不同防腐剂对3种模式腐败菌抑菌效果的比较
- 格式:pdf
- 大小:141.85 KB
- 文档页数:5
浓度增加面加强,当其浓度达到1.0%左右时,抑菌效果随浓度增加增加效
果不明显。
茶多酚对三种菌均表现出较强的抑制作用,在浓度为0.05%时茶多酸对大肠杆菌和假单胞菌已有较强的抑制作用,对金黄色葡萄球菌抑制不明显。
随浓度增加,茶多酚对金黄色葡萄球菌的抑制效果显著增加,而对别外两株菌的抑制效果变化不显著。
Nisin对大肠杆菌的抑菌效果在浓度由0.02%增加至0.04%过程中存在加大跃迁;浓度在0.04%~0.10%之间时,抑菌圈直径增加缓慢;Nisin对大肠杆菌和假单胞菌无抑菌圈产生,说明Nisin对这两种菌无抑制作用,因为这两种菌为革兰氏阴性菌,而Nisin只能够抑制革兰氏阳性菌。
4 结论
本实验研究了ε-聚赖氨酸、壳聚糖、茶多酚和Nisin四种天然保鲜剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和假单胞菌的抑制效果,通过MIC实验和最佳抑菌效果实验发现四种保鲜剂对三种代表菌的抑制效果各不相同,其中ε-聚赖氨酸、壳聚糖和茶多酚表现出较好的抑菌效果,Nisin较差。
1。
研究微生物防腐剂对不同食品中的细菌的抑制效果微生物防腐剂在食品保鲜和消费者健康方面起着重要的作用。
不同食品中存在着不同种类的细菌,因此研究微生物防腐剂对这些细菌的抑制效果具有重要意义。
本论文将首先介绍微生物防腐剂的定义和分类,然后探讨其在不同食品中的应用,最后对其抑制效果进行评估。
一、微生物防腐剂的定义和分类微生物防腐剂是指能够抑制或杀灭食品中微生物的化学物质。
根据其来源和化学结构的不同,微生物防腐剂可以分为天然防腐剂和化学合成防腐剂两类。
1. 天然防腐剂:天然防腐剂主要来源于动植物和微生物,包括天然抗菌多肽、抗菌酸、酚类化合物等。
它们具有较好的抗菌活性和安全性。
2. 化学合成防腐剂:化学合成防腐剂是人工合成的化合物,包括苯甲酸类、硝酸盐、亚硝酸盐等。
这些化学合成物具有高效的抑菌活性,但有些化学合成防腐剂可能存在潜在的毒性和对人体健康的危害。
二、微生物防腐剂在不同食品中的应用微生物防腐剂广泛应用于不同类型的食品中,包括肉制品、乳制品、果蔬制品、粮食制品等。
1. 肉制品:在肉制品中,微生物防腐剂可以有效地抑制肉制品中的细菌滋生,防止肉制品变质。
常用的微生物防腐剂包括硝酸盐和亚硝酸盐。
2. 乳制品:乳制品容易受到细菌的污染,因此需要使用微生物防腐剂来保持其保质期和品质。
常用的微生物防腐剂包括乳酸菌和益生菌。
3. 果蔬制品:果蔬制品中的细菌易导致发酵和腐败,因此需要微生物防腐剂进行保鲜。
常用的微生物防腐剂包括山梨醇和抗菌多肽。
4. 粮食制品:粮食制品易受到真菌污染,导致霉变。
微生物防腐剂可以有效地抑制真菌的生长,并延长粮食制品的保质期。
常用的微生物防腐剂包括丙酸类和脂肪酸类。
三、微生物防腐剂对不同食品中细菌的抑制效果评估对微生物防腐剂的抑制效果评估通常通过测定微生物的生长曲线、菌落计数和性状观察等方法进行。
1. 生长曲线:通过监测细菌在含有微生物防腐剂的培养基中的增殖情况,可以得到细菌生长的速度和程度。
蜂胶与三种化学防腐剂抑菌性能的比较高建新;卢兆芸;薛琳;龙慧;肖菊珍;倪贤生【期刊名称】《中国消毒学杂志》【年(卷),期】2008(25)3【摘要】目的研究蜂胶与某些化学防腐剂的抑菌性能及其稳定性。
方法采用肉汤稀释法和定量抑菌试验法,对蜂胶及三种化学防腐剂抑菌性能进行比较观察。
结果蜂胶对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和黑曲霉菌的最低抑制浓度依次为7.8、31.25和31.25 g/L。
苯甲酸钠对金黄色葡萄球菌最低抑制浓度为62.5 g/L,山梨酸和山梨酸钾对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和黑曲霉菌的最低抑制浓度达到125 g/L以上。
