大鼠过敏性哮喘模型的建立

BALB／c小鼠阴虚型过敏性哮喘模型的建立与评价

目的 建立BALB/c小鼠阴虚型过敏性哮喘模型并进行评价。方法 采用腹腔注射与皮下注射卵清白蛋白（OVA）致敏、雾化吸入OVA激发的方法复制过敏性哮喘BALB/c小鼠模型，激发后期合并灌胃甲状腺素复制阴虚型过敏性哮喘模型。在监测饮食、饮水及体质量的基础上，对支气管激发过程中哮喘行为学、肺功能及肺组织病理学等哮喘相关指标进行观测，同时对cAMP、cGMP及肺液清除功能等阴虚证相关指标进行考察。结果 阴虚哮喘模型组小鼠出现明显的哮喘症状，哮喘行为学综合评分明显升高，吸气峰流量、呼气峰流量、潮气量明显下降，呼吸频率增加，肺组织病理学可见明显的炎症反应；同时，阴虚哮喘模型组小鼠进食与饮水量明显增加，而体质量增长缓慢，肺组织湿重/干重比值下降，血清cAMP及cAMP/cGMP升高，cGMP下降，显示小鼠处于阴虚而阳相对亢盛的状态。结论 在OVA致敏、激发的基础上给予甲状腺素，可成功复制BALB/c小鼠阴虚型过敏性哮喘模型。

Abstract： Objective To establish and evaluate a BALB/c mouse model of

anaphylactic asthma with yin-deficiency syndrome. Methods Ovalbumin （OVA）

was injected to sensitize and was inhaled to stimulate to replicate the BALB/c mouse

model of anaphylactic asthma. Thyroxin was used for gavage during late stimulation

to replicate the BALB/c mouse model of asthma with yin-deficiency syndrome. On

IL-8和Eotaxin在哮喘大鼠中的表达及地塞米松的作用

汪浩;武晓兰;谭红霞;范晓云

【摘 要】investigate the expression of IL-8 and Eotaxin in peripheral blood,

bronchoalveolar lav-age fluid ( BALF ), mRNA and protein expressions of

Eotaxin in lung tissue of asthma rat, and observe the effection of IL-8 and

Eotaxin on dexamethasone( DXM ). Methods Thirty SD rats were randomly

divided into control group, asthma model group and DXM group. Asthma

rat model was established by sensitization and stimulation with

ovalbumin( OVA ). Cell differential counting was conducted in BALF. IL-8

and Eotaxin levels in serum and BALF were detected by enzyme linked

immunosorbent assay( ELISA ). The lung tissue slices were stained with HE.

The mRNA and protein expressions of Eotaxin in lung tissue were

measured with real-time fluorescent quantitative PCR and

immunohistochemical techniques. Results Total white blood cell number,

野罂粟碱对哮喘和溃疡性结肠炎模型大鼠肺及结肠组织相同差异表达基因的干预作用

付骞卉;柯愈诗;宋铭晶;刘伟志

【摘 要】目的 通过野罂粟碱调控呼吸道疾病与炎性肠病探讨中医归经理论的分子内涵,分析两类疾病动物模型在治疗后共同差异表达基因的变化从而揭示肺、肠相关联的分子机制.方法 采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)雾化法建立过敏性哮喘模型并与复合免疫法建立的溃疡性结肠炎模型相比较,以正常大鼠作为对照.经野罂粟碱给药后,经反转录聚合酶链式反应技术(RT-PCR)检测两组模型大鼠肺组织和肠组织中共同差异表达基因mRNA表达水平.结果 野罂粟碱能够明显改善大鼠肺组织和结肠组织病变,通过KEGG注释分析测序结果最终得到三个关键差异表达基因分别是C-C基序趋化因子11,碳酸酐酶1,核激素受体亚家族D组成员1,RT-PCR结果与转录组测序结果上下调情况基本一致,且野罂粟碱显著降低两组模型大鼠肺和结肠组织Ccl11 mRNA表达水平(P<0.05)及升高Ca1和Nr1d1 mRNA表达水平(P<0.05,P<0.05).结论 呼吸道疾病与炎性肠病模型大鼠的肺、肠组织具有相同差异表达基因,野罂粟能显著调节肺与大肠共同差异表达基因的水平,这可能是野罂粟归肺与大肠经的分子机制之一.

