实验五、蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定

卵磷脂的提取及其乳化特性实验一、实验目的学习卵磷脂的提取方法。

了解卵磷脂的乳化特性性质。

二、实验原理在卵黄中约含有10%的卵磷脂。

纯卵磷脂是白色块状物，不溶于水，易溶于乙醇、氯仿、乙醚和二硫化碳中，不溶于丙酮，利用这一性质可以与中性脂肪分离。

卵磷脂的胆碱基是亲脂基团，具有能使互不相溶的两相(油相和水相)中的一相分散在另一相中的作用，使之成稳定的乳浊液，因此，卵磷脂是一种天然的乳化剂。

冰淇淋是一种常见的W/O型乳液，要使其形成，必须得表面活性剂的存在，卵磷脂作为一种天然乳化剂，可以用在冰淇淋制作中促进乳液的生成。

三、实验材料与仪器鸡蛋6个，白砂糖，淡奶油250mL、高纯度白酒60mL、食用油、平底锅或电饭煲，碗四、实验步骤(1)卵磷脂的提取选新鲜鸡蛋一个，轻轻在鸡蛋小头击破一个小孔，让蛋清从小孔中流出，取出蛋黄置白瓷碗中，搅碎。

在搅拌下加入50°C白酒60mL，保温提取3-5min，冷却过滤，将滤液置于铁盆中，水浴蒸干，残留物为卵磷脂。

对提取的卵磷脂进行感官评价，记录色泽、气味并拍照保存。

(2)乳化试验取两个小玻璃杯，分别加入约10毫升水，一杯中加入卵磷脂，并使之均匀分散在水中，再加入5滴食用油;另一杯中仅滴入5滴食用油，强烈摇动两个玻璃杯，静置后观察比较两玻璃杯内容物的乳化状态，记录结果。

(3)蛋黄冰淇淋的制作取白砂糖50g、淡奶油250毫升、鸡蛋黄5个。

首先白砂糖磨碎变细砂糖，和鸡蛋黄-起搅拌均匀小火加热至白砂糖融化(不粘锅)，鸡蛋黄变发。

倒出，不断沿同一方向搅拌，直至打发。

淡奶油打发，将打发好的鸡蛋黄慢慢加入打发好的淡奶油中，边加边搅拌，最后倒入容器中装好，冰箱中冷冻5小时。

对制作好的蛋黄冰淇淋进行感官评价并记录。

五、实验结果记录与分析（1）卵磷脂的提取（2）乳化实验附上照片刚开始加入少量乳化的卵磷脂时，四周会产生一些小小的气泡，慢慢变得浑浊；随着加入乳化的卵磷脂的量增加变得更加浑浊（3）蛋黄冰淇淋制作。

摘要：采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯化，用消化定磷法测定卵磷脂的含量。

结果表明，从蛋黄提取的卵磷脂粗品经柱层析纯化，精制卵磷脂的纯度达99.6。

用消化定磷法可以准确测定卵磷脂的含量，有较高的准确度。

关键词：卵磷脂；纯化；含量；测定1引言卵磷脂又称为磷脂酰胆碱，是磷脂酸的衍生物，由甘油与脂肪酸和磷酸胆碱结合而成。

卵磷脂广泛分布于动物、植物和酵母中。

卵磷脂是构成细胞等生物膜、脑组织和神经组织的重要组成成分[1]，对酶的活性也起重要的作用，而且也是乙酰胆碱的重要供给源[2]。

卵磷脂因为其乳化特性和安全性，可用于生产人工血浆、脂乳剂。

临床上可用于治疗动脉粥样硬化、脂肪肝、神经衰弱、营养不良、胆固醇结石的防治药物及静脉注射脂肪乳的乳化剂。

在食品、化妆品和医药领域有着广泛的用途。

目前，卵磷脂的来源主要是从鸡蛋黄、大豆和猪脑中提取。

传统提取卵磷脂的几种方法，如用二甲醚从生蛋黄中提取卵磷脂、用乙醇和酸类从生蛋黄中提取卵磷脂、用丙酮提取卵磷脂和冷冻蛋黄，用乙醇和己烷将卵磷脂与中性脂进行分离，提取卵磷脂等方法，这些方法提取的卵磷脂达不到食品和医用的高纯度[3]，因此，必须对粗产品或市售的卵磷脂进行纯化。

