抗枣疯病枣树品种酚类物质的薄层层析分析
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第 １期
河北林 业科 技
２０ ０６年 ２月
抗 枣 疯 病 枣树 品种 酚 类物 质 的薄 层层 析 分 析
郭晓军， 温秀军， 孙朝晖， 王振亮， 李梦钗 ， 刘满光
（ Ｅ 河Ｊ省林业科学研究院 ， 河北 石家庄 ００６ ） ５０ １
摘要： 该文通过筛选出来的抗病品种壶瓶枣（ ｕ Ｈ 系列）婆枣单株（ｌ 、 Ｊ系列） 和作为对照的感病品种当地婆枣、 酸枣
枣疯病是 由植原体 （ ｈｔ ｌ ｍ ） Ｐ ｙｏ ａ ａ 引起 的一种毁 灭性 ｐｓ 侵染病害 ， 通常小树 １－ ａ 大树 ３—６ 便逐 渐枯 死 ， ． ， ２ ８ 已有 的调查表 明枣疯 病在我 国 ２ ５个省 （ ） 市 均有不 同程度的 发生 ， 大量枣树毁 灭绝 产 ， 造成 了 巨大 的经济损 失 ， 重 严 阻碍了枣树产业 的发展 ， 为此 ， 多学 者对枣疯病 的防治 许
普 表 疯 的 枣 通已 现 状 婆
普 通健康婆枣
地野生、 疯状的酸枣 袁现
品分别为筛选出来的抗病品种壶瓶枣（ ｕ Ｈ 系列） 婆枣单 、
株（１ Ｊ系列） 和作 为对照 的感 病 品种 当地婆枣 、 酸枣 共 ３ 个品种 １ ０个样品 ， 并分别 于 ２ ０ ０ ２—２０ ０ ３年 的 ７— ９月进 行 了酚类 物质层析分析 ， 取样 材料具体说 明见表 １ 。
１２ 酚 类 物质 分析 ．
Ｊ 一 没有进行 Ｉ Ｈ １ 病原接种
￥ａ— 没有进行 ｕｎ Ｄ 病原接种
Ｓｎ Ｈ 有 行 原 种 ｕ — 没 进 惰 接 ａ
健 枝
当 生 健 枣 地 ｆ 、 康酸
汽： “一” 前相 同的ｌ示所取 的材 料在 同一棵树 上 （ ｕｎ—Ｄ 丧 ＿ Ｓａ
表 １ 酚类物质分析材料的基本情况
样品编号 病原接种情况 采样说明 备 注
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
… １ １２ Ｌ １ Ｈ ９０ ０ ９ ８０ ０
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Ｊ 一 一 接 皮。 、 、 苗 上 健枝 病 木 的 ２０ 接 棱 ｛１ ］ 年 病
儿１ ２ 接 皮 ８２ １９ 、 ９ 儿０ Ｈ 病 。 ０ 一一
１２ １ 酚类物质 的提取 ．．
称取 ５ 的新鲜茎叶于研钵 中 ， ｇ
与 Ｓａ ｕｎ—Ｈ例外） “ ｜ ； Ｄ”＆示嫁接 该树疯接穗上 长出的枝 ． Ｈ … 表示该本树 ． ｌ的健枝。 长 ｝ Ｊ
技 术进行 了大量 的探索研 究 ， 取环剥 截枝 、 除病 树、 采 刨
药物输液治疗、 药杀传病 昆虫、 选育抗病品种、 组织培养
脱毒苗等 多种措施 ， 中 ， 抗病 品种是解决这 一类维 其 选育
管束系统侵染性病害最经济有效的措施， 基于这一解决
枣疯病防治 的根 本途 径 ， 河北 省林 业科 学研究 院枣 疯病 课题组在 １９ ９ ６～２０ ０ ２年的 ６ ａ时间里 ， 通过反 复嫁接病枝 和病皮进行 ７次 病 原传病 试验 ， 筛选 出几个生 长 良好且 至今没有 表现 出任 何丛枝 症状 的 品种 和单 株 ， 已证 明 现
共 ３个 品种 １ Ｏ个样品 ， ２０ ２０ 年对与植物抗性有关 的酚类物 质进 行 了薄层层析分析 ， 于 ０ ２～ ０ ３ 结果发 现 ： 抗病 材料 与感 病材料以及不同材料品系间均有显著差异 ， 出现 了明显不同 Ｒ 的荧光带 ， ｆ 不仅为 寻找抗 病材料 中与其抗病有 关 的物 质 提供了重要的线索 ， 为揭示其抗病机理起到 了一定的推动作用 。 也
２０ 接 枝 ０１ 年 病
枝
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竺 … 腐 ９ ９ ９
。
了具有很强 的抗 性 和 良好 的抗 性遗 传稳 定性 ， 了进一 为
、 ０ 苗 上 健枝 ０ 木的
步探讨抗病品种和单株与寄主病原的互作过程 ， 揭示其
抗病机理 。 ２０ ２０ 于 ０ ２— ０ ３年专 门对与植物 抗性有 关的酚 类物质进行了薄层 层析分 析 ， 旨在寻 找与抗 病有 关的物 质或 因子 ， 并通过基 因途径解决 枣疯病 问题 ， 同时 也为枣 疯病的防治提供理 论依 据和参考。