【期刊名称】《中国比较医学杂志》

【年(卷),期】2019(029)003

【总页数】8页(P7-13,66)

【关键词】野罂粟碱;归肺与大肠经;转录组测序技术;哮喘;溃疡性结肠炎

【作 者】付骞卉;柯愈诗;宋铭晶;刘伟志 【作者单位】中央民族大学药学院,民族医药教育部重点实验室(中央民族大学) ,北京 100081;中央民族大学药学院,民族医药教育部重点实验室(中央民族大学) ,北京

100081;中国医学科学院医学实验动物研究所,北京协和医学院比较医学中心,国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室,北京 100021;中央民族大学药学院,民族医药教育部重点实验室(中央民族大学) ,北京 100081

孕粤杂染色法在哮喘大鼠模型杯状细胞染色中的应用朱惠源员，圆，张建立猿，张国俊员，孟鹏飞源关键词：哮喘；杯状细胞；孕粤杂染色中图分类号：砸源源远援愿摇摇文献标识码：月文章编号：员园园员原苑猿怨怨（圆园员圆）园猿原园猿源愿原园圆收稿日期：圆园员员原园苑原园员作者单位：员郑州大学第一附属医院呼吸与危重症医学一科，郑州摇源缘园园缘圆郑州市第二人民医院圆呼吸内科、猿消化内科摇源缘园园园远源河南中医学院第一附属医院呼吸内科，郑州摇源缘园园园园作者简介：朱惠源，男，博士研究生，主治医师。耘鄄皂葬蚤造：澡怎蚤赠怎葬灶员猿岳员远猿援糟燥皂张国俊，男，教授，主任医师，博士生导师，通讯作者。耘鄄皂葬蚤造：扎造早躁原园园员岳员圆远援糟燥皂摇摇在支气管哮喘大鼠模型中，常需研究支气管黏膜杯状细胞的增生状况，从而了解哮喘的严重程度。其中最常用的杯状细胞染色法为高碘酸鄄无色品红染色法（孕粤杂法），本文对该方法介绍如下。员摇材料与方法员援员摇材料摇动物模型制备杂孕云级雌性宰蚤泽贼葬则大鼠圆园只，重员愿园耀圆猿园早，购自河南省实验动物中心。实验动物许可证号：杂悦载运（豫）圆园园缘鄄园园园员。大鼠于动物房适应饲养一周后，按随机数字表将大鼠分为模型组和对照组，每组员园只，按照吴巧珍等［员］报道的哮喘模型造模方法，对模型组进行哮喘大鼠模型的制备，对照组为无处理正常大鼠。模型制备成功后处死圆组大鼠，取左侧肺叶于员园豫中性福尔马林中固定圆源澡，常规石蜡包埋并切片，以备杯状细胞孕粤杂染色。员援圆摇染液配制摇本文综合采用了刘亚敏和陈水平等［圆，猿］介绍的方法进行染液配制，采用高碘酸钠代替传统的高碘酸，将高碘酸钠圆早加入圆园园皂造蒸馏水中摇匀使其充分溶解，配制成员豫高碘酸钠溶液；另配制无色品红溶液（杂糟澡蚤枣枣液）：先将圆园园皂造蒸馏水放入微波炉中煮沸后取出，加入员早碱性品红，摇匀至其彻底溶解，待凉至缘园益时过滤至另一烧杯中，加入员晕的盐酸圆园皂造摇匀，待其冷却至圆缘益时再加入偏重亚硫酸钠员郾缘早摇匀，放置于冰箱避光冷藏员圆澡后取出，加入活性碳员郾缘早静置员澡后，溶液经过滤呈无色或微黄色透明液体，即可使用。员援猿摇染色程序摇切片常规脱蜡至水后，先使用员豫高碘酸钠水溶液氧化员园皂蚤灶，蒸馏水洗圆皂蚤灶伊猿次，再使用杂糟澡蚤枣枣液染色圆园皂蚤灶，染色后经蒸馏水水洗分化员园皂蚤灶，苏木精染核员园泽，员豫盐酸乙醇分化圆园泽，自来水冲洗后梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。圆摇结果摇摇在哮喘大鼠模型中，支气管黏膜杯状细胞的染色效果稳定，色差明显，背景清晰，肺和支气管黏膜背景染为浅蓝色，杯状细胞染为紫红色，杯状细胞和其他组织易于区分，且模型组与对照组相比明显增生，两组染色结果分别如图员、圆。①②图员摇模型组支气管黏膜杯状细胞，孕粤杂染色摇摇图圆摇摇对照组支气管黏膜杯状细胞，孕粤杂染色猿摇讨论摇摇孕粤杂染色是一种常用的组织化学染色方法，可用于多糖类或糖蛋白（黏蛋白）的染色，支气管黏膜杯状细胞因含有糖蛋白而染色。在传统的孕粤杂染色程序中，通常使用高碘酸进行氧化，而我们的实验采用高碘酸钠代替高碘酸。高碘酸钠同样具有氧化特性，经本实验证实，哮喘大鼠杯状细胞的染色效果明显，且高碘酸钠价格便宜，经济性较好，宜于采用。在染色程序中需要注意的是，配制好的高碘酸钠溶液和杂糟澡蚤枣枣液应置于冰箱避光冷藏，染色前取出恢复至室温，使用后可再回收利用，不影响染色效果。新配好的杂糟澡蚤枣枣液应为·愿源猿·临床与实验病理学杂志摇允悦造蚤灶耘曾责孕葬贼澡燥造摇圆园员圆酝葬则；圆愿（猿）