在本工作中，作者采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯（自提）；化，用消化定磷法测定卵磷脂的含量。

2实验部分2.1试剂和仪器蛋黄卵磷脂（卵PC）中性三氧化二铝（200-300目）；硅胶G；氯仿（AR）；甲醇（AR）；乙醚（AR）；浓硫酸（AR）；钼酸铵（AR）；30过氧化氢（AR）；磷酸二氢钾（AR）；层析柱（Ф15cm，L40cm）；紫外检测仪（自制）；台式平衡记录仪（上海大华仪表厂）；分光光度计（日本岛津）；EYELASB-20xx 旋转蒸发仪（上海EYELA有限公司）。

2.2实验方法和结果2.2.1蛋黄卵磷脂的提取取12克蛋黄置于150mL的锥型瓶中，加入35mL乙醚，搅拌10min，放置20min，过滤，于45oC的条件下，用旋转蒸发仪蒸干乙醚，再放入真空干燥器减压干燥20min，彻底除尽乙醚，粗提取物离心10min，取出下层的卵磷脂，约为2克。

序言卵磷脂是过去五十年间既蛋白质、维生素被发现的最重要的营养素。

它没有副作用，却在抗击疾病和促进健康方面有着稳定、长远、整体的效果。

越来越多的营养学家、药物学家和医学家投身到对卵磷脂的研究中去。

越来越多的国际权威研究组织为卵磷脂对人类健康的神奇作用都给予高度的评价！1996年9月在布鲁塞尔召开的卵磷脂国际会议上，赢得了世界营养专家、药物学家和医学家的普遍认同；1997年第七届卵磷脂国际会议曾作出结论：“总结这些研究成果，建议怀孕妇女服用适量的卵磷脂，这对于幼儿的智力发育是很重要的。

”1998被联合国粮农组织(FAO)列为世界五大营养食品之一的高度认可1999在美国食品与药物管理委员会（FDA）的批准下，所有的婴儿食谱中都要适量补充卵磷脂。

2001年被美国时代杂志上评选为“二十一世纪最伟大的健康食品”卵磷脂集中存在于脑及神经系统，血液循环系统、免疫系统及心、肝、肺、肾等重要器官。

是构成神经组织的重要成分，属于高级神经营养素。

卵磷脂在人体中占体重的1%左右，但在大脑中却占到脑重量的30%；神经系统机能低下带来的疾病，如焦躁不安，食欲不振，耳鸣，性无能力，神经性下痢，习常性便秘，以及神经传达物质缺乏所带来的痴呆症，内存力减退，每天充分地补充卵磷脂，会收到很好的疗效。

——麻省综合医院的J. H.克劳顿博士啮齿动物口服由大豆卵磷脂合成的磷脂醚丝氨酸能够改善大脑功能，预防老年性痴呆症——日本东京“Yakult Central Institute for Microbiological Research”的研究人员称大豆卵磷脂为天然营养食品，几乎没有什么副作用，每天吃多一点也没有危险。

——世界卫生组织（WHO）用卵磷脂饲育怀孕的大鼠，其后代在智力测验（迷宫测试）中，记忆力显著优于未饲育卵磷脂的大鼠的后代。

——美国北卡罗来纳州DUKE大学心理学教授药学博士沃伦来克“总结有关卵磷脂的所有研究成果，我们应当特别建议怀孕妇女服用适量的卵磷脂，这对于她们的婴儿的智力发育是很重要的。

一、实验目的1. 掌握卵磷脂的提取方法。

2. 学会使用光谱分析法鉴定卵磷脂的纯度。

3. 了解卵磷脂的生物学功能及其在食品和医药领域的应用。

二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质，属于磷脂类，由磷酸、脂肪酸、甘油和胆碱等成分组成。

卵磷脂具有降低血液中胆固醇、改善脑功能、增强免疫力等生物学功能。

本实验采用乙醇提取法从蛋黄中提取卵磷脂，并通过光谱分析法鉴定其纯度。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：蛋黄、乙醇、正己烷、蒸馏水、硫酸、碘化钾、淀粉、硅胶、层析板、紫外灯、旋转蒸发仪、分光光度计等。

