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指纹图谱

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中药指纹图谱的原理与应用

中药指纹图谱的原理与应用

气相色谱(GC)以气体为流动相，对于含挥发性 成分中药的鉴别具有一定优势。由于裂解气相 色谱具有操作简便、样品无须化学前处理、提 供信息量大等优点而格外引人注目。该方法将 样品故人裂解器内，在一定的条件下将样品加 热使其瞬间裂解，生成可挥发性的小分子物质， 立即被载气带人气相色谱系统的分析柱上，分 离后得到具有指纹性质的裂解气相色谱图。如 果将气相色谱与质谱、傅立叶变换红外光谱联 用，则不但可以知道不同中药中挥发性成分的 差别，而且可以对这些成分进行鉴定。
高速逆流色谱指纹图谱(HSCCC fingerprintspectrum， 即调整逆流色谱法) HSCCC利用动态液-液分配原理分 离样品，其分离度和重现性与HPLC类似，但样品前处 理简单。具体地说它是一种基于液-液多级逆流萃取建 立的色谱体系，以轻巧的聚四氟乙烯螺旋管作分离柱，
在行星式运动中连续地完成整个分配、传递、分离过
中药指纹图谱，即中药身份证，主要指中 药化学指纹图谱，实际上是一种保证中药质量 的措施，是指对某种中药材或中成药等运用现 代分离分析科学的手段，得到能够标示该中药 的色谱或光谱的图谱，最终用来对中药质量评 价的科学性方式。它有两个显著特点，一是通 过指纹图谱的特征性，能有效鉴别样品的真伪 或产地。二是通过指纹图谱主要特征峰的面积 或比例的制定，能有效控制产品的质量，确保 产品质量的相对一致。
对这种中药材的分子遗传标记的研究，找到具有该种高度特异性
的片段，便可以此为基础，制备出对该种高度特异性的寡核苷酸 探针，再经分子杂交进行指纹分析，即可达到鉴别目的。DNA指 纹图具有高度的个体特异性。DNA指纹图谱技术包括AP-PCR(arb itrary primer PCR，任意引物聚合酶链式反应)和RAPD(随机扩增 多态性DNA，randomly amplified polymorphic DNA)两种指纹图谱 技术。RFLP (限制性[内切酶]片段长度多态性，restriction fragment length polymorphism)是最常用的构建DNA指纹图的方法，但该法 费时费力，使应用受到限制。随机扩增多态DNA(RAPD)标记，可 以在特异DNA序列尚不清楚的情况下，检测DNA的多态性，这是

指纹图谱及高效液相

指纹图谱及高效液相

指纹图谱及高效液相
第8页
• 指纹图谱中, 各色谱峰所代表物质光吸收曲线不可 能相同, 而物质含量检测理想条件是取得待测物质 光吸收曲线峰值或最大值, 所以, 固定单波长下准 确检测色谱峰所代表各种物质含量是不可能。
• 假如能够取得指纹图谱中个色谱峰代表物质光吸 收峰值, 就可准确测定这些物质含量, 而二极管阵 列检测器应用使同时准确测定各种物质含量成为 可能。
• ②决定用等度洗脱还是梯度洗脱
• ③预计等度洗脱适宜%B或梯度洗脱终止 %B
• ④了解样品整体情况, 防止有早流出或晚 流出组分被遗漏。
指纹图谱及高效液相
第29页
指纹图谱及高效液相
第6页
指纹图谱在评价中药质量中作用
• 1. 观察指纹图谱整体特征, 判别生产前原料真伪, 对原料药进行质量控制用以确保其质量稳定。
• 2. 可区分药材不一样部位, 还可对不一样采摘期 药材进行分析, 确定最正确生终年限和采收季节。
• 3. 指纹图谱能够考查商品药材及成药质量, 建立 各药材或成药标准指纹图谱, 可用于判断药材优劣, 区分正品与伪品。也可区分不一样产地药材。
度（即分离出成份多少）有所不一样。
指纹图谱及高效液相
第10页
中药高效液相指纹图谱分析方法
• 中药高效液相指纹图谱分析是以样品间色谱峰图 共有峰不一样峰面积和保留时间为对象进行比对 分析。分析时大多结合药材, 制剂有效成份所在部 位以对应溶剂提取该部位有效成份, 而有些制剂或 药材用一个溶剂不能完全获取全部代表性有效成 份时则采取多色谱指纹图谱分析。以不一样溶剂 提取取得多个色谱图。
指纹图谱文件查阅总结
指纹图谱及高效液相
第1页
查阅文件名称
• 中药指纹图谱在中药质量控制中应用—王乐 • 高效液相色谱数字化定量指纹图谱评价维C银翘片中药

