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野菊花水提液抗氧化作用的实验研究中国现代应用药学1999年第6期第16卷药理作者：严亦慈娄小娥蒋惠娣单位：严亦慈桐庐311500 浙江桐庐药品检验所；娄小娥蒋惠娣杭州310006 浙江大学药学院关键词：野菊花；脂质过氧化；谷胱甘肽过氧化物酶；过氧化氢酶摘要目的：观察野菊花水提液的体内外抗氧化作用。
方法：分别用TBA法、DTNB 法及紫外分光光度法测定脂质过氧化(LPO)产物MDA的含量、全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及过氧化氢酶(CAT)活力。
结果：野菊花水提液体外可抑制大鼠心、脑、肝、肾组织自动LPO及由H2O2引发的红细胞脂质过氧化及溶血；小鼠ig给药2g/(kg·d) 7d，可显著升高全血GSH-Px、CAT活力(P＜0.05)。
结论：野菊花水提液具有很好的抗氧化作用。
Experimental studies on the anti-oxidation effects of water extract from Chrysanthemumindicum L.Yan Yici(Yan YC),Lou Xiaoe(Lou XE),Jiang Huidi(Jiang HD)(Zhejiang Tonglu Institute of Drug Control,Tonglu 311500)ABSTRACT OBJECTIVE：To observe the anti-oxidation effects of Chrysanthemum indicum L. water extract in vivo and in vitro.METHOD:The content of MDA,the whole blood GSH-Px and CAT activities were measured with TBA,DTNB and UV methodsrespectively.RESULTS:Chrysanthemum indicum L. water extract could inhibit lipid peroxidation of tissue homogenate of heart,brain,liver,kidney of rat and it could also inhibit lipid peroxidation and hemolysis of red blood cell caused by H2O2.When mice were given(ig) the water extract2g/(kg·d) for 7 days,the whole blood GSH-Px and CAT activities were significantly higher than those in control group (P＜0.05).CONCLUSION:Water extract from Chrysanthemum indicum L. has strong anti-oxidation effects in vivo and in vitro.KEY WORDS Chrysanthemum indicum L.,lipid peroxidation,GSH-Px,CAT自由基医学的研究表明，炎症、肿瘤、组织缺血再灌注损伤均与活性氧引发的脂质过氧化(LPO)密切相关［1］。
球菊的抗氧化活性成分研究【摘要】球菊是一种具有显著抗氧化活性的植物，其主要抗氧化活性成分包括黄酮类、酚类和多糖类物质。
研究表明，球菊提取物在体外和体内均表现出良好的抗氧化效果，可有效减少氧化应激对机体的损害。
球菊抗氧化活性成分还具有抗炎、抗肿瘤和保护神经系统等多种生物活性。
对球菊抗氧化活性成分的作用机制研究发现，其通过清除自由基、抑制氧化酶活性和调控氧化还原平衡等多种途径发挥抗氧化作用。
未来的研究可进一步探讨球菊抗氧化活性成分在抗衰老、心脑血管疾病等方面的应用，为开发天然抗氧化剂提供新的思路和方法。
【关键词】球菊、抗氧化活性、成分、提取物、生物活性、作用机制、应用领域、总结、展望、未来研究方向建议1. 引言1.1 球菊的抗氧化活性成分研究球菊（Chrysanthemum）是一种盛开在秋季的常见花卉，具有丰富的药用和保健功能。
近年来，球菊的抗氧化活性成分引起了科研人员的广泛关注。
