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泥鳅Qin_2002_The-Journal-of-Nutritional-Biochemistry

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Protectiveeffectofpolysaccharidefromtheloachontheinvitroandinvivoperoxidativedamageofhepatocyte

ChuanguangQina,b,KaixunHuanga,HuibiXua*aPharmaceuticalInstitute,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,430074,Wuhan,P.R.China

bDepartmentofBioengineering,HubeiPolytechnicUniversity,430068,Wuhan,P.R.China

Received13July2001;receivedinrevisedform18February2002;accepted29March2002

AbstractMisgurnusanguillicaudatuspolysaccharide(MAP),atypeofnaturalneutralpolysaccharideoccurringinthemucusofMisgurnusanguillicaudatusC.,wasstudiedforantioxidantbioactivity.ThepreliminaryresearchshowedthatMAPwasabletoremoveO2•៮,HO⅐,H2O2andotheractivecompoundsofoxygenandsignificantlyprotectedDNAchainsfrombeingdamagedbyhydroxylradicals.Thisantioxidant

bioactivitywasfurtherevaluatedusingthemodelofperoxide-inducedoxidativeinjuryinratprimaryhepatocytesandhepatotoxityinmice.TheresultsdemonstratedthatMAP,attheconcentrationsof0.10ϳ0.40mg/ml,significantlyincreasedtheactivityofSODandGSH-px,butdecreasedtheconsumptionofreducedglutathioneandtheformationofmalondialdehydeinducedbya30-mintreatmentofH2O2(2.0

mmol/L).TheinvivoinvestigationshowedthatoralpretreatmentofMAP(100,200and300mg/kg)for7daysbeforeasingledoseoft-BHP(0.2mmol/kg,ip)significantlyloweredtheserumlevelsofhepaticenzymemarkers(alanineandaspartateaminotransferase)andreducedoxidativeliverinjury.ThehistopathologicalevaluationoftheliverrevealedthatMAPreducedtheincidenceofliverlesionsincludinginflammatory,leukocyteinfiltration,andnecrosisinducedbyt-BHPinmice.Basedontheresultsdescribedabove,aconclusioncanbedrownthatMAPmayplayanimportantroleinthepreventionofoxidativedamageinlivingsystems.©2002ElsevierScienceInc.Allrightsreserved.

Keywords:Misgurnusanguillicaudatuspolysaccharide;loach;liverinjury;lipidperoxidation;hepatoxicity

1.IntroductionThemucuscoatoffishskincontainsavarietyofsecre-tionsfromepidermalgobletcellsandepithelialcells.Thesesecretionshavebeenimplicatedinmanyimportantbiolog-icalfunctions[1].Theloach(Misgurnusanguillicaudatus)haslongbeenemployedastraditionalChinesemedicineinfolkremediesforthetreatmentofhepatitises,osteomyeitis,carbuncles,inflammationsandcancers[2].Somevertebratelectinswerepurifiedfromtheskinmucusoreggoftheloach(Misgurnusanguillicaudatus)andfoundtoinducereleaseofcytotoxinfromfreshmurinebonenarrowcellsormacrophagesandlysetumorcellsbutnotnormalspleencells[3–6].Anovelantimicrobialpeptidenamedmisgurin,whichconsistsof21aminoacidresidues,fromtheloachwasisolatedandidentified[7].Thecarbohydratecomposi-tionsoftheskinmucusofseveralspeciesoffishwasexaminedandfoundthatthesialicacidsinloachconsistedpredominantlyof2-keto-3-deoxy-D-glycero-D-galacto-nononicacid(KDN).Adeaminatedneuraminicacid-con-tainingglycoproteinfromtheskinmucusoftheloach,Mis-gurnusanguillicaudatus,wasisolatedandcharacterized[8].Misgurnusanguillicaudatuspolysaccharide(MAP),akindofneutralfreepolysaccharide,wasextractedfromthemucusoftheloach(Misgurnusanguillicaudatus).Thepre-liminaryresearchshowedthatMAPwasabletoremoveO2•៮,HO⅐,H2O2andotheractivecompoundsofoxygenandsignificantlyprotectedDNAchainsfrombeingdamagedbyhydroxylradicals[9].ThepresentstudywascarriedtoexaminewhetherMAPcouldprotecttherathepatocytesagainsttheoxidativedamageinducedbyhydroperoxideinvitro.TheprotectiveeffectofMAPagainstinvivoliverinjurycausedbyt-BHPwasalsoinvestigated.

