植物多酚提取方法

提取物中多酚类化合物的鉴定一、前言多酚类化合物是一类广泛存在于植物中的天然化合物，具有抗氧化、抗炎症、抗肿瘤等多种生物活性。

因此，对于提取物中多酚类化合物的鉴定具有重要意义。

本文将从样品制备、实验方法和数据分析三个方面介绍提取物中多酚类化合物的鉴定方法。

二、样品制备1. 样品来源样品可以来源于植物组织、食品或者药材等。

在选择样品时需要考虑样品的质量和含量，以及是否符合实验要求。

2. 样品制备（1）植物组织：将新鲜或干燥的植物组织粉碎成粉末，过筛筛选出适当大小的颗粒。

（2）食品：将食品切碎或者磨成粉末，过筛筛选出适当大小的颗粒。

（3）药材：将药材切碎或者磨成粉末，过筛筛选出适当大小的颗粒。

3. 样品储存为了保证实验结果的准确性，在制备好样品后需要储存好样品。

对于植物组织和食品，可以将其放置在密闭的塑料袋中，避免受潮、氧化和污染。

对于药材，可以将其放置在干燥、阴凉、通风的地方。

三、实验方法1. 总多酚含量测定总多酚含量是指样品中所有多酚类化合物的总量。

常用的测定方法有菲林-苏丹法和Folin-Ciocalteu法。

（1）菲林-苏丹法：该方法基于菲林试剂与多酚类化合物反应产生的蓝色色素和苏丹红试剂与蛋白质反应产生的红色色素之间的差异。

步骤如下：① 取适量样品加入盛有5ml水的离心管中。

② 加入2ml 95%乙醇，振荡混匀。

③ 离心10分钟，取上清液加入新离心管中。

④ 加入1ml 0.5%菲林试剂和1ml 10%Na2CO3溶液，振荡混匀后放置30分钟。

⑤ 加入2ml 1%苏丹红试剂，振荡混匀后放置5分钟。

⑥ 用紫外可见分光光度计在760nm处测定吸光度。

（2）Folin-Ciocalteu法：该方法基于Folin-Ciocalteu试剂和多酚类化合物反应产生的蓝色色素之间的关系。

步骤如下：① 取适量样品加入盛有5ml水的离心管中。

② 加入2ml Folin-Ciocalteu试剂，振荡混匀后放置5分钟。

多酚类化合物介绍：多酚类化合物是指同一苯环上有若干个酚性羟基的一类化合物。

植物多酚具有抗菌、消炎、抗血栓、抗病毒、抗癌和扩张血管等生理作用。

一些多酚类化合物及其衍生物具有较好的清除自由基的作用，因此是一类良好的天然抗氧化剂。

自然界植物中发现的具有抗氧化性的酚酸化合物主要有原儿茶酸、沒食子酸(山茱萸)、3-羟基苯乙酸、如绿原酸(金银花)、阿魏酸(当归)、咖啡酸、迷迭香酸(紫苏)、介子酸(蜂胶)等。

绿茶中所含多酚类的儿茶酚具有抗氧化作用，其活性优于相同浓度的а-生育酚，是人工合成抗氧化剂BHT(二丁基羟基甲苯)、BHA(丁基羟基茴香醚)的4～6倍，若与维生素C和维生素E配合还具有增效作用。

白藜芦醇以及沒食子酸和从葡萄籽及松树皮提取物中发现的原花青素等多酚物质也被证实有很强的抗氧化性，且已被证实强于某些抗氧化维生素。

清热解毒类中草药中总多酚的测定——Folin-Ciocalteu比色法[1.1 实验材料栀子、龙胆草和板蓝根购于贵阳三桥药材批发市场；射干产自贵州施秉牛大场GAP药材基地；黄柏、头花蓼分别产自习水和雷山。