１ 试 验 材 料 与 方 法 １ １ 试 验 材 料 ．
ｌ ６一 － ｌ Ｈ ｕ
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。
Ｊ ９ 茁健／。 黻 皮 ０术枝Ｏｒ 苗 １ 年、０ 上 ★ ’ ２ ，０ 的 ｌ ４ 接０ 一１， 病 ２ ｔ罴 病 枝 ８ １ ＇ｌ ２ ０ ｆｌ ｔ。 Ｈ ￣ ，
供试的枣树材料均采 自河北 省保定市唐 县军城镇 枣 树试验栽培区 ， 面积 ４ ０ 土壤 和管理条件一致 ， ０ｍ ， 被测样
一病０ 上 且 ’ 接０ 茼健 料 年０ 接 １ 的 箍２０木枝 睇 、 病２ 皮０ 枝 ，
有 行 接 进 病原 种 疯 枝
健枝
城枝
Ｊ ・ Ｌ Ｄ １
关 键词 ： 枣疯病 ； 酚类物质； 薄层层析
中图分类 号 ： ６． 文献标 识码 ： ￥ ５１ ６ Ａ
文章编 号 ： ０ ～ ３６ ２０ ）１ ００ — ２ １ ２ ３５ （０６０ — ０１ ０ ０
以上 ） ，２ ０ ｒｍ离心 ２ ｍｎ 收集 上清液 甲醇相 ， 后 １０ ０ｐ ０ ｉ， 沉淀 继续 加甲醇 溶解 抽 提 ， 甲醇 相 合并 ， 至沉 淀 变 白为 将 直 止； 将所收集的上清液通入 氮气流吹 除甲醇 ， 留体积 为 所 原 来的 １２～１３左右 （ ／ ／ 可在 ６ ℃水浴 中吹 ） 向剩余 的上 ０ ， 清液 中加 ２倍体积 的石油醚萃取 ２～ ３次 （ 上层 为石 油醚 相， 下层为 甲醇相 ） 再用氮气流将 甲醇相吹千 ， ， 用少 量甲 醇（ Ｂ Ｔ抗氧化剂 ） 甲醇相 吹 干残 留物溶解 并转 移 含 Ｈ 将 到离心管中 ， 于冰箱内 一 ０ ２ ℃下保存备用。
第 １期
河北林 业科 技
２０ ０６年 ２月
抗 枣 疯 病 枣树 品种 酚 类物 质 的薄 层层 析 分 析
郭晓军， 温秀军， 孙朝晖， 王振亮， 李梦钗 ， 刘满光
（ Ｅ 河Ｊ省林业科学研究院 ， 河北 石家庄 ００６ ） ５０ １
摘要： 该文通过筛选出来的抗病品种壶瓶枣（ ｕ Ｈ 系列）婆枣单株（ｌ 、 Ｊ系列） 和作为对照的感病品种当地婆枣、 酸枣
枣疯病是 由植原体 （ ｈｔ ｌ ｍ ） Ｐ ｙｏ ａ ａ 引起 的一种毁 灭性 ｐｓ 侵染病害 ， 通常小树 １－ ａ 大树 ３—６ 便逐 渐枯 死 ， ． ， ２ ８ 已有 的调查表 明枣疯 病在我 国 ２ ５个省 （ ） 市 均有不 同程度的 发生 ， 大量枣树毁 灭绝 产 ， 造成 了 巨大 的经济损 失 ， 重 严 阻碍了枣树产业 的发展 ， 为此 ， 多学 者对枣疯病 的防治 许
普 表 疯 的 枣 通已 现 状 婆
普 通健康婆枣
地野生、 疯状的酸枣 袁现
品分别为筛选出来的抗病品种壶瓶枣（ ｕ Ｈ 系列） 婆枣单 、
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管束系统侵染性病害最经济有效的措施， 基于这一解决
枣疯病防治 的根 本途 径 ， 河北 省林 业科 学研究 院枣 疯病 课题组在 １９ ９ ６～２０ ０ ２年的 ６ ａ时间里 ， 通过反 复嫁接病枝 和病皮进行 ７次 病 原传病 试验 ， 筛选 出几个生 长 良好且 至今没有 表现 出任 何丛枝 症状 的 品种 和单 株 ， 已证 明 现
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中图分类 号 ： ６． 文献标 识码 ： ￥ ５１ ６ Ａ
文章编 号 ： ０ ～ ３６ ２０ ）１ ００ — ２ １ ２ ３５ （０６０ — ０１ ０ ０
以上 ） ，２ ０ ｒｍ离心 ２ ｍｎ 收集 上清液 甲醇相 ， 后 １０ ０ｐ ０ ｉ， 沉淀 继续 加甲醇 溶解 抽 提 ， 甲醇 相 合并 ， 至沉 淀 变 白为 将 直 止； 将所收集的上清液通入 氮气流吹 除甲醇 ， 留体积 为 所 原 来的 １２～１３左右 （ ／ ／ 可在 ６ ℃水浴 中吹 ） 向剩余 的上 ０ ， 清液 中加 ２倍体积 的石油醚萃取 ２～ ３次 （ 上层 为石 油醚 相， 下层为 甲醇相 ） 再用氮气流将 甲醇相吹千 ， ， 用少 量甲 醇（ Ｂ Ｔ抗氧化剂 ） 甲醇相 吹 干残 留物溶解 并转 移 含 Ｈ 将 到离心管中 ， 于冰箱内 一 ０ ２ ℃下保存备用。
