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ESCRT-III作用于MLKL下游调控细胞程序性坏死

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Cell：ESCRT-III作用于MLKL下游调控细胞程序性坏死
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程序性坏死（necroptosis）是一种可调控的坏死，然而经历程序性坏死的细胞并不总是面向死亡。

来自美国圣犹达儿童研究医院的研究团队发现，在细胞程序性坏死的过程中由MLKL活性引起的膜损伤可被ESCRT-III修复，保留细胞质膜的完整性，使具有MLKL活性的细胞可以在ESCRT的参与下维持生存。

相关结果发表于《Cell》。

RIPK3（相互作用激酶-3）激活MLKL（混合谱系激酶样）导致质膜（PM）的破坏，引起细胞程序性坏死。

RIPK3本身通过寡聚化激活，可以通过单独添加二聚体快速激活RIPK3。

ESCRT蛋白包括亚群（ESCRT-I，-II和-III），其在多泡体形成、质膜断裂、细胞因子中的核膜组装等中起作用。

1. 程序性坏死细胞在质膜完整性丧失之前暴露磷脂酰丝氨酸（PS）
PS通过脂质转位酶的作用定位于健康细胞质膜的内叶。

向培养的NIH 3T3细胞添加二聚体（B / B），发现细胞在摄取Sytox Green或碘化丙啶（PI）之前迅速变为膜联蛋白V （AnnV）阳性（在质膜上形成的小（〜0.5mm）的AnnV+气泡）。

在添加肿瘤坏死因子（TNF）和caspase抑制剂zVAD-fmk（TZ）后也观察到这种现象。

MLKL的消融阻止了PS的暴露。

因此MLKL的激活导致脂质扰乱以暴露PS。

2. ESCRT-III负责组建MLKL诱导的AnnV+气泡
用GFP-CHMP4B瞬时转导表达RIPK3-2Fv或hMLKL1-181-2Fv的NIH 3T3细胞，并加入B / B后成像。

发现活性MLKL诱导CHMP4B转运到PM。

为了确定ESCRT-III是否在MLKL激活后AnnV+气泡的形成中起作用，沉默ESCRT-III组分的CHMP2A和CHMP4B，发现激活RIPK3或MLKL后质膜气泡的形成取决于这些ESCRT-III组分的存在。

还发现，在激活MLKL之后PS暴露之前发生Ca2+的内流，并且依赖于MLKL的存在。

尽管PS暴露不需要Ca2+，但是发现CHMP4B易位和质膜气泡形成需要细胞外Ca2+。

3. ESCRT-III拮抗程序性坏死
沉默NIH 3T3细胞中的CHMP2A会诱导20%左右细胞死亡，并且不受caspase抑制剂qVD-oph 和zVAD-fmk的影响。

在ESCRT-III沉默的鼠L929细胞中，添加TNF 或zVAD-fmk后，诱导更多的快速程序性坏死。

ESCRT-III控制质膜完整性。

4. ESCRT-III促使程序性坏死细胞释放信号分子
缺乏ESCRT-III功能的细胞比对照细胞产生的趋化因子（CXCL10和CXCL1）少。

永生化巨噬细胞（iMac）中RIPK3-2Fv的激活诱导细胞死亡，CHMP2A的沉默加速这一过程，在通过B / B的RIPK3活化后，这些细胞产生多种细胞因子和趋化因子（Interleukin (IL)-1a, IL-1b, IL-6, CXCL10，TNF-a）。

因此，ESCRT-III可延迟或预防MLKL引起的细胞死亡，足以使信号（如细胞因子和趋化因子）在细胞消亡之前显现。

5. 具有活性MLKL的细胞可以复苏
通过添加B / B激活RIPK3-2Fv细胞，分选出AnnV+，Sytox Green-细胞，将细胞返回到培养物中，添加Fvbinding试剂的单体形式，称为“洗脱”，洗脱剂与B / B二聚体竞争并破坏由其诱导的的低聚物。

在没有洗脱剂的情况下，AnnV+，Sytox Green-细胞变为AnnV+，Sytox Green+细胞，添加洗脱剂后，细胞变为AnnV-，Sytox Green-细胞并快速生长。

表明AnnV+细胞已被“复苏”以维持存活。

6. ESCRT组分是具有活性MLKL的细胞复苏所必需的
复苏效果在ESCRT-III组分CHMP2A或CHMP4B沉默的细胞中显着降低。

总之，ESCRT-III作用于MLKL下游保留细胞质膜的完整性，促进细胞生存。

参考文献：
ESCRT-III Acts Downstream of MLKL to Regulate Necroptotic Cell Death and Its Consequences. Cell. 2017 Apr 6;169(2):286-300.e16.
doi: 10.1016/j.cell.2017.03.020.。

