清热解毒口服液的絮凝澄清技术

中国医院药学杂志２００２年第２２卷第７期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２００２　Ｊｕｌ，Ｖｏｌ　２２，Ｎｏ　７　清热解毒口服液的絮凝澄清技术　・

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苗兰兰，秦雪梅，漆小梅，王超凡　（山西医科大学药学院，山西太原０３０００１）　［摘要］　目的：研究絮凝技术用于中药水提液精制的可行性与科学性。方法：采用絮凝技术与醇沉技术制备清热解毒口服　液。结果：絮凝技术制备的清热解毒口服液与醇沉技术相比，成本低，生产周期短，对鞣质的去除较完全，稳定性优于醇沉法，　有效成分总黄酮的含量较醇沉制品略低，但明显高于中国药典标准，总多糖含量也略低于醇沉制品。结论：絮凝技术可替代　醇沉技术用于清热解毒口服液的澄清。　［关键词］　清热解毒；口服液；絮凝；醇沉　［中图分类号】Ｒ９２７　［文献标识码】Ａ　［文章编号】１００１—５２１３（２００２）０７—０４１３．０３　

Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｑｉｎｇｒｅｊｉｅｄｕ　ｏｒａｌ　ｌｉｑｕｉｄ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｆｉｏｃｃｕｌａｔｉｏｎ　

ＭＩＡｏ　Ｌａｎ—Ｌａｎ，ＱＩＮ　Ｘｕｅ—Ｍｅｉ，ＱＩ　Ｘｉａｏ－Ｍｅｉ，ｅｔ　ａ１．（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｓｈａｎｘｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｘｉ　Ｔａｉｙｕａｎ　０３０００１）　

ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　３ＳＳＣＳＳ　ｔｈｅ　ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｈｅｒｂ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｌｉｑｕｉｄ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｏｎ．１ＶｌＥＴＩｔＯＤＳ　Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｑｉｎｇｒｅｊｉｅｄｕ　ｏｒａｌ　ｌｉｑｕｉｄ　ｉｎ　ｔｌｏｃｃｕｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｃｏｍｐａｒａｂｌｅ　ｔＯ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ，ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｎｇ　Ｃａｎ　ｂｒｉｎｇ　ＵＳ　ａｄｖａｎｔａｇｅｓ　ｏｆ　ｌｏｗｅｒ　ｃ０ｓｔ．ｓｈｏｒｔｅｒ　ｃｙｃｌｅ　ｏｆ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｈｉｇｈｅｒ　ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｖｅｇｅｔａｂｌｅ　ｔａｎｎｉｎｓ　ａｎｄ　ｂｅｔｔｅｒ　ｒｅｌｉａｂｉｌｉｔｙ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ，ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，ｉｓ　ｌｏｗｅｒ　ｉｎ　ｓａｍｐｌｅ　ｐｒｅｐａｒｅｄ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｏｎ　ｔｈａｎ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ，ｂｕｔ　ｅｘｃｅｅｄｓ　ｔｈｅ　ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ．Ａｌｓｏ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ，ｔｏｔａｌ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ｉｓ　ｌｏｗｅｒ　ｉｎ　ｓａｍｐｌｅ　ｐｒｅｐａｒｅｄ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｏｎ　ｔｈａｎ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮＳ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｏｎ　ｃａｎ　ｒｅｐｌａｃｅ　ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ　ｔＯ　ｐｕｒｉｆｙ　Ｑｉｎ－　ｇｒｅ　ｊｉｅｄｕ　ｏｒａｌ　ｌｉｑｕｉｄ．　ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：Ｑｉｎｇｒｅｊｉｅｄｕ；ｏｒａｌ　ｌｉｑｕｉｄ；ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｏｎ；ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ　

