酶的生物合成法生产
- 格式:ppt
- 大小:5.47 MB
- 文档页数:80
酶的制备酶的制备主要有两种方法,即直接提取法和微生物发酵生产法。
早期酶制剂是以动植物作为原料,从中直接提取的。
由于动植物生长周期长,又受地理、气候和季节等因素的影响,因此原料的来源受到限制,不适于大规模的工业生产。
目前,人们正越来越多地转向以微生物作为酶制备的主要来源。
—、酶的微生物发酵生产法1.微生物发酵生产法的优点酶的品种齐全微生物种类繁多,目前已鉴定的微生物约有20万种,几乎自然界中存在的所有的酶,我们都可以在微生物中找到。
酶的产量高微生物生长繁殖快,生活周期短,因而酶的产量高。
许多细菌在合适条件下20min左右就可繁殖一代,为大量制备酶制剂提供了极大的便利。
生产成本低培养微生物的原料,大部分比较廉价,与从动、医学教育|网搜集整理植物体内制备酶相比要经济得多。
便于提高酶制品获得率由于微生物具有较强的适应性和应变能力,可以通过适应、诱变等方法培育出高产量的菌种。
另外,结合基因工程、细胞融合等现代化的生物技术手段,可以完全按照人类的需要使微生物产生出目的酶。
正是由于微生物发酵生产具有这些独特的优点,因此目前工业上得到的酶,绝大多数来自于微生物,如淀粉酶类的α一淀粉酶、β一淀粉酶、葡萄糖淀粉酶以及异淀粉酶等都是从微生物中生产的。
2.微生物发酵生产法中尚待解决的问题尽管微生物发酵法生产酶制剂存在上述优点,但仍存在一些问题需要解决。
消除毒性微生物发酵法生产的酶制品中会带人一些细菌自身的生理活性物质,这些生理活性物质往往对人体有害,因此进行毒性实验是必需的。
优良产酶菌种的筛选、培育目前,大多数工业微生物制酶生产采用的菌种较少,仅局限于11种真菌、8种细菌和4种酵母菌。
只有不断寻找更多的适用的产酶菌种,才可能使越来越多的酶采用微生物发酵法进行工业化生产。
3.微生物发酵生产法的条件控制微生物酶的发酵生产是在人为控制的条件下有目的迸行的,因此条件控制是决定酶制剂质量好坏的关键因素。
条件控制包括以下几个方面。
生物酶制备方法全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:生物酶是一种生物催化剂,能够加速化学反应的速率,降低反应所需的能量,提高反应的效率。
生物酶在生物技术、制药和食品工业等领域起着至关重要的作用。
生物酶的制备方法有多种,包括基因工程法、筛选法、提取法等。
下面就来详细介绍一下生物酶的制备方法。
一、基因工程法基因工程法是目前生物酶制备的主要方法之一。
通过改造目的基因,将其插入到细胞内,使细胞具有产生特定酶的能力。
基因工程法的步骤可以分为以下几个部分:1.选择目的基因:首先需要确定想要制备的酶的基因序列,包括编码蛋白质的DNA序列。
2.构建表达载体:将目的基因插入到表达载体中,通常是一个质粒或病毒基因组,以便将其导入到宿主细胞中。
3.转染宿主细胞:将构建好的表达载体导入到宿主细胞中,使其具有表达目的基因的能力。
4.培养发酵:将转染宿主细胞进行培养和发酵,使其产生目的酶。
5.酶的纯化:通过离心、过滤、色谱等方法对酶进行分离和纯化。
基因工程法制备生物酶不仅可以大幅提高酶的产量,还可以实现对酶性质的精确调控,提高了生物酶的工业应用价值。
二、筛选法筛选法是一种通过筛选高产酶菌株的方法,主要包括自然选择和人工筛选。
1.自然选择:利用自然环境对酶产生菌株进行筛选,比如在含有特定底物的培养基上培养细菌,通过检测培养基的变化来筛选高产酶株。
2.人工筛选:通过改造细菌菌株,使其表达高效的酶,然后通过培养和筛选找到高产酶株。
筛选法制备生物酶虽然效率较低,但可以利用自然选择或人工筛选的方法获得具有特定性能的酶,是一种简单有效的制备方法。
三、提取法提取法是将含有酶的细菌或真菌通过破碎、搅拌等方式分离出酶,然后通过离心、过滤等方法对酶进行纯化。
1.破碎细胞:首先需要将含有酶的微生物体进行破碎,打破细胞壁,释放出酶。
2.提取酶:将破碎后的微生物体经过离心、过滤等方式分离出酶。
提取法虽然效率较低,但较为简便,适用于小规模制备生物酶的情况。
第一章绪论1.酶工程:酶的生产与应用的技术过程叫酶工程。
2.酶:酶是具有生物催化功能的生物大分子。
3.酶的分类:①蛋白类酶(P酶)【氧化还原酶,转移酶、水解酶、裂合酶,异构酶,合成酶】;②核酸类酶(R酶):a 分子内催化R酶(自我剪切酶,自我剪接酶);b 分子间催化R酶(DNA剪切酶,RNA剪切酶,多肽剪切酶···)4.酶的命名:底物名称+催化反应的类型+酶。
如葡萄糖氧化酶。
5.酶活力单位:在特定条件下,每1min催化1umol(微摩尔)的底物转化为产物的酶量定义为1个酶活力单位。
国际单位IU。
6.酶比活力:酶的比活力是酶纯度的一个指标,是指在特定条件下,单位质量(mg)蛋白质或RNA所具有的酶活力单位数。
酶比活力=酶活力(单位)/mg(蛋白质或RNA)7.酶工程发展概况:1894年日本的高峰让吉从米曲霉中制备得到高峰淀粉酶,开创了近代酶的生产和应用的先例。
