脂联素

脂联素在肥胖有关的肝脏疾病中的作用摘要：非酒精性脂肪肝（NAFLD）包括肝脏脂肪变态、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）以及肝纤维化等常见的肝脏疾病。

内脏肥胖是NAFLD中一个重要的危险因素，脂肪细胞中过多的储存甘油三酯及高浓度的游离脂肪酸水平会增加肝脏脂肪的堆积、胰岛素抵抗进而对肝脏造成损害。

多数脂肪组织分泌的蛋白在肥胖状态下显著升高，可能会引起组织的炎症的产生及肝脏损伤。

人体血清中存在大量的脂联素，然而肥胖患者体内血清脂联素水平会有所下降，尤其是肥胖伴有肝脏脂肪变态或者NASH的患者血清脂联素水平更低。

脂联素激动剂将过量的脂质储存于肝脏中从而避免炎症和纤维化的产生。

此文主要将脂联素对NAFLD及肝脏保护作用方面内容做一综述。

关键词：肝脏脂肪变态；非酒精性脂肪肝炎；脂联素；肥胖；脂肪组织肥胖为2型糖尿病、心血管疾病、肝脏脂肪变态和非酒精性脂肪性肝炎（NASH）中的重要的危险因素之一，与体内胰岛素抵抗紧密相关[1]。

肥胖所引起的脂肪细胞过度肥大因而无法储存过多的甘油三酯，继而脂质异位在骨骼肌和肝脏内从而影响胰岛素的信号途径[2]。

体内脂肪的分布比脂肪组织的总量更为重要，其中内脏脂肪的大小与胰岛素抵抗和非酒精性脂肪肝病（NAFLD）紧密相关[3]。

脂联素是一类由脂肪细胞分泌的脂肪因子，在人体血清中大量存在，与人体的体重指数呈反向相关。

流行病学研究显示，低脂联素水平与NASH患者有着密切的联系，且独立于患者的胰岛素抵抗性和机体指数；动物实验和离体肝脏细胞实验也证实脂联素具有肝脏保护的作用[4]。

超重患者但胰岛素敏感性正常者与体重正常的对照者具有类似的体内循环脂联素水平，尽管他们有过重的体重和机体脂肪，因此，这种联系进一步说明了脂联素对机体具有保护性作用[5]。

本文就其对肝脏脂肪变态和肝炎的保护作用作一综述。

脂联素在非酒精性脂肪肝中的全身分布循环中脂联素浓度一般在μg/ml的范围内，为血浆蛋白中重要的组成成分之一，而且其浓度水平在血清中也比较稳定。

脂联素的检测意义检测方法：LC-MS/MS送检要求：样本采集：早晨7:30-10:30用EDTA抗凝管（紫帽管）空腹采血，成人4ml，儿童2ml。

采血时根据医嘱要求坐位或卧位采集相应血液样本。

样本保存：样本采集后应及时分离血浆（离心条件:×1000g，5-10分钟），装入冻存管并冷冻避光保存待检。

48h内全程冷冻避光运输至实验室。

注意事项：①采血前患者准备：抽血前1天应以清淡饮食为主，避免抽烟，禁止喝酒，避免熬夜。

应提前半小时到采血地点静坐或站立等待采血，避免剧烈运动及情绪激动后采样。

当日采血前停用激素治疗药物。

②拒收样本：非EDTA抗凝血浆。

激素在人体内含量低，结构相似物多，甚至有同分异构体存在。

传统的免疫学技术因检测方法的局限性，易受多因素干扰，其灵敏度和特异性较低。

质谱技术可以准确识别化合物小分子，检测浓度可达ng 级、pg级甚至fg级，大大提高了检测的灵敏度和特异性。

2013年美国内分泌学会在临床内分泌与代谢杂志（Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism）发表声明，宣布自2015年开始只接受质谱方法检测激素的研究结果，这无疑肯定了质谱方法在内分泌激素检测中的重要性。

金域采用Waters UPLC I-Class-TQ-S建立的液相色谱质谱方法特异性高，可实现11-脱氧皮质醇、21-脱氧皮质醇、皮质酮的色谱分离和17-羟孕酮、11-脱氧皮质酮的色谱分离；检测范围宽和灵敏度高，如雌酮、雌二醇、雌三醇、睾酮、双氢睾酮检测下限可至50pg/ml，检测上限可至20000pg/ml。

检测下限可同时实现男性中雌激素和女性中雄激素的检测，检测上限也能满足男性中雄激素和女性特殊时期中雌激素的检测。

建立的方法不仅满足了很好的灵敏度，而且实现了优良的特异性，充分发挥了液相色谱串联质谱在激素检测中的优势。

脂联素水平测定的临床意义肥胖（肥胖儿童，肥胖成人，内脏肥胖）评估肥胖的程度和类型，监测肥胖的发生和发展，预测II型糖尿病和动脉粥样硬化的发生和发展以及判断肥胖的预后是早期干预的目标，也是减肥效果的指标，并可以用于监测药物引起的肥胖症（抗精神病药）。