2. 实验试剂：无水乙醇、正己烷、碘化钾、淀粉、硅胶、硫酸等。

四、实验步骤1. 卵磷脂提取（1）取一定量的蛋黄，加入适量的无水乙醇，充分搅拌，使蛋黄中的卵磷脂溶解。

（2）将溶液转移至分液漏斗中，加入适量的正己烷，振荡，静置分层。

（3）取下层正己烷层，通过旋转蒸发仪去除溶剂，得到卵磷脂粗品。

2. 卵磷脂鉴定（1）取少量卵磷脂粗品，加入适量的硫酸，充分溶解。

（2）使用分光光度计测定溶液在特定波长下的吸光度值。

（3）以硫酸溶液为空白对照，计算卵磷脂的纯度。

五、实验结果与分析1. 卵磷脂提取实验中，通过乙醇提取法成功从蛋黄中提取了卵磷脂。

提取过程中，蛋黄中的中性脂肪和卵磷脂在乙醇中溶解，通过正己烷的萃取，实现了卵磷脂的分离。

2. 卵磷脂鉴定实验结果显示，卵磷脂在特定波长下的吸光度值与纯度呈正相关。

通过计算，得到卵磷脂的纯度为95.6%，说明实验提取的卵磷脂纯度较高。

六、实验讨论1. 实验中，卵磷脂的提取效果与乙醇的浓度、蛋黄的量、搅拌时间等因素有关。

本实验中，采用适量的乙醇、适量的蛋黄和充分的搅拌，提高了卵磷脂的提取效率。

2. 卵磷脂的鉴定方法采用光谱分析法，具有快速、简便、准确等优点。

通过测定特定波长下的吸光度值，可以较为准确地判断卵磷脂的纯度。

七、实验结论1. 本实验成功从蛋黄中提取了卵磷脂，并采用光谱分析法对其纯度进行了鉴定。

实验九卵磷脂的提取和鉴定实验目的：熟悉卵磷脂的提取方法和常见的鉴定方法。

实验原理：卵磷脂是存在于组织和细胞膜中的一类复杂的生物分子，其主要成分包括磷酸甘油酯、磷酸肌酸、磷酸胆碱等物质。

卵磷脂在生物体内扮演着极为重要的生理功能，在维持生物体的正常生理代谢过程中发挥着重要作用。

卵磷脂的提取方法：材料：鸡蛋黄、乙醇、正己烷、醋酸乙酯。

1.取足够多的鸡蛋黄，用纯净水洗净后晾干备用。

2.将洗净干燥的鸡蛋黄取出，剥去蛋壳并取出蛋黄，用刀将其压成泥状。

3.将压成泥状的鸡蛋黄放入烧杯中，加入适量的乙醇，不断搅拌，使其混合均匀。

4.待混合好的鸡蛋黄和乙醇彻底混合均匀后，将其倒入滤布中，将滤液与滤涤液分离开来。

5.将滤液中酒精分离鸡蛋黄接着加入等量的正己烷，用250ml分液漏斗进行振荡后，取出下层酒精分离液。

6.将酒精中的卵磷脂析出，将析出卵磷脂加入等量的醋酸乙酯中溶解，即可得到卵磷脂。

卵磷脂的鉴定：1.磷钼酸法：将标本加入一定量的磷钼酸试剂，加热至磷钼酸中磷酸结晶完全溶解，此时磷酸含量的多少即为卵磷脂的质量。

其原理是卵磷脂中的磷酸和磷钼酸反应，生成黄色的磷钼酸沉淀。

2.碱水解法：将标本与氢氧化钠混合，使卵磷脂水解产生酰基胆碱。

然后加入硫酸和琼脂，沉淀下来的物质即为卵磷脂。

3.利用质谱法进行鉴定：该方法是根据卵磷脂分子中所含的质子数、化学成分以及分子量等特征，通过对样品中分子的荷电性和分子量的测定，进行卵磷脂的鉴定。

实验步骤：1.取少量卵磷脂样品溶于水中。

2.将卵磷脂样品反复洗涤至清洁，然后加入磷钼酸试剂。

3.待磷钼酸在样品中完全溶解后，使用分光光度计测定溶液中吸收光谱，从而得出样品中卵磷脂的质量。

实验结论：通过卵磷脂的提取方法和鉴定方法，我们可以成功地得到卵磷脂，并确定了样品中卵磷脂的数量和质量。

这为我们进一步研究卵磷脂的生理功能以及用途奠定了基础。

食品化学综合的设计性实验汇报[1]-卵磷脂的提取，鉴定与应用食品化学综合的设计性实验汇报——卵磷脂的提取，鉴定与应用一、引言卵磷脂是一种天然存在于动植物体内的物质，具有多种生理功能，如改善记忆、降低胆固醇等。

近年来，卵磷脂在食品工业中的应用越来越广泛，被用作添加剂、乳化剂、营养补充剂等。

本实验旨在探究卵磷脂的提取、鉴定方法及其在食品中的应用，以期为卵磷脂的开发利用提供理论支持。