*Correspondingauthor.Tel.:86-27-87543532;fax:86-27-87543632.E-mailaddress:hbxu@mail.hust.edu.cn(H.Xu).ListofAbbreviations:ALTϭalanineaminotransferase;ASTϭas-partateaminotransferase;t-BHPϭtert;butylhydroperoxide;GPCϭgelpermeatechromatography;GSHϭreducedglutathione;GSH-Pxϭglu-tathioneperoxidase;LDHϭlactatedehydrogenase.MAPϭMisgurnusanguillicaudatuspolysaccharide;MDAϭmalondialdehyde;OPTϭo-phthaldialdehyde;SODϭsuperoxidedimutase.

JournalofNutritionalBiochemistry13(2002)592–5970955-2863/02/$–seefrontmatter©2002ElsevierScienceInc.Allrightsreserved.PII:S0955-2863(02)00193-62.Materialsandmethods2.1.ChemicalsThiobarbituricacid(TBA),tert-butylhydroperoxide(t-BHP),glutathione(GSH),o-phthalaldehyde(OPT),Seph-adexG-100and5,5Ј-dithiohydroxyl-2,2Ј-dinitrobenzoxicacid(DTNB)werepurchasedfromSigmaCo.(StLouis,MO,USA).1,1,3,3-tetraethoxylpropane(TEP)andpyrogal-licacid(PA)weresuppliedbyFlukaChemicalCo.Pullulanstandards(P-112000,P-47300,P-22800,P-11800,P-5900,P-2700)wereboughtfromJapan.Kitsforaianineamino-transferase(ALT),aspartateaminotransferase(AST)andlactatedehydrogenase(LDH)wereobtainedfromInstituteofJianchengBioengineering(Nanjing,P.R.China).Me-diumforcellcultureandotherreagentsordisheswereorderedfromtheChinesesuppliers.2.2.PreparationofMAP2.5kgofliveloaches(Misgurnusanguillicaudatus,weight8Ϯ1.5g,length8.5Ϯ2cm,obtainedfromthemarketinWuhan.)werefirstimmersedin2.5Lofcleantap-waterandaeratedfor24hratroomtemperature.Then,afterbeingsupersonicatedfor1hronanultrasonicshaker(modelSB2200,Shanghai,China),theloacheswerere-movedbyfiltration.Thesupersonicationandfiltrationarenotfatal.Theextractwascentrifugatedat0°Cand8,000rpmfor10mininacentrifugalmachine(modelRS-2III,TomySeikoCo.,Tokyo,Japan),andsubsequentlyconcen-tratedto1/3volumeinvacuum.Theresiduewasextractedwith50ml/timeSevagreagent,CHCl3-nBuOH(V/Vϭ4:1)3timestodeproteinize.AfterremovingtheSevagreagent,4timesthevolumeofabsolutealcoholwasaddedtothewaterphaseandkeptat4°Covernightinarefrigeratortoprecipitatecarbohydratecompounds.AfterfilteringwithaBuchnerfunnelinvacuumandwashingwithabsolutealco-hol,thesedimentwasfrozenat-79.5°Covernightinasuperlow-temperaturefreezer(NUAIRE,Japan),andlyophilizedtoobtain7.5gofwhitepowderpreparation.Qualitativetestsshowthatthissedimentpreparationcontainingfreereductivepolysaccharides.Ithadcolor-reactionwithphe-nolsinsulfuricacidorwith3,5-dinitrosalicylicacid,butnocolor-reactionwithninhydrinorbiuretreagent.Aportionofthedriedsedimentpreparation(2g)washomogenizedwith100mlofhotdistilledwater,andafteraddingtoit50mlofanhydrousethanol,putintoarefrig-eratorandkeptat4°Covernight.TheMAPsedimentwasseparatedbycentrifugationat10,000rpm,washedwithanhydrousethanolfor3timesfrozenandlyophilizedtoyieldfineMAP(300mg).TheMAPwasfurtherpurifiedonaSephadexG-100gelcolumn(1ϫ50cm),usingHAc-NaAcbuffersolution(pH5)aseluentatthemobilerateof0.1ml/min.Thefractionsweredetectedbythephenol-sulfuricacidmethod.TheelutingcurvegaveasinglepeakandsuggestedthatMAPwaspurified.Thecontentoftotalsugarwas95.7%.

