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*+&#游离脂肪酸诱导的肝细胞脂肪变性对巨噬细胞极化的影响李晓芸，倪茜茜，华 静上海交通大学医学院附属仁济医院消化内科，上海２００００１摘要：目的 探讨游离脂肪酸诱导的肝细胞脂肪变性对巨噬细胞极化的影响及可能机制。
方法 胶原酶原位灌注法分离Ｃ５７ＢＬ／６小鼠原代肝细胞，将细胞分为对照（ＮＣ）组和混合游离脂肪酸（ＦＦＡ）处理组，并制备肝细胞条件培养液（ＣＭ），以ＣＭ干预巨噬细胞株ＲＡＷ２６４．７。
油红Ｏ染色检测肝细胞内脂质沉积情况，Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅＰＣＲ检测肝细胞脂质代谢相关基因和巨噬细胞Ｍ１／Ｍ２型极化基因表达，ＥＬＩＳＡ检测肝细胞培养上清细胞因子水平。
ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测巨噬细胞Ｔｏｌｌ样受体４（ＴＬＲ４）／核因子－κＢ（ＮＦ－κＢ）信号通路相关蛋白表达。
计量资料两组间比较采用独立样本ｔ检验；多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用Ｔｕｋｅｙ检验。
结果 与ＮＣ组相比，ＦＦＡ孵育诱导肝细胞内大量脂滴沉积，细胞内甘油三酯和总胆固醇含量明显升高（ｔ值分别为１５．６５、３．４９，Ｐ值均＜０．０５）。
ＦＦＡ显著上调肝细胞脂质合成基因固醇调节元件结合蛋白１Ｃ和脂肪酸合酶的ｍＲＮＡ表达（ｔ值分别为２．８９、２．８２，Ｐ值均＜０．０５），并降低脂质分解基因脂酰辅酶Ａ氧化酶１和肉碱棕榈酰转移酶１Ａ的ｍＲＮＡ表达（ｔ值分别为１４．３０、３．３６，Ｐ值均＜０．０５）。
ＦＦＡ诱导肝细胞培养上清炎性细胞因子ＩＬ－６、ＩＬ－１β和ＴＮＦα的水平明显增加（Ｐ值均＜０．０５）。
相比ＣＭ－ＮＣ，ＣＭ－ＦＦＡ显著增加巨噬细胞Ｍ１型基因诱生型一氧化氮合酶２、ＴＮＦα和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达（Ｐ值均＜０．０５），降低Ｍ２型基因ＩＬ－１０ｍＲＮＡ表达水平（Ｐ＜０．０５）。
ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测结果显示，ＣＭ－ＦＦＡ显著增加巨噬细胞ＴＬＲ４、磷酸化ＮＦ－κＢｐ６５和磷酸化ＮＦ－κＢ抑制因子表达水平（ｔ值分别为２．８８、３．６９、３．５４，Ｐ值均＜０．０５）。
PCOS—IR大鼠动物模型的构建与评价目的建立丙酸睾丸酮（testosterone propionate，TP）及高脂饲料诱导的大鼠多囊卵巢综合征（polycyst ic ov ar ian syndrome，PCOS）胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）动物模型，并探讨其胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）特征。
方法将21 日龄雌性SD大鼠随机分为PCOS 组（10只）和对照组（10只），PCOS 组每日皮下注射丙酸睾丸酮的油剂连续8周；对照组每日皮下注射同剂量大豆油剂，连续8周。
观察卵巢形态学改变，测定血中性激素、空腹血糖（FPG）和空腹胰岛素（FIN S）浓度，并计算胰岛素抵抗指数（HOMA1-IR）。
结果模型组卵巢见多个呈囊性扩张的卵泡黄体细胞少见，颗粒细胞层减少。
与对照组比较，模型组体重增加，卵巢重量及卵巢平均体积增加（P＜0.05），血清睾酮（T），LH、LH/FSH、FINS 和HOMA-IR 均显著增高（P＜0.05）。
结论丙酸睾丸酮合并高脂饮食可成功诱导大鼠PCOS胰岛素抵抗模型。
标签：多囊卵巢综合征；动物模型；胰岛素抵抗多囊卵巢综合征是育龄期妇女常见的生殖内分泌及代谢紊乱性疾病，其病因不清，具体发病机制不明，同时至今没有最佳治疗方案，因此建立一种理想的PCOS动物模型非常重要，由于大鼠有规律的动情周期，且周期较短（4-5 d），容易在较短时间观察到更多的生殖周期，因而成为较理想PCOS造模动物[1]。
现代研究认为高雄激素血症和胰岛素抵抗是PCOS的主要内分泌特征，二者相互促进，恶性循环，参与了PCOS的病理过程，为进一步探索治疗PCOS的方案，本文采用丙酸睾丸酮及高脂饲料诱导雌性SD大鼠PCOS 动物模型，并分析其胰岛素抵抗（insulinresistance，IR）特征，旨在寻找一种符合人IR 特征的PCOS 研究模型。
1实验资料与方法1.1实验动物及动物模型构建选取21 日龄的SD雌性大鼠，随机分成模型组与对照组，每组各10 只。
・善宁园地・奥曲肽抑制重症急性胰腺炎大鼠诱生型一氧化氮合酶黄鹤光 冷希圣 杨波作者单位:100044 北京市,北京大学人民医院普通外科(黄鹤光、杨波现在福建医科大学附属协和医院普外科) 一般认为奥曲肽(善宁)治疗急性胰腺炎的显著疗效常与抑制胰酶、消化液分泌有关〔1〕,重症急性胰腺炎(S AP )急性期常伴有急剧的全身病理生理改变,细胞因子和炎症介质的过度表达可引起急性胰腺炎组织损伤〔2,3〕,诱生型一氧化氮的过量产生可明显引起细胞毒性作用以及脏器血供的低灌注〔4〕。
本研究探讨奥曲肽缓解急性胰腺炎的病情,是否还通过抑制过量产生的一氧化氮(NO )。
材料和方法1.实验动物:雄性S D 大鼠200～250g128只,清洁级,购自中国科学院上海实验动物中心。
随机分为假手术组8只,S AP 组60只,治疗组60只,其中S AP 组和治疗组各观察20只动物死亡率。