二、实验材料与方法1.实验材料（1）原料：鸡蛋、大豆油（2）试剂：乙醇、硫酸、正己烷、甲醇、氯化钠、磷酸、酚酞指示剂、碘化钾淀粉试纸（3）设备：分液漏斗、旋转蒸发仪、真空干燥箱、电子天平、色谱柱2.实验方法（1）卵磷脂的提取将鸡蛋黄或大豆油用乙醇溶解后，加入正己烷进行萃取。

通过旋转蒸发仪将萃取液浓缩至半，得到卵磷脂粗品。

将粗品置于真空干燥箱中干燥，得到卵磷脂产品。

（2）卵磷脂的鉴定① 颜色反应：取少量卵磷脂产品，分别加入甲醇和酚酞指示剂，观察颜色变化。

② 红外光谱分析：将卵磷脂产品进行红外光谱扫描，与标准谱图对比。

③ 薄层色谱法：将卵磷脂产品点样于硅胶G板上，以石油醚-乙酸乙酯为展开剂进行展开。

观察斑点位置与颜色。

（3）卵磷脂的应用实验① 乳化性实验：将卵磷脂产品加入大豆油中，搅拌均匀。

取一滴混合液滴于水面，观察乳化现象。

② 抗氧化性实验：将卵磷脂产品加入到油脂中，测定油脂的氧化稳定性。

三、实验结果与讨论1.实验结果（1）卵磷脂的提取结果如下表：（2）卵磷脂的鉴定结果如下：① 颜色反应：卵磷脂产品在甲醇中溶解后呈红色，在酚酞指示剂中呈蓝色。

② 红外光谱分析：卵磷脂产品的红外光谱图与标准谱图基本一致，证实其为卵磷脂。

③ 薄层色谱法：斑点位置与颜色均与标准品一致，说明卵磷脂产品的纯度较高。

（3）卵磷脂的应用实验结果如下：① 乳化性实验：混合液滴于水面后，形成一层稳定的乳化层，说明卵磷脂具有较好的乳化性能。

② 抗氧化性实验：在油脂中添加卵磷脂后，油脂的氧化稳定性明显提高。

卵磷脂的提取及鉴定作者：未知来源：郑州轻工业学院时间：2006-9-23一、实验目的1.加深了解磷脂类物质的结构和性质。

2.掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。

二、实验原理磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中，尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。

卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开；此外，卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。

新提取的卵磷脂为白色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。

卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。

甘油与硫酸氢钾共热，可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷钼酸沉淀；胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。

这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。

三、仪器和试剂仪器小烧杯、试管。

试剂1. 鸡蛋黄2. 红色石蕊试纸3. 95%乙醇4. 10%氢氧化钠溶液5. 钼酸铵试剂将6g 钼酸铵溶于15mL 蒸馏水中，加入5mL 浓氨水，另外将24mL 浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中，两者混合静置一天后再用。

6. 丙酮7. 乙醚8. 3%溴的四氯化碳溶液9. 硫酸氢钾四、操作步骤(一)卵磷脂的提取称取约10g 蛋黄于小烧杯中，加入温热的95%乙醇30mL，边加边搅拌均匀，冷却后过滤。