含10 g/L的蜂胶溶液对金黄色葡萄球菌作用10 min,抑菌率可达99.92%;对大肠埃希菌作用20 min,抑菌率仅为67.22%。
苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌作用20 min,抑菌率均达不到50%。
含量10 g/L蜂胶经55℃存放14 d,对金黄色葡萄球菌杀灭效果无明显下降。
结论蜂胶对细菌繁殖体和霉菌都有较强的抑菌作用,其储存性能稳定;蜂胶抑菌性能明显优于苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾等防腐剂。
【总页数】3页(P233-235)【关键词】蜂胶;苯甲酸钠;山梨酸;山梨酸钾;抑菌作用【作者】高建新;卢兆芸;薛琳;龙慧;肖菊珍;倪贤生【作者单位】江西省南昌市疾病预防控制中心【正文语种】中文【中图分类】R187.2【相关文献】1.纳米TiO2复合蜂胶与蜂胶抑菌效果比较 [J], 刘红华;玄红专2.食品防腐剂抑菌性能的量子化学研究 [J], 于辉3.虎奶菇抑菌物质与食品防腐剂抑菌活性的比较 [J], 林陈强;林戎斌;蔡海松;郑永标;林新坚;陈济琛4.三种天然防腐剂对五种常见微生物抑菌作用的研究 [J], 冯林慧;李迎秋;张鑫5.纳米TiO_2复合蜂胶与蜂胶抑菌效果比较 [J], 刘红华;玄红专因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
研究微生物防腐剂对不同食品中的细菌的抑制效果一直是食品科学领域的研究热点之一。
微生物污染是食品加工和储存过程中不可避免的问题,会导致食品变质,甚至引发食物中毒事件。
因此,寻找有效的微生物防腐剂对抗细菌污染,保障食品安全具有重要意义。
微生物防腐剂是一种被广泛应用于食品生产中的抗菌剂,具有抑制细菌、霉菌和酵母菌的生长和繁殖能力。
通过研究微生物防腐剂对不同食品中细菌的抑制效果,可以为食品生产企业提供科学依据,选择适合的防腐剂,延长食品的保质期,确保食品的质量和安全。
首先,我们需要了解不同食品中常见的细菌种类和污染程度。
食品中的细菌主要包括大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌等。
这些细菌会在食品加工、储存和运输的过程中产生污染,给食品安全带来潜在风险。
针对不同种类的细菌,需要研究不同种类的微生物防腐剂的抑制效果。
常见的微生物防腐剂包括乙酸、山梨酸、亚硝酸盐等。
这些抗菌剂在食品生产中被广泛使用,但不同的细菌对不同的防腐剂具有不同的敏感性,需要根据具体情况选择合适的防腐剂。
在研究微生物防腐剂对不同食品中的细菌的抑制效果时,需要考虑到食品的特性对防腐剂的影响。
不同的食品具有不同的组成成分和PH值,会对防腐剂的效果产生影响。
比如,乳制品和肉制品可能需要不同类型的防腐剂才能达到良好的抑菌效果。
此外,还应该考虑到微生物防腐剂的安全性和稳定性。
防腐剂在食品中的使用必须符合相关法规和标准,不能对人体健康造成危害。
同时,防腐剂在食品中的稳定性也是一个重要因素,只有在食品加工和储存过程中能够保持有效的抑菌效果,才能起到预防细菌污染的作用。
梳理一下本文的重点,我们可以发现,研究微生物防腐剂对不同食品中的细菌的抑制效果是一项复杂而重要的课题,需要综合考虑细菌种类、防腐剂类型、食品特性、安全性和稳定性等因素。
通过深入研究,可以为食品生产提供科学依据,保障食品的安全和质量,促进食品产业的健康发展。
三种食品防腐剂的抑菌效果研究一、本文概述本文旨在探讨三种常见食品防腐剂——山梨酸钾、苯甲酸钠和尼泊金乙酯的抑菌效果。
食品防腐剂在延长食品保质期、防止食品腐败和保障食品安全方面起着至关重要的作用。
然而,不同类型的防腐剂对不同种类的微生物具有不同的抑菌效果,因此,选择适合的防腐剂对确保食品质量和安全至关重要。
本文将通过实验室研究,比较这三种食品防腐剂在不同浓度下对几种常见食品腐败菌(如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和霉菌等)的抑菌效果。