抗氧化活性成分是指具有抗氧化作用的化学物质，可以帮助预防或延缓氧化反应对生物体造成的损害，保护细胞免受自由基等有害物质的伤害。
球菊中含有丰富的抗氧化活性成分，如黄酮类化合物、多酚类化合物、维生素C、维生素E等。
这些成分具有显著的抗氧化活性，可以清除自由基、减少氧化损伤，有助于维持人体健康。
随着科学技术的不断发展，研究人员对球菊的抗氧化活性成分进行了深入的研究，探讨了其生物活性、作用机制以及应用领域。
这些研究结果为球菊的药用和保健功能提供了科学依据，也为开发利用球菊中的抗氧化活性成分提供了重要参考。
在未来的研究中，还需要进一步挖掘球菊中的抗氧化活性成分，探索其更广泛的应用价值，为人类健康和生活质量的提升做出更大的贡献。
2. 正文2.1 球菊提取物的抗氧化活性研究球菊提取物的抗氧化活性研究可以追溯到很早以前，早期的研究主要集中在从球菊中提取出具有抗氧化作用的化学成分，并评估其在体外和体内对自由基的清除能力。
通过各种方法，如DPPH自由基清除实验、超氧阴离子清除实验、还原铁离子能力等，研究人员发现球菊提取物中含有丰富的多酚类化合物，如黄酮类、黄酮糖苷类、儿茶素类等，这些化合物对抗氧化应激具有显著的保护作用。
苦丁茶不同提取物抗氧化活性比较及其GC-MS分析
近年来，许多研究已经发现苦丁茶具有很好的保健作用，其中的抗氧化能力被认为是
其最重要的功效之一。
事实上，苦丁茶中的多种成分，如茶多酚、黄酮类、生物碱等都具
有一定的抗氧化活性。
这些成分对于保护人体细胞免受自由基的损伤有着非常重要的作用。
为了进一步探究苦丁茶的抗氧化活性，本实验采用了不同提取物来进行比较研究。
首先，我们采取了水提取和乙醇提取的方法来制备苦丁茶的不同提取物，并进一步进行了DPPH自由基清除试验来评估其抗氧化能力。
结果表明，苦丁茶的乙醇提取物在不同浓度下均表现出了更强的DPPH自由基清除活性，其IC50值为3.82 mg/mL，而水提取物的IC50
值为9.81 mg/mL。
此外，为了进一步探索苦丁茶提取物中的成分，我们采用了GC-MS技术进行了分析。
结果表明，苦丁茶中含有多种化学成分，如苯乙醇、咖啡因、橙皮苷、山柰酚等。
其中，
咖啡因和橙皮苷是具有较高抗氧化活性的化合物，这也与前面DPPH自由基清除试验的结
果相符合。
综合以上结果，可以得出结论：苦丁茶中的乙醇提取物表现出较强的抗氧化活性，其
中咖啡因和橙皮苷可能是其主要的抗氧化成分。
这些结果有助于更深入地了解苦丁茶对人
体健康的保护作用，并为其开发更具有价值的保健食品提供了重要的参考。
苦丁茶不同提取物抗氧化活性比较及其GC-MS分析
随着现代化生活的快节奏和压力的增加，人们越来越关注保健和健康。
苦丁茶是一种传统的草药饮料，广泛应用于民间医疗领域。
苦丁茶不仅可以帮助人们增强免疫力、降低血糖、抗炎抗菌，还可以提高人们的抗氧化能力，抵御自由基的侵害。
因此，本研究旨在比较苦丁茶不同提取物的抗氧化活性，分析苦丁茶的化学成分。
实验步骤：
1. 实验材料和仪器：苦丁茶、甲醇、水、二氧化硅胶、十六烷基三甲基溴化铵、硫酸铜、明胶试剂、2,2-二苯基-1-苦肽自由基、硝酸铁、吸光度计、气相色谱-质谱联用仪。
2. 实验设计：将苦丁茶粉末分别用甲醇和水提取，得到甲醇提取物和水提取物。
然后，将不同提取物分别用2,2-二苯基-1-苦肽自由基法测定其抗氧化能力，并用硝酸铁法检测其还原力；最后，用气相色谱-质谱联用仪分析其化学成分。
3. 结果与分析：经过实验测定，苦丁茶甲醇提取物和水提取物均表现出较强的抗氧化能力和还原能力，其中甲醇提取物的抗氧化能力和还原能力优于水提取物。
同时，气相色谱-质谱联用仪的分析结果表明，苦丁茶中含有多种化合物，如咖啡因、黄酮类、酚类等，这些化合物具有强大的抗氧化作用。
苦苣多酚超声辅助提取及抗氧化研究金寒冰;方丽;赖蓓蕾;吴祥庭【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2014(030)005【摘要】优化超声波辅助提取苦苣中多酚的工艺条件,并研究其抗氧化活性.试验结果表明,苦苣中的多酚提取条件为:乙醇浓度70％、液固比30∶1(V∶m)、超声波功率255 W、超声20 min、浸提温度75℃和浸提时间2h;该条件下提取率1.040％.苦苣多酚的还原能力与其浓度成正相关性,在低于0.15 mg/mL时还原力比VC弱,高于0.15 mg/mL时还原力与VC相当;苦苣多酚对DPPH清除率随浓度的提高而增大,但增大幅度逐渐减小;在含量相同的情况下,苦苣多酚的自由基清除能力与VC 相当.