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坏死性凋亡及其相关疾病的研究进展

坏死性凋亡及其相关疾病的研究进展

南京农业大学学报2021,44(1) :8-17Journal qf Nanjing Agricultural University http :// DOI ：10.7685/jnau.202006001鲍春彤，张晓光，雷连成.坏死性凋亡及其相关疾病的研究进展［J ］.南京农业大学学报,2021,44(1):8-17.BAO Chuntong,ZHANG Xiaoguang,LEI Liancheng. Research progress of necroptosis and related diseases ［ J ］ . Journal of Nanjing Agricultural Lniversity, 2021,44(1):8-17.坏死性凋亡及其相关疾病的研究进展鲍春彤-张晓光-雷连成(1.吉林大学动物医学学院，吉林长春130000;2.长江大学动物科学学院，湖北荆州434000)摘要:坏死性凋亡，即程序性坏死，主要由细胞因子(TNF-a 、IFN-a 、IFN -丫)、Toll 样受体(TLR3、TLR4、TLR9)以及核酸 (DNA 、RNA)感受器等介导起始过程。

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目前研究发现,坏死性凋亡与感染性疾病、神经系统疾 病、炎症、癌症的发生密切相关。

本文将对细胞坏死性凋亡在炎性因子失衡中的作用、坏死性凋亡发生的分子机制、坏死性 凋亡与多种疾病的关系以及治疗药物研究进展方面进行综述。

关键词:炎性因子;坏死性凋亡;疾病中图分类号:S858.28 文献标志码：A 文章编号：1000-2030( 2021) 01-0008-10Research progress of necroptosis and related diseasesBAO Chuntong 1 ,ZHANG Xiaoguang 1 ,LEI Liancheng 1,2*(1.College of Veterinary Medicine ,Jilin University ,Changchun 130000,China ；2.College of Animal Science , Yangtze University , Jingzhou 434000,China)Abstract : Necroptosis is programmed death , and is mainly caused by cytokines ( TNF-a , IFN-a , IFN -7) , Toll-like receptors ( TLR3, TLR4, TLR9) and nucleic acid( DNA, RNA ) sensors. Receptor interacting serine/threonine protein kinase 1 ( RIPK1) , receptor inter ­acting serine/threonine protein kinase 3 ( RIPK3) and mixed lineage kinase domain like pseudokinase ( MLKL ) are involved , and MLKL is the key molecule. The current research found that necroptosis has been linked to infectious diseases , neurological diseases , inflammatory diseases and cancer. In this article , the role of necroptosis will be reviewed in the imbalance of inflammatory cytokines , the molecular mechanism , the correlation between necroptosis and a variety of diseases and therapeutic drugs.Keywords : pro-inflammatory cytokine ； necroptosis ； disease坏死性凋亡(necroptosis)，也被称作“程序性坏死”，是一种类似于坏死的细胞死亡方式，依赖受体相 互作用蛋白激酶 1 ( receptor interacting serin^^threonine protein kinase 1, RIPK1)、受体相互作用蛋白激酶 3 (receptor interacting serin^^threonine protein kinase 3 , RIPK3 )和底物混合谱系激酶样蛋白(mixed lineage kinase domain like pseudokinase , MLKL ),不依赖半胱氨酸天冬氨酸蛋 白酶(cysteine-aspartic proteases , Caspase )［1］o凋亡(apoptosis)与坏死(necrosis)是两类主要的细胞死亡方式,坏死曾经被认为是被动和非程序性 的。

SIRT3在右美托咪定减轻小鼠肠缺血再灌注损伤中的作用及机制

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◇基础研究◇中国临床药理学与治疗学中国药理学会主办!"#$ %&'()*，+,,"%''- &.'%/0012))3334565104578&'&&9:;<&=>#?2&.# &.-&'&% '( %(收稿　&'&% %% '-修回国家自然科学基金（@%-('#$.）；甘肃省自然科学基金（&%E*%*B'(-）；兰州大学第一医院院内基金（M[\\\P&'%- &.）任以行，男，硕士，住院医师，研究方向：器官保护。

H 8:LM2%==....&%#$N%(#4578冷玉芳，通信作者，女，博士，教授)主任医师，研究方向：器官保护。

H 8:LM2MUPQ\gN MnY4U[Y45P,+*^#在右美托咪定减轻小鼠肠缺血再灌注损伤中的作用及机制任以行%S&，冷玉芳%，郭名君%，张健民%，石亚静%，陈凤%，刘馨%%兰州大学第一医院，兰州=#''''，甘肃；&苏州大学附属第二医院，苏州&%.''$，江苏摘要　目的：探讨沉默信息调节因子&同源蛋白#（,+*^#）在右美托咪定减轻小鼠肠缺血再灌注损伤中的作用及机制。

方法：健康雄性!.=AG 小鼠&$只，随机分为$组（ h (）：假手术组（,/:8组）、肠缺血再灌注组（+)*组）、右美托咪定组（DUR 组）及,+*^#抑制剂# ^JX 组（# ^JX 组）。