研究将采用定量和定性分析方法,评估防腐剂的抑菌效能,包括最小抑菌浓度(MIC)的测定和抑菌圈的形成等。
通过本文的研究,期望能够为食品工业提供更准确、科学的防腐剂选择依据,以优化食品加工工艺,提高食品质量,保障消费者健康。
本文还将为食品防腐剂的研发和应用提供理论支持,推动食品科技的发展和进步。
二、实验材料与方法本实验选取了三种常见的食品防腐剂,分别为防腐剂A(具体名称)、防腐剂B(具体名称)和防腐剂C(具体名称)。
同时,选择了五种常见的食品腐败菌,包括细菌(具体名称)、细菌Y(具体名称)、霉菌Z(具体名称)、霉菌M(具体名称)和霉菌N(具体名称),以评估防腐剂的抑菌效果。
分别将五种食品腐败菌接种至相应的培养基中,于恒温摇床中培养至对数生长期,制备成菌悬液。
按照生产商推荐的浓度,分别将三种防腐剂溶解于无菌水中,制备成不同浓度的防腐剂溶液。
采用平板计数法,将不同浓度的防腐剂溶液与菌悬液混合,涂布于相应培养基的平板上,于恒温培养箱中培养一定时间后,观察菌落生长情况。
以未加防腐剂的菌液作为对照组。
统计各平板上的菌落数,计算各防腐剂对五种食品腐败菌的抑菌率。
利用统计软件对数据进行处理,分析不同浓度防腐剂对菌株生长的影响,并比较三种防腐剂的抑菌效果。
通过以上实验方法,我们将评估三种食品防腐剂在不同浓度下对五种食品腐败菌的抑菌效果,为食品工业选择合适的防腐剂提供参考依据。
三、实验结果与分析本研究采用了三种不同的食品防腐剂——A、B和C,并通过标准的抑菌实验方法,测定了它们在不同浓度下对三种常见食品腐败菌(菌种菌种2和菌种3)的抑菌效果。
三种防腐剂对大肠杆菌和白色葡萄球菌旳克制效果第二组组长:李爽182****5951;成员:颜同文、褚剑钶、雷聪、谢伟、胡雪丽摘要:目旳:研究三种防腐剂(丙酸钙、山梨酸钾、脱氢乙酸钠)对大肠杆菌和白色葡萄球菌旳抑菌效果。
措施:采用牛津杯培养测定不同防腐剂对大肠杆菌和白色葡萄球菌旳抑菌效果。
成果: 0.2%旳山梨酸钾对大肠杆菌旳克制效果好于对白色葡萄球菌旳克制效果,0.2%旳丙酸钙对白色葡萄球菌旳克制效果好于对大肠杆菌旳抑菌效果,0.2%旳脱氢乙酸钠对白色葡萄球菌旳克制效果好于对大肠杆菌旳抑菌效果。
结论:三种防腐剂对大肠杆菌和白色葡萄球菌旳克制效果有所差别,山梨酸钾对大肠杆菌旳克制效果更好,丙酸钙、脱氢乙酸钠对白色葡萄球菌旳克制效果好。
核心词:防腐剂;山梨酸钾;丙酸钙;脱氢乙酸钠;抑菌作用食源性疾病是发展中国家和发达国家旳首要食品安全问题,对人类健康危害严重,特别是对小朋友、孕妇和老人。
食品在生产和贮藏过程中,易受细菌性微生物感染而腐败变质,并导致食物中毒和食源性疾病影响人类健康。
采用防腐剂克制腐败菌与食源性致病菌是贮藏食品旳有效手段之一[1]。
常见旳食源性致病菌种类繁多,其中涉及革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
目前水产品中旳重要防腐剂有山梨酸钾,山梨酸钾[2]。
山梨酸钾作为一种不饱和脂肪酸,可在体内参与新陈代谢,最后被分解成二氧化碳和水,而几乎没有毒性[3],目前山梨酸钾已成为一种在全球范畴使用广泛旳化学防腐剂。
白色结晶性颗粒或粉末,无臭或略带轻微丙酸气味,对光和热稳定,易溶于水是一种安全性较好旳防腐剂。
丙酸钙对多种霉菌、需氧芽孢杆菌、革兰氏阳性杆菌有作用较强旳克制作用,对能引起食品发粘旳枯草杆菌效果尤为明显,对避免黄曲霉素旳产生有特效[4]。
脱氢乙酸钠是继苯甲酸钠、尼泊金、山梨酸钾之后又一代新旳食品防腐保鲜剂,对霉菌、酵母菌、细菌具有较好旳克制作用,广泛应用与饮料、食品、饲料旳加工业,可延长寄存期,避免霉变损失。
三种防腐剂的抑菌效果“蓝字”酱卤肉制品防腐保鲜是近年来研究的热点,中国食品添加剂国家标准中对酱卤肉制品允许添加防腐剂及限量作出明确规定,其中山梨酸钾 0.075g/kg,脱氢乙酸钠 0.5g/kg,ε-聚赖氨酸0.25g/kg。
酱卤肉制品中所添加所有防腐剂占相应限量的百分比之和不超过1。
除了一些广谱抑菌剂,部分防腐剂只是对特定菌有抑制作用,山梨酸钾和脱氢乙酸钠对细菌、酵母菌和霉菌均有一定抑制作用。