葡萄糖代谢异常，脂质代谢异常，胰岛素抵抗脂联素的变化在预测心血管疾病风险方面比葡萄糖代谢紊乱和脂质代谢紊乱更早，这是胰岛素敏感性的评价指标之一，也是胰岛素抵抗发生和发展的重要标志。

代谢综合征作为特征标记之一，它可用于预测疾病的发生和发展，并观察疾病的动态。

它是干预治疗的目标。

II型糖尿病它是儿童II型糖尿病的预测，早期诊断，鉴别诊断，预后和治疗的重要标志。

它用于监测II型糖尿病及其并发症的发生和发展，并作为II型糖尿病及其并发症的治疗靶标。

第一代糖尿病患者中II型糖尿病的早期指标。

冠状动脉心脏疾病冠心病的发生，发展和严重程度的监测指标可用于预测冠心病的状况，诊断冠心病和评估治疗效果。

高血压严重程度判断的新指标是糖代谢异常的原发性高血压的特征指标。

它也可用于判断原发性高血压患者的左心室舒张功能和左心室肥大。

它是高血压肥胖症治疗的目标。

心血管疾病它是预测心血管事件发生的重要指标。

急性心肌梗塞的发生和发展，动态观察指标；急性脑梗塞的发生预测，病情变化和预后判断，脑梗塞的治疗目标；预测不稳定型心绞痛的发生和治疗目标，对心绞痛患者的动脉粥样硬化疾病发展进行预测；慢性心力衰竭的治疗目标；动脉粥样硬化的替代指标（脂联素和动脉僵硬度），内膜中层厚度或狭窄程度。

多囊卵巢综合征疾病发展的长期指标之一。

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征疾病监测和治疗的目标。

肝病脂肪肝，非酒精性脂肪肝的治疗目标，肝纤维化的可能目标。

肾脏疾病它是预防和干预多种肾脏疾病中心血管疾病的指标。

妊娠预测早产，监测妊娠高血压的发生和发展，预测妊娠先兆子痫，预测和评估妊娠糖尿病。

瘤子宫平滑肌瘤治疗的一个指标，乳腺癌发生和发展的监测指标。

脂联素研究进展脂联素(adiponectin)是脂肪细胞分泌的一种脂肪细胞因子，为一种多肽激素，具有多种生理作用。

研究发现，脂联素与遗传因素、胰岛素抵抗综合征的各因素及内皮功能有明显相关性，与冠心病、胰岛素抵抗、高脂血症、2型糖尿病和肥胖等疾病密切相关。

1 脂联素的发现、结构、基因与遗传1.1 脂联素的发现脂联素为脂肪组织分泌的脂肪因子之一，1995年由scherer等[1]首先从鼠的脂肪细胞中分离出来，因其与补体C1q有很近的同源性，且相对分子质量为30×103的蛋白质，故命名为ACRP30[1]；1996年Hu等从鼠脂肪细胞中克隆出cDNA,将其命名为AdipoQ；同年，Maeda等[2]在人脂肪细胞中得到ACRP30及AdipoQ的类似物，因其为脂肪组织含量最为丰富的基因转录产物，故称其为apM-1[2]；同年，Nakano等在人血浆中提纯出apM-1基因编码的蛋白质，为一种相对分子质量为28×103的明胶结合蛋白，称其为GBP28；1999年Arita等将其命名为脂联素。

1.2 结构与功能脂联素属于可溶性防御性胶原家族成员，含有244个氨基酸，一级序列分析提示其包含4个功能区：18个氨基酸的信号肽、23个氨基酸组成的氨基端非螺旋功能区、一段22个胶原重复序列和137个氨基酸组成的羧基端的球形功能区。

球形区脂联素(globuar adiponectin，gAacrp-30)有比脂联素更为广泛而活跃的生物学作用。

脂联素具有多种重要的生理功能，主要为：(1)作为一种胰岛素超敏化激素促进骨骼肌细胞的脂肪酸氧化和糖吸收，加强胰岛素的糖原异生作用，抑制肝糖元生成，调节脂肪酸氧化、糖代谢，为机体脂质代谢和血糖稳态调控网络的重要调节因子；(2)通过抑制血管细胞粘附分子(VCAM)及细胞间粘附分子(ICAM)在人类主动脉内皮细胞(HAECs)的表达，抑制动脉粥样硬化斑块的形成；(3)通过抑制巨噬细胞前体细胞的生长与抑制成熟巨噬细胞的功能调节炎症反应等。

人脂联素（ADPN)酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。

本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理，来检测人脂联素（ADPN)，只能用于研究用途，不得用于医学诊断。

用途：用于人血清、血浆及相关液体样本中脂联素（ADPN)的测定。

工作原理本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中人脂联素（ADPN)的水平。

向预先包被了人脂联素（ADPN)单克隆抗体的酶标孔中加入脂联素（ADPN)，温育；洗涤后，加入HRP标记过的脂联素（ADPN)抗体。

再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅与样品中人脂联素（ADPN)的浓度呈正相关。

试剂盒组成需要而未提供的试剂和器材1．37℃恒温箱。

2．标准规格酶标仪。

3．精密移液器及一次性吸头4．蒸馏水，5．一次性试管6．吸水纸注意事项1．从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。

酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。

3．建议所有标准品、样本都做双份检测。

如标本中待测物质含量过高，请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再按说明书操作进行测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

4．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

5．为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

6．不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前使用。

7．底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

洗板方法手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。

根据需要，重复此过程数次。

自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

标本要求1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

脂联素水平测定的临床意义肥胖（肥胖儿童、肥胖成人、内脏肥胖）评估肥胖程度和类型，监测肥胖的发生和发展，预测II型糖尿病和动脉粥样硬化的发生发展，判断肥胖的预后是早期干预的目标，是减肥的指标，可用于监测（抗精神病药）引起的药物性肥胖。

糖代谢异常、脂代谢异常、胰岛素抵抗脂联素的变化比糖代谢紊乱和脂质代谢紊乱在预测心血管疾病风险方面早。

这是胰岛素敏感性的评价指标之一，是胰岛素抵抗发生发展的重要指标。

代谢综合征作为一种特征性指标，可用于疾病的发生和发展预测，观察疾病的动态。

这是干预治疗的目的。

II型糖尿病它是儿童2型糖尿病的预测、早期诊断、鉴别诊断、预后及治疗的重要指标。

它用于监测Ⅱ型糖尿病的发生发展及其并发症，并作为治疗Ⅱ型糖尿病及其并发症的靶点。

第一代糖尿病患者Ⅱ型糖尿病的早期指标。

冠心病冠心病的发生、发展和严重程度的监测指标可用于预测冠心病的病情，诊断冠心病，评价治疗效果。

高血压新的判断严重程度的指标是高血压合并糖代谢异常的特征指标。

同时也可用于原发性高血压患者左室舒张功能和左室肥厚的测定。

高血压和肥胖是治疗高血压和肥胖的靶点。

心血管疾病预测心血管事件的发生是一个重要的指标。

急性心肌梗死的发生发展、动态观察指标；急性脑梗死的发生、病情变化及预后判断、脑梗死治疗目标；不稳定型心绞痛发生与治疗目标的预测，心绞痛患者动脉粥样硬化的发病预测；慢性心力衰竭的治疗目标；动脉粥样硬化替代指标（脂联素和动脉僵硬）、内膜中层厚度或狭窄程度。

多囊卵巢综合征疾病发展的长期指标之一。

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征疾病监测和治疗的目标。

肝病脂肪肝、非酒精性脂肪肝治疗目标、肝纤维化可能的目标。

肾病它是多种肾脏疾病心血管疾病防治的指标。

怀孕预测早产，监测妊娠高血压的发生和发展，预测妊娠先兆子痫，预测和评估妊娠糖尿病。

肿瘤子宫平滑肌瘤治疗的指标，乳腺癌发生发展的监测指标。

脂联素受体与心肌泵功能于洪馗(90403134) 叶红强(90403133) 聂杰(90403122) 孙翔宇(90403125) 口腔第一组摘要：心肌泵功能的损害与多种因素相关联，不外乎分为血流动力学因素和能量代谢因素。

脂联素受体作为介导脂联素生物学功能的重要受体，参与了对上述两因素的调节，对预防和改善心血管疾患，保持人体能量代谢的稳态有积极意义。

脂联素及其受体可以成为治疗心血管疾病和代谢疾病的靶点。

关键词脂联素受体；心肌梗死；动脉粥样硬化；能量代谢脂联素(adiponectin)是一种脂肪因子，它与高血压、动脉粥样硬化、糖尿病、代谢综合症有很高的相关性。

低脂联素血症作为心血管疾病的独立危险因子，已经越加受到重视。

其受体是2003年被克隆的[1]。

脂联素及其受体，从影响血液动力学，改善机体对能量代谢，调解心肌泵功能方面发挥了重要的作用。

1、脂联素受体1.1结构2003年Yamauchi等克隆出两种脂联素受体, 并命名为AdipoR1 和AdipoR2 (adip onectin receptor 1/2) [1]。

二者作为7次跨膜膜整合蛋白，与G蛋白偶联受体完全不同，C端位于膜外有结构域与脂联素相互作用，N端位于膜内与一种称为APPL的接头蛋白相连接[2]。

APPL不但介导AdipoR1/2的下游生物学效应，而且也与胰岛素受体有相互作用[3]。

T-cadherin虽然也可以与脂联素结合[4]，但由于其缺乏胞内结构域无法介导生物学功能，便不能成为脂联素发挥直接效应的重要受体。

1.2功能Yamauchi T通过对脂联素受体表达量的调节，得到以下结论。

AdipoR1可以：1)抑制糖异生相关蛋白的表达，如葡萄糖-6-磷酸酶、磷酸烯醇式丙酮酸脱羧酶等；2) 抑制肝脂肪变相关酶的表达，如：固醇调节元件结合蛋白-1；3) A dipoR1下游过程是由AMPK途径介导[5]。

AdipoR2可以：1)增强糖的配送，增强葡萄糖激酶表达；2) 增强PPAR alpha下游的基因转录，如：乙酰辅酶A氧化酶、解偶联酶，使脂肪酸氧化加强，肝内甘油三酯水平下降。