一母种培养基配制及棉塞制作
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真菌母种制备流程真菌母种制备呀,这可是个挺有趣的事儿呢。
一、准备工作。
二、培养基的制作。
培养基制作可是个关键步骤。
先把土豆去皮切成小块,就像切小方块一样,然后煮一煮。
煮的时候可别偷懒,得煮得软软的,这样才能把营养都煮出来。
煮好之后呢,用纱布过滤一下,把那些渣渣都去掉,只留下土豆汁。
接着把葡萄糖、琼脂还有其他需要的营养物质按照一定的比例加进去,然后再加热搅拌,就像做美食的时候搅拌面糊一样,要搅拌得均匀些。
等琼脂完全融化了,这培养基就差不多做好啦。
然后趁热把培养基分装到试管或者三角瓶里,装的时候也要小心,别装得太满,就像给杯子倒水,不能太满,不然会溢出来的。
最后呢,给这些装了培养基的容器塞上棉塞,这棉塞就像小卫士,既能让空气进去一点,又能防止外界的杂菌跑进去捣乱。
三、灭菌。
灭菌这个步骤就像是给真菌的小房子和食物来个大扫除,把那些坏细菌都消灭掉。
一般咱们用高压蒸汽灭菌锅来灭菌。
把装了培养基的容器放进去,然后按照规定的时间和压力来灭菌。
在这个过程中,就想象是在给真菌创造一个超级干净的世界,只有这样,真菌才能在里面自由自在地生长,不用担心被坏家伙欺负。
灭菌的时候可不能着急,得等灭菌完成后,让锅里的压力慢慢降下来,就像让一个刚跑完步的人慢慢平静下来一样。
四、接种。
接种可是个技术活。
得在无菌的环境下进行,就像做手术一样,得特别小心。
把灭过菌的培养基拿出来,然后用接种针或者接种环挑取一点已经纯化好的真菌菌丝或者孢子。
这个挑取的动作要轻,就像从花丛里轻轻摘下一朵花一样。
然后把挑取的真菌放到培养基上,这个过程就像是把小种子种到土里一样。
接种完之后呢,要尽快把容器的口封好,防止杂菌进去。
五、培养。
接种好的真菌母种就可以放到培养箱里去培养啦。
要给它们设置合适的温度、湿度和光照条件。
不同的真菌可能要求不太一样,就像不同的人喜欢不同的居住环境一样。
在培养的过程中,要时不时去看看它们,就像照顾小宠物一样。
看看它们有没有开始生长,有没有什么异常情况。
实验二武陵山野生食用菌母种的制作与培养一.目的1.了解食用菌菌种的来源,菌种的分离方法。
2.掌握PDA培养基的配制、分装、灭菌的方法和食用菌菌种的培养方法。
3.熟悉和掌握无菌操作的原理和操作方法。
二.原理首先是制作菌种,即通过孢子或组织分离出菌丝体,菌丝体扩大繁殖成为生产菌种;其次是将菌种接种于基质中,生产出食用菌的子实体。
食用菌菌种是食用菌菌种生产和科研工作的基本材料。
食用菌生产的菌种来源于野生食用菌资源,我国丰富的食用菌资源为我国食用菌产业的发展奠定了坚实的基础。
食用菌菌种的最初来源是来自于野生食用菌资源,采用孢子或组织分离法分离得到食用菌菌种,然后把该菌种进行人工驯化、菌种选育,得到具有生产价值的食用菌菌种。
母种是食用菌生产的经菌丝体,菌丝体扩大繁殖成为生产菌种;而该过程必须在无菌环境中以无菌操作进行,以防杂菌污染。
一般在接种箱,无菌室或超净工作台上进行接种。
接种前要对环境进行消毒,一般是用37%~40%甲醛溶液于接种前按5ml/m3 的量熏蒸半小时。
也可用紫外灯照射半小时,以杀死空气中的微生物。
适合食用菌生长繁殖的混合培养料称培养基,由于不同的食用菌生长繁殖需要相应的营养条件及适宜的酸碱度。
因此,在配制培养基时,还要根据所使用的配方,按次序配制培养基,并调节pH等。
在液体培养基中加入琼脂等凝固剂后,就可制成试管斜面或在培养皿内倒成平板,成为用途广泛的食用菌母种培养基。
三.实验材料1.野生食用菌标本。
2.量筒、试管、玻棒、铝锅、电炉、天平、高压灭菌锅、超净工作台、接种钩、酒精灯、火柴、蒸发皿、甲醛、高锰酸钾、70%酒精、无菌平皿3.培养基配方(1)PDA培养基马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18~25g 和水1000ml(2)完全培养基蛋白胨2.0g、酵母膏2.0g、葡萄糖20g 、MgSO4H2O 0.5g、K2HPO4 1.0g、KH2PO4 1.0g、琼脂20g、水1000ml 四.方法与步骤(一)培养基的配制1.把马铃薯洗干净,去皮,挖掉芽眼,切成大约1cm3 的小方块,在天平上称取200g。
实验一培养基的配制实验目的1. 明确培养基的配制原理。
2. 掌握配制培养基的一般方法和步骤。
实验内容学习细菌、放线菌、酵母菌及霉菌四大类微生物培养基的配制。
实验原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
