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南瓜多糖提取方法摘要：本文介绍了南瓜多糖的提取方法,如水提醇沉法、碱液提取法、超声波提取法、微波辅助提取法、酶提取法等等。
关键词：南瓜；多糖；多糖提取南瓜又称番瓜、倭瓜、金瓜等，系葫芦科南瓜属一年生蔓性草本植物，是重要药食两用植物之一。
南瓜营养丰富，不仅含有甘露醇，多种氨基酸，维生素C、E 及微量元素Fe、Se、Zn、Mn 等，还含有大量生物碱、南瓜子碱、果胶等活性成分。
南瓜多糖呈棕色粉末，是南瓜活性成分中最重要、最具潜力功能因子之一。
不仅具有复杂、多方面生物活性，作为广谱免疫促进剂，且具有免疫调节，抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸与蛋白质生物合成，控制细胞分裂、分化，调节细胞生长、衰老等作用。
因此，对南瓜多糖分离提取，日益引起人们重视。
1 提取方法的研究现状1.1 水提醇沉法水提醇沉法是通过在天然产物的浓缩的水提取液中加入数倍量高浓度乙醇，利用南瓜多糖溶于水而不溶于高浓度的乙醇的性质，使其生成沉淀而与其他水溶性的杂质分离的方法。
水提醇沉法提取南瓜多糖的工艺，工艺流程如下：市购南瓜洗净、去皮切丁并配水榨汁→加热浸提→过滤→提取液→浓缩→乙醇沉淀→南瓜粗多糖。
通过四因素三水平正交试验法优选，研究发现南瓜多糖提取的最优条件为：南瓜丁的质量与水的体积比为1(g):5(ml)，90℃条件下浸提2h，浓缩水浸提液与乙醇的体积比为1:4，南瓜粗多糖提取率为1.5%左右，纯度可达到21.02%。
1.2 碱液提取法由于D- 葡萄糖醛酸的存在，南瓜多糖为酸性多糖，故可采用稀碱液如氢氧化钠、氢氧化钾等来提取。
由于稀碱液有助于解除植物细胞壁分子间的化学和物理作用，故可增加南瓜多糖的提取率。
利用氢氧化钠溶液提取南瓜多糖的工艺，实验表明：随着碱液浓度的升高，多糖的提取率增加，当达到0.3mol/L 之后，碱液浓度的升高对提取率无显著影响，而且由于碱性条件下，其中的还原糖会分解成分子量更小的色素分子，从而使的产品的色泽加深。
从南瓜中制取多糖,果胶和南瓜粉的工艺研究下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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1.南瓜粗多糖的提取：准确称取100g 新鲜南瓜，加入200ml蒸馏水，在榨汁机中搅拌5min，置于烧杯，放入70℃恒温水浴中加热2h，搅拌提取多糖，然后抽虑，滤液80℃真空浓缩至固形物含量约30%，在浓缩液中加入5倍体积95%酒精搅拌均匀，冰箱放置过夜，离心得沉淀物。
沉淀物以水溶解重复醇析1次，然后将沉淀物用无水酒精、丙酮、乙醚洗涤，冷冻干燥得南瓜粗多糖。
2.Sevag法除蛋白质取粗多糖的样品，用蒸馏水溶解，按多糖水溶液体积的1/3-1/4加入氯仿：正丁醇（4：1）混合液剧烈震荡，离心分离30min，除蛋白质，反复操作5次，直至紫外光谱分析在蛋白质280nm和核酸260nm处无特征吸收峰，说明含氮物质已除去。
3. 南瓜多糖降糖组分的分离、纯化（三氯乙酸）将南瓜多糖粗品饱和溶解至0.1 mol/L 氯化钠溶液中,4 ℃放置24 小时,离心,弃去沉淀,滤液中加入40 %三氯乙酸使其终浓度达到10 % ,4 ℃冷藏24小时, 离心, 沉淀用0.1 mol/L NaCl 溶液溶解, 经Sepharose CL24B 柱层析,用0.1 mol/L 氯化钠溶液洗脱、分离,采用硫酸- 蒽酮法跟踪检测,收集含多糖的组分,再用0.1 mol/L NaOH 中和,将洗脱液适当浓缩,透析,用Sephadex A2200 柱层析分离、纯化, 用0.1 mol/L 氯化钠溶液洗脱(洗脱液流速: 0.55 mL/min) ,收集洗脱液,减压浓缩,冷冻干燥得白色粉末状南瓜多糖精品,测定其多糖含量。