第五章指纹图谱

第五章指纹图谱
代表性 均一性
10批以上中药
预处理
中药未 知检品
图谱测试、相似度评价 方法检验
评价标准
图
药效学试验
谱
相关性
评
价ห้องสมุดไป่ตู้
供试品溶液
选择测试条件 方法建立考察
中药指纹图谱
测定图谱参数
图谱分析
图谱信息
不同产地、采收期 和加工炮制的中药
一、样品收集
1. 最关键的步骤 真实性 代表性 2. 10批以上 3. 原药材 ：不同产地、不同采收季节等
共有峰数×2 重叠率=
指纹图谱峰数+供试品峰数
×100%
重叠率和相似率计算
供试品图谱中特征指纹峰面积 特征指纹峰相似率= 指纹图谱中特征指纹峰面积×100%
中药注射剂指纹图谱的评价
➢以指纹图谱相似度评价软件评价 中间体和注射剂指纹图谱的相似度应不低
于0.90。 ➢以色谱峰面积的比值评价
峰面积比值的要求： ➢保留时间小于或等于30分钟的共有峰：
指纹图谱中应包含的信息
1. 对于中药材和中药饮片：种的共性，用药 部位的共性，产地的个性，采收期、炮制 方法的个性信息。
2. 对于半成品和中药制剂：原药材（甚至辅 料）的信息；工艺信息等。
3. 药效信息：药效信息。
中药指纹图谱构建方法
TLC
色谱技术 HPLC, LC/MS
GC, GC/MS
HPCE, CE/MS 光谱技术 UV IR 波谱技术 MS NMR X-射线衍射法 分子生物学技术
三、对照品（参照物）溶液制备
1. 参照物的选择 ①道地药材/饮片 半成品 通常为主要成分 主要活性成分或指标成分
制剂
考察指纹图谱的稳定程度和重现性，有助于指纹 图谱确认。

指纹图谱

指纹图谱

fingerprint;"指纹图谱" 英文对照1、指纹图谱是指经光谱或色谱测定得到的组分群体的特征图谱或图像,由于紫外光谱是电子光谱,吸收光谱的峰位取决于电子能级差,它反映的是分子的电子结构特征 文献来源2、通常,指纹图谱是指蛋白质或DNA 的酶解图谱.在DNA 指纹图谱分析中,大分子DNA 经合适的限制性内切酶酶解,然后在凝胶介质中电泳,将酶解片段分离,所得分离图谱即为DNA 指纹图谱 文献来源3、3 作物品种指纹图谱目前,指纹图谱是指能够反映生物个体间差异的电泳谱带.它具有类似于人的指纹所具有的个体特异性和稳定可靠性.贾继增(1996)指出,指纹图谱技术应主要满足两方面的要求:一是分辨率高,多态性好 文献来源4、指纹图谱是指某种或某产2004年t2月·总第盆03期_走必,·563,、一诀拼瓤曝缎黝耀黝黝黝黝巍黯燃撇叭二一加-莽.葬沁莎撒{.术参数等,建立了徐长卿指纹图谱的分析方法,制定了徐长卿药材的质量标准草案 文献来源5、指纹图谱是指某种(或某产地)中药材或中成药中所共有的、具有特征性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱.其特点在于:通过指纹图谱的特征性,能有效鉴别样品的真伪或产地 文献来源6、这种电泳图谱多态性丰富,具有高度的个体特异性和环境稳定性,就象人的指纹一样,因而被称为“指纹图谱”.指纹图谱是鉴别品种、品系(含杂交亲本、自交系)的有力工具,具有迅速(数小时至数天)准确等优点 文献来源7、这些图谱能反映出原药材所含有的有效成分可有效地表征药材的质量是各种药材的固有特征并有重复性故称为指纹图谱.由于中药品种繁多有效成分与部位多种多样需要进行大量的研究工作因此最好有尽可能多的单位分工合作不断积累数据总结规律并应明确指纹图谱与有效部位的关系这样才能逐渐完善 文献来源"指纹图谱" 在学术文献中的解释什么是指纹图谱 撰写人：朱仲良指纹的概念大家都很清楚，是可以唯一标识一个人的特征。

