胃癌中iNOS与HIF-1α表达的相互关系和临床意义

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・中文论著摘要・胃癌中iNOS与HIF.1a表达的相互关系及临床意义目的研究iNOS与HIF.1a在胃癌中表达的相互关系,探讨它们在胃癌的发生发展、浸润和转移中的作用。研究材料和方法

(一)研究对象:选择临床及病理资料齐全的中国医科大学附属第二医院普通外科2001年"-'2003年手术切除并经病理证实为胃腺癌的蜡块标本54例,术前均未进行过化疗或放疗,病理均为腺癌。另取正常胃粘膜组织15例做对照,标本取自胃溃疡或十二指肠溃疡手术标本中正常胃粘膜组织,并经病理观察证实且排除重度不典型增生。(二)主要试剂:本试验采用浓缩型兔抗人iNOS单克隆抗体(福州市迈新生物技术开发公司)兔抗人HIF.1a单克隆抗体(福州市迈新生物技术开发公司)S.P试剂盒及DAB显色试剂盒购自福少li市迈新生物技术开发公司。(三)主要器材:普通实验室冰箱(得贝牌)、切片机SHANDONFiness、

全自动脱水机SHANDONthermoElectro型、石蜡包埋机LEICAEGIl50H,温箱(国产),PH计MODEILPIl5H、TK--218VIH恒温摊片烤片机、ZH一3H石蜡切片用冷台,HNl01—2AD电热鼓风干燥箱。OlympusBX41显微镜、显微数码照相机OlympusBX40F4等,均由中国医科大学附属二院病理科提供。实验方法

应用免疫组化SP法检测54例胃癌中iNOS、HIF.1a的表达情况,探讨iNOS与HIF.1a的表达关系及临床意义。结果

胃癌中iNOS高表达(66.67%),明显高于正常胃组织(6.67%),P<0.05;iNOS的表达与胃癌TNM分期、肿瘤浸润深度和淋巴结转移显著相关,P<0.05。HIF.l0【在胃癌中的表达率(74.07%)明显高于正常胃组织(O%),P<o.01;HIF—la的表达与胃癌TNM分期、肿瘤浸润深度和淋巴结转移显著相关,P<0.05或P<0.01。胃癌组织中iNOS与HIF—la的表达呈正相关(r=0.596,P<0.05)。

结论iNOS和HIF.1et在胃癌的发生发展中起重要作用,联合检测可作为判断胃癌恶性程度和预后的指标。

关键词缺氧诱导因子.1伐;诱导型一氧化氮合酶(iNOS);癌;免疫组织化学

2・英文论著摘要・TheRelationshipandSignificanceofHIF-・laandiNOSExpressioninGastricCancer

objectivesTostudytheexpressionofiNOSandHIF—laingastriccancerand

their

relationshipwithtumorangiogenesis,clinicopathologicfeatureandprognosis.

Methods1.Patientsandtissuecollection

54casesofgastriccarcinomaswerecollectedaftersurgicalresectionperformedin

ShengjingHospitalduring2001-2003.Noneofthepatientsreceivedchemicaltherapy

orradiotherapybeforeresection.Another15samplesfromnormalgastrictissuewere

asthecontrolgroup.

2.Theagents

Mouseanti—humaniNOS、HIF-laandSupersensitivitySPkitsandDAB

reagentswereallwereboughtfromMaixinCorporation(Fuzhou,Fujian

province,

China).3.Method

ImmunohistochemicaltechniquewasusedtodetecttheexpressionofiNOS

and

HIF一1ain54casesofgastriccancer.TherelationshipbetweentheexpressionofiNOS,HIF-1aandtumorangiogenesis,clinicopathologiefeatureofpatientswas

analyzed.ResultsTheexpressionofiNOSingastriccancersWas(66.67%)significantlyhigherthanthatinnormalgastrictissue(6.67%),P<0.05;TheexpressionofiNOSingastric

cancerWassignificantlyassociatedwimTNMstage,invasivedepthandlymphnode

3metastasis(P<O.05).ThepositiveexpressionrateofHIF—l

in

gaslriccancer

(74.07%)wassignificantlyhigher

thanthatinnormalgastrictissue(O%),P<0.01;

TheexpressionofHIF—lctingastric

cancerwassignificantly

associatedwithTNM

stage,invasivedepth

andlymphnodemetastasis,P<0.05orP<0.01.Therewas

positivecorrelationbetweenexpressionofiNOSandHIF-la(r20.596,P<0.05).

ConclusionsiNOSandHIF-lotplay

the

veryimportantroleinthedevelopmentofgastric

cancer,couldbemarkersindiagnosisofgastriccancerandestimationof

prognosis.

KeywordsiNOS;HIF-la;gastric

cancer;Immunohistochemistry

4英文缩略语iNOSHIF.1anitricoxidesynthaseNO

HRE

诱导型一氧化氮合酶hypoxia-induciblefactor-1a缺氧诱导因子一lanitricoxide一氧化氮

Hypoxiaresp.ondeelement缺氧反应元extracellularmatrix中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。论文作者签名:型兰日期:区。仁::苎

中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外),以采用影印、缩印或其他手段保存论文。

论文作者签名:塑指导教师签名:塑亟日期:粤生・论文・胃癌中iNOS与HIF.1a表达的相互关系及临床意义刖菁

胃癌是消化道发病率很高的恶性肿瘤之一,且发病率和死亡率呈上升趋势,肿瘤细胞生长的无限性和浸润转移是肿瘤的最重要的特征,是胃癌治疗失败导致死亡的主要原因,而肿瘤细胞生长及浸润转移受多种因子的调控【11。故寻找一条正确的途径预测胃癌的发生发展并控制浸润与转移,已经成为迫切需要解决的问题。缺氧是实体肿瘤生长微环境的一个共同特征【2】,缺氧可触发机体产生一系列应急性保护反应,使得肿瘤细胞适应缺氧微环境。研究表明诱导型一氧化氮合酶(nitricoxidesynthaSe,iNOS)为一种诱生型酶其活性与许多肿瘤的血管生成密切相关。有研究表明低氧上调iNOS表达,NO在内皮细胞中诱导有丝分裂,在癌细胞中诱导血管内皮生长因子的表达和肿瘤中新生血管的形成,以及肿瘤生长、转移【31。研究表明缺氧诱导因子.1a(hypoxia.induciblefactor.1a,HIF.1叻是介导细胞对缺氧微环境进行适应性反应的关键性转录调控因子,可促进肿瘤血管的生成,在肿瘤生长、浸润和转移中起重要作用。基础和临床研究均表明肿瘤生长依赖于血管形成,肿瘤血管形成是肿瘤生长和转移的基础。本研究采用免疫组织化学法,检测iNOS、HIF.1a在胃癌中的表达,探讨它们与胃癌肿瘤生物学行为的关系及二者之间的相关性,为临床上进一步了解胃癌的生物学行为、判断预后提供帮助。实验材料方法

一、研究对象研究对象:胃癌组:2001年1月至2002年3月手术切除,病理证实为腺癌,临床病理及随访资料齐全的胃癌蜡块标本54例,术前均未行化疗或放疗。男37例,女17例;年龄38岁.78岁;肿瘤的原发灶大小、深度(T)、淋巴结转移(N)由病理确定,远处转移(M)由病理学和临床确定。其中肿瘤直径<5cm37例,>5cm17例;肿瘤浸润深度在浆膜下者15例,浸透浆膜者39例;组织学分型:高分化19例,中分化17例,