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两种泥鳅中PdSox8和PdSox9基因的染色体定位

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常重杰;周荣家;余其兴
【期刊名称】《遗传学报：英文版》
【年(卷),期】2000(27)5
【摘要】应用染色体原位杂交技术，以地高辛标记的大鳞副泥鳅ＰｄＳｏｘ８和
ＰｄＳｏｘ９基因片段为探针，研究了二者在泥鳅和大鳞副泥鳅染色体组中的定位。

结果表明，在大鳞副泥鳅中ＰｄＳｏｘ８和ＰｄＳｏｘ９分别位于端部着丝粒染色体第４和第２号即ｔ４和ｔ２染色体上，信号位点距着丝粒的相对距离分别为４０．２％和６７．５％；在泥鳅中，则分别位于ｔ９和ｔ６上，信息位点距着丝粒的相对距离分别为５８.３％和３０.８％。

【总页数】6页(P377-382)
【关键词】泥鳅;大鳞副泥鳅;基因定位;染色体原位杂交;SOX
【作者】常重杰;周荣家;余其兴
【作者单位】河南师范大学生命科学学院;武汉大学生命科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】Q959.403;Q953
【相关文献】
1.小麦中定位于黑麦6R染色体上一个线虫抗性基因的缺失图定位 [J],
IanS.Dandas;向平;等
2.两种白斑小鼠突变基因的染色体定位 [J], 薛整风;陈兵;茅慧华;邵义祥;吴宝金;李
厚达
3.两种泥鳅中PdSox8和PdSox9的RFLP分析 [J], 常重杰;周荣家;余其兴
4.两种泥鳅中Sox基因的检出 [J], 周荣家;常重杰;等
5.ZFX基因同源序列在黄鳝基因组中的检出及其染色体定位(英文) [J], 戢福云;余其兴;郑从义
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转基因鱼的构建及检测

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万方数据
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农业生物技术学报
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基因开始的。首例报道的转基因鱼是导入人生长激 !"#$$$获$得目的基因
素（ #$%）基因，启动子是 &’()*&#道不断增加 ， ),-./"+ 有的导入牛生长激素基因 合适的目的基因。侧翼调控序列包括位于基因编码
步筛选出整合了外源基因的实验鱼；再用 12345678 杂交法确认真正整合的转基因鱼；最后采用 $27459 678 杂交法证实转录 :0$% 的鱼，并用放射免疫法 确定其表达情况。 %"&$$整$ 合了外源基因受体鱼的筛选
从注射了外源基因的受体鱼中筛选出整合了外 源基因的鱼，为以后进一步检测外源基因的整合和 表达缩小检测鱼的数量。具体操作如下：
用常规微量注射法注入金鱼受精卵内，获得转抗冻 以上外源基因拷贝的外源生长激素基因。显微注射
蛋白基因金鱼。但从目前的研究来看，转基因鱼中 后，受体卵在 %14J5H:J:H 溶液中发育，胚胎发育至原
BCD 的量还不足以产生抗冻的效果，因此在今后的 肠期后，将培养液逐渐用曝气的冷开水稀释，直至心
研究中要提高启动子的增强效应，或者增加基因导 跳期之后胚胎完全在曝过气的冷开水中培育成鱼
农业生物技术学报 C,D1-793,>3EF18/D90D1793G8,0./H-,9,FI3333?@@?J%$3（3 B）： ’$(K’%%
转基因鱼的构建及检测 L
杨 弘 吴婷婷 夏德全 LL
（ 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心，无锡 ?%B$M%）
33·3 专家论坛·
摘 要 ：转 基 因 鱼 技 术 是 鱼 类 育 种 的 重 要 方 法 之 一 。 介 绍 了 外 源 基 因 的 克 隆 、转 基 因 鱼 的 构 建 及 其 检 测 ，并 指 出 在 进 行 鱼 类 转基因研究中需注意的一些问题：克隆合适的启动子是保证外源基因在转基因鱼中有效表达的重要因素；构建“ 全鱼”基因则 是今后发展的方向，受到越来越多的关注；显微操作技术仍是构建转基因鱼的主要方 法 ；在 转 基 因 鱼 的 检 测 中 ，应 注 意 转 基 因 嵌合体的问题。
二倍体和四倍体泥鳅全基因组DNA甲基化的比较