2.大鼠重症急性胰腺炎模型制作:参照Schmidt等〔5〕方法并加以改进氯胺酮(50mg/kg )和3%苯比妥钠(30mg/kg )腹腔麻醉经右颈外静脉行右心房插管,无菌条件下,手术显微镜下,十二指肠降部的肠壁处逆行穿刺胆胰管,微量药液注射泵注射5%牛磺胆酸钠(Sigma 公司)110ml/kg ,注射速度012ml/min ,注射持续10min 。
肉眼下,大鼠胰腺组织出现充血、水肿后方开始后续实验。
假手术组仅翻动胰腺后关腹,治疗组于诱发S AP 后皮下注射奥曲肽(诺华公司),每次14μg/kg q8h ×2d 。
3.诱发重症急性胰腺炎6,12,24,48h 后,自大鼠右心房导管抽血1ml ,肝素抗凝,离心后吸取上清液置-20℃冰箱保存待测。
重氮化反应法测定NO(试剂由南京建成生物工程研究所提供)。
常规方法测血清淀粉酶和血钙。
4.取大鼠胰头3mm ×3mm ×3mm 大小组织块,作4μm 厚切片行HE 染色切片,病理检查。
Journal of Mathematical Medicine Vol.28No.12015The volume of right hippocampus,parahippocampal gyrus,amygdala,precuneus,inferior frontal gyrus,and bilateralmiddle frontal gyrus,putamen,etc.in the MCI patient group is significantly smaller than that in control group.The volume of right hippocampus ,thalamus,Cuneus,etc.in the AD patient group is significantly smaller than that in MCI patient group.Changes of white matter:The volume of bilateral extra-nuclear,sub-gyral,corpus callosum,ante-rior cingulate cortex,and right parahippocampal gyrus,etc.is smaller in the AD patient group is significantly small-er than that in the control group.The volume of right parahippocampal gyrus,thalamus,Extra -Nuclear,and left fusiform,etc.in the MCI patient group is significantly smaller than that in control group.The volume of bilateral sub-gyral,right anterior cingulated,left postcentral etc.in the AD patient group is significantly smaller than that in MCI patient group.Conclusions:VBM can reveal widespread volumetric reduction of gray matter and white matter in AD and MCI with the advantage of objectivity.It is helpful in the early diagnosis of AD and is helpful to monitor the convertion from MCI to probable AD.Key words DARTEL;alzheimer ’s disease;mild cognitive impairment;magnetic resonance imaging;gray matter;white matter;voxel-based morphometry经国内外学者数十年的努力，使非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD ）模型研究有了很大的进展，可分为动物模型和体外细胞模型，动物模型包括影响肝脏能量代谢的基因敲除或突变模型与营养、药物或毒物导致的肝内脂肪酸摄入和输出不平衡诱发的脂肪肝模型[1]，体外细胞模型通常是利用肝细胞给予饱和或不饱和脂肪酸刺激，复制脂滴在肝细胞的生成，高度模拟了人NAFLD 的特征性表现。
油酸性肺损伤大鼠肝组织TNF-α、IL-6的表达美丽班;买买提祖农·买苏尔;张建龙;郭芹【摘要】目的:观察油酸性肺损伤大鼠肝组织TNF-α、IL-6的表达,探讨油酸致肺损伤发生中细胞因子与肝损伤的相关性.方法:16只健康Wistar雄性大鼠随机分为对照组和油酸6 h组(OA6 h),2组大鼠测肺湿/干重(W/D)及血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TB)的改变,应用放射免疫法测定血清及肝组织中TNF-α、IL-6蛋白含量,应用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测肝组织TNF-α、IL-6mRNA的表达,同时观察肝组织形态学的变化.结果:OA6 h 组肺W/D、ALT、AST和TB均高于对照组(P＜0.01),OA6 h组血清和肝组织TNF-α、IL-6蛋白含量以及肝组织TNF-α、IL-6mRNA的表达均较对照组增多(P ＜0.01).结论: 油酸致大鼠ARDS过程中可发生肝功能障碍,同时肝组织TNF-α、IL-6在基因和蛋白水平的表达均增强.ARDS过程中出现的肝功能障碍可能与TNF-α、IL-6的参与有关.【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2008(031)011【总页数】3页(P1525-1527)【关键词】急性肺损伤;肝功能;TNF-α;IL-6【作者】美丽班;买买提祖农·买苏尔;张建龙;郭芹【作者单位】新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室,新疆,乌鲁木齐,830011【正文语种】中文【中图分类】R-332;R-363急性肺损伤(acute lung injury, ALI)是心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性、进行性缺氧性呼吸衰竭。