试验证明:苦苣多酚是一个潜在的天然安全有效抗氧化剂.【总页数】5页(P211-215)【作者】金寒冰;方丽;赖蓓蕾;吴祥庭【作者单位】温州大学生命与环境科学学院,浙江温州 325027;温州大学生命与环境科学学院,浙江温州 325027;温州大学生命与环境科学学院,浙江温州 325027;温州大学生命与环境科学学院,浙江温州 325027【正文语种】中文【相关文献】1.超声辅助提取盐碱地苦菜多酚及其抗氧化活性研究 [J], 王红玉;焦林宏;赵芳;本莲芳2.紫苏叶多酚超声辅助聚乙二醇提取工艺优化及抗氧化活性研究 [J], 茹巧美;任国平;胡琼3.响应曲面法优化超声辅助提取芒果叶中多酚和黄酮工艺及抗氧化活性研究 [J], 张静;陶俊葓;刘银;刘倩;杨周昊;李孟容;程桂广4.响应面优化超声辅助提取黄瓜皮多酚工艺及其抗氧化活性研究 [J], 陈建福;陈健旋;袁思琦;陈仲巍5.菊芋叶多酚的超声辅助提取及抗氧化活性研究 [J], 马剑;张宏志;王愈;梁明祥;边道刚;马艳弘因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
昆仑雪菊不同溶剂萃取物抗氧化活性研究邵冬冬;陈千;李赫宇;肖文平【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2018(039)015【摘要】用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼((1,1 diphenyl-2-trinitrobenzene hydrazine,DPPH)法分别测定4个提取部位的抗氧化活性,结果表明,正丁醇部位的抗氧化活性最强,绝对清除率达到96.97％,其次是乙酸乙酯部位,绝对清除率达到93.86％.用水杨酸法进行了其清除·OH的测定,结果表明,乙酸乙酯部位对羟基自由基清除能力最强.采用铁离子还原能力测定法测定各提取部位的总还原能力,乙酸乙酯部位总还原能力最强.对乙酸乙酯部位进行进一步的分离,得到一个苯丙酸类化合物,用1H-NMR初步鉴定了化合物的结构.【总页数】4页(P28-31)【作者】邵冬冬;陈千;李赫宇;肖文平【作者单位】黄冈师范学院化学化工学院,催化材料与制备湖北省重点实验室,湖北黄冈438000;黄冈师范学院化学化工学院,催化材料与制备湖北省重点实验室,湖北黄冈438000;天津益倍生物科技集团,天津300457;黄冈师范学院化学化工学院,催化材料与制备湖北省重点实验室,湖北黄冈438000;湖北中医药大学药学院,湖北武汉430065【正文语种】中文【相关文献】1.刺参不定根不同溶剂萃取物的抗氧化活性研究 [J], 田文;韩璐;高原;廉美兰;朴炫春2.针毛鳞盖蕨不同溶剂萃取物抗氧化及其抑制α-葡萄糖苷酶活性研究 [J], 陆怀; 李红锐; 黄相中; 孙静贤; 陈毅坚; 李育逵; 高利斌; 王韦; 田凯3.矮垂头菊不同极性溶剂萃取物的抗氧化活性研究 [J], 邵瑾; 马慧萍; 赵彤; 杨颖; 贾正平; 景临林4.厚朴叶不同极性溶剂萃取物总酚含量及体外抗氧化活性研究 [J], 康兆勇; 李玉霜; 吴过; 黄杰林; 陈钰; 赵泽洋; 马林5.桦褶孔菌不同溶剂萃取物抗氧化活性研究 [J], 郭磊; 高然; 田野; 徐海; 孔德仙; 华燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
球菊的抗氧化活性成分研究球菊是一种常见的花卉植物，其花色鲜艳、形态优美，深受人们喜爱。
除此之外，球菊还具有一定的药用价值，主要体现在它含有丰富的抗氧化活性成分。
抗氧化活性成分是指能够稳定自由基、抵御氧化损伤的化合物。
自由基是一种极活跃的分子，在人体内，它们会与细胞膜、蛋白质、核酸等重要分子结合，导致这些分子受到氧化损伤，从而引发多种疾病和衰老。
抗氧化活性成分可以与自由基结合，从而减少自由基对细胞的伤害，起到抗氧化的作用。
球菊中含有多种抗氧化活性成分，包括黄酮类、酚类和花青素类等。
黄酮类化合物是一类广泛存在于植物中的多酚化合物，具有良好的抗氧化活性。
其中，异鼠李素和山柰酚是球菊中主要的黄酮类成分。
研究发现，异鼠李素和山柰酚均具有较强的清除自由基能力，能够有效减轻自由基对人体的损伤。
酚类化合物是一类含有酚基的有机化合物，具有很强的抗氧化活性。
球菊中含有丰富的酚类成分，包括儿茶酸、咖啡酸和香草酸等。
研究表明，这些酚类成分具有较强的自由基清除能力，有助于保护人体免受氧化损伤的影响。