色谱指纹图谱评价PPT课件

色谱指纹图谱评价PPT课件

面取得了显著进步。
毛细管电泳法（CE）
03
CE具有高分离效率和低成本的优势，尤其适合分析复杂生物样
品。
数据库的建立与完善
建立标准色谱指纹图谱库
收集各种样品的标准色谱指纹图谱，建立全面的数据库，为比对 分析提供参考。
数据标准化
对色谱数据进行处理和标准化，确保不同实验条件下的数据具有可 比性。
数据库更新与维护
谢谢观看
根据样品的性质和目标成 分，选择合适的色谱柱， 确保目标成分的有效分离。
流动相的选择
根据样品的性质和目标成 分，选择合适的流动相， 以获得最佳的分离效果。
检测波长的选择
选择适当的检测波长，以 便在指纹图谱中获得准确 的检测结果。
数据处理与分析
数据采集
按照设定的色谱条件进行实验 ，并采集色谱图数据。
色谱指纹图谱评价ppt课件
目录
• 引言 • 色谱指纹图谱的建立 • 色谱指纹图谱的解析 • 色谱指纹图谱的应用 • 色谱指纹图谱的局限性 • 色谱指纹图谱的发展趋势
01
引言
目的和背景
目的
介绍色谱指纹图谱在中药质量评价中的应用。
背景
随着中药产业的快速发展，中药质量评价方法的创新与改进成为行业关注的焦 点。色谱指纹图谱作为一种新型的中药质量评价方法，具有独特的优势和广泛 的应用前景。
数据预处理
对采集的数据进行必要的预处 理，如平滑化、基线校正等， 以提高数据的准确性和可靠性 。
特征峰的确定
通过对比对照品和样品色谱图 ，确定色谱指纹图谱中的特征 峰。
相似度评价
利用相关软件计算样品之间的 相似度，以评估色谱指纹图谱
的一致性和可靠性。
03
色谱指纹图谱的解析