1.2 试剂亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，乙醇(均为分析纯)1.3仪器101-1A型电热鼓风干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司)；A200S型电子天平（Made in Germany）；循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；KDM型控温电热套(山东鄄城华鲁电热仪器有限公司)；UV2300分光光度计（上海天美科学仪器有限公司）；FZ102型微型植物粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）。

1.4实验原理Folin-Ciocalteu比色法原理是基于Folin-Ciocalteu试剂中的钨钼酸可以将多酚化合物定量氧化，自身被还原生成蓝色的化合物，颜色的深浅跟多酚的含量呈正相关。

2.分析步骤⑴多酚的提取购买药材，清洗后晾干，将其放入微型植物粉碎机中粉碎，即得到相应的中药材粉末。

精密称取粉碎均匀的试样2.5g于250ml圆底烧瓶中，加溶剂（95%乙醇/水）100ml加热回流1小时，抽滤，滤渣再加溶剂（95%乙醇/水）100ml 再回流1小时，抽滤。

白红花生衣多酚物质含量分析方法及提取技术优化裴云逸【摘要】[目的]建立白、红花生衣多酚物质含量的分析方法并优化其提取技术.[方法]通过光谱特征分析白、红2种花生衣多酚物质主要组成,并建立多酚物质含量分析方法.以60％乙醇为提取剂,通过多次单因素试验,对超声辅助与微波辅助提取的最佳条件进行了优化,比较超声辅助、微波辅助及振荡提取花生衣多酚含量的差异.[结果]通过花生衣多酚物质的紫外可见光谱特征,说明这2种花生衣多酚物质以原花青素和儿茶素等单体为主,从而建立了以原花青素和儿茶素为对照的紫外法分析其多酚物质含量的方法.试验表明,经超声辅助提取多酚物质含量比微波辅助提取略高,二者比振荡提取都要高一些.[结论]花生衣多酚物质含量分析采用紫外法符合其光谱吸收特征,结果可靠.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2015(000)030【总页数】4页(P221-224)【关键词】花生衣;多酚物质;超声辅助提取;微波辅助提取;紫外法【作者】裴云逸【作者单位】玉溪农业职业技术学院,云南玉溪653106【正文语种】中文【中图分类】S509.9花生为人们的日常食品，也是保健食品。

花生衣最常见为呈粉白色和红褐色2种,一般称白皮和红皮。

花生衣中含有多种具有生理活性的多酚类物质，对此方面近年来研究较多，主要包括花生衣红色素、原花青素的提取，花生衣色素的抗氧化性研究，关于花生衣多酚组成的报道[1-2]，关于通过HPLC-MS技术分离鉴定出花生衣原花青素二聚体和三聚体的报道[3-4]，以及有关花生衣原花青素更详细的报道[5]，如每100 g花生皮含儿茶素约16.1 mg，原花青素二聚体约111.3 mg，三聚体约221.3 mg，四聚体约296.1 mg，而关于花生衣多酚的主要成分分析报道很少。

超声辅助提取与微波辅助提取是对植物多酚类物质提取研究较早的2种技术[6-7]，这2种提取方法具有省时、高效、节约溶剂等特点。

超声辅助提取主要利用了超声波的机械振动作用和空化作用促使有效成分进入溶剂中；微波辅助提取主要利用微波的热效应使细胞内产生急剧压力而破裂，有效成分溢出，同时微波的电磁效应加剧了植物细胞内分子运动，也有助于有效成分的浸出[8]。

一、实验目的1. 了解单宁的提取方法及其原理；2. 掌握单宁提取过程中影响提取率的主要因素；3. 学习并运用单宁提取技术，为相关产品开发提供理论依据。

二、实验原理单宁是一种广泛存在于植物中的多酚类化合物，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性。

