图分类号S433文献标识码A文章编号1007-5739（2023）22-0060-05DOI：10.3969/j.issn.1007-5739.2023.22.017开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Prokaryotic Expression and Antibody Preparation of Jun Protein from Pea AphidSU Huidi WANG Wentao LIU Yan MA Li*（College of Plant Protection,Shanxi Agricultural University,Jinzhong Shanxi030801）Abstract Prokaryotic expression of Jun protein from pea aphid,followed by antibody preparation,can lay a mate-rial foundation for exploring the regulatory mechanism of JNK pathway on target genes.In this study,total RNA of pea aphid was extracted,and then prokaryotic expression and antibody preparation were performed after reverse transcrip-tion and PCR amplification,and its antiserum potency was determined by ELASA method and antibody specificity was detected by Western-Blot method.The results showed that the pET-28a-SUMO expression vector constructed in this paper could successfully express Jun protein in Escherichia coli,and successfully prepare polyclonal antibodies by immunizing rabbits,the antibodies had good antiserum potency and good antibody specificity.In this study,we success-fully expressed the Jun protein of pea aphid and prepared antibody that can be used in the next experiments,which is important to further investigate the regulatory mechanism of JNK pathway on target genes.Keywords pea aphid;Jun protein;prokaryotic expression;antibody preparation蚜虫属于昆虫纲半翅目胸喙亚目，是半翅目昆虫中的一个大类，目前世界上已知的蚜虫有4700余种[1]。

作物学报ACTA AGRONOMICA SINICA 2014, 40(11): 1905 1913/ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9E-mail: xbzw@ DOI: 10.3724/SP.J.1006.2014.01905利用病毒介导基因沉默方法研究小麦抗光氧化相关基因陈坤梅1,2李宏伟2,*林凡云2陈耀锋1,*李滨2郑琪2李振声21西北农林科技大学农学院, 陕西杨凌 712100; 2中国科学院遗传与发育生物学研究所, 植物细胞与染色体工程国家重点实验室, 北京 100101摘要: 为了鉴定可能的小麦抗光氧化基因, 利用大麦条斑病毒(barley stripe mosaic virus, BSMV)介导的基因沉默(virus-induced gene silencing, VIGS)系统, 对6个小偃54响应强光的基因进行了沉默表达研究。

以BSMV:GFP植株为对照, 分析了这些基因的减量表达植株在低温强光、DCMU、MV、H2O2等处理下的PSII最大光化学效率(F v/F m)和光合性能指数(P.I.)、MDA含量及整株生物量变化。

结果显示, Ta23008和Ta92165均参与小麦对低温强光、DCMU、MV和H2O2等胁迫的响应过程; Ta106078参与小麦对DCMU、MV和H2O2等胁迫的响应过程; Ta27787参与小麦对低温强光、DCMU和H2O2等胁迫的响应过程; Ta24695参与小麦对低温强光和H2O2胁迫的响应过程; 而Ta119251仅参与小麦对DCMU的响应过程。

此外, Ta23008、Ta92165、Ta106078、Ta119251四个基因被抑制表达后, 其转化株系的生物量比对照显著降低, 推测其可能参与调控小麦生物量的积累。