中药指纹图谱研究课件

中药指纹图谱研究课件
中药指纹图谱的建立，应以系统的化学成分和 药理学研究为依托，应体现系统性、特征性、重现性 三个基本原则。
系统性：
“系统性“是指指纹图谱所反映的化学成分应包 括中药有效部位所含大部分成妥的种类，或指标成分 的全部。 如：中药人参中所含的有效成分多为皂苷类化合物， 则其指纹图谱应尽可能多地反映其中的皂苷成分；银 杏叶中的有效成分是黄酮和银杏内酯类，则其指纹图 谱可采用两种方法针对这两类成分，分别分析，以达 到系统、全面的目的。
药物研究的主要内容包括药物安全性、有效性、 稳定性和可控性，四者缺一不可。
已生产并临床使用的注射剂等中成药，由于经 过了药效学测试、临床评价，安全性与有效性没有， 但是，现有的质量控制方法的不全面性及生产过程中 的不稳定性导致各批次产品之间质量出现差异，在临 床应用过程中往往出现非正常的医疗事故。
指纹图谱研究的直接目的有两个方面： （1） 对中药质量控制的补充和提高。
（1） 薄层扫描流程
点样
洗脱展开
扫描检测 数据处理
（2） 薄层扫描仪主要部件 典型的薄层扫描仪主要由机械扫描装置和数据处理两部分
组成，新型的薄层扫描仪配有自动点样器等。 （3） 主要厂家及仪器型号 日本岛津CS系列；美国Schoeffel SD3000等。 2.2.2 高效液相色谱仪
2 2.2.3 气相色谱仪
（2） 紫外可见分光光度法和红外光谱法 这两种方法能够给出药效物质基础的结构信息
，但所给出的信息是所有化学物质结构结构信息的加 和，不具备指纹特征，但可作为中药指纹图谱研究的 辅助方法。
（3） 近红外光谱法 此方法与红外光谱法原理相同，但检测时采用近红外波
长，所给出的信息是所有化学物质结构信息的加和，通过一系 列样本的检测（必须预先知道样品中相关成分的含量或样本的 定性归属），运用化学计量学手段，建立了样本与信息之间的 数学模型。运用该模型即可对未知样本（如：新近购进的原药 材或新生产的成品等）进行辨别分析（给出结果：合格与否、 含量多少等）。

中药指纹图谱(课件)


分离效果好
GC利用气体作为流动相，能够实现中药中挥发性成分的快速、 有效分离。
分析速度快
GC分析周期短，适用于中药中大量样品的快速分析。
灵敏度高
GC检测器灵敏度高，能够检测到中药中微量的挥发性成分。
薄层色谱法（TLC）
操作简便
TLC操作简便易行，无需特殊设备，适用于中药指纹图谱的初步 分析。
分离效果好
感谢您的观看
THANKS
1 2 3
色谱柱选择
根据中药样品的成分特点，选择合适的色谱柱类 型及规格，确保各成分在色谱柱上得到良好的分 离。
流动相选择
根据样品的溶解性和色谱柱的特性，选择合适的 流动相组成及比例，以获得良好的色谱峰形和分 离效果。
色谱条件优化
通过调整流动相的流速、柱温等色谱条件，进一 步优化色谱分离效果，提高指纹图谱的准确性和 稳定性。
03
常见中药指纹图谱类型及 特点
高效液相色谱法（HPLC）
分离效能高
重复性好
HPLC采用高效微粒固定相，能够实现 中药复杂体系中各组分的有效分离。
HPLC方法稳定可靠，重复性好，能够 满足中药指纹图谱的批量化分析需求。
灵敏度高
采用高灵敏度的检测器，能够检测到 中药中微量甚至痕量的有效成分。
气相色谱法（GC）
指导工艺改进
根据生产工艺稳定性评 价结果，可以指导工艺 改进和优化，提高生产 效率和产品质量。
05
中药指纹图谱在真伪鉴别 中应用
伪品识别与防范策略
伪品定义及危害
阐述伪品概念，分析伪品对 中药市场及患者用药安全造 成的严重影响。
常见伪品类型
列举常见的中药伪品，如以 次充好、掺杂使假、品种混 淆等。

指纹图谱(PPT)

分布：主产云南文山、砚山、马关等地，广西 靖西、百色以及广东部分地区有产。
1年生
2年生
3年生
4年生
5年生
6年生
三七主根
其中云南省文山州占80%以上， 种植面积约5万亩，分布于文山 砚山、马关、麻栗坡、西畴等
三七药材资源分布图
三七GAP种植基地
化学成分研究：
已分离成分： 人参皂苷（ginsenoside）-Rb1、Rd、Re、
HO
O glc
20(S) 20( R)
notoginsenoside 8 notoginsenoside 9
glcO OH
OOH
HO
Oglc
notoginsenoside R10
HO
O glcO
OH
Oglc
glcO OH
notoginsenoside R1
OCH3
HO
HO Oglc
notoginsenoside R12
第三部分、三七系列中药注射剂指纹图谱研究及 相似度计算软件的试用。
研究单位：
中国药科大学 中国药品与生物制品检定所 中科院昆明植物研究所 广西药品检验所 上海市药品检验所 云南省药品检验所 广东省药品检验所 黑龙江省药品检验所 北京禾普康天然药物技术开发有限公司
研究的主要内容
➢ 三七药材GAP情况 ➢ 指纹图谱方法学研究 ➢ 三七药材指纹图谱研究、三七总皂甙生
500 400 300 200 100
0 0
10
20
mAU 500
VWD1
A,
(SANQI\A2112502.D)
Wavelength=203
nm
400
300
200