花青素类化合物是一类广泛存在于植物中的天然色素，具有很强的抗氧化和抗炎作用。
球菊中含有丰富的花青素类化合物，如芸香苷和花青素等。
研究表明，这些花青素类化合物具有很强的抗氧化活性，能够减轻自由基对人体的损伤，并且还能够对炎症有一定程度的缓解作用。
总之，球菊中含有多种抗氧化活性成分，具有很好的保健作用。
在日常生活中，适当地食用球菊或者饮用球菊茶，可以有效保护人体免受自由基的损害，有利于预防多种疾病的发生。
苦荞黄酮的提取分离及抗氧化活性研究郭刚军;何美莹;邹建云;龚加顺【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2008(029)012【摘要】采用正交试验研究苦荞黄酮提取过程中的浸提时间、乙醇浓度、料液比、浸提温度,得到最佳的提取条件为:提取时间5h、乙醇浓度70%、料液比1∶15、浸提温度70℃.利用最佳提取条件对苦荞粉进行了苦荞黄酮的提取分离,并进行了纯化、成分分析,得到了含量高达72.32%的高纯度苦荞黄酮.以VC、芦丁为对照,研究苦荞黄酮、荞籽醇提物、荞壳醇提物在不同浓度,不同pH值下对DPPH·的清除能力.结果表明,苦荞黄酮的清除DPPH·的能力仅次于VC,大于芦丁和荞籽醇提物,远大于荞壳醇提物,清除DPPH·的能力随着浓度的增大而升高,在pH2～8范围内,随着pH值的增大清除DPPH·的能力先降低后增大,在pH7时最低.【总页数】4页(P373-376)【作者】郭刚军;何美莹;邹建云;龚加顺【作者单位】云南省热带作物科学研究所,云南,景洪,666100;云南农业大学食品科技学院,云南,昆明,650201;云南省热带作物科学研究所,云南,景洪,666100;云南省热带作物科学研究所,云南,景洪,666100;云南农业大学食品科技学院,云南,昆明,650201【正文语种】中文【中图分类】TS201.4【相关文献】1.雁门苦荞黄酮的分离提取、稳定性及抗氧化活性研究 [J], 付丽红;李晓斌;董正中;薛亮2.超声波辅助提取黑苦荞黄酮类化合物及其抗氧化活性研究 [J], 王丽娟;魏涛;尹何南;李可3.酶-超声辅助提取苦荞秆中总黄酮及抗氧化活性研究 [J], 杨海涛;曹小燕4.苦荞籽粒黄酮的提取纯化及抗氧化活性研究 [J], 李飞;任清;季超;侯昌;5.苦荞籽粒黄酮的提取纯化及抗氧化活性研究 [J], 李飞;任清;季超;侯昌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
甜叶菊总黄酮提取条件、成分与抗氧化活性研究童红梅;宋巧;王保平;郭敏;彭涛;张敏【摘要】为探究甘肃酒泉产甜叶菊中总黄酮提取条件、成分与其抗氧化活性间的关系.采用乙醇超声水浴提取法,探讨提取时间、温度、料液比、功率等因素对总黄酮提取条件的影响;用HPLC柠檬酸-甲醇流动相梯度洗脱法测定甜叶菊中芦丁、圣草枸杞苷、山奈素、槲皮素、橙皮苷的含量;用FRPD和DPPH法评价甜叶菊茎叶中总黄酮提取物与抗氧化活性之间的关系.结果:通过正交试验,得出乙醇超声水浴的最佳提取条件:80％乙醇、提取功率450 W、料液比1:20、提取时间150 min、温度85℃、提取3次,总黄酮提取率最高可达到0.88％;HPLC法检测甜叶菊茎叶中5种黄酮成分,以芦丁的含量(701.42μg/g)为最高,槲皮素含量(451.55μg/g)居其次,橙皮苷含量(297.54μg/g)与山奈素含量(241.21μg/g)较少,圣草枸杞苷含量(57.44μg/g)极微;用FRPD和DPPH法评价甜叶菊茎叶总黄酮提取物抗氧化活性,其抗氧化活性高达10.02 mg/g DW,黄酮含量与抗氧化活性二者呈较显著的正相关性(R=0.769～0.792).这为甜叶菊中黄酮类物质的提取与进一步开发利用提供基础性研究资料.【期刊名称】《中国糖料》【年(卷),期】2019(041)002【总页数】5页(P32-36)【关键词】甜叶菊;总黄酮;提取条件;抗氧化活性;FRPD法;DPPH法【作者】童红梅;宋巧;王保平;郭敏;彭涛;张敏【作者单位】甘肃医学院,甘肃平凉 744000;甘肃医学院,甘肃平凉 744000;甘肃医学院,甘肃平凉 744000;甘肃医学院,甘肃平凉 744000;甘肃医学院,甘肃平凉744000;甘肃医学院,甘肃平凉 744000【正文语种】中文【中图分类】S566.90 引言甜叶菊（Stevia rebaudiana）别名甜菊、糖草，属菊科（Compositae），斯台维亚属，原产南美亚热带地区。