4.南瓜多糖精品的纯度鉴定柱层析法将多糖精品溶解在0.05 mol/L磷酸缓冲液(PH=7.0 的PBS 2mol/l 的91.4ml磷酸一氢钠+8.6ml磷酸二氢钠为100mlPBS) 中, 质量浓度为0.3g/dL , 经用0.05 mol/L PBS 平衡后的Sephadex G2200 层析柱洗脱,体积流量为4.8 mL/h ,每管收集洗脱液2 mL ,硫酸- 苯酚法部分收集检测，分析多糖组分。
南瓜多糖中药提取物南瓜多糖【提取来源】本品为葫芦科植物南瓜Cucurbita moschnta(Duch.ex Lam.) Poiret的果实提取的多糖类成分，总多糖含量≥60%。
【制法】南瓜切片水煮提取，沉淀，精滤，浓缩液加乙醇沉淀，粗多糖透析，脱蛋白，喷雾干燥，最后加入10%水提干粉混合而成。
【性状】本品为浅黄色至棕黄色粉末，可溶于热水。
【鉴别】取本品加热水制成46.0%的溶液作供试液。
取南瓜标准对照药材1.0g加热水40ml，80℃超声提取30分钟，滤液蒸干，残渣加40%甲醇1ml，热溶滤过作对照液。
取上述两液各10μl，分别点于同一硅胶G板，一次点三板。
(1)乙酸乙酯-甲醇-水(8：1：1)展开，喷5%三氯化铝乙醇溶液，紫外灯365nm下检视。
(2)乙酸乙酯-异丙醇(7：13)展开，喷茴香醛硫酸试液，热风吹显。
(3)正丁醇-乙醇-水(5：3：2)展开，喷茴香醛硫酸试液，热风吹显。
以上三板荧光斑点和可见光斑点对应率≥80%。
取本品与南瓜多糖对照品各20mg，分别加入2 mol/L硫酸2ml，110℃水解8小时，BaCO3中和至pH=6～7，离心，上清液浓缩至1ml，各取10μl，分别点于同一硅胶G板，以正丁醇-二甲基吡啶-水(6：3：1)展开，喷茴香醛硫酸试液，热风吹显，斑点对应率≥80%。
【检查】水分：不得过5. 0%(附录Ⅸ H)灰分：不得过3.0%(附录Ⅸ K)重金属：不得过10ppm(附录Ⅸ E)砷盐：不得过2ppm(附录Ⅸ F)糊精：不得过0.5%(附录Ⅳ)【含量测定】照多糖含量测定法(附录Ⅲ)测定。
【功能】降血糖，降血脂，抗肿瘤。
【贮藏】阴凉，干燥，避光。
第1篇一、实验目的本实验旨在研究南瓜中多糖的提取工艺，优化提取条件，并通过分析提取物的性质和含量，评估其生物活性。
二、实验材料与仪器1. 实验材料：- 南瓜（新鲜，品种：蜜本）- 无水乙醇- 95%乙醇- 氯化钠- 硫酸铵- 磷酸氢二钠- 氢氧化钠- 碳酸钠- 蒸馏水2. 实验仪器：- 研钵- 研杵- 电子天平- 恒温水浴锅- 超声波清洗器- 分光光度计- 离心机- 超速离心机三、实验方法1. 南瓜多糖提取（1）将新鲜南瓜洗净，去皮去瓤，切成小块，置于研钵中。
（2）加入适量蒸馏水，用研杵充分研磨，制成匀浆。
（3）将匀浆转移至烧杯中，加入95%乙醇，搅拌均匀，静置过夜。
（4）取上清液，用蒸馏水洗涤沉淀，直至上清液无色。
（5）将沉淀转移至烧杯中，加入蒸馏水，用超声波处理20分钟。
（6）将超声波处理后的溶液转移至离心管中，离心分离，取上清液。
（7）将上清液用95%乙醇沉淀，离心分离，收集沉淀。
（8）将沉淀用蒸馏水洗涤，直至洗涤液无色。
（9）将沉淀转移至烧杯中，加入无水乙醇，加热浓缩至干。
（10）将干沉淀转移至锥形瓶中，加入适量蒸馏水，用超声波处理30分钟。
（11）将超声波处理后的溶液转移至离心管中，离心分离，取上清液。
（12）将上清液用95%乙醇沉淀，离心分离，收集沉淀。
（13）将沉淀用蒸馏水洗涤，直至洗涤液无色。
（14）将沉淀转移至烧杯中，加入蒸馏水，用超声波处理30分钟。
（15）将超声波处理后的溶液转移至离心管中，离心分离，取上清液。