指纹图谱

气相色谱：通常使用毛细管柱，要注明色谱柱类型、 长度、内径、老化条件、载气、流速、柱温、柱头 压力、进样方式、进样口温度、检测器等。
＊选择试验方法及试验条件须根据供试品的特 点和需要设计合适的试验方案，在保证专属 性、重现性的前提下，宜选择简单、实用、 便于实施的方法和试验条件。
＊色谱中的参照峰由于作用不同于含量测定， 提高其分离度应以不牺牲色谱泊整体特征为 前提，所以不应孤立地苛求分离度必需达到 含量测定的要求。
中药材指纹图谱 质量控制及仪器方法
江苏省中医药研究院 钱大玮 段金廒
一、中药材指纹图谱的基本含义
定义：中药材指纹图谱是指某种(或某产地） 中药材中所共有的，具有特征性的某类 或几类成分的色谱或光谱的图谱。
特点：(1)通过指纹图谱的特征性,能有效鉴 别样品的真伪；
(2)通过指纹图谱主要特征峰的面积和比 例的制定，能有效控制样品质量，保证 样品质量的相对稳定。
2 应用实例
图9 黄连TLC指纹图谱
（六）高效毛细管电泳（HPCE）指纹图谱
1. 仪器简介
仪器装置通常包括高压电源、进样系统、 毛细管柱、检测器和记录系统5部分,其中毛细管 柱是分离的核心部分。
2. 应用实例
图 10 天麻及其伪品HPCE图 a天麻水提液 b天花粉水提液 c黄精水提液 d 商陆水提液e大九股牛水提液
（九）质谱（ MS）指纹图谱
将中药提取液置质谱仪中进行电子轰击 电离，可获得提取液中化学成分的MS图，不 同中药提取液所含成分不同，所得质谱图显 示的分子离子峰及进一步的裂解碎片峰亦不 一致，可资鉴别。但质谱法对提取液中主要 成分的含量要求较高，实验费用亦较大，能 否作为常用的检测方法尚待继续探索。
版一部119页红花项下的各项规定。