单宁的提取方法主要有水提法、醇提法、超声波辅助提取法等。

本实验采用水提法提取单宁，其原理是利用植物组织中的单宁易溶于水或水溶液的特性，通过加热、搅拌等手段使单宁从植物组织中溶出。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：茶叶、葡萄皮、苹果皮等富含单宁的植物材料；2. 实验仪器：电子天平、烧杯、电热恒温水浴锅、漏斗、布氏漏斗、抽滤瓶、旋转蒸发仪、蒸馏水、无水乙醇、盐酸、氢氧化钠、碘液等。

四、实验步骤1. 准备植物材料：将茶叶、葡萄皮、苹果皮等植物材料洗净，晾干，剪成小块备用；2. 水提法提取单宁：（1）称取5g植物材料，置于烧杯中；（2）加入50ml蒸馏水，置于电热恒温水浴锅中，加热至沸腾，保持沸腾状态30min；（3）取出烧杯，冷却至室温；（4）用漏斗过滤，收集滤液；（5）将滤液转移至布氏漏斗，用抽滤瓶进行抽滤，得到单宁提取液；（6）将单宁提取液转移至烧杯中，用旋转蒸发仪蒸去溶剂，得到单宁固体；3. 测定单宁提取率：（1）称取一定量的单宁固体，用碘液进行滴定；（2）根据滴定结果，计算单宁提取率。

五、实验结果与分析1. 实验结果（1）茶叶单宁提取率：10.5%（2）葡萄皮单宁提取率：12.8%（3）苹果皮单宁提取率：9.2%2. 实验分析（1）不同植物材料中单宁提取率存在差异，这与植物种类、生长环境、成熟度等因素有关；（2）本实验采用水提法提取单宁，提取率较高，操作简便，适用于实验室和小规模生产；（3）实验过程中，单宁提取率受温度、时间、植物材料粒度等因素影响。

在一定范围内，提高温度、延长提取时间、减小植物材料粒度，有利于提高单宁提取率。

六、实验结论1. 水提法是一种有效的单宁提取方法，适用于实验室和小规模生产；2. 不同植物材料中单宁提取率存在差异，可根据实际需求选择合适的植物材料；3. 提高温度、延长提取时间、减小植物材料粒度等操作有利于提高单宁提取率。

RESEARCH REPORT研究报告植物多酚在植物叶、植物枝干、植物根茎及花果中均有分布，对植物的生长及代谢起重要作用。

植物多酚是一类次生代谢产物，含有多种广泛存在于植物中的酚羟基化合物。

植物多酚通常指的是单宁或鞣质，广义上植物多酚还包括槲皮素、芹黄素、染料木素、没食子酸、橙皮素等多种天然小分子酚类[1]。

大量文献表明，植物多酚种类繁多，有报道研究指出，植物界有超过8 000多种植物多酚及其衍生物。

植物多酚除了具有抗氧化作用外，还具有其他生物活性，如预防阿尔茨海默病、抗炎、抑菌、抗癌、调节肠道菌群和心血管疾病等。

它们被广泛应用于医药和保健品[2]。

近年来，植物多酚作为天然产物开发已成为各国的研究热点，许多研究提出采用不同的提取技术来提取植物多酚并对比其含量，以找出最佳提取植物多酚的方法，从而进一步对植物多酚进行开发利用。

本文综合了近年来不同植物多酚的提取技术，并对这些提取技术进行了比较，为今后植物多酚的进一步提取技术研究提供理论参考。

1 按植物多酚的结构分类在众多的次生代谢产物中，具有芳香或酚环结构是植物多酚的特征[3]。

茶、巧克力、咖啡、葡萄酒、蔬菜和水果的多酚都很丰富，它们具有很强的抗氧化能力。

根据植物多酚的结构，可将其分为8类[4]。

主要包括槲皮素、山奈酚、杨梅素在内的黄酮醇类；有包括木犀草素、芹黄素在内的黄酮类；有包括大豆苷元、染料木素在内的异黄酮类；有柚皮素、橙皮素在内的黄烷类；有包括柚皮素、橙皮素在内的花色苷类；有包括儿茶素、表儿茶素、没食子酸、没食子儿茶素酯在内的黄烷三醇类；有包括绿原酸、单宁酸在内的酚酸类；有包括白藜芦醇在内的芪类。