SIRT1信号通路在高尿酸介导的NAFLD大鼠中的表达及白藜芦醇的干预作用赵旭;施军平;张仙土;赵鹏杰;王妙婵;傅晓晴;刘寿荣;乔梁;包剑锋【摘要】Objective] To investigate the effect of resveratrol on the serological inflammation index and pathological changes of nonalcoholic fatty liver disease in rats with high uric acid. [Methods] Male SD rats were treated with modified high yeast high fat diet and subcutaneous injection of oxonic acid potassium salt, to build model of NAFLD with high uric acid.36 SPF male SD rats were randomly divided into 3 groups: controlgroup(Group A), model group(Group B), treatment group(Group C), 12 rats in each group. Body mass, liver wet weight, ALT, AST, TNF-α, IL-6 and UA were respectively observed in each group. And compared with control group and model group, the pathological changes were analyzed. Observed SIRT1, cox-2 and NF-κB expression by immunohistochemical. [Results] After resveratrol treatment, the liver wet weight of the rats was significantly lower than that of the model group(P<0.05), ALT, AST, TNF-α, IL-6 and UA were significantly decreased(P<0.01). Besides, after resveratrol treatment, range of fatty degeneration and inflammatory reaction in the liver tissue were smaller compared with the model group. Immunohistochemical results: compared with model group, in treatment group, the cox-2 and NF-κB expression were significantly reduced(P<0.01), the SIRT1 expression obviously increased(P<0.01). There was a positive correlation between the expression of cox-2, NF-κB and rat liver fattychange and inflammation score. And there was a negative correlation relationship between SIRT1 expression and rat liver fatty change and inflammation score( P<0.01). There was a negative correlation relationship between expression of cox-2, NF-κB and expression of SIRT1(P<0.01). [Conclusion] Resveratrol may promote SIRT1 expression in liver cells, inhibit cox-2 and NF-κB, prevent inflammation cytokines such as TNF-α, IL-6, mediate cytotoxic effect, reduce the degree of inflammation and play a role for the treatment of NAFLD.%[目的]探讨白藜芦醇对高尿酸介导的非酒精性脂肪性肝病(nonalcholic fatty liver disease，NAFLD)大鼠血清炎症指标的影响及病理学的改变。