（16）将上清液用95%乙醇沉淀，离心分离，收集沉淀。
（17）将沉淀用蒸馏水洗涤，直至洗涤液无色。
（18）将沉淀转移至烧杯中，加入蒸馏水，用超声波处理30分钟。
（19）将超声波处理后的溶液转移至离心管中，离心分离，取上清液。
（20）将上清液用95%乙醇沉淀，离心分离，收集沉淀。
（21）将沉淀用蒸馏水洗涤，直至洗涤液无色。
（22）将沉淀转移至烧杯中，加入蒸馏水，用超声波处理30分钟。
㊀第９期㊀㊀收稿日期：２０２１－０２－０６㊀㊀基金项目：云南省教育厅科学研究基金项目（２０１９Ｊ０３７６）㊀㊀作者简介：蒋高华（１９８２ ），安徽巢湖人，高校讲师，研究方向：有机资源综合利用㊂南瓜多糖提取工艺优化研究蒋高华，赵江，彭兴华，杨文坪（云南能源职业技术学院资源与环境工程学院，云南曲靖㊀６５５００１）摘要：南瓜多糖是南瓜中具有重要活性的功能成分㊂通过实验研究了提取温度㊁超声功率㊁提取时间和液料比对提取南瓜多糖的影响㊂结果表明：在提取温度７０ħ，超声功率８０Ｗ，提取时间１５ｍｉｎ，液料比１ʒ２０下进行南瓜多糖的提取，南瓜多糖的提取率为３５．６ｍｇ／ｇ㊂关键词：南瓜多糖；提取；工艺优化中图分类号：ＴＱ２８１；ＴＳ２０１㊀㊀㊀㊀文献标识码：Ａ㊀㊀㊀㊀文章编号：１００８－０２１Ｘ（２０２１）０９－００１３－０２ＳｔｕｄｙｏｎＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆＥｘｔｒａｃｔｉｏｎＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＰｕｍｐｋｉｎＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅＪｉａｎｇＧａｏｈｕａ，ＺｈａｏＪｉａｎｇ，ＰｅｎｇＸｉｎｇｈｕａ，ＹａｎｇＷｅｎｐｉｎｇ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＲｅｓｏｕｒｃｅｓａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＹｕｎｎａｎＶｏｃａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＥｎｅｒｇｙＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｑｕｊｉｎｇ㊀６５５００１，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＰｕｍｐｋｉｎｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｗａｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｉｎＰｕｍｐｋｉｎ．Ｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ，ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｐｏｗｅｒ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅａｎｄｒａｔｉｏｏｆｌｉｑｕｉｄｔｏｍａｔｅｒｉａｌｏｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＰｕｍｐｋｉｎｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆＰｕｍｐｋｉｎｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｗａｓ３５．