2 植物多酚不同提取方法介绍近年来，植物多酚的提取工艺随着科学技术的发展被不断优化，董科、冷云、何方婷等人的研究综述指出，各种不同的提取方法均得到长足发展，使多酚产量得到了很大的提高。

例如，超临界流体提取、高压脉冲电场法和组合法等新的和改进的提取技术，正在逐步取代传统的提取技术，并在植物多酚提取领域得到应用和发展。

蚌埠学院生物与食品工程系综合实验实验名称：茶多酚的提取工艺试验一、实验目的及要求：1.了解茶多酚的性质和用途。

2.了解植物天然产物的常规提取及精制方法。

3.通过本实验的具体操作，掌握并熟悉茶多酚的提取与精制的方法及其操作原理和步骤。

4.掌握提取精制过程中茶多酚的分析检测方法。

二、实验原理：茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称，含量约占茶叶干重量的20％－30％。

茶多酚可以消除超氧阴离子和过氧化氢自由基，同时具有抑菌、杀菌，有效降低大肠对胆固醇的吸收，增强机体免疫能力等功能。

目前，茶多酚被广泛的用作食品、饮料、药品和化妆品的天然添加成分。

（离子沉淀法）茶多酚易溶于热水，与一些金属离子形成络合物，并在一定pH值下溶解度很低。

形成的金属离子络合物溶于酸溶液后，茶多酚再次转变成游离状态，再用对茶多酚有更好选择性的溶剂进行萃取、浓缩和干燥，即可得到茶多酚的纯品。

三、实验仪器：电动搅拌器、离心机、pH试纸、真空干燥箱、抽虑瓶、旋转蒸发仪、真空泵、天平、紫外分光光度计、容量瓶、烧杯、量筒等。

四、实验试剂及材料：氯化钠、碳酸氢钠、柠檬酸、硫酸铝、盐酸、亚硫酸氢钠、乙酸乙酯、维生素C（抗坏血酸）、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、硫酸亚铁、酒石酸钾钠、硫酸、绿茶等五、实验内容及步骤：1．浸提1.1 预处理:粉碎干茶叶;粉碎的目的是与液体的接触面增大,使提取率增高；1.2 提取:准确称取经过预处理的干茶叶末10. 00g,按照单因素实验的料液比、浸提温度、浸提时间分别搅拌浸提。

过滤（用抽滤的方法）得到茶多酚提取液。

用附一的方法测提取液中的茶多酚含量。

单因素实验步骤：（1）将称取得10.00g茶叶末置于500ml烧杯中，加入200mL蒸馏水，在85℃下，分别提取0.5h、0.75h、1.0h、1.25h、1.5h，测提取液的吸光度，绘制曲线图，找出最佳提取时间。

（2）称取得10.00g茶叶末置于500ml烧杯中，加入200mL蒸馏水，在所测得的最佳提取时间下，分别在75℃、80℃、85℃、90℃、95℃下浸提，测提取液的吸光度，绘制曲线，找出最佳提取温度。

植物总多酚常用的含量测定方法有Folin- Ciocalteu 法, 酒石酸亚铁法, 普鲁士蓝法和高锰酸钾法等。

1.福林试液的配制：取钨酸钠10g与钼酸钠，加水70ml、85％磷酸5ml与盐酸10ml,置200ml 烧瓶中,缓缓加热回流10小时，放冷，再加硫酸锂15g、水5ml与溴滴定液1滴煮沸约15分钟，至溴除尽，放冷至室温，加水使成100ml。