从国标规定的防腐剂中选择三种防腐剂。
研究抑菌剂对指示菌抑菌效果,根据防腐剂特性选择革兰氏阳性菌中的蜡样芽孢杆菌,革兰氏阴性菌中的大肠杆菌,还有酵母菌来作为指示菌进行抑菌试验,先进行单因素试验,从单因素试验中选择合适浓度进一步进行防腐剂复配试验从而获取较优组合,为以后酱牛肉保鲜奠定理论基础。
单因素试验结果显示,乳酸链球菌素、纳他霉素、ε-聚赖氨酸等天然防腐剂比亚硝酸钠、山梨酸钾等化学防腐剂有更好的抑菌效果,总体上随添加浓度增加,抑菌率增大。
0.2g/kg乳酸链球菌素对蜡样芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌率100%,0.06g/kg纳他霉素对酵母菌抑菌率100%,0.1g/kgε-聚赖氨酸对细菌抑菌率100%,对酵母菌抑菌率稍低,0.20g/kg脱氢乙酸钠对酵母菌抑菌率100%。
从经济高效上考虑,选择ε-聚赖氨酸、脱氢乙酸钠、山梨酸钾来进行正交试验。
正交试验通过极差和方差分析可得出主要因素和次要因素,对细菌的抑制主要影响因素是ε-聚赖氨酸。
对酵母菌的抑制主要影响因素是脱氢乙酸钠。
综合对细菌和酵母菌的抑菌效果,主要因素选取优水平,次要因素可以根据需要添加。
综合考虑优水平为 0.1g/kg ε-聚赖氨酸、0.20g/kg脱氢乙酸钠、0.015g/kg山梨酸钾。
文章来源:肉类工业。
不同防腐剂对3种模式腐败菌抑菌效果的比较陈南南1,徐 歆1,商丰才1,黄 琴1,陈有亮2,李卫芬1,*(1.浙江大学动物科学学院饲料科学研究所,教育部动物分子营养学重点实验室,浙江 杭州 310029;2.浙江大学动物科学学院动物产品加工实验室,浙江 杭州 310029)摘 要:目的:研究食品防腐剂对腐败菌的抑菌效果。
方法:采用微量稀释法测定不同防腐剂对藤黄微球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的最小抑菌质量浓度(MIC)。
结果:对于藤黄微球菌(G +),抑菌效果最好的是乳酸链球菌素(Nisin)与ε-聚赖氨酸,MIC 均为12.5μg/mL ;对于枯草芽孢杆菌(G +),抑菌效果最好的是丙酸钙、丁二酮、柠檬酸、柠檬醛和D -异抗坏血酸钠,MIC 均为6.25μg/mL ;对于大肠杆菌(G -),抑菌效果最好的是过氧化氢和丁二酮,MIC 均为25μg /mL 。
结论:不同防腐剂对3种模式腐败菌的抑制效果有所差异,应复配使用。
关键词:防腐剂;腐败菌;最小抑菌质量浓度;抑菌作用Comparative Study on Bacteriostasis of Different Preservatives for Three Typical Spoilage BacteriaCHEN Nan-nan 1,XU Xin 1,SHANG Feng-cai 1,HUANG Qin 1,CHEN You-liang 2,LI Wei-fen 1,*(1. Key Laboratory of Molecular Animal Nutrition, Ministry of Education, Institute of Feed Science, College of Animal Science,Zhejiang University, Hangzhou 310029, China ;2. Laboratory of Animal Product Processing, College of Animal Science,Zhejiang University, Hangzhou 310029, China)Abstract :Objective: The inhibitory effects of twenty-three food preservatives on three typical spoilage bacteria were evaluated and compared. Methods: The minimal inhibitory concentrations (MIC) of