６ｍｇ／ｇａｔｔｈｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆ７０ħｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｐｏｗｅｒｏｆ８０Ｗ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｏｆ１５ｍｉｎａｎｄｒａｔｉｏｏｆｌｉｑｕｉｄｔｏｍａｔｅｒｉａｌｏｆ１ʒ２０．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｕｍｐｋｉｎｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｐｒｏｃｅｓｓｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ㊀㊀南瓜系葫芦科南瓜属植物果实㊂南瓜富含南瓜多糖㊁氨基酸㊁蛋白质㊁纤维素及维生素等多种营养成分，其中南瓜多糖具有抗氧化㊁降血糖㊁降血脂㊁抗肿瘤㊁增强免疫等功效［１－５］㊂对南瓜多糖的研究引起人们的高度关注㊂本文以曲靖本地产南瓜为原材料，采用热水浸提加以超声方式来提取南瓜多糖，研究了提取温度㊁超声功率㊁提取时间和液料比对南瓜多糖提取的影响，为南瓜多糖的开发利用提供理论依据㊂１㊀材料与方法１．１㊀实验材料原料与试剂：菜市场购置本地南瓜；无水乙醇㊁丙酮㊁乙醚㊁双氧水㊁正丁醇㊁氯仿㊁浓硫酸㊁苯酚㊁葡萄糖标准品，均为分析纯．实验设备：鼓风干燥箱㊁１００目筛子㊁离心机㊁ＴＵ－１９０１双光束紫外可见分光光度计㊁ＳＫ２５１０ＬＨＣ数控超声波清洗器㊁分析天平㊂１．２㊀实验方法１．２．１㊀南瓜多糖提取新鲜南瓜洗净处理后，将其切成薄片，在６０ħ鼓风干燥箱烘干㊂将烘干的南瓜片研磨成粉，过１００目筛，制成南瓜粉㊂南瓜粉末按比例加水混合ң超声波浸提ң离心ң上清液浓缩ңＳｅｖａｇｅ法除蛋白ң活性炭脱色ң醇沉㊁洗涤㊁干燥ң南瓜粗多糖㊂１．２．２㊀标准曲线建立主要采用硫酸－苯酚比色法进行测定多糖得率［６］㊂分别准确量取１００ｍｇ／Ｌ的葡萄糖标准溶液０．０，０．２，０．４，０．６，０．８，１．０ｍＬ放入１０ｍＬ比色管，加蒸馏水至２．０ｍＬ，再加入５％苯酚溶液１．０ｍＬ，混合均匀后加入５．０ｍＬ浓硫酸，摇匀后置于沸水浴中１２ｍｉｎ，取出冷却时室温㊂在最大吸收波长４９０ｎｍ处测其吸光度，得到线性回归方程Ａ＝８．３３Ｃ＋０．５００，Ｒ２＝０．９９４２㊂结果表明具有良好的线性关系㊂１．２．３㊀单因素实验与参数优化称取２．０ｇ南瓜粉４份，分别在研究提取温度㊁超声功率㊁提取时间和液料比等参数对多糖得率影响㊂根据实验结果，在其他条件相同的情况下，先后改变提取温度㊁超声功率㊁提取时间和液料比，比较各因素对南瓜多糖得率的影响㊂在单因素实验的基础上选取提取温度㊁超声功率㊁提取时间和液料比４个因素为考察因素，选择Ｌ９（３４）正交表设计试验，优化南瓜多糖提取工艺㊂２㊀结果与分析２．１㊀单因素实验２．１．１㊀提取温度对南瓜多糖提取率的影响由图１可以看出，当提取温度升高到６０ħ时，多糖得率明显增加；后面温度继续升高，多糖得率会下降㊂结果表明，随着提取温度升高，南瓜多糖提取率会逐渐增加㊂一般来说，温度升高会增加溶剂分子和溶质分子的运动，促进扩散作用，有利于提高提取率［７］㊂所以选择提取温度为６０ħ㊂图１㊀提取温度的影响２．１．２㊀超声功率对南瓜多糖提取率的影响由图２可以看出，超声功率变大时，南瓜多糖得率出现先增加后降低的情况㊂结果表明，超声功率在８０Ｗ的时候，南瓜多糖的提取率最大㊂主要原因可能是因为超声的空化作用和机械振动作用，导致南瓜细胞破坏越来越容易，才会出现南瓜㊃３１㊃蒋高华，等：南瓜多糖提取工艺优化研究山㊀东㊀化㊀工多糖提取率增加㊂所以选择提取功率为８０Ｗ㊂图２㊀超声功率的影响２．１．