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二倍体和四倍体泥鳅全基因组DNA甲基化的比较张曼曼;冯兵;罗双双;王卫民;周小云【期刊名称】《华中师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2018(037)005【摘要】以二倍体和四倍体泥鳅为研究对象,采用甲基化修饰依赖性内切酶测序技术(MethylRAD-Seq)在全基因组水平上分析泥鳅的DNA甲基化特点及倍性间的DNA甲基化变异.测序结果共得到302111684条Methyl-RAD序列标签.与参考基因组比对结果显示,泥鳅的甲基化位点主要分布在基因体区(gene body),其次为内含子区(intron)和基因间区(intergenic),而在其他功能元件上的分布较少.四倍体泥鳅的整体甲基化水平比二倍体高,尤其是在第一外显子区(1stExon)和转录起始位点上游1500 bp至200 bp区(TSS1500),且倍性间差异极显著(P<0.01).但在启动子区,四倍体泥鳅的甲基化水平略低于二倍体.在二倍体和四倍体泥鳅间共筛选到1268个差异甲基化Cm CGG位点和14个差异甲基化Cm CWGG位点,这些位点主要分布于内含子、基因体和基因间区.比较各基因的甲基化水平,共得到684个倍性间差异甲基化基因.KEGG分析结果显示,倍性间差异甲基化基因主要富集到与生长发育、免疫及错配修复等相关通路上.【总页数】9页(P95-103)【作者】张曼曼;冯兵;罗双双;王卫民;周小云【作者单位】华中农业大学水产学院/农业动物遗传育种与繁育教育部重点实验室,武汉 430070;华中农业大学水产学院/农业动物遗传育种与繁育教育部重点实验室,武汉 430070;华中农业大学水产学院/农业动物遗传育种与繁育教育部重点实验室,武汉 430070;华中农业大学水产学院/农业动物遗传育种与繁育教育部重点实验室,武汉 430070;华中农业大学水产学院/农业动物遗传育种与繁育教育部重点实验室,武汉 430070【正文语种】中文【中图分类】Q959.46+8【相关文献】1.二倍体和四倍体泥鳅染色体组型比较 [J], 印杰;赵振山;陈小奇;李艳秋;朱丽亚2.四倍体泥鳅、二倍体泥鳅和大鳞副泥鳅营养成分分析 [J], 印杰;熊传喜;李圣华;张红云;朱勇夫3.二倍体、四倍体泥鳅与大鳞副泥鳅杂交子代DNA相对含量与染色体组型的比较[J], 方礼豹;周小云;崔蕾;阎里清;王卫民4.二倍体与同源四倍体茅苍术基因组DNA甲基化水平与模式的MSAP分析 [J], 王红娟;巢建国;李雅婷;李颖硕;向增旭5.二倍体和四倍体泥鳅IGFBP-1基因的表达及其与DNA甲基化的相关性 [J], 张曼曼;高泽霞;冯兵;罗双双;曹文怡;周小云因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

饥饿和再喂食对泥鳅生化组成的影响

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饥饿和再喂食对泥鳅生化组成的影响吴立新;蔡勋;陈炜【期刊名称】《生态学杂志》【年(卷),期】2006(25)1【摘要】研究了泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)在18±0.5℃下,饥饿20 d和恢复喂食8 d的生化组成变化。

结果表明,在饥饿初期,泥鳅鱼体的脂肪和蛋白质含量均明显地下降,饥饿15 d后,脂肪的降低量减少并趋于稳定,而蛋白质的含量则进一步显著降低。

这表明在饥饿过程中,泥鳅首先动用机体的脂肪和蛋白质提供能源,饥饿至一定程度后则主要利用蛋白质。

恢复喂食后这两种物质的含量均迅速回升,其中恢复喂食5 d后,脂肪和蛋白质的含量均达到初始水平。

水分和灰分在饥饿过程中呈上升趋势,恢复后便开始下降;饥饿20 d后,鱼体的饱和脂肪酸含量基本保持不变,而多不饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸含量分别有一定的增加和降低,另外n-3系列脂肪酸含量升高,而n-6系列脂肪酸几乎不变。

【总页数】4页(P101-104)【关键词】泥鳅;饥饿;再投喂;生化组成;脂肪酸【作者】吴立新;蔡勋;陈炜【作者单位】大连水产学院农业部海洋水产增养殖学与生物技术重点开放实验室【正文语种】中文【中图分类】S917【相关文献】1.饥饿和再投喂对漠斑牙鲆生化组成的影响 [J], 陈雷;姜志强;吴丹2.周期性饥饿再投喂对大菱鲆幼鱼生长、生化组成和能量收支的影响 [J], 阿荣;吴立新;姜志强;李滑滑;陈炜;李洪宇;倪晨华;金康;3.周期性饥饿再投喂对大菱鲆幼鱼生长、生化组成和能量收支的影响 [J], 阿荣;吴立新;姜志强;李滑滑;陈炜;李洪宇;倪晨华;金康4.饥饿后再投喂对星斑川鲽生化组成以及能值的影响 [J], 孙向军;梁拥军;张升利;苏建通;尤宏争;姜志强5.饥饿和再投喂对白斑狗鱼生长性能和生化组成的影响 [J], 杜劲松;高攀;胡建勇;牛建功;时春明;黄永平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。