different preservatives for Micrococcus luteus ,Bacillus subtilis and E.coli were determined by micro-dilution assay. Results: Among the 23 tested food preservatives, Nisin and ε-poly-L -lysine had the best inhibitory effect on Micrococcus luteus (G + cocci), and their MICs were both 12.5 μg/mL. For Bacillus subtilis (G + bacillus), the best antimicrobials were calcium propionate, diacetyl, citric acid, citral and D -sodium isoascorbiate, presenting an identical MIC of 6.25μg/mL. As for E.coli (G - bacillus), hydrogen peroxide and diacetyl were the best preservatives, with an identical MIC of 25μg/mL. Conclusion: The bacteriostasis of various tested preservatives for the three typical spoilage bacteria is irregular and their combined use seems to be an approach for more effective bacteriostasis.Key words :preservative ;spoilage bacteria ;minimal inhibition concentration ;bacteriostasis中图分类号:TS202.3 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2011)01-0014-05收稿日期:2010-03-19基金项目:浙江省重大科研专项(2006C12066)作者简介:陈南南(1982—),男,硕士研究生,研究方向为微生物。
E-mail :chenjieweilai@*通信作者:李卫芬(1965—),女,研究员,博士,研究方向为微生物、酶工程与基因工程。
E-mail :wfli@zju.ed 微生物大量繁殖是引起肉制品腐败变质的最主要因素[1]。
为此,人们采用各种手段使微生物丧失活性、延缓或阻止其生长,从而延长肉制品的保藏期。
添加防腐剂是一种简单、有效的方法,因而被普遍采用。
当前,实际生产中使用的主要是化学合成防腐剂,包括苯甲酸、山梨酸、尼泊金酯(对羟基苯甲酸酯)、亚硝酸盐和硝酸盐等。
虽然它们具有较好的抗菌作用,但经长期研究发现,一些合成防腐剂具有诱癌性、致畸性和易引起食物中毒等问题,如用于肉类防腐和着色的亚硝酸盐可形成强致癌的亚硝胺类。
为此,人们将目光转向了同样能够抑制致病菌和腐败菌,但更安全的天然材料(如天然植物物质或食品级微生物的代谢产物)上,即生物型防腐剂,以代替化学防腐剂。
因此,开发高效、安全、稳定的天然防腐剂已成为防腐剂研究的重要方向。
近年来,将生物安全防腐剂应用于肉制品保鲜的研究取得了一定成果,应用较多的有乳酸链球菌素(N is in )、溶菌酶和壳聚糖等。
罗欣等[2]报道,在冷却牛肉的保鲜中,Nisin有显著的抑菌作用,细菌总数明显降低,且保鲜效果随Nisin添加量的增加而增强,其有效保鲜添加量为0.075g/kg。
白建[3]研究发现,使用溶菌酶并采用真空包装,冷却猪肉在保鲜15d时,色泽红润、挥发性盐基氮(TVB-N)值仍在一级鲜度的标准内,且肉样的pH值变化得到有效控制,保鲜效果较好。