283洋甘菊多糖和黄酮的提取及抗氧化活性研究何 萍，冯 伟（广东岭南职业技术学院，广东 广州 ５１０６６３）摘 要：目的：研究洋甘菊中多糖和黄酮提取物的抗氧化活性。
方法：采用复合酶酶解辅助超声法和传统方法处理洋甘菊提取多糖和黄酮成分，通过清除ＤＰＰＨ、羟自由基、超氧阴离子自由基能力来评价洋甘菊多糖和黄酮的体外抗氧化能力。
结果：洋甘菊中多糖和黄酮含量分别是２４．７ｍｇ／ｇ、２３．１ｍｇ／ｇ，对ＤＰＰＨ自由基的清除率是７３．３％、７８．１％，对羟自由基（ＨＯ－）的清除率是６５．４％、５９．４％，对超氧阴离子自由基（Ｏ２·－）的清除率是５６．８％、７４．３％。
洋甘菊中多糖和黄酮均具有较强的抗氧化能力，对ＤＰＰＨ、羟自由基、超氧阴离子自由基均具有不同程度的清除能力。
关键词：洋甘菊；多糖；黄酮；酶解；抗氧化；自由基中图分类号：ＴＳ２０１．２ 文献标识码：Ａ作者简介：何萍，女，生于１９８８年，硕士研究生，教师，研究方向：药物化学、食品化学教学与研究、职业教育等。
洋甘菊是菊科植物，原产欧洲。
由洋甘菊提炼出来的精油是非常流行的保键和药物制品。
洋甘菊：味微苦、甘香，具有清肝、明目、增强记忆力、止咳化痰、降低胆固醇、降血压、缓解气喘和支气管炎，减轻头痛、偏头痛或感冒引起的肌肉痛，还具有舒缓神经的作用，能镇定精神、纾缓情绪，治疗失眠，提升睡眠质量，还可改善过敏的皮肤。
自由基的代谢在人机体内是普遍存在的。
一般情况下，人体内自由基的产生与清除处于平衡状态。
然而如果人体自由基产生过多或机体清除自由基能力下降将给机体带来损伤。
体内的自由基是由机体发生氧化作用产生的有害化合物，尤其是氧自由基，具有很强的氧化性，能破坏细胞内的核酸、生物膜及蛋白质、脂肪、糖类，继而发生机体的损伤和老化，加速人体衰老，严重的可能导致癌症的产生[1]。
一方面自由基会导致衰老的加速，另一方面衰老又会使得人体清除自由基的能力下降，使得人体的健康陷入了一个恶性循环。
食品与药品 Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ ２０１１年第１３卷第０３期 ９３ 苦菊提取物的抗氧化活性研究 陈超杰 ，秦海林 ，邓安瑁 ，王爱平 （１．新药安全评价研究中心，２．中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室 中国医学科学院／北京协和医学院，北京１０００５０） 摘要：目的研究苦菊提取物的体外抗氧化作用。方法苦菊经９５％乙醇加热回流、石油醚脱脂、乙酸乙酯提取和大孔吸 附树脂乙醇洗脱，取６Ｏ％乙醇的洗脱液挥于后得到提取物。通过二苯代苦味酰自由基（ＤＰＰＨ·）和超氧阴离子（Ｏ 一·）清 除能力的检测，及２，２’．偶氮．双．（２．脒基丙烷）氯化二氢（ＡＡＰＨ）诱导的红细胞溶血模型的测试，总体评价该提取物的体 外抗氧化活性。结果该提取物能有效清除ＤＰＰＨ·和０ 。，其清除能力呈浓度依赖性，且清除Ｏ 。·的能力比阳性对照药维生 素Ｃ更佳。同时，该提取物能有效防￣ＡＡＰＨ诱导的兔红细胞溶血，提示具有预防机体细胞组织氧化应激损伤的作用。结 论苦菊提取物具有很好的抗氧化活性，为其在食品和药品的抗氧化剂应用提供参考。 关键词：苦菊；二苯代苦味酰自由基；超氧阴离子；红细胞溶血；抗氧化活性 中图分类号：１１２８２。７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７２．９７９Ｘ（２０１１）０１—００９３—０４ Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｅｘｔｒａｃｔ ｆｒｏｍ Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ ｅ／／ｄｉｖｉａ Ｌ． ＣＨＥＮ Ｃｈａｏ￣ｉｅ ，ＱＩｙ Ｈａｉ—ｌｉｎ ，ＤＥＮＧ Ａｎ－ｊｕｎ ，ＷＡＮＧ Ａｉ—ｐｉｎｇ ｆ１．ＮｅｗＤｒｕｇＳａｆｅｔｙＥｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ，２．