,/:8组仅进行假手术，其余三组通过夹闭肠系膜上动脉$.8LP 再灌注&/制备肠缺血再灌注模型。

于缺血前%/时，# ^JX 组腹腔注射# ^JX （.8Q)dQ ，稀释至'4#8G ），其余三组腹腔注射'4#8G 生理盐水；于缺血前#'8LP 时，# ^JX 组和DUR 组均腹腔注射右美托咪定（&.μQ)dQ ，稀释至'4#8G ），其余两组分别腹腔注射'4#8G 生理盐水。

抑制半乳糖凝集素3促进椎间盘软骨终板细胞凋亡诱导椎间盘退变

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Chinese Journal of Tissue Engineering Research ｜Vol 25｜No.35｜December 2021｜5599抑制半乳糖凝集素3促进椎间盘软骨终板细胞凋亡诱导椎间盘退变刘岩路，胡 炜，艾克拜尔，伊力亚，黄异飞文题释义：椎间盘软骨终板细胞：椎间盘软骨终板是椎间盘的重要组成部分，其结构组成可以通过椎间盘的生物力学和营养供给保证椎间盘的稳定性和完整性。

椎间盘软骨终板退变是导致椎间盘退变的主要因素之一，在应力变化、老龄化、炎性因子浸润等作用下，会影响椎间盘的营养供给及软骨终板细胞的生物功能，参与或加速椎间盘退变。

半乳糖凝集素3：又称为Galectin-3，是β-半乳糖苷结合动物凝集素家族之一，是脊椎动物中唯一的嵌合体型半乳凝素，它包含一个保守的碳水化合物识别结构域，该结构域通过胶原样连接区与非凝集素结构域连接。

Galectin-3主要依赖碳水化合物的方式参与细胞增殖、分化、凋亡、细胞因子分泌等多种生理和病理过程。

摘要背景：椎间盘软骨终板的退变破坏了椎间盘完整性，影响了营养和代谢物交换及细胞外基质代谢平衡，是导致椎间盘退变的主要因素。

半乳糖凝集素3(Galectin-3)是半乳糖凝集素家族的一员，参与调控细胞增殖、凋亡、细胞黏附等多种生理和病理过程，但是Galectin-3在椎间盘软骨终板中的调控作用尚不明确。

目的：通过抑制剂GB1107干预Galectin-3，探讨其对大鼠软骨终板细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响。

方法：将大鼠软骨终板细胞分为正常对照组和Galectin-3 GB1107抑制剂组，其中GB1107抑制剂组分为6个浓度组，即1，2.5，5，10，25和50 μmol/L 组。

MTT 法检测3个时间点(12，24，48 h)各组椎间盘软骨终板细胞的增殖情况；采用最佳的抑制剂浓度25 μmol/L 进行后续流式测定，检测大鼠软骨终板细胞凋亡和细胞周期的差异变化。

miRNA-155在非小细胞肺癌中的作用机制

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miRNA-155在非小细胞肺癌中的作用机制发布时间：2022-08-24T03:37:39.418Z 来源：《医师在线》2022年4月8期作者：王巧刘璐璐谢冀周熊建军* [导读]miRNA-155在非小细胞肺癌中的作用机制王巧刘璐璐谢冀周熊建军*（九江学院；江西九江332000）摘要近年研究发现，miR-155在肺癌等肿瘤组织中异常表达，且其高表达提示非小细胞肺癌（Non-Small Cell Lung Cancer, NSCLC）患者不良生存预后，故miR-155有可能成为肺癌治疗的靶向基因。

经文献查阅发现，程序性细胞死亡因子PDCD4、RASSF4、Apaf-1、SOCS1、FGF9以及Smad 2/3等6种不同功能基因受miR-155的调控。

文章主要对miR-155通过这6种因子在非小细胞肺癌发病、进展中作用的机制进行综述，为推动肺癌治疗的发展提供参考。

关键词非小细胞肺癌；miR-155; Mechanism of miRNA-155 in non-small cell lung cancer Wang Qiao, Liu Lulu, Xie JiZhou,Xiong Jianjun*(Jiujiang College, Jiujiang, Jiangxi 332000) Abstract In recent years, it has been found that miR-155 is abnormally expressed in tumor tissues such as lung cancer, and its high expression indicates that patients with non-small cell Lung Cancer (NSCLC) have an adverse survival prognosis, so miR-155 may become Targeted gene for lung cancer treatment. According to the literature, six different functional genes such as programmed cytodeath factor PDCD4, RASSF4, Apaf-1, SOCS1, FGF9 and Smad 2/3 are regulated by miR-155. This article mainly reviews the mechanism of the role of miR-155 in the pathogenesis and progression of non-small cell lung cancer through these six factors, so as to provide reference for promoting the development of lung cancer treatment. Keywords Non-small cell lung cancer; miR-155;微小RNA(miRNA)是非编码RNA调控因子，长度为18～25个核苷酸，参与多种细胞信号传导通路的调控，在炎症、肿瘤、自身免疫性疾病中发挥重要的生物学作用[1]。