关键词:小麦; 大麦条斑病毒(BSMV); 病毒介导的基因沉默; 基因功能; 光氧化Functional Analysis of Photo-Oxidative Stress Responsive Genes in Wheat Using Virus-Induced Gene Silencing SystemCHEN Kun-Mei1,2, LI Hong-Wei2,*, LIN Fan-Yun2, CHEN Yao-Feng1,*, LI Bin2, ZHENG Qi2, and LI Zhen-Sheng21 College of Agronomy, Northwest A&F University, Yangling 712100, China;2 State Key Laboratory of Plant Cell and Chromosome Engineering, Institute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, ChinaAbstract: Functional analysis of photo-oxidative stress responsive genes in wheat (Triticum aestivum L.) may benefit wheat im-provement for high radiation use efficiency. A Chinese variety Xiaoyan 54 developed from distant hybridization between common wheat (T. aestivum, 2n=42) and tall wheatgrass (Thinopyrum ponticum, 2n=70) shows significant tolerance to high light induced photo-oxidative stress. Based on previous transcriptome analysis of Xiaoyan 54 in response to high light stress, six genes were selected in this study to assess their possible roles in photo-oxidative stress response using barley stripe mosaic virus (BSMV) mediated virus-induced gene silencing (VIGS) system in Xiaoyan 54. The BSMV induced silencing of the targeted genes together with the BSMV:GFP control plants were exposed to low temperature and high light (LTHL), N-(3,4-dichlorophenyl)-N’,N’- dimethylurea (DCMU), methylviologen (MV), and hydrogen peroxide (H2O2) stress, respectively. The maximum photochemical efficiency of photosystem II (F v/F m), the photosynthetic performance index (P.I.), malondialdehyde (MDA) content, and biomass were evaluated. The results showed that Ta23008 and Ta92165 were involved in the responses of wheat to LTHL, DCMU, MV, and H2O2, respectively. Ta106078 was responsible for wheat tolerance to DCMU, MV, and H2O2 while Ta27787 was responsiblefor LTHL, DCMU, and H2O2 stress. Ta24695 participated in the response of wheat to both LTHL and H2O2. However, Ta119251 seemed to be only responsible for the DCMU stress in wheat. Additionally, four genes, Ta23008, Ta92165, Ta106078, andTa119251, were likely to regulate biomass accumulation because the biomass was significantly reduced when they were silencedin wheat. These results provided new hints toward understanding the molecular mechanism of tolerance to photo-oxidative stressin Xiaoyan 54.Keywords:Triticum aestivum; Barley stripe mosaic virus; VIGS; Genomic function; Photo-oxidative stress本研究由国家自然科学基金项目(31371609)资助。

毕业论文（设计）题目：CUC3基因RNA干扰载体对烟草的转化及鉴定诚信声明本人郑重声明：所呈交的毕业设计（论文）是我个人在导师指导下, 由我本人独立完成。

有关观点、方法、数据和文献等的引用已在文中指出,并与参考文献相对应。

据我查证，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表和撰写的研究成果，也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。

我承诺，论文中的所有内容均真实、可信。

如在文中涉及到抄袭或剽窃行为，本人愿承担由此而造成的一切后果及责任。

毕业论文（设计）作者签名：签名日期：年月日摘要采用叶盘法通过已导入了构建好的表达载体的根癌农杆菌，对野生型烟草叶片进行转化。

烟草叶片在分化培养基MS + 0.1mg/L NAA + 1.0mg/L 6-BA + 50mg/L Hyg + 500mg/L Cb上4周后分化出芽；在生根培养基MS +0.2 mg/L IBA +250mg/L Cb上，1-2周后形成根；叶片β-葡萄糖甘酸酶（GUS）组织化学染色，阳性率为75%；通过PCR 检测潮霉素磷酸转移酶（HPT）基因的DNA序列，获得14个阳性株系。