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＢｉｏａｃｔｉｖｅＳｕｂｓｔａｎｃｅｓａｎｄＲｅｓｏｕｒｃｅｓ Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｈｅｒｂａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆＭａｔｅｒｉａ Ｍｅｄｉｃａ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆＭｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ＆Ｐｅｋｉｎｇ Ｕｎｉｏｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １ ０００５０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔ ｆｒｏｍ Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ ｅｎｄｉｖｉａ Ｌ—Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｃ ｅｎｄｉｖ Ｌ． ｗａｓ ｒｅｆｌｕｘｅｄ ｗｉｔｈ ９５％ｅｔｈａｎｏｌ ａｎｄ ｄｅｆａｔｔｅｄ ｗｉｔｈ ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ ｅｔｈｅｒ，ａｎｄ ｔｈｅｎ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｅｄ
收稿日期： 基金项目： 作者简介： 通讯作者
２０１０—１２—１０ “重大新药创制”科技重大专项课题（２００８ＺＸ０９３０５—００１） 陈超杰（１９８２一），男，广西梧州人，博士研究生，研究方向为药物安全性评价 王爱平，男，博士生导师，研究方向为药物安全性评价Ｅ—ｍａｉｌ：ｗａｎｇａｉｐｉｎｇ＠ｉｍｍ．ａｃ．ｃａ
素、维生素等。ＸＦ．１经形态特征，１６Ｓ ｒＤＮＡ序列比 对及系统发育树分析，与Ａｒａｎｉｃｏｌａｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｕｓ有９９．７％ 同源性，初步认为同种。Ａｒａｎｉｃｏｌａ ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｕｓ为近 年新发现的肠杆菌科新菌种，目前国际上正式命名尚 未公布，因此关于该菌的文献报道甚少，１９９９年Ｐａｒｋ 等 发现该菌，并初步研究了其生理特性。但该菌所 产分泌物的种类以及是否有致病性尚不明确，这是决 定应用价值的最关键问题，今后以此为研究方向进行深 入研究。
参考文献 ［１】周世水，丁金国，姚汝华．海洋微生物药物的开发和应用［Ｊ１． 工业微生物，２００２，３２（２）：４８—５１． ［２】胡艳红，张庆林，王正平．海洋微生物生物活性代谢物研究进 展及技术问题【Ｊ］．科学技术与工程，２００４，４（２）：１６０—１６３． ［３］Ｍａｒｘ Ｊ Ｃ，Ｂｌａｉｓｅ Ｖ，Ｃｏｌｌｉｎｓ Ｔ，ｅｌ ａ１．Ａ ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ ｏｎ ｃｏｌｄ ｅｎｚｙｍｅｓ：ｃｕｒｒｅｎｔ ｋｎｏｗｌｅｄｇｅ ａｎｄ ｆｒｅｑｕｅｎｔｌｙ ａｓｋｅｄ ｑｕｅｓｔｉｏｎｓ［Ｊ］
Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，２００４，５Ｏ（５）：６４３—６５５． ｆ４】张士瑞，马军英，范晓．海洋生物技术原理【Ｍ］．北京：海洋出 版社，１９９７：１０—１３． ［５］杨丽，闰志勇，王斌，等．嗜麦芽寡养单胞菌Ｄ２株基因组文 库的构建及部分克隆的分析［Ｊ］．医学研究生学报，２０１０，２３ （４）：３６９—３７１． 【６］Ｇａｒｒｉｔｙ Ｇ Ｍ，Ｂｅｌｌ Ｊ，Ｌｉｉｂｕｍ Ｇ．Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ ｍａｎｕａｌ ｏｆ ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉｏ１ｏｇｙ（ｓｅｃｏｎｄ ｅｄｉｔｉｏｎ）［Ｍ］．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｂｅｒｌｉｎ Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ， ２００４：８０—８３． ［７］闫志勇，王斌，苏维奇，等．多重半套式ＰＣＲ检测细菌１６Ｓ ｒＲＮＡ基因方法的建立［Ｊ］．青岛大学医学院学报，２００ｌ，３７ （１）：２２—２４ ［８］张桂红，付勇，刘彦仿．来源于中国青蛙的一种核糖核酸酶 新基因的克隆和序列分析［Ｊ］．医学研究生学报，２０ｌ０，２３ （１）：ｌ１０一ｌ１２ 『９］９ 宋欣．微生物酶转化技术［Ｍ］．北京：化学工业出版社，２００４：