清热解毒口服液是由生石膏、金银花、连翘、黄　芩等ｌ２昧药物组成的复方制剂。具有清热解毒功　效，用于治疗流感、上呼吸道感染及各种发热疾病，　收载于中国药典１９９５年版一部，生产工艺为水提醇　沉。此工艺存在许多缺点，如耗醇量大，成本高，工　艺流程长。若成品中含有一定量的醇，可能对药效　会产生直接或间接影响＿１　Ｊ。由于鞣质可溶于乙醇，　不能有效地去除，久置可聚合成絮状沉淀而影响口　服液的稳定性　２。为此，采用絮凝澄清技术处理本　方水提液，并与醇沉技术对比，考察生产周期及成　本、有效成份的保留、主要杂质鞣质的去除，为中药　水提液絮凝澄清新技术提供科学证据，并为筛选最　佳絮凝浓度提供一种科学简便的方法“浊度法”。　１试剂和仪器　几丁质（食用级，上海试剂二厂）；芦丁、Ｄ一葡萄　糖（均由中国药品生物制品检定所提供）；其余试剂　均为分析纯；所用药材由山西省药材采供站供给，经　山西省药品检验所鉴定均为正品药材；电光分析天　平（ＴＧ３２８Ａ，上海天平仪器厂）；紫外分光光度计　（ＵＶ一２６０，日本岛津）；光电式浑浊度仪（ＧＤＳ一　３Ａ，无锡科达仪器厂）、三用紫外分析仪（ＵＶ一１型，　上海顾村电光仪器厂）。　２方法与结果　２、１絮凝最佳条件选择　２．１．１　水提液的制备按中国药典处方量的１／１０　称取药材＿３　Ｊ，同法水煎提两次，滤过，合并滤液。滤　液浓缩至２倍总生药重，计２６０　ｍｌ。测定相对密度　为１．０６ｌ　，用氢氧化钠调ｐＨ至６．０，备用。　２．１．２絮凝最佳条件选择絮凝温度在７５～８５℃，　滤液ｐＨ值在４～６效果较好＿５．　。当药液温度和　ｐＨ值固定后，絮凝剂的加入量则成为影响澄清的最　主要因素。本研究采用浊度法筛选絮凝的最佳浓　度。取预热８０℃的药液７份，每份２５　ｍｌ，按表１中　体积加入絮凝剂（１％的醋酸溶液），静置３０　ｍｉｎ，记　录沉淀完全的沉降时间，过滤，记录过滤时间，将滤　表１　絮凝剂加入量与浊度和吸收度关系　Ｔａｂ　１　Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｏｆ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｑｕａｎｔｉｔｙ　ｏｆ　ｆｌｏｃｃｕｌａｎｔ　ｗｉｔｈ　ｔｕｒ—　ｂｉｄｉｔｙ　ａｎｄ　ａｂｓｏｒｂｌａｎｃｅ　