各类微生物对营养的要求不尽相同,因而培养基的种类繁多。
培养细菌常用牛肉膏蛋白胨培养基,培养放线菌常用高氏I号培养基,培养霉菌常用蔡氏培养基或马铃薯培养基,培养酵母菌常用麦芽汁培养基或马铃薯葡萄糖培养基。
另外还有固体、液体、加富、选择、鉴别等培养基之分。
在这些培养基中,就营养物质而言,一般不外乎碳源、氮源、无机盐、生长因子及水等几大类。
琼脂只是固体培养基的支持物,一般不为微生物所利用。
它在96℃以上熔化成液体,而在45℃左右开始凝固成固体。
在配制培养基时,根据各类微生物的特点,就可以配制出适合不同种类微生物生长发育所需要的培养基。
培养基除了满足微生物所必需营养物质外,还要求有一定的酸碱度和渗透压。
霉菌和酵母菌的pH偏酸;细菌、放线菌的pH为微碱性。
所以每次配制培养基时,都要将培养基的pH值调到一定的范围。
牛肉膏蛋白胨培养基配方牛肉膏 3.0 g蛋白胨10.0gNaCl 5.0g水1000mLpH 7.4~7.6高氏I号培养基配方可溶性淀粉20gNaCl 0.5gKNO31gK2HPO4·3H2O 0.5gMgSO4·7H2O 0.5gFeSO4·7H2O 0.01g琼脂15—25g水1000mLpH 7.4~7.6马铃薯培养基配方马铃薯(去皮)200g葡萄糖(或蔗糖)20g琼脂15~25g水1000ml自然pH察氏培养基配方蔗糖30gNaNO32gK2HPO41gKCl 0.5gMgSO4·7H2O 0.5gFeSO4·7H2O 0.01g琼脂15~25g蒸馏水1000ml自然pH实验器材牛肉膏,蛋白胨,NaCl,琼脂,1mol/LNaOH, 1mol/LHCl,KNO3,K2HPO4·3H2O,MgSO4·7H2O,FeS04·7H2O,马铃薯,蔗糖等。
秀珍菇母种优质培养基配方筛选作者:高为民卢玉文来源:《现代农业科技》2020年第01期摘要; ; 为了筛选出秀珍菇母种优质培养基配方,以马铃薯、胡萝卜、大豆、芋头、麸皮、红薯等为主料,制作母种培养基,接入秀p-1号菌种,并存放入6 ℃恒温箱培养,进行母种培养基配方筛选试验。
结果表明,效果最好的配方是马铃薯和麸皮为主料的混合配方,菌丝洁白,浓密,粗壮,萌发快,生长速度也快,生长旺盛,爬壁力强。
关键词; ; 秀珍菇;母种培养基;配方筛选中图分类号; ; S646.14; ; ; ; 文献标识码; ; A秀珍菇学名为环柄侧耳、白环柄侧耳。
秀珍菇营养丰富,质地细嫩,味道鲜美,含纤维量少,被人们称为保健食品、安全食品。
秀珍菇在市场上畅销不衰。
目前,国内有相当的省(市、地区)已形成利用科技大棚栽培秀珍菇的生产规模,需要大量优质菌种,而优质菌种需要优质培养基配方,特别是优质母种培养基配方,以促进菌丝浓白、健壮和快速生长,提高菌种质量,缩短制种时间,对提高产量、质量起到重要作用[1-3]。
因此,笔者开展了秀珍菇母种优质培养基配方筛选試验,为生产实践提供参考。
1; ; 材料与方法1.1; ; 供试材料1.1.1; ; 供试菌株。
秀p-1号,从广西农业科学院微生物研究所引进,经广西玉林市微生物研究所进行转管保存。
1.1.2; ; 供试培养基。
主料为马铃薯、大豆、红薯、芋头、胡萝卜、麸皮;辅料为葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾、硫酸镁。
1.2; ; 试验设计本试验共设计了7个母种培养基配方:①(常规配方,CK)马铃薯200 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;②胡萝卜200 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;③大豆100 g,胡萝卜100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;④芋头100 g,胡萝卜100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;⑤马铃薯100 g,麸皮100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;⑥大豆100 g,红薯100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g;⑦红薯100 g,芋头100 g,葡萄糖10 g,琼脂10 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1.5 g。