３㊀提取时间对南瓜多糖提取率的影响由图３可以看出，随着提取时间变化，南瓜多糖得率出现先增后降的情况㊂结果表明，提取时间在２０ｍｉｎ的时候，南瓜多糖的提取率最高㊂主要原因是从南瓜中提取多糖属于固液提取过程，只要有足够时间就能保证固相和液相充分接触，使得溶剂渗入到南瓜细胞中并有利于传质过程㊂所以选择提取时间为２０ｍｉｎ㊂图３㊀提取时间的影响２．１．４㊀液料比对南瓜多糖提取率的影响由图４可以看出，随着液料比的变化，南瓜多糖得率出现先升高后降低的情况㊂结果表明，液料比在１ʒ２０的时候，南瓜多糖的提取率最高㊂主要原因是液料比可以使得固相和液相充分结合，从而提高南瓜多糖的提出率，液料比再增加不会对提出率有明显提升㊂所以选择液料比为１ʒ２０㊂图４㊀液料比的影响２．２㊀正交试验设计根据２．１的单因素实验结果，选用Ｌ９（３４）正交表，以提取温度㊁超声功率㊁提取时间和液料比为考察因素，因素水平见表１，实验结果见表２㊂表１㊀正交试验因素水平表水平因素Ａ提取温度／ħＢ超声功率／ＷＣ提取时间／ｍｉｎＤ液料比／（ｇ／ｍＬ）１５０７０１５１ʒ１５２６０８０２０１ʒ２０３７０９０２５１ʒ２５表２㊀正交试验结果试验编号因素ＡＢＣＤ多糖提取率／（ｍｇ／ｇ）１１１１１２８．４２１２２２３１．６３１３３３２９．５４２１２３２８．６５２２３１２９．８６２３１２３０．６７３１３２３４．５８３２１３３５．８９３３２１３６．４Ｋ１４．５６６５．２４６５．２１５４．８７５Ｋ２４．５９７４．９８６４．４９８４．７６６Ｋ３４．４３４４．８９１４．７８９４．８８１Ｒ０．１６３０．３５５０．７２６０．１１５㊀㊀从表２可以得知㊂极差大小顺序为：提取时间＞超声功率＞提取温度＞液料比㊂极差越小说明该因素对南瓜多糖提取的影响越小，极差越大说明该因素对南瓜多糖提取的影响越大㊂由此可以得出各因素对南瓜多糖的影响程度由大到小顺序为：提取时间＞超声功率＞提取温度＞液料比，最佳提取条件为：提取温度７０ħ㊁超声功率８０Ｗ㊁提取时间１５ｍｉｎ㊁液料比１ʒ２０，即最佳组合为：Ａ３Ｂ２Ｃ１Ｄ２，此时南瓜多糖的得率为３５．６ｍｇ／ｇ㊂３㊀结论在提取温度７０ħ，超声功率８０Ｗ，提取时间１５ｍｉｎ，液料比１ʒ２０下进行南瓜多糖的提取，结果南瓜多糖的提取率为３５．６ｍｇ／ｇ㊂为南瓜多糖提取及应用提供理论依据㊂参考文献［１］中国农业百科全书编辑部．中国农业百科全书（蔬菜卷）［Ｍ］．北京：农业出版社，１９９０：７１３．［２］罗双群，张桂红，陈海伟，等．南瓜功能特性研究进展［Ｊ］．粮食与油脂，２０１２（４）：４７－４９．［３］任永新．浅谈南瓜的保健功能及药理作用［Ｊ］．食品工程，２００７（２）：１０－１２．［４］赵婧，袁驰，周春丽，等．南瓜多糖降血糖作用研究进展［Ｊ］．食品研究与开发，２０１４，３５（７）：１０８－１１０．［５］毕新颖，王建南，姜玲玲，等．南瓜多糖的多重生理效用研究进展［Ｊ］．生物学杂志，２０１４，３１（１）：７８－８１．［６］向东，赖凤英，梁平．植物性多糖的强化提取［Ｊ］．食品与发酵工业，２００４，３０（５）：８１－８４．［７］赵二劳，李满秀，梁兴红．超声提取南瓜多糖的研究［Ｊ］．声学技术，２００８，２７（１）：５８－６０．（本文文献格式：蒋高华，赵江，彭兴华，等．南瓜多糖提取工艺优化研究［Ｊ］．山东化工，２０２１，５０（９）：１３－１４．）㊃４１㊃ＳＨＡＮＤＯＮＧＣＨＥＭＩＣＡＬＩＮＤＵＳＴＲＹ㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀２０２１年第５０卷。