在烟草转化阳性株系中获得了2种表型：叶片融合和叶片缺失。

关键词∶根癌农杆菌；GUS组织化学染色; 聚合酶链式反应( PCR)AbstractAgrobacterium with expression vector transformed the leaves of Nicotiana tabacum. Regenerated shoots were formed in 4 weeks when the leaves of N. tabacum cultured on shoot-inducing medium MS medium supplemented with 0.1mg/L NAA, 1.0mg/L 6-BA, 50mg/L Hyg and 500mg/L Cb. Shoots rooted on the root induction medium MS medium supplemented with 0.2mg/L IBA and 250mg/L Cb in 1-2 weeks. β-glucuronidase(GUS) histochemical assay indicated that the GUS positive rate was 75%. PCR analysis of gene Hygromycin phosphotransferase(HPT) gene indicated that there were 14 positive lines. There were 2 distinct phenotypes in the positive lines: leaf fusion and leaf incompleteness.Keywords：Agrobacterium tumefacien; GUS staining; polymerase chain reaction (PCR)目录第一章前言 (1)1.1烟草概述 (1)1.1.1 烟草的生物学研究 (1)1.1.2 烟草的遗传转化研究进展 (1)1.2根癌农杆菌转化体系 (2)1.2.1根癌农杆菌介导的分子机制 (3)1.2.2 用根癌农杆菌进行基因转化的植物 (3)1.3RNA干扰 (4)1.3.1 RNA干扰的定义 (4)1.3.2 siRNA基因沉默原理 (4)1.3.3 RNA干扰在植物中的应用 (4)1.3.4 CUC3（Cup-Shaped Cotyledon3）基因 (6)1.4常用分子生物学实验方法 (6)1.4.1 GUS基因检测——组织化学染色法 (6)1.4.2 基因组DNA提取（CTAB法） (7)1.4.4 PCR技术 (8)1.4.4 琼脂糖凝胶电泳 (8)1.5立题的依据及目的 (10)1.6本研究的目的及实验内容 (11)第二章材料与方法 (12)2.1材料 (12)2.1.1植物材料 (12)2.1.2菌株 (12)2.1.3培养基 (12)2.1.4试剂 (13)2.1.5实验仪器 (14)2.2方法 (16)2.2.1烟草无菌苗的培养 (16)2.2.2菌株及培养 (16)2.2.3叶盘法浸泡转化及植株再生 (17)2.2.4烟草转基因植株鉴定 (17)第三章结果与讨论 (20)3.1实验结果 (20)3.1.1转化植株的获得 (20)3.1.2 GUS组织化学染色法鉴定 (21)3.1.3 PCR扩增检测阳性转基因植株 (22)3.2转基因植株的表型特征分析 (22)3.2.1表型类型Ⅰ——叶片融合 (22)3.2.2 表型类型Ⅲ——叶片缺失 (23)3.3讨论 (24)3.3.1分化和筛选培养基的选择 (24)3.3.2 报告基因的选择 (24)3.3.3 表型分析 (25)第四章结论与展望 (26)4.1结论 (26)4.2展望 (26)致谢 ........................................................................................................... 错误!未定义书签。

作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2014, 40(8): 1356 1363/ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9E-mail: xbzw@本研究由国家自然科学基金项目(31171590)和江苏省自然科学基金项目(BK2010065)资助。

*通讯作者(Corresponding author): 王心宇, E-mail: xywang@, Tel: 025-********Received(收稿日期): 2014-01-10; Accepted(接受日期): 2014-06-04; Published online(网络出版日期): 2014-06-12. URL: /kcms/detail/11.1809.S.20140612.1637.002.htmlDOI: 10.3724/SP.J.1006.2014.01356TRV 病毒介导的基因沉默体系在棉花中的建立及应用王心宇1,* 吕 坤1 蔡彩平2 徐 君2 郭旺珍21南京农业大学生命科学学院, 江苏南京210095; 2南京农业大学农学院 / 作物遗传与种质创新国家重点实验室, 江苏南京210095摘 要: 以陆地棉CLA1基因为标记基因, 利用烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus, TRV)载体建立基于病毒介导的棉花基因沉默体系(virus-induced gene silencing, VIGS)。

病毒RNA2的RT-PCR 分析证明, 棉花子叶接种TRV 病毒后, 该病毒可高效扩散到受体的根、茎、叶等器官。

利用TRV-VIGS 体系同时诱导34份不同来源棉花材料CLA1基因沉默, 尽管不同材料间的抑制程度有差异, 但均可有效抑制CLA1基因的表达, 说明该体系在棉花研究中的广谱利用性。

GhMAPKKK 基因受黄萎病菌诱导表达, 接种后96 h 表达量达到高峰。

利用TRV-VIGS 体系, 成功抑制了棉花GhMAPKKK 基因的表达, 与对照株相比, 抑制后的棉花植株接种黄萎病菌后更易感病, 说明GhMAPKKK 参与了棉花对黄萎病菌的抗性反应。