如滤液仍然混浊，可重新过滤直至完全透明。

将滤液置于蒸发皿内，水浴锅中蒸干，所得干物即为卵磷脂。

(二)卵磷脂的溶解性取干燥试管，加入少许卵磷脂，再加入5mL 乙醚，用玻棒搅动使卵磷脂溶解，逐滴加入丙酮3～5mL，观察实验现象。

(三)卵磷脂的鉴定1.三甲胺的检验取干燥试管一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 氢氧化钠溶液，放入水浴中加热15min，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味。

将加热过的溶液过滤，滤液供下面检验。

卵磷脂的提取及鉴定作者：未知来源：郑州轻工业学院时间：2006-9-23一、实验目的1.加深了解磷脂类物质的结构和性质。

2.掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。

二、实验原理磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中，尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。

卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开；此外，卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。

新提取的卵磷脂为白色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。

卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。

甘油与硫酸氢钾共热，可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷钼酸沉淀；胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。

这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。

三、仪器和试剂仪器小烧杯、试管。

试剂1. 鸡蛋黄2. 红色石蕊试纸3. 95%乙醇4. 10%氢氧化钠溶液5. 钼酸铵试剂将6g 钼酸铵溶于15mL 蒸馏水中，加入5mL 浓氨水，另外将24mL 浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中，两者混合静置一天后再用。

6. 丙酮7. 乙醚8. 3%溴的四氯化碳溶液9. 硫酸氢钾四、操作步骤(一)卵磷脂的提取称取约10g 蛋黄于小烧杯中，加入温热的95%乙醇30mL，边加边搅拌均匀，冷却后过滤。

如滤液仍然混浊，可重新过滤直至完全透明。

将滤液置于蒸发皿内，水浴锅中蒸干，所得干物即为卵磷脂。

(二)卵磷脂的溶解性取干燥试管，加入少许卵磷脂，再加入5mL 乙醚，用玻棒搅动使卵磷脂溶解，逐滴加入丙酮3～5mL，观察实验现象。

(三)卵磷脂的鉴定1.三甲胺的检验取干燥试管一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 氢氧化钠溶液，放入水浴中加热15min，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味。