1949年微生物液体深层培养技术成功地应用于细菌α-淀粉酶的发酵生产,揭开了现代酶制剂工业的序幕。
1960年,法国的雅各和莫诺德提出操纵子学说,为酶的生物合成提供了理论根据。
20世纪80年代的动植物细胞培养技术,为酶的生产提供了新途径。
随着酶生产技术的发展,酶在医药、食品、工业、农业、能源、环保和科研等领域得到广泛应用。
此后产生酶固定化和分子修饰技术。
第二章酶生物合成的基本理论1.酶的生物合成:指细胞内RNA和蛋白质的合成过程。
2.转录:以DNA为模板,以核苷三磷酸为底物,在依赖DNA的RNA聚合酶的作用下,生成RNA的过程。
转录分以下四步:㈠转录的起始:RNA的生物合成的起始位点是在DNA的启动基因(启动子)上。
识别启动基因的任务由σ因子完成。
σ因子的作用是转录的起始所必需,故又称为转录因子。
起始阶段的重要问题是RNA聚合酶与DNA的启动基因的相互作用。
㈡RNA链的延伸:核心酶沿着模板DNA移动,DNA的双链逐渐解旋,按照模板上的碱基序列,逐个加入与其互补的核苷三磷酸,聚合生成多聚核苷酸链。
第二章酶的生物合成与发酵生产酶工程就是将酶所具有的生物催化功能,借助工程手段应用于社会生活的一门科学技术。
酶制剂是如何生产的呢?我们知道,酶是活细胞产生的具有催化作用的生物大分子,广泛存在于动植物和微生物体内。
酶的生产方法有三种:提取分离法、生物合成法、化学合成法。
生物合成法又包括:微生物细胞发酵产酶、植物细胞发酵产酶和动物细胞发酵产酶第一节酶生物合成及调节一、酶的生物合成先从遗传信息传递的中心法则谈起(1958年,Crick提出)遗传信息传递的中心法则:生物体通过DNA复制将遗传信息由亲代传递给子代,通过RNA 转录和翻译而使遗传信息在子代得以表达。
DNA具有基因的具有基因的所有属性。
基因是DNA的一个片段,基因的功能最终由蛋白质来执行,RNA控制着蛋白质的合成。
核酸是遗传的物质基础,蛋白质是生命活动的体现者。
1970年Temin和Baitimore发现了逆转录酶,是对中心法则的补充。
即:细胞能否合成某种酶分子。
首先取决于细胞中的遗传信息载体-DNA分子中是否存在有该酶所对应的基因。
DNA分子可以通过复制生成新的DNA,再通过转录(transcription)生成所对应的RNA,然后再翻译(translation)成为多肽链,经加工而成为具有完整空间结构的酶分子。
(一)RNA的生物合成--转录(transcription)P102DNA分子中的遗传信息转移到RNA分子中的过程,称为转录。
转录:见课件附图,书P102定义:以DNA为模板,以核苷三磷酸为底物,在RNA聚合酶(转录酶)的作用下,生成RNA分子的过程。
模板链(template strand):又称反意义链(antisense strand),指导转录作用的一条DNARNA的转录过程:转录过程分为三步:起始、延长、.终止补充:原核生物的RNA聚合酶(DDRP)-见课件附图E.coli的RNA聚合酶是由四种亚基组成的五聚体(α2、β、β′、)全酶(holoenzyme)包括起始因子σ和核心酶(core enzyme)。
酶的生产名词解释酶的生产是指酶在生物体内或通过工业化方法制备的过程。
酶是一种具有催化作用的蛋白质,能够加速化学反应的进行,降低反应活化能,促进生物体的代谢和生理功能。
一、酶的基本概念酶是生物催化剂,其分子结构与功能密切相关。
在生物体内,酶能够选择性地与底物结合,通过改变反应的活化能,使反应发生速率加快。
酶的催化作用具有高效、专一和可逆性等特点,使得生命活动得以顺利进行。
二、酶的结构与功能酶由氨基酸残基组成,具有特定的三维空间结构。
酶的结构与功能密切相关,其中最重要的是酶的活性中心。
活性中心是酶分子上能够与底物结合并发生催化反应的部分,它的形状和电荷分布能够与底物相互适应。
酶与底物结合后,形成酶底物复合物,通过酶的催化作用,底物被转化为产物。
三、酶的生物合成在生物体内,酶的合成通常是通过基因的转录和翻译过程进行的。
先以DNA 为模板,经过转录过程合成mRNA,将基因信息转移到mRNA上。
然后,mRNA 通过核糖体的翻译过程,将信息转化为氨基酸序列,合成蛋白质。
蛋白质进一步经过修饰和折叠,形成功能完整的酶分子。
酶的合成过程受到基因表达的调控,包括转录调控和翻译调控,确保酶在适当的时间和位置合成。
四、酶的工业生产除了生物体内产生的酶,酶也可以通过工业化方法进行大规模的制备。
工业生产的酶被广泛应用于食品、制药、农业等领域。
工业生产酶的常用方法包括微生物发酵法和重组DNA技术。
微生物发酵法是利用微生物代谢产生的酶,通过合适的培养基和发酵条件培养大量的酶。
重组DNA技术则是利用基因工程技术将酶基因导入到寄宿细胞中,通过寄宿细胞的表达合成酶。
五、酶的应用领域酶具有广泛的应用领域,在食品加工过程中,酶能够改善食品质量,提高产量和减少能源消耗。
例如,在面包制作中使用的面粉酶可以促进面团发酵,增加面包的体积和口感。
在制药领域,酶被用于药物的合成和代谢途径的研究。
此外,酶还被广泛应用于纺织、生物传感器、环境保护和能源生产等领域。