龚　婷，刘灵娣，温春秀，等．丹参ＳｍＷＲＫＹ３３基因的克隆与表达分析［Ｊ］．江苏农业科学，２０２４，５２（３）：５３－６０．ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０２４．０３．００８丹参ＳｍＷＲＫＹ３３基因的克隆与表达分析龚　婷１，２，刘灵娣１，温春秀１，武玉翠２，王　升３，万修福３，孙亚倩１，姜　涛１（１．河北省农林科学院经济作物研究所，河北石家庄０５００５１；２．河北工程大学园林与生态工程学院，河北邯郸０５６０３８；３．道地药材国家重点实验室，北京１００７００） 摘要：为了研究ＷＲＫＹ３３基因在丹参非生物胁迫中的作用机制，以白花丹参为试验材料，对丹参转录组数据进行分析，挖掘出丹参ＷＲＫＹ３３基因参考序列并设计特异性引物，利用基因克隆技术从丹参中克隆出ＷＲＫＹ３３基因的全长ｃＤＮＡ，命名为ＳｍＷＲＫＹ３３。

对ＳｍＷＲＫＹ３３基因进行生物信息学分析，同时利用荧光定量方法探究ＳｍＷＲＫＹ３３基因在逆境胁迫下的表达模式。

结果表明，ＳｍＷＲＫＹ３３基因核苷酸长度为１６３５ｂｐ，编码５４４个氨基酸。

生物信息学分析显示，ＳｍＷＲＫＹ３３基因的理论相对分子量为６０８３５．６６，等电点为７．００，定位于细胞核，不存在跨膜区及信号肽，ＳｍＷＲＫＹ３３蛋白为不稳定亲水蛋白。

亲缘关系显示，ＳｍＷＲＫＹ３３与紫苏、芝麻、白花泡桐的ＷＲＫＹ３３亲缘关系较近。

密码子偏好性分析得出拟南芥真核表达最适应丹参ＳｍＷＲＫＹ３３基因的外源表达。

ｑＲＴ－ＰＣＲ结果表明，ＳｍＷＲＫＹ３３基因在低温、高温、ＰＥＧ、ＮａＣｌ等逆境胁迫诱导下具有不同的表达模式，其中低温、ＮａＣｌ能显著诱导ＳｍＷＲＫＹ３３基因的高表达，说明该基因对温度调节、盐胁迫较为敏感，猜测其参与温度、盐胁迫调控反应机制。

本试验首次从丹参中克隆出ＳｍＷＲＫＹ３３基因，探讨了该基因在丹参逆境胁迫下的作用机制，旨在为培育丹参的抗逆新品种提供参考基因。

关键词：丹参；ＳｍＷＲＫＹ３３基因；生物信息学；ｑＲＴ－ＰＣＲ；基因克隆 中图分类号：Ｓ５６７．５＋３０．１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－１３０２（２０２４）０３－００５３－０８收稿日期：２０２３－０４－１１基金项目：中央本级重大增减支项目（编号：２０６０３０２）；国家现代农业产业技术体系建设专项（编号：ＣＡＲＳ－２１）；河北省重点研发计划专项（编号：２２３２６３０１Ｄ）。

植物病原菌诱导表达载体构建及在烟草中的瞬时表达研究欧阳乐军;黄真池;沙月娥;曾富华【摘要】According to the sequences of pathogen-inducible plant promoters PPP3 at GenBank,PPP3 promot-ers was cloned from tobacco genome .It was used to replace cauliflower mosaic virus 35 S promoter of pCAM-BIA1301 .The recombinant plasmid was used to transform Agrobacterium tumefaciens GV3101 .The inducibility of the PPP3 promoters in tobacco leaf was evaluated by Agrobacterium tumefaciens-transient genetic transformation as-sye .Real-time quantitative PCR was used to screen the PPP 3 promoters with high inducible expression .The results showed that the gus transcript level under the control of PPP 3 promoters increased respectively 27 .94 fold and 17.69 fold after inoculation with Ralstonia solanacearum and SA.The PPP3 promoter had the advantages such as low basal activity and high expression activity .%根据GenBank中植物病原物诱导型启动子碱基序列设计引物，以烟草基因组DNA为模板，扩增PPP3启动子。

