不同培养时间和表皮生长因子浓度对猪卵母细胞体外成熟培养的影响.pdf
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卵母细胞体外成熟的影响因素乔利敏1,2 黄成定2 李向臣1 姚雅馨2 关伟军13 马月辉1(1中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100094 2甘肃农业大学动物科技学院兰州730070) 【摘要】随着哺乳动物体外受精、细胞核移植技术的不断深入,人们对成熟卵母细胞以及哺乳动物胚胎需求量日益增加,卵巢内丰富的卵泡资源是胚胎工程迅速发展的基础。
本文从卵巢因素、供体、体外培养条件和成熟培养液中添加成分等对卵母细胞IVM的影响进行了分析,为胚胎的体外生产提供理论基础和科研依据。
关键词:卵母细胞;体外成熟;影响因素 胚胎移植技术成熟与否是胚胎工程技术成败的基础,而卵母细胞体外成熟质量又是决定胚胎移植技术成功的关键。
IVM可以为体细胞核移植提供大量的受体细胞,也为体外受精提供大量的MⅡ期卵母细胞,因此IVM已经成为胚胎体外生产和体外受精的重要环节之一。
虽然近几年来在卵母细胞的体外成熟方面已经取得了飞速发展,但是卵母细胞的体外成熟还存在很多问题。
现就卵母细胞体外成熟的影响因素进行概述。
1 卵巢因素和供体对卵母细胞体外成熟的影响1.1 卵巢所处性周期的影响有学者研究表明,卵巢所处性周期阶段影响卵母细胞的成熟培养,在无黄体期卵巢上的卵母细胞比黄体期和黄体前期卵巢上卵母细胞成熟效果要好。
崔亚利等〔1〕根据卵巢上是否有明显突出卵巢表面的黄体,将卵巢分为黄体期和卵泡期,分别在两期卵巢上卵泡中抽取卵母细胞进行体外成熟培养发现,二者无统计学差异,但是卵泡期卵母细胞成熟培养效果(63.9%)较好,说明卵巢性周期阶段对卵母细胞体外成熟存在一定影响,但影响不大。
2000年郭继彤〔2〕对繁殖季节和非繁殖季节山羊卵母细胞进行研究发现,非繁殖季节可采集到比繁殖季节更多的可用卵母细胞,并且非繁殖季节的屠宰山羊卵巢卵母细胞成熟培养效果(74.1%)优于繁殖季节的屠宰山羊卵巢卵母细胞(67.7%)。
在非繁殖季节屠宰的山羊,几乎没有大卵泡的发生。
《生长因子和C型钠肽对山羊卵母细胞成熟及早期胚胎发育的影响》篇一摘要:本研究旨在探讨生长因子和C型钠肽对山羊卵母细胞成熟及早期胚胎发育的影响。
通过实验操作,分析不同处理条件下卵母细胞的成熟率和胚胎发育情况,为山羊繁殖技术提供理论依据和实践指导。
一、引言山羊作为重要的家畜之一,其繁殖效率和后代质量对于养殖业的发展具有重要意义。
近年来,生长因子和C型钠肽在动物生殖领域的研究逐渐受到关注。
它们通过调节生殖系统的生理过程,对卵母细胞的成熟及胚胎发育产生重要影响。
因此,研究生长因子和C型钠肽对山羊卵母细胞成熟及早期胚胎发育的影响,对于提高山羊繁殖效率和后代质量具有重要意义。
二、材料与方法1. 实验材料选用健康成年山羊作为实验动物,收集其卵母细胞;生长因子和C型钠肽购自生物试剂公司,其他试剂为分析纯。
2. 实验方法(1)卵母细胞的收集与处理从健康成年山羊的卵巢中收集卵母细胞,将其分为两组,一组作为对照组,另一组分别添加不同浓度的生长因子和C型钠肽进行处理。
(2)卵母细胞的成熟培养将处理后的卵母细胞置于培养液中,在特定条件下进行成熟培养。
(3)胚胎的体外培养与观察将成熟后的卵母细胞与精子共同培养,进行体外受精,然后观察并记录胚胎的发育情况。
三、实验结果1. 生长因子对山羊卵母细胞成熟及早期胚胎发育的影响(1)卵母细胞的成熟率在添加了生长因子的实验组中,卵母细胞的成熟率显著高于对照组(P<0.05)。
其中,适中的生长因子浓度对卵母细胞的成熟最为有利。
(2)胚胎的发育情况实验组中早期胚胎的发育率也显著高于对照组,且胚胎的质量较好。
2. C型钠肽对山羊卵母细胞成熟及早期胚胎发育