滤过,滤液作为贮备液。

置棕色瓶中,于冰箱中保存。

临用前，取贮备液，加水稀释至10ml，摇匀，即得。

用10mL乙醇溶液溶解没食子酸，定容至100mL，分别移取到100mL容量瓶中，用蒸馏水定容。

加入福林－薛卡多（Folin-Ciocalteu）试剂显色，在765nm 波长下测定吸光度。

每个浓度做三个平行试验，取平均值，根据标准曲线。

取样品溶液1mL，按照上述的制作方法，测定其吸光度，每个样品做三个平行试验，取平均值，计算样品中的多酚含量。

反应原理为酚类化合物在碱性条件下可以将钨钼酸还原，生成蓝色的化合物，颜色的深浅与酚类化合物含量呈正相关，在波长760 nm左右有最大吸收。

2. 酒石酸亚铁比色法。

其测定原理是茶多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。

用分光光度法测定其含量。

茶多酚标准溶液的配制称取提取纯品,加水溶解定容至250mL,混匀,即为每毫升含1mg提取纯品的标准溶液(mg/mL) 。

茶多酚的含量。

茶多酚标准曲线的绘制。

分别吸取茶多酚标准溶液1. 0mL、2. 0mL、3. 0mL、4. 0mL 于4 个50mL 容量瓶中,各加水至10mL,再加酒石酸亚铁溶液10mL,加入pH为7. 5的磷酸缓冲液至刻度,混匀后用1㎝比色皿,以空白试剂作参比,于波长540nm处测定吸光度(A) ,绘制出标准曲线。

实验十七食品中多酚类物质的提取与含量测定一、实验原理多酚类物质包括花青苷、黄酮苷、单宁等，具体又可分为若干种。

多酚类物质含有酚羟基，有的还含有羧基，属于极性有机化合物，常用极性溶剂提取，如甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、水以及由这些溶剂按比例组成的复合溶剂。

提取植物中原生苷方法原生苷（Proanthocyanidins，简称OPCs）是一种天然植物多酚化合物，被广泛应用于生物医学和食品行业。

它具有抗氧化、抗炎、保护心血管、抗肿瘤、改善免疫功能等生物功能。

因此，分离和提取植物中OPCs的方法备受关注。

植物中OPCs主要存在于种子、果实、皮、茎、叶子和根等不同部位，而不同植物部位中的OPCs含量也有很大的差异。

提取植物中OPCs可以采用多种方法，下面将介绍常用的几种方法：1. 水提取法水提取法是常用的提取方法之一，原因是它简单、安全、易操作。

通常采用热水提取或冷水提取。

将干燥的植物材料加入水中，隔水加热，使OPCs溶解在水中，然后再通过离心、过滤等步骤得到提取物。

热水提取可以提高提取效率，但同时也会破坏一部分OPCs。

2. 有机溶剂提取法有机溶剂提取法通过利用有机溶剂与OPCs亲和力的特点，将OPCs从植物材料中分离出来。

通常采用乙醇、乙腈、丙酮等有机溶剂进行提取。

在提取过程中，需要控制温度和时间，使得提取效果最佳。

该方法方便、快捷、提取效率高，但其提取物中可能会带有一定的有机溶剂残留。

3. 超声波辅助提取法超声波辅助提取法是一种有效的物理提取方法，利用声波的物理作用，加速OPCs与提取溶剂相互作用，从而提高提取效果。

该方法不需要高温、高压，适用于提取不稳定的OPCs。

此外，该方法提取速度快，效率高，不破坏OPCs结构，提取物中有机溶剂残留率低。

4. 纤维素柱层析法纤维素柱层析法是一种依靠纤维素固定相分离OPCs的方法。

该方法提取效果稳定、分离效率高、操作简单，常用于分离复杂混合物中OPCs。

在该方法中，一般使用不同的有机溶剂作为洗脱剂，可以实现不同极性的OPCs的分离。

综上所述，选择不同的提取方法需要考虑植物材料、目标OPCs的性质和研究目的等多种因素。

在实际操作中，可能需要针对实际情况进行优化，以提高提取效率及质量。