将加热过的溶液过滤，滤液供下面检验。

蛋黄中卵磷脂的提取项目报告引言卵磷脂是一种重要的生物分子，广泛存在于生物体组织细胞膜中，在保护细胞、保持细胞健康和参与代谢过程等方面发挥着重要的作用。

蛋黄中富含卵磷脂，因此从蛋黄中提取卵磷脂具有重要的意义。

本报告旨在介绍卵磷脂提取的方法和操作过程，并探讨蛋黄中卵磷脂提取的优化条件。

材料和方法1. 实验材料鸡蛋黄，氯仿，乙醇，硫酸钠，硫酸铜，脱色活性炭。

2. 实验步骤(1) 蛋黄分离将鸡蛋清与蛋黄分开，将蛋黄逐个捞出并洗净。

(2) 蛋黄液的制备将洗净的蛋黄放入搅拌机中，加入适量的盐水，混合均匀，制成蛋黄液。

(3) 卵磷脂的提取取一定量的蛋黄液，按体积比例1:1加入氯仿，搅拌30秒，放置静置。

收取上层乳白色的液体，转移到新的容器中。

(4) 脱色处理加入少量的脱色活性炭，并摇晃混匀。

静置15分钟，然后用过滤器分离出脱色后的液体。

(5) 卵磷脂提取量的测定将卵磷脂溶解在正丁醇中，然后用硫酸钠和硫酸铜定量，计算出卵磷脂的提取量。

结果和讨论本实验通过以上步骤从蛋黄中成功提取卵磷脂，并计算出提取量。

但是，在实验过程中也发现了一些问题，如提取效率低、脱色效果不理想等，需要进一步优化。

提高提取效率的主要方法是改变溶剂体系、控制温度和加入乳化剂等。

比如，可以将氯仿与丙酮混合使用，或使用丙酮-水混合液代替氯仿。

此外，将温度控制在15-20℃范围内也有助于提高提取效率。

最后，加入乳化剂，如十六烷基三甲基溴化铵等也可以提高提取效率。

对于脱色效果不理想的问题，可以通过添加更多的脱色活性炭和增加脱色时间来解决。

同时，调整溶液的pH值也可能改善脱色效果。

结论本实验成功地从蛋黄中提取了卵磷脂，但提取效率和脱色效果需要进一步优化。

通过改变溶剂体系、温度控制和加入乳化剂等方法，可以提高提取效率。

此外，采用更多的脱色活性炭和延长脱色时间以及调整溶液pH值可以改善脱色效果。

卵磷脂的提取和鉴定卵磷脂是一种重要的生物活性分子，具有许多生理功能和医学应用价值。

在研究和应用中，正确而高效地提取和鉴定卵磷脂是至关重要的。

本文将介绍卵磷脂的提取和鉴定方法，为相关研究和应用提供指导。

首先，介绍卵磷脂的提取方法。

常见的提取方法包括有机溶剂提取法、酶解法和超声波辅助提取法。

有机溶剂提取法是最常用的方法之一。

首先将样品加入有机溶剂（如甲醇、乙醇），进行浸泡提取，再通过离心分离，得到含有卵磷脂的上清液。

酶解法则是利用酶（如磷脂酶）进行水解，将卵磷脂释放出来。

超声波辅助提取法利用超声波的机械振动和热效应，加速卵磷脂的释放。

其次，介绍卵磷脂的鉴定方法。

常用的鉴定方法包括色谱法、质谱法和核磁共振法。

色谱法主要包括薄层色谱和高效液相色谱。

通过与标准品对照，根据卵磷脂的保留时间或峰面积来确定卵磷脂的含量和种类。

质谱法通过质谱仪的分析，利用质量/电荷比（m/z）来鉴定卵磷脂的分子结构和种类。

核磁共振法则通过核磁共振仪的分析，利用核磁共振信号来得到卵磷脂的结构信息。

在提取和鉴定卵磷脂时，需要注意以下几点。

首先，样品的选择要具有代表性和可重复性，确保提取和鉴定结果的准确性。

其次，选择合适的提取方法和鉴定方法，根据研究目的和实际情况进行选择，以提高效率和准确性。

再次，要使用纯度高的试剂和标准品，避免杂质的干扰。

最后，严格控制实验条件和操作技术，确保实验的精确性和可重复性。

总之，卵磷脂的提取和鉴定是研究和应用中的重要环节，本文介绍了常用的提取和鉴定方法，并提供了一些注意事项。

希望本文能够为相关研究和应用提供指导，促进卵磷脂的深入研究和广泛应用，推动医学和生命科学的进步。

生命科学与技术系生化技术综合实验报告设计〔论文〕题目鸡蛋中卵磷脂的提取与鉴定姓名学号所属系专业年级电子指导教师电子年月摘要卵磷脂是甘油、胆碱、磷酸、饱和及不饱和脂肪酸组成的一种磷脂类物质，它是构成细胞膜、核膜、质体膜等生物膜的本成份、研究发现卵磷脂具延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆力，促进脂肪代谢、防止出现脂肪肝、降低血清胆固醇等方面的作用。

被英国科学家喻为“健脑的黄金、养心的极品〞。

在西方国家卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素〞。

卵磷脂在动植物体内分布广泛．其中以蛋黄中含量最为丰富。

卵磷脂按照其纯度的上下，一般分为 PC50、PC 60 、PC 70、PC80、PC 90、PC95等产品形式。

最高可以提纯到98%，因为其纯度越高，氧化性能越强，故提纯到98%的卵磷脂需要做氢化处理。

然后保存。

未经过氢化处理的卵磷脂，一般要求在充氮的密封容器中。

纯洁的卵磷脂常温下为一种无色无味的白色固体，由于制取或精制方法、储存条件不同而呈现淡黄色至棕色。

利用95％乙醇在蛋黄溶液里进展浸提取，再参加乙醚过滤，参加一定量的丙酮在旋转枯燥仪器中把乙醇蒸发出来，取溶胶性的物质，参加丙酮冲洗除杂，冲洗屡次取得粗品，让后再参加无水乙醇溶解，参加金属沉淀剂进展精提取，取出少量精品，在碱性条件下溶解，分别用钼酸铵，斐林试剂，滤纸，氢氧化钠，对卵磷脂进展定性检测关键词：蛋黄卵磷脂；提取；纯化；鉴定。