南瓜多糖的提取、分离、纯化和活性鉴定实验原料：南瓜粉实验试剂：蒸馏水 95%乙醇 Sevage试剂 4%H2O2溶液 0.1-0.5mol/lNaCl1mmol/L H2O2 2 mmol/L FeSO4 6 mmol/ L 水杨酸溶液 1%铁氰化钾0.2 mol/L 、pH=6.6 的磷酸盐缓冲液 10%三氯乙酸 0.1%FeCl3 Vc实验仪器：500ml烧杯（4个） 10ml量筒（2个） 1ml移液枪（枪头一盒）玻璃搅拌棒胶头滴管（2个） 25ml试管（12支）玻璃比色皿（6个） 50ml离心管（4支）温度计（1支）透析袋D36mm(8000-14000)DEAE-纤维素离子交换柱层析（2cm×80cm） Sephadex G-100柱层析（90cm×2cm）电子天平电热恒温水浴锅紫外分光光度计离心机超声波破碎仪磁力搅拌器（没有亦可用别的搅拌器代替）真空冷冻干燥机电导率测量仪实验步骤：1.准确取100．0g 南瓜粉置于烧杯中2.按料液比1∶4 （g ／ mL）加入蒸馏水，预浸15min3.在50℃条件下用500W 超声波进行处理21min（作用间隔时间3s）4.然后将提取液过滤，收集滤液5.加入95％的乙醇沉淀多糖，直到几乎再无更多沉淀析出，记录加入的体积6.过滤，取沉淀得粗提取物7.脱蛋白：取粗提取物样品,用少量蒸馏水溶解,按多糖水溶液体积1/ 3～1/ 4 加入Sevage 试剂,混合震荡20min ,在离心机中以4000r/ min 离心20min ,去除多糖溶液层与有机溶液层交界处的变性蛋白质,重复操作8～12次,直至中间无混浊沉淀. 再用紫外光谱分析在蛋白质280nm和核酸260nm处无特征吸收峰，说明含氮物质已除去8.脱色：按多糖液与H2O2体积比为4：1加入4%过氧化氢,40 ℃磁力搅拌2h 脱色,去除多余色素.9.最后用95 %的乙醇沉析,直到几乎再无更多沉淀析出（或者直接按2-3倍体积添加），离心得沉淀物10.将沉淀物加蒸馏水使其溶解，对蒸馏水透析48h，将袋内物取出测定电导率均小于250μS，说明杂质离子已基本除去，离心分离得南瓜粗多糖11.取适量（按结果决定取量）粗多糖按第14到15步骤进行活性研究，剩余多糖按第12到13步进行进一步纯化12. 将南瓜粗多糖采用DEAE-纤维素离子交换柱层析（2cm×80cm）进行多糖分离。
分类号 密级 作者姓名 指导教师 学科门类 提交论文日期 专业名称 成绩评定 理 科 孙 家 娟 2011年6月摘要摘要分别使用乙醇乙醚混合液和石油醚处理南瓜粉。
然后在90℃，固液比40:1的条件下使用传统的热水浸法提取4小时，过滤，用甲醇沉淀滤液中的多糖，通过Sevage法脱蛋白，得到精制的南瓜多糖。
最后以葡萄糖为标准对照品，使用苯酚—硫酸法测定南瓜多糖吸光度，计算后得到多糖含量。
关键词：南瓜；多糖；提取；分离AbstractAbstractSeparately using ethanol ether mixture and petroleum ether processing pumpkin powder. Then in 90 ℃, solid-liquid ratio under the condition of chains, the use of traditional hot water leaching extraction four hours, filtering, with methanol precipitation of polysaccharides, through the filtrate Sevage method refined, get off protein pumpkin polysaccharide. Finally with glucose for standard reference substance, the use of phenol hydrate-sulfuric determination - pumpkin polysaccharide absorbency, calculated get polysaccharide.Key words：Pumpkin; Polysaccharide; Extraction; Separation目录摘要 (I)前言 (1)1 文献综述 (2)1.1南瓜介绍 (2)1.1.1 南瓜的生物特性 (2)1.1.2 南瓜的营养价值 (2)1.1.3 南瓜多糖的组成及性状 (2)1.1.4 南瓜多糖的应用前景 (2)1.2南瓜多糖组成的研究方法 (3)1.2.1 南瓜多糖提取方法 (3)1.2.2 除蛋白 (3)1.2.3 多糖的分析方法 (4)1.3拟采取研究方法 (4)2 实验部分 (5)2.1药品试剂与仪器设备 (5)2.1.1 药品试剂 (5)2.1.2 仪器设备 (5)2.2南瓜多糖的提取 (5)2.2.1 南瓜的脱脂 (5)2.2.2 南瓜多糖的提取 (5)2.2.3 粗多糖的纯化 (6)2.2.4 待测液的配制 (6)2.3苯酚—硫酸法测多糖含量 (6)2.3.1 测定方法 (6)2.3.2葡萄糖标准液的配制及测定 (6)2.3.3 样品溶液的测定 (6)2.3.4 多糖含量计算 (6)3 结果与讨论 (7)3.1结果 (7)3.1.1 最大吸收波长的确定 (7)3.1.2 标准工作曲线的绘制 (8)3.1.3 样品的测定结果 (8)3.1.4 南瓜多糖的提取率 (8)3.2讨论 (8)结论 (9)致谢 (10)参考文献 (11)南瓜多糖的提取与分离前言南瓜，俗名倭瓜、番瓜、北瓜。
南瓜多糖提取分离纯化及其抗氧化活性的研究展摘要：南瓜多糖是一类具有重要生物活性的功能性成分，其具有广泛的开发前景。
对南瓜多糖的提取、分离纯化及抗氧化活性的研究现状进行综述，并展望了其今后研究方向及开发应用前景。
关键词：南瓜多糖；提取；分离纯化；抗氧化活性南瓜为葫芦科南瓜属一年生蔓性草本植物，其营养成分丰富，具有很高的食疗保健作用[1-2]。
而南瓜中的多糖具有降血脂、降血糖、防癌等多种功能[3]。
对南瓜多糖的研究及相应功能食品的开发逐渐受到重视，其中南瓜多糖抗氧化活性的研究是人们普遍关注的问题之一。
文章对南瓜多糖的提取、分离纯化方法及对其抗氧化活性的研究做一综述。
1 南瓜多糖的提取方法1．1 热水浸提法由于多数多糖在热水中的溶解度较大且性质稳定，热水浸提法是提取多糖最常用的方法。
李俊丽[4]等采取热水浸提法对南瓜多糖的提取进行了研究，提取工艺的最佳条件为：1：40的料液比，在70℃水浴条件下提取3次，每次提取4 h 。
向东[5]等在用热水提取南瓜多糖的研究中发现，热处理对致密的南瓜组织有疏松作用，从而使细胞内的多糖更容易浸提出来。
热水浸提法是一种常用的提取植物多糖的传统方法，操作简便，所得多糖生物活性好，但多糖得率低，费时费工。
1．2 碱法提取法由于碱液能减弱植物细胞壁分子间的作用以增加多糖的提取率，所以碱法也常用于提取多糖。
向东[6]等采取碱法提取法提取南瓜多糖，得出最佳的提取工艺条件为：提取温度80℃，提取时间2 h，液固比5：1，NaOH 浓度0．4 mol／L 。
碱处理对致密的南瓜组织有疏松作用，能提高多糖的提取率，但由于在碱液的作用下还原糖会因发生反应使获得的南瓜提取液色泽较深，呈棕色，很难除去。
1．3 超声提取法超声提取法是利用超声波的热效应、机械效应和空化作用破坏细胞，使水溶性多糖更易提取。
赵二劳[7]等采用超声提取法对南瓜多糖的提取进行了研究，得出最佳的提取工艺条件为：以水为提取剂，预浸时间10 min ，超声作用时间20min ，提取温度60℃，超声波功率80 w ，占空比1, 此时多糖的提取量最大可达42．6 mg ／g 。
超声波协同复合酶法提取南瓜多糖最佳条件的研究一、研究背景要说起南瓜，大家可能都会觉得它是个吃起来甜甜糯糯的好东西，尤其在秋冬季节，做个南瓜粥、南瓜饼、南瓜汤，简直好吃得不行。
但南瓜不仅好吃，还有不少“隐藏”的营养成分，最值得一提的就是南瓜中的多糖。
要知道，南瓜多糖可不是普通的糖，它可是有着抗氧化、免疫调节等功效的一大“宝贝”。