植物病害研究法1.列举五个你熟悉的中英文文献检索数据库。

中文：维普、万方、CNKI三大期刊知识库，超星、书生之家书籍库。

英文：Pubmed、SD、EBSCO、Springer、NPG、Ei Village、CAS、Kluwer、ProQuest、Ovid。

2.谈谈如何做好文献检索工作。

（1）根据题目确定关键词，随着对题目的深入了解，增加关键词，保证文章的查全率。

（2）选择合适的数据库，常用的中文数据库有……英文数据库有……（3）使用相应的检索技术，如布尔逻辑算符、位臵检索、截词、优先算符等，来提高检索的效率，另外，需要注意of、the、in、she、he、to be、as、because、if、when等为禁用词，在检索时自动忽略。

（4）将检索到的文献进行筛选和归类：分精读与速读两类；只保留重要的资料；精细分类，并录入数据库。

（5）科学合理使用文件管理软件，如Endnote和Reference Manage。

（6）学会走进文献、走出文献，从文献中发现Idea。

3.谈谈文献检索工作对科研工作者的重要性。

第一，有助于利用和掌握文献资料，缩短查找文献资料所花费的时间。

在科学研究活动中，搜集、掌握足够的文献资料是研究工作的重要组成部分，往往要耗费较多的时间，而文献数量的成倍增长，各学科的相互渗透导致的文献交叉与分散化，使查找所需文献更加固难。

在这种情况下，文献检索的功能和作用，恰恰能解决众多繁杂的文献与研究者特定需要之间的矛盾，能帮助研究者从浩如烟海的文献中迅速、准确地查找出所需专用文献，达到节省时间和精力的目的。

第二，有助于获取最新知识，及时了解研究课题内容所涉及的专业和相关学科的发展动态，指导课题研究的顺利进行。

第三，有助于开阔视野，扩大知识面，借鉴他人之法，指引治学门径，解决研究过程中的疑难问题。

通过文献检索，不仅能够较快地获得所必须了解和掌握的知识，获得大量的情报信息，而且还能够比较有关文献的异同优劣，明确学术源流，达到正确鉴别、准确选择所需文献资料的目的。

蚕豆萎蔫病毒单克隆抗体制备及检测应用
青玲;吴建祥;戚益军;周雪平;李德葆
【期刊名称】《微生物学报》
【年(卷),期】2000(040)002
【摘要】用蚕豆萎蔫病毒(BBWV)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,获得6株能稳定传代并分泌抗BBWV单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株,单抗腹水ELISA滴度为1:320000～1:640000,各单抗抗体类型均为IgG1.6株单抗与BBWV不同分离物均有反应,而与其它植物病毒无交叉反应.经Western-blot印迹分析表明,此6株单克隆抗体均是针对BBWV44.7kD的外壳蛋白大亚基的特异性抗体.这是国内外首次报道获得BBWV单克隆抗体.
【总页数】8页(P166-173)
【作者】青玲;吴建祥;戚益军;周雪平;李德葆
【作者单位】西南农业大学植保系,重庆,630716;浙江大学生物技术研究所,杭州,310029;浙江大学生物技术研究所,杭州,310029;浙江大学生物技术研究所,杭州,310029;浙江大学生物技术研究所,杭州,310029
【正文语种】中文
【中图分类】S432.4
【相关文献】
1.齿兰环斑病毒外壳蛋白的原核表达、抗体制备及检测应用 [J], 章颉;孟春梅;荣松;张超;洪健;吴建祥
2.蚕豆萎蔫病毒单克隆抗体研制 [J], 吴建祥
3.单克隆抗体夹心ELISA检测蚕豆萎蔫病毒研究 [J], 吴建祥
4.黄瓜绿斑驳花叶病毒多克隆抗体制备及检测应用 [J], 李桂芬;马洁;陈红运;李明福;陈笑瑜;丁建云
5.Bt（Cry1F）毒素多克隆抗体制备及其检测应用 [J], 徐重新;程诚;张霄;刘媛;仲建锋;胡晓丹;张存政;刘贤金
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。