脂联素对自发性2型糖尿病大鼠肝脏IRS-1磷酸化的影响及其可能机制朱波;李晨钟;钱毅;潘永华;李佳;张燕;薛耀明【摘要】Objective To investigate the effect of adiponectin (APN) on the insulin pathway in the liver of OLETF rats and explore its molecular mechanism. Methods Twenty male OLETF rats and 10 male LETO rats were sacrificed at 8 and 32 weeks of age to examine the fasting blood glucose, serum insulin, adiponectin and blood lipid profiles. The APN, phosphotyrosine of insulin receptor substrate-1 (IRS-1), IKKβ and nuclear-kB (NF-kB) in the liver tissue were determined using ELISA, Western blotting or immunohistochemistry. Results The plasma adiponectin level in OLETF rats was significantly lower than that of LETO rats since 8 weeks of age (P<0.01). At 32 weeks of age, the blood lipid levels of OLETF rats increased significantly (P<0.05) with inverse correlations to plasma adiponectin (P<0.01). The liver APN, py-IRS-1, IKKβ and NF-kB levels in OLETF rats differed significantly from those of LETO rats at both 8 and 32 weeks. At 32 weeks of age, the APN level of both rats were correlated to the levels of NF-kB and py-IRS-1 (P< 0.01). Conclusion APN may decrease tyrosin phosphorylation of IRS-1 via the IKK/NFkB pathway and inhibit insulin signaling pathway in the liver, which contributes to hyerlipidemia, hyperglycemia and development of type 2 diabetes.%目的探讨脂联素对自发性2型糖尿病(OLETF)大鼠肝脏胰岛素信号通路的影响及其分子信号机制.方法自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠20只,同系健康对照LETO鼠10只.于8周和32周龄分别宰杀.检测空腹血糖、血浆胰岛素、脂联素、血脂水平,并以ELISA、免疫印迹和免疫组化法检测肝脏脂联素、胰岛素受体底物-1酪氨酸磷酸化水平(py-IRS-1)以及IKKβ和NFkB表达水平.结果 OLETF鼠血浆脂联素水平在8周龄和32周龄均显著低于LETO鼠(P<0.05).32周龄时OLETF鼠血清胰岛素、TG、FFA、ISI均显著升高(P<0.05).脂联素水平与FBG、血清胰岛素、TG、FFA、ISI数显著相关(P均<0.01).OLETF鼠肝脏脂联素和py-IRS-1水平在8周龄和32周龄均显著低于LETO鼠,IKKβ和NFkB水平也显著升高(P<0.01).py-IRS-1与肝组织脂联素、IKKβ和NFkB变化显著相关(P<0.01).32周龄时脂联素水平与NF-κB和py-IRS-1显著负相关(P<0.05).结论OLETF鼠脂联素可能通过NFkB通路影响肝脏IRS-1酪氨酸磷酸化水平,导致肝脏的胰岛素信号传导障碍及糖、脂代谢紊乱,参与2型糖尿病的发生发展.【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2011(031)005【总页数】5页(P782-786)【关键词】糖尿病;脂联素;胰岛素受体底物-1【作者】朱波;李晨钟;钱毅;潘永华;李佳;张燕;薛耀明【作者单位】南方医科大学南方医院内分泌代谢科,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院内分泌代谢科,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院内分泌代谢科,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院内分泌代谢科,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院内分泌代谢科,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院内分泌代谢科,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院内分泌代谢科,广东,广州,510515【正文语种】中文【中图分类】R587.1胰岛素抵抗是2型糖尿病发病机制的关键环节之一。