兰凤英等[4]研究了壳聚糖涂膜对酱牛肉贮藏性能的影响,结果表明,对照组的酱牛肉在冷藏条件下安全存放期仅为3~4d,0.4%和0.6%壳聚糖的处理组可存放6d,而0.8%和1.0%壳聚糖处理组可延长至9d。
本实验拟采用微量稀释法测定23种食品防腐剂对藤黄微球菌(G+球菌)、枯草芽孢杆菌(G+杆菌)和大肠杆菌(G-杆菌)3种模式腐败菌的最小抑菌质量浓度(MIC),旨在为安全复配型防腐剂的研制提供实验依据。
1材料与方法1.1菌株与培养基藤黄微球菌(Micrococcus luteus)购自中国工业微生物菌种保存中心,改进型PCA(PCA+)培养;枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)本校教育部动物分子营养学重点实验室保存,甘露醇蛋卵黄多黏菌素琼脂(MYP)培养;大肠杆菌(Escherichia coli)由浙江大学动物科学学院方维焕教授赠送,LB琼脂培养。
上述菌株培养温度均为37℃。
1.2防腐剂脱氢醋酸钠、双乙酸钠、山梨酸钾、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金复合酯钠、丁二酮、柠檬酸、柠檬醛、苹果酸、D-异抗坏血酸钠及红曲色素(食品级)杭州大好家添加剂有限公司;乳酸钠、丙酸钙、30%过氧化氢(分析纯) 浙江大学设备科;乳酸链球菌素(Nisin,食品级) 浙江银象生物工程有限公司;硫酸鱼精蛋白(分析纯) 上海楷洋生物技术有限公司;ε-聚赖氨酸(分析纯) 北京东方瑞德公司;溶菌酶(食品级) 杭州中香化学有限公司;那西肽(食品级) 杭州汇能生物技术有限公司;壳聚糖(分析纯) 杭州华东医药股份有限公司;25%大蒜素(食品级) 浙江明珠动物保健品有限公司;96%蜂胶(食品级) 河北东盛蜂蜡厂。
1.3仪器与设备AB204-N普及型分析天平瑞士Mettler Toledo公司;722型分光光度计上海菁华科技仪器有限公司;电子数显恒温培养箱、恒温鼓风干燥箱上海新苗医疗器械制造有限公司;Multiscan MK3酶标仪芬兰Thermo公司;THZ-C-K 台式空气恒温振荡器江苏海门麒麟医用仪器厂;LDZX-30KBS立式压力蒸汽灭菌器上海申安医疗器械厂。
1.4方法1.4.1防腐剂母液的配制及其倍比稀释乳酸钠、脱氢醋酸钠、双乙酸钠、山梨酸钾、丙酸钙、丁二酮、柠檬酸、柠檬醛、苹果酸、D-异抗坏血酸钠、ε-聚赖氨酸、红曲色素和大蒜素溶液:称取1.28g试剂,无菌水溶解,定容至100m L,摇匀,4℃保存备用。
尼泊金乙酯、尼泊金甲酯、尼泊金复合酯钠和蜂胶溶液:称取1.28g试剂,无水乙醇溶解,定容至100mL,摇匀,4℃保存备用。
过氧化氢溶液:量取30%过氧化氢4.27mL,无菌水稀释,定容至100m L,摇匀,4℃保存备用。
Nisin、硫酸鱼精蛋白、溶菌酶和那西肽溶液:称取1.28g试剂,冰醋酸溶解,定容至100m L,摇匀,4℃保存备用。
壳聚糖溶液:称取1.28g甲壳素,稀盐酸溶解,定容至100m L,摇匀,4℃保存备用。
倍比稀释:取11支EP管,每管加入0.5mL无菌水,在第1管加入0.5mL母液,混匀,吸取0.5mL混合液至第2管,混匀,再吸取0.5mL混合液至第3管,如此反复操作直至第11管,质量浓度依次为6400、3200、1600、800、400、200、100、50、25、12.5、6.25μg/mL。
1.4.2菌液制备将3种腐败菌置于各自的选择性培养基上培养24h,用接种环挑取典型形态的供试菌落,接种于5mL LB液体培养基中,37℃,200r/min,培养2~6h至对数生长期。
取适量菌液,用L B液体培养基调整菌浓度至105CFU/mL。
1.4.3MIC测定无菌条件下,依次将不同防腐剂的各倍比稀释溶液按稀释度从低到高依次加入到无菌96孔板的第1列至第11列,每孔50μL,第12列为阳性对照,加等量无菌水。
随后每孔再加入50μL菌液,密封混匀。
此时,第1孔至第11孔防腐剂终质量浓度分别为3200、1600、800、400、200、100、50、25、12.5、6.25、3.125μg/mL。