维普资讯 http://www.cqvip.com ・４１４・　中国医院药学杂志２００２年第２２卷第７期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｍ￣Ｊ，２００２　Ｊｕｌ，Ｖｏｌ　２２，Ｎｏ．７　液定容于２５　ｍｌ量瓶中。取５　ｍｌ用蒸馏水稀释至　１００　ｍｌ，测定浊度，结果见表１。取各序号溶液　０．４　ｍｌ，加水至６　ｍｌ，按文献　』测定吸收度。　从表１可见：随着絮凝剂加入量的增加，吸收度　降低，浊度先减小后增大。当加入絮凝剂２～４　ｍｌ　时，浊度最小，参照过滤时间及吸收度，选择每２５　ｍｌ　药液加入４　ｍｌ絮凝剂。　２．２醇沉与絮凝工艺比较　２．２．１　制备工艺　按药典处方ｌ／２称取药材，按　２．１．１法煎提两次，滤过，合并滤液，将其平均分成两　份。工艺Ｉ（醇沉法）：将一份滤液浓缩至与药材等　重时，加入乙醇使含醇量为６７％，冷藏４８　ｈ，滤过，　回收乙醇，浓缩。工艺Ⅱ（絮凝法）：将另一份滤液浓　缩至２倍药材重，调ｐＨ６，在８０℃时加絮凝剂　１０４　ｍｌ，边加边搅拌，静置０．５　ｈ，滤过，浓缩。两种　工艺过滤后的滤渣经洗涤干燥后用薄层层析法均未　检查出绿原酸；将工艺Ｉ和Ⅱ的浓缩液中加入０．５％　活性炭，加热３０　ｍｉｎ，滤过，滤液调ｐＨ为６．０，加水　至２５０　ｍｌ，滤过，灌装，灭菌，得醇沉口服液（Ｉ）和絮　凝口服液（１１）。　２．２．２　总黄酮含量　』测定　方法学考察见文　献ｔ３　Ｊ，经试验芦丁在８．０１６～７２．１４４　之间，浓度与　吸收度呈良好的线性关系。回归方程：Ａ＝　０．００４８６１＋１２．３８９８Ｃ，ｒ＝０．９９９９。精密量取各工　艺口服液２　ｍｌ，置于１００　ｍｌ量瓶中，加水至刻度，作　为供试品溶液。按文献【３　Ｊ测定样品含量，每个样品　测定６次，结果见表２。　表２不同工艺制备的口服液有效成分比较　Ｔａｂ　２　Ｃｏｍｐａｒｉｓｉｏｎ　ｏｆ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ　ｉｎ　ｏｒａｌ　ｌｉｑｕｉｄ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｍｅｔｈｏｄｓ　２．２．３总多糖测定＿７』　（１）标准曲线的制备：精密　称取１０５℃干燥至恒重的Ｄ一葡萄糖对照品５　ｍｇ置　２５　ｍｌＮＣ瓶中，加水溶解并稀释至刻度，得葡萄糖储　备液Ｉ。精密吸取储备液１　０，０．５，１．０，１．５，２．０，　２．５　ｍ１分别置１０　ｍｌ量瓶中，加水至刻度，得不同浓　度的葡萄糖标准溶液。精密吸取葡萄糖标准溶液各　１　ｍｌ，分置１０　ｍｌ具塞试管中，各加０．５　ｍｌ葸酮试液　（２％的乙酸乙酯溶液），摇匀，加３．０　ｍｌ浓硫酸，摇　匀，放置０．５　ｈ，在（６２５±１）ｎｒｎ处测定吸收度。回归　方程为Ａ：一０．０１７４３＋１７．３２８６Ｃ，ｒ＝０．９９８９。在　１０－６０　ｇ范围有良好的线性关系。（２）样品中总多　糖的含量测定：精密量取工艺Ｉ和Ⅱ各１　ｍｌ于具塞　试管中，加入１８　ｍｌ无水乙醇，摇匀，静止过夜。过　滤，沉淀用无水乙醇洗涤３次后，过滤，６０℃挥干乙　醇，加水溶解，全部转移至１００　ｍｌ量瓶中，定容，得储　备液Ⅱ。取储备液１１　１．０　ｍｌ置２５　ｍｌ量瓶中，加水至　刻度，此溶液作为样品溶液。取上述样品溶液１　ｍｌ　置具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“加　０．５　ｍｌ葸酮试液”起测定吸收度。每个样品测定６　次，每毫升口服液中总多糖的含量的结果见表２。　由表２可见：工艺Ⅱ总黄酮和总多糖的含量均小于　工艺Ｉ（Ｐ＜０．０５），但总黄酮含量仍明显高于中国　药典标准（每ｍｌ含总黄酮５．０　ｍｇ）（Ｐ＜０．０５）。　２．２．４鞣质含量测定ｌ８　分别配制ＮＨ４Ｃ１一ＮＨ　・　Ｈ２Ｏ缓冲溶液（ｐｉｌｌ０），０．５％铬黑Ｔ指示液；　０．０５　ｍｏｌ・Ｌ　ＥＤＴＡ溶液，１　ｍｏｌ・Ｌ　Ｚｎ（Ａｃ），溶　液。样品中鞣质的含量测定：取工艺Ｉ和Ⅱ刚制备　和放置４个月的口服液各２５　ｍＩ，按文献ｌ　８＿　』测定鞣　质含量，每个样品测定４次，结果见表３。　由表３可知，工艺Ⅱ的鞣质含量明显低于工艺　Ｉ（Ｐ＜０．０５），表明工艺Ⅱ制品更稳定。　２．２．５浊度测定精密量取工艺Ｉ和Ⅱ各２　ｍｌ，置　ｌ００　ｍｌ量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取上述溶　液２０　ｍｌ置１００　ｍｌ量瓶中，加水至刻度，摇匀，测浊　度，结果见表３。　表３不同工艺口服液浊度和鞣质比较（　＝４）　Ｔａｂ　３　Ｃｏｍｐａｒｉｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｕｒｂｉｄｉｔｙ　ａｎｄ　ｔａｎｎｉｎｓ　ｉｎ　ｏｒａｌ　ｌｉｑｕｉｄ　ｐｒｏ—　ｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｍｅｔｈｏｄｓ（　＝４）　

工　灭菌前浊灭菌后浊４个月后浊灭菌后鞣４个月后鞣　一　度／ｕｇ・ｇ。。度　ｇ・ｇ　度／ｆ』ｇ・ｇ　质／ｇ．【　。质／ｇ・Ｉ　

Ｉ　４．１０　４．７８　８　７５　１３．７４　ｌ６．９６　ＩＩ　５　１３　７　１５　７　８３　５　４　７　１　３　

由表３可见，每种工艺在灭菌后浊度均较灭菌　前增大，放置４个月后，每种工艺浊度和鞣质都增　大，其中工艺Ｉ的浊度增值明显大于工艺Ⅱ（Ｐ＜　０．０５），表明工艺Ⅱ的稳定性优于工艺Ｉ。　３讨论　絮凝法制备清热解毒口服液，与醇沉法相比，具　有周期短、成本低、鞣质易除去、稳定性好等优点，但　有效成分总黄酮及总多糖的含量却较低，此项与以　往的文献报道＿５　６＿不一致，是否与本处方中含有大　量的矿物药石膏有关，仍需进一步研究。但絮凝法　制备的成品其总黄酮含量仍明显高于药典标准。综　合分析，絮凝法可替代醇沉法用于清热解毒口服液　的制备。　中药口服液的稳定性是影响药品质量的重要因　素，采用测定药品放置数月前后的鞣质含量及浊度　变化，对于考察口服液的稳定性及除杂方法是否合　理，具有重要意义。