ｌ６ １８． ［１０】熊振平．酶工程【Ｍ】．北京：化学工业出版社，１９８９：４０—４１． ［１ １】Ｐａｒｋ Ｈ，Ｓｏｎ Ｋ，Ｐａｒｋ Ｄ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｏｔｅａｓｅ，ａ ｇｅｎｅ ｔｈｅｒｅｆｏｒ ａｎｄ ｔｈｅ ｕｓｅ ｔｈｅｒｅｏｆ．＂ＵＳ Ｐ．ＵＳ７５６３８７２Ｂ２［ＰＪ．２００９—０７—２１． ９４ 食品与药品 Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ ２０１ １年第１３卷第０３期 ｂｙ ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎ ｓｕｃｃｅｓｓｉｖｅｌ￣ｗｉｔｈ ｅｔｈａｎｏｌ ａｓ ｅｌｕｅｎｔ．Ａｆｔｅｒ ｅｌｕｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ６０％ｅｔｈａｎｏｌ，ｔｈｅ ｅｌｕａｔｅ ｗａｓ ｅｖａｐｏｒａｔｅｄ， ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｉｄｕｅ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ．Ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ２，２一ｄｉｐｈｅｎｙｌ－ １－ｐｉｃｒｙｌｈｙｄｒａｚｙｌ ｒａｄｉｃａｌ（ＤＰＰＨ·）ａｎｄ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ａｎｉｏｎ（０２－＇）ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｃａｐａｃｉｔｙ ａｓｓａｙｓ，ａｎｄ ｂｙ ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｈａｅｍｏｌｙｓｉｓ ｍｏｄｅｌ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ２，２’一ａｚｏｂｉｓ（２一ａｍｉｄｉｎｏｐｒｏｐａｎｅ）ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（ＡＡＰＨ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈｅ ｃａｐａｃｉｔｙ ｏｆ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｒａｄｉｃａｌｓ ｏｆ ＤＰＰＨ·ａｎｄ Ｏ２一，ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｏｎ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｔ，ａｎｄ ｉｔｓ ｐｏｗｅｒ ｔｏ ｓｃａｖｅｎｇｅ Ｏ２．ｗａｓ ｓｔｒｏｎｇｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｖｉｔａｍｉｎ Ｃ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｈａｅｍｏｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒａｂｂｉｔ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ＡＡＰＨ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｗａｓ ａｂｌｅ ｔｏ ｐｒｏｔｅｃｔ ｔｈｅ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ｏｒｇａｎｉｓｍ ｆｒｏｍ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｅｘｃｅｌｌｅｎｔ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｃａｐａｃｉｔｙ ｏｆ ｅｔｒａｃｔ ｆｒｏｍ ＣｆｃＩｉｌｏｒｉｕｍ ｅｎｄｉｖｉａ Ｌ．