中药的指纹图谱名词解释

中药的指纹图谱名词解释中药指纹图谱是指一种通过一系列分析技术，对中药药材进行综合评价的方法。

它以图谱的形式展示中药药材的化学成分特征，并用来判断中药的质量和真伪。

本文将对中药指纹图谱中的几个重要名词进行解释。

1. 指纹图谱指纹图谱是通过分析中药中特定成分的含量和组合特征等，通过一系列实验和技术手段形成的图谱。

它是一种对中药进行快速鉴别和定性定量的方法。

指纹图谱中的指纹是指具有一定特征的中药成分，在图谱上呈现出独特的峰谱或图像。

2. 质量控制质量控制是中药指纹图谱的核心内容之一，其目的是保证中药的质量稳定和一致性。

通过分析中药指纹图谱，可以对中药的成分进行定性定量分析，以判断中药的纯度、真伪和质量是否符合规定要求。

这对于确保中药的疗效和安全性至关重要。

3. 成分鉴别成分鉴别是指通过中药指纹图谱分析中药的化学成分，以判断中药的种类和品质。

中药中的主要活性成分对中药的药效起到决定性作用，因此准确地鉴别中药的成分是评价中药质量好坏的重要指标。

中药指纹图谱通过分析中药中的特定成分，可以对中药的成分进行鉴别和评价。

4. 匹配度分析匹配度分析是指将待测中药样本与已知的标准物质进行对比和匹配的分析方法。

通过计算待测样本与标准物质在指纹图谱上的相似性，可以判断样本的真伪和质量。

匹配度分析是评价中药指纹图谱的重要手段之一，也是判断中药质量的重要依据。

5. 符合度评价符合度评价是指通过对中药指纹图谱结果进行定量分析和评价，以得出中药样本的质量水平。

通过计算中药指纹图谱与标准指纹图谱之间的相似性，可以评价中药样本所含成分的含量和组合特征是否符合规定要求。

符合度评价是评价中药质量好坏的重要方法之一。

总结：中药指纹图谱是一种对中药药材进行综合评价的方法，可以通过分析中药的化学成分特征来判断中药的质量和真伪。

对中药指纹图谱中的关键名词进行解释，有助于加深对中药指纹图谱的理解和应用。

质量控制、成分鉴别、匹配度分析和符合度评价是中药指纹图谱中的重要内容，对于保证中药的质量和疗效具有重要意义。

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核磁共 振仪
X射线衍射指纹图谱
X射线的波长和晶体内部原子面之间的间距相近，晶 体可以作为X射线的空间衍射光栅，即一束X射线照射到 物体上时，受到物体中原子的散射，每个原子都产生散 射波，这些波互相干涉，结果就产生衍射。物质组成， 晶型、分子内成键方式、分子的构型等决定该物质特有 的衍生图谱。 对中药而言，其组成成分是固定的某些化合物，当 收到X射线照射后产生的图谱是各混合物各组分衍射效应 的叠加。药材质量的稳定，其衍射图谱可以作为该混合 物的特征图谱。
指纹特征
质量稳定性评价结果 方法学考察：重现性、稳定性、精密度
光谱法
光谱法主要包括红外光谱 (IR)、紫外光谱(UV) 和荧光光 谱(AFs)等3种方法。其中IR和UV是目前常用的2种用于中药指 纹图谱建立的方法。这2种方法对于成分简单的单昧药材具有 良好的鉴别效果，但由于其加和性，对于较为复杂的中药制剂 难以准确判断。
色谱法
目前用于构建中药指纹图谱的色谱法主要有薄层色谱 法 (TLC) 、高效液相色谱法 (HPLC) 、气相色谱法 (GC) 、 高效毛细管电泳法(HPCE)和高速逆流色谱指纹图谱法 (HSCCC)等
薄层色谱法(TLC)
TLC是利用中药成分性质上的差异经过薄层分离后相对位移值的不同进行鉴别的 一种方法。该方法具有操作简单，分析速度快，成本低等优点，适用于不同种类药 材指纹图谱的构建。使用该方法只需要选取好薄层色谱展开剂，分离样品后即可获 得直观的图谱图像。但是由于薄层板质量的差异和色谱系统的开放性等外界因素的 影响，导致薄层色谱法的精确性和重现性比较差．所以现在薄层色谱法的应用较少
。
高效薄层色谱法是指利用特殊材质的薄层板和展开技术来提高薄层色谱的灵敏 度和准确度，从而有效提高构建指纹图谱的效率。
薄层板
毛细管电泳（CE）