卵磷脂的提取与鉴定卵磷脂(lecithin) 是一种含磷的类脂类生理活性物质, 同时又是一种天然外表活性剂 [1～2], 化学名称为磷脂酰胆碱，它是构成细胞膜、核膜、质体膜等生物膜的根本成份，空间构造的卵磷脂分子是由一个极性的“头部〞(甘油和胆碱磷酸脂局部) 和两条非极性的“尾巴〞(两个依附于甘油主框架上的脂肪酸) 组成, 它是典型的两性电解质 [3]主要集中在大脑、神经系统、免疫系统及心、肝、肾、生殖腺等重要器官内) ,是人体必需的胆碱和必需脂肪酸的重要来源[4] 纯洁的卵磷脂常温下为一种无色无味的白色固体，由于制取或精制方法、储存条件不同而呈现淡黄色至棕色。

一、实验目的1. 掌握卵磷脂的提取方法；2. 学习卵磷脂的提纯技术；3. 了解卵磷脂在生物体内的作用和应用。

二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质，广泛存在于动植物细胞膜、脑、神经组织等部位。

其化学结构为甘油、胆碱、磷酸和脂肪酸组成的磷脂类物质。

卵磷脂具有多种生物活性，如延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆力、促进脂肪代谢、防止脂肪肝、降低血清胆固醇等。

本实验采用乙醇提取卵磷脂，利用乙醚进行提纯。

实验过程中，通过离心分离、沉淀、洗涤等步骤，使卵磷脂与其他杂质分离，提高卵磷脂的纯度。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：蛋黄、95%乙醇、乙醚、蒸馏水、氯化钠、无水硫酸钠、石油醚、硫酸铜、硫酸钠、盐酸等。

2. 实验仪器：离心机、恒温水浴锅、磁力搅拌器、锥形瓶、漏斗、烧杯、试管、滴定管、移液管等。

四、实验步骤1. 提取卵磷脂（1）取一定量的蛋黄，加入适量的95%乙醇，充分搅拌，使蛋黄溶解；（2）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的氯化钠，充分搅拌，使蛋白质沉淀；（3）将溶液静置一段时间，待蛋白质沉淀后，取上层清液；（4）将上层清液转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（5）将洗涤后的沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（6）将溶液过滤，收集滤液。

2. 卵磷脂的提纯（1）将收集到的滤液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（2）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（3）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的石油醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（4）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（5）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（6）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（7）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（8）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（9）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（10）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（11）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（12）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（13）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（14）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（15）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（16）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（17）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（18）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（19）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（20）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（21）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（22）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（23）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（24）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（25）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（26）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（27）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（28）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（29）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（30）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（31）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（32）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（33）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（34）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（35）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（36）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（37）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（38）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（39）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（40）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（41）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（42）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（43）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（44）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（45）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（46）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（47）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（48）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（49）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（50）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（51）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（52）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（53）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（54）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（55）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（56）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（57）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（58）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（59）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（60）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（61）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（62）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（63）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（64）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（65）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（66）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（67）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（68）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（69）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（70）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（71）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（72）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（73）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（74）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（75）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（76）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（77）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（78）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（79）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（80）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（81）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（82）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（83）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（84）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（85）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（86）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（87）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（88）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（89）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（90）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（91）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（92）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（93）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（94）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（95）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（96）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（97）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（98）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（99）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（100）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（101）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（102）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（103）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（104）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（105）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（106）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（107）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（108）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（109）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（110）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（111）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（112）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（113）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（114）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（115）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（116）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（117）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（118）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（119）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（120）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（121）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（122）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（123）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（124）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（125）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（126）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（127）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（128）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（129）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（130）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（131）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（132）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（133）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（134）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（135）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（136）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（137）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（138）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（139）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（140）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（141）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（142）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（143）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（144）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（145）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（146）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（147）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（148）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（149）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（150）。