ｐｒｏｖｉｄｅｓ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ ｉｔｓ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｆｏｏｄ ａｎｄ ｄｒｕｇ． Ｋｅｙ Ｗｏｒｄｓ：Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ ｅｎｄｉｖｉａ Ｌ．；２，２一ｄｉｐｈｅｎｙｌ一１－ｐｉｃｒｙｌｈｙｄｒａｚｙｌ ｒａｄｉｃａｌ；ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｒａｄｉｃａｌ；ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ ｈｅｍｏｌｙｓｉｓ； ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ
自由基是导致油脂类产品氧化变质和造成机体氧 化应激损伤的主要因素，因此具有清除自由基能力的 抗氧化剂是防止食品变质和防治氧化损伤相关疾病的 最主要手段之一【ｌ】。 苦菊（Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ ｅｎｄｉｖｉａ Ｌ．）是菊科菊苣属的一 种栽培植物，学名栽培菊苣，又称苦苣 。苦菊源自 欧洲，是欧美地区常用的色拉或食用蔬菜。有研究发 现，苦菊中含有一定量的抗氧化活性成分，是其防治 多种与氧化应激损伤相关的慢性疾病的理论基础ｐ】。 我国已成功引种栽培苦菊并出售，其清甜爽口的特点 也逐渐受到中国老百姓青睐。但至今仍缺乏对国内栽 培的苦菊生物活性的研究报道。本文提取分离苦菊， 并通过体外模型检测其抗氧化活性，为进一步探究苦 菊在食品和医药领域的应用提供依据。 １材料 １．１原料 苦菊购自北京新发地蔬菜批发中心，经鉴定为菊 科菊苣属植物苦菊。 １．２试剂 二苯代苦味酰自由基（ＤＰＰＨ·）、２，２’．偶氮． 双一（２一脒基丙烷）氯化二氢（ＡＡＰＨ）、水溶性维生 素Ｅ类似物（Ｔｒｏｌｏｘ）、维生素Ｃ、乙二胺四乙酸二 钠（ＥＤＴＡ．Ｎａ，）、还原型辅酶Ｉ烟酰胺腺嘌呤二核 苷酸二钠（ＮＡＤＨ—Ｎａ ）、吩嗪硫酸甲酯（ＰＭＳ）和硝 基四氮唑蓝（ＮＢＴ）均购自Ｓｉｇｍａ．Ａｌｄｒｉｃｈ公司，乙 醇、石油醚、乙酸乙酯、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）等 试剂皆为国产分析纯。大孔吸附树脂购自日本三菱 （ＤＩＡＩＯＮ ＨＰ２０）。 １．３仪器 酶标仪（美国ＭＤ，Ｓｐｅｃｔｒａ Ｍａｘｌ９０）；高速冷 冻离心机（德国Ｓｉｇｍａ，３Ｋ１８）；电子天平（北京赛 多利斯天平有限公司，ＢＳ２０１Ｓ）。 １．４动物 雄性新西兰家兔１只，１２～１５周龄，体重３．０ ｋｇ， 购自北京富豪实验动物养殖中心。单笼饲养，自由进 食饮水。 ２方法 ２．１苦菊提取物的制备 苦菊干燥全草５．８ 经９５％乙醇回流提取３次（８０ Ｌ×２ ｈ、７０Ｌ×１ ｈ、６８ＬＺ１ ｈ），过滤合并滤液，减 压浓缩所得浸膏混悬于７０％乙醇溶液中。混悬液继续 经石油醚提取４次（２，１．５，１．５，１．５ Ｌ），所得到的 乙醇层经减压浓缩至无醇味，加水混悬约２．３ Ｌ，并经 乙酸乙酯提取３次（１．５，１．２，１．２ Ｌ），提取后所得的 水层约２．２ Ｌ，过大孔吸附树脂，分成水部分（１４ Ｌ） 和６０％乙醇部分（１５ Ｌ）。其中６Ｏ％乙醇部分浓缩 后挥千得到重约４０ ｇ的棕色粉状颗粒，即为苦菊提取 物。 ２．２ ＤＰＰＨ·清除能力的检测 ＤＰＰＨ·清除能力检测的操作步骤根据文献［４】略 加调整：反应体系在９６孔板中进行，溶于ＤＭＳＯ的 待测样品每孔加入２０ Ｌ，随后迅速加入１００ Ｉｘｍｏｌ／Ｌ 的ＤＰＰＨ·（溶于无水乙醇）１８０ ，震荡混匀后采用 酶标仪于５ｌ７ ｎｍ波长处检测吸光度（ ），同时以 ２０ 的ＤＭＳＯ代替待测液作为空白对照，空白调零 孔为２０ ＤＭＳＯ和１８０ 无水乙醇。经过多个时间 点的检测，以不再发生改变的 值作为最终测量值。 ＤＰＰＨ·清除率的计算公式为： ＤＰＰＨ·清除率＝［１一 Ｊ．４。）】Ｘ １００％ 其中，Ａ 为待测样品组 值，Ａ 为空白对照组