是色谱与电泳结合发展的产物。又称高效毛细管电泳（ high performance capillary electrophoresis HPCE），是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电 场为驱动力的新型液相分离技术。高效毛细电泳法的工作原理是利用高压直流电场 推动中药样品在毛细管中运动，由于样品中各组分的淌度和分配行为的不同，导致 不同组分在毛细管中产生运动上的差异，从而实现分离的一种技术。 优点是分离效率高、快速、适用面宽，模式多样且易于变换，运行费用低，无环境 污染。特别适用于成分复杂的中药材和带电离子的分析。将其运用于中药的指纹图 谱的研究，已取得可观的成绩。但利用电泳机制在毛细管中进行分离使得该方法的 精确性和灵敏度较低，所以目前的使用并不是很广泛。
中药起药效的是有效物质群在发挥作用，不同的配伍将引起有效物质群 的该变。这种群体的变化可通过指纹图谱这种形式反映或表现出来。控 制好指纹图谱就可以获得良好的药效、稳定的质量和最佳的生物利用度。
中药指纹图谱的构建原则：
构建原则
系统性
特征性
稳定性
可操作性
中药指纹图谱的构建方法
中药化学指纹图谱
中药化学指纹图谱系指 采用光谱、色谱和其他 分析方法建立以表征中 药化学成分特征的指纹 图谱 光谱指纹图谱构建最常 用的是红外光谱（ IR ） 色谱最 常 用的是 TLC 、 GC、HPLC和CE
质 谱 法（MS）
质谱分析是一种测量离子质荷比（质量-电荷比）的分析方法，其基本 原理是使试样各组分在离子源中发生电离，生成不同荷质比的带电荷的离子， 经加速电场的作用，形成离子束，进入质量分析器。在质量分析器中，再利 用电场和磁场使发生相反的速度色散，将它们分别聚焦而得到质谱图，从而 确定其质量。 中药各成分分子在质谱仪中被裂解为不同的碎片，其成分不同则其图谱 显示的碎片峰也不同，因而可以鉴别化学成分。MS一般都和色谱仪连用，常 见的有GC-MS、HPLC-MS、HPLC-UV-MS、LC-MS、HPLC-MS。
2.色谱条件
色谱柱：Apollo C8(250 mm×4.6 mm，5µL)；流动相：A甲醇，B 0.5％冰醋酸，梯度洗脱；流速：1.0 ml/min；柱温：30℃；检测波长：254 nm；进样量：5µL。
3.试品溶液的制备
取甘草药材粉末(过60目筛)约0．5 g，置于10ml量瓶中，加入适量甲醇超声提取(250 W，40 Hz)30min， 放冷加甲醇定容至10ml，摇匀，静止，取上清液经0．45斗m微孑L膜过滤，即得。
常见的中药指纹图谱的指标参数评判标准有直观标准法、量化数据对比法、计 算机图谱解析技术等，其中计算机图谱解析技术发展较为技术，解析的方法也比较 多，如模糊信息分析法、人工神经网络法、聚类分析法及化学计量学等。
直比较，但这种方法不仅要求有标准图 谱，而且标准图谱库还要有足够的容量，要能涵盖大多的中药标准图谱。 即引入指数、重叠率、八强峰、表观丰度等量化数据进行比较。与直观 对比法进行相比，此法更客观、准确。但是，面临的问题就是如何建立 大量的标准数据库。
6.2共有指纹峰面积的比值
6.3相似度计算
对于中药复杂体系及多靶点的作用而言，指纹图谱比单一指标成分更能从整体上 反映该产物的药效质量。目前所谓的构效图谱，只不过是“活性提取物”的色谱 指纹图谱。能否在研究天然产物有机化学成分指纹图谱的同时，获得这些有机活 物质的活性作用通路，并同时发现活性先导化合物，构建“有机成分活性指纹图 谱”，就需要发展中药指纹图谱的活性标识技术。
构建方法
中药生物指纹图谱
中药生物指纹图谱包括中 药基因组学指纹图谱中药 蛋白质组学指纹图谱和中 药材DNA指纹图谱
构建指纹图谱的主要步骤
样品采集
方法建立
数据分析
样品评价
方法检验
中药样品处理
指纹图谱构建程序
预处理（提取分离）
测试样品
色谱分析
色谱图
对应关系 计算机图谱解析、处理
构效
指纹图谱
质量稳定性评价
量化数据 对比
模糊信息分析法
1. 特征提取 2. 依照某种方式确定该中药指纹特征对“真 模式、假模式”的隶属度 3. 用最大从属原则或阀值原则确定中药的真 伪