这东西在南瓜中可是隐藏得很深，不是那么容易就能提取出来的。
像提取这些营养成分的方法，科学家们可是费了不少心思。
最近，一种新颖的提取方法——超声波协同复合酶法，引起了研究人员的关注。
超声波？你可能会觉得这不就是平时听到的那种“嗡嗡”的声音？其实超声波不仅仅是用来看病的，它在提取多糖、酶解等方面也能大显身手。
超声波通过振动能让细胞破裂，更好地释放出南瓜中的营养成分。
而复合酶法，就是通过多种酶的联合作用，分解南瓜中的大分子，释放出更多的糖分。
这样一来，提取的效果就能大大提升！在这项研究中，研究人员通过调整超声波的强度、时间以及酶的种类和用量，探索出一种最佳的提取条件。
二、研究方法这次研究可不简单。
为了提取出更多的南瓜多糖，研究团队首先采用了超声波的辅助作用。
说到超声波，可能有些人会觉得这听起来挺高大上的，但它就像是给南瓜“打个振动按摩”，通过让细胞膜的结构发生变化，帮助我们更好地提取里面的多糖。
简单点说，超声波就是让南瓜细胞“开了个小会”，从而把多糖给释放出来。
研究人员选择了几种常见的酶，像是纤维素酶、果胶酶和淀粉酶，这些酶都有一个共同的特点，那就是它们可以帮助分解南瓜中的大分子，转化成我们所需的多糖。
研究的关键就在于如何调整这些酶的比例和用量，以及超声波的频率和时间，以便实现提取效果的最大化。
就像做菜一样，你得找到一个恰到好处的火候，才能做到色香味俱全。
于是，研究人员做了多次实验，调节不同的超声波强度和酶的浓度，最后终于找到了一个最佳组合。
这个组合既能最大程度地提取南瓜中的多糖，又能保证提取过程中的营养成分不被破坏，真的是一举两得！这个“最佳条件”简直是南瓜多糖提取的“黄金法则”，可以说是找到了南瓜中的宝藏钥匙。
专利名称：南瓜多糖的制备方法专利类型：发明专利
发明人：张拥军,王正郁,郑龙华申请号：CN200310116848.2申请日：20031201
公开号：CN1624001A
公开日：
20050608
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种南瓜多糖的制备方法，包括制备南瓜粉，将所得南瓜粉用热水抽提，将所得滤液用乙醇沉淀，接着将所得沉淀物洗涤，然后向该沉淀物中加入三氯醋酸，在冰箱中放置过夜，离心，将所得滤液逆水透析后干燥，即得产物。
申请人：中国计量学院
地址：310014 浙江省杭州市下沙高教园区学源街中国计量院
国籍：CN
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精品整理
南瓜多糖清洁生产提取工艺
南瓜多糖是一种非特异性免疫增强剂，具有丰富的活性功能，多项研究表明南瓜多糖对免疫系统有重要的调节作用，同时具有降血糖、降血脂、抗癌等作用，南瓜多糖作为长效、无毒、降血糖，调血脂药物或食疗剂，因此它在保健食品与医药上的广泛使用。
它的开发利用和研究越来越受到人们的关注，然而目前南瓜多糖的提取存在产品的纯度不高，有机溶剂的使用量比较大等多方面问题。
针对目前南瓜多糖提取工艺中存在的问题，通过正交试验设计进行提取操作单元优化，使用膜分离技术进行有效分离和纯化，从而进行南瓜多糖清洁。
通过南瓜多糖清洁生产工艺研究，先采用正交试验找到提取条件：温度40℃、浸提时间0.5h、料液比1∶3，此条件下多糖提取率达到95.6%。
提取液离心调节pH值后，依次经过微滤膜N100除杂，可使南瓜多糖透过率达97.3%、杂质截留率为21.6%；然后经纳滤膜DLC浓缩，浓缩后南瓜多糖截留率达94.5%，南瓜多糖的纯度为67.5%，其品质明显高于传统工艺提取的多糖。
整个新工艺过程，分离效率高、能耗低的特点充分体现的清洁生产的“节能、降耗、减污、增效”的宗旨，企业采用此清洁生产工艺可降低成本，减少污染，大大提高经济效益。