计算机图谱解析技术
人工神经网络法
模拟人脑功能的全新信息处理方法，其理论 是神经网络的数学模型
聚类分析法
是利用在多维空间的相对位置，将样本分为 两个或多个集团的算法，属于无人管理分类
毛细管电泳仪及色谱图
HPLC高效液相色谱法
HPLC高效液相色谱法是在经典液相色谱的基础上发展而成的。HPLC利用了气相色谱的理论和 方法。其工作原理是依据中药中各成分在展开剂和固定相之间分配系数的不同进行分离。HPLC受样 品本身和外界干扰的影响较小，非常适合用于中药指纹图谱的构建。HPLC具有仪器化程度高、分析 速度快、色谱柱可反复使用等优点，目前已成为指纹图谱研究的主要方法，应用十分广泛。 高效液相色谱法有“三高一广一快”的特点：
主要用于化合物结构的鉴定和含量的测定。由 于中药所含成分的不饱和度是有区别的，其紫外吸 收曲线形状、峰位、峰强均有所不同，因此可以用 来鉴别药材。但紫外光谱是电子光谱，形状变化不 大，有时不同的化合物有相似的图谱，专属性差。 故紫外光谱较少的应用于指纹图谱。
苯的紫外光谱
红外光谱法（IR）
在有机物分子中，组成化学键或官能团的原子 处于不断振动的状态，其振动频率与红外光的振动 频率相当。所以，用红外光照射有机物分子时，分 子中的化学键或官能团可发生振动吸收，不同的化 学键或官能团吸收频率不同，在红外光谱上将处于 不同位置，从而可获得分子中含有何种化学键或官 能团的信息。 对单一组分或混合物中各组分也可以进行定量 分析，尤其是对一些较难分离并在紫外区、可见区 找不到明显特征峰的样品，可以方便、迅速的完成 定量分析。 红外光谱的优点：1.指纹性 2.对样品的要求 较低 3.可操作性较强 红外光谱在中药质量控制方面的应用： 1.中药材质量的监控 2.中药材生产过程质量的监控 3.中成药质量的监控
荧光光谱分析法 （AFS）
AFS的基本原理是蒸汽状态的原子因吸收能量而跃迁至高能态，并在这个过程 中发射出具有固定波长的荧光。
中草药因大多含有发光性组分而具有特征的荧光光谱。因此可利用发光标记、 被测物本身发光性质、分子组装、能量转移原理等分离鉴定药物有效成分。如中药 材的荧光鉴定、中药注射液等的药物鉴别、以及荧光分析及其连用技术用于测定中 药有效成分。
〈1〉高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载 液加高压。 〈2〉高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱 的分离效能高出许多倍。 〈3〉高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在µL数量级。 〈4〉应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、 强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。
中药饮片指纹图谱
中成药指纹图谱
初级中药指纹图谱即常见的中药质量控制方法，是以保证中药的品
质为目的。重点是测定方法的建立、有效成分和控制指标的确定
高 中药药理 药效 级 阶 药动 段 生物等效性
高级阶段的指纹图谱研究多采用多仪器连用，如GC-MS（气象色谱-质谱连用）、
LC-MS（液相色谱-质谱联用）等方式，获取多维信息数据，寻找最佳药效相关指纹图谱， 指导实践，从而保证药品最终品质
紫外光谱法（UV）
紫外光谱法，是测定物质分子在紫外光区吸收 光谱的分析方法。紫外吸收光谱是物质吸收紫外光 后，其价电子从低能级向高能级跃迁，产生吸收峰 形成的。并非所有的有机物质在紫外光区都有吸收， 只有那些具有共轭双键（π 键）的化合物，其π 电 子易于被激发发生跃迁，在紫外光区形成特征性的 吸收峰。
中药指纹图谱构建及 质量评价技术
姓名：曹瑞致 学号：2015051655 专业：中药学
中药指纹图谱的构建 中药指纹图谱的活性标识 中药指纹图谱的评价技术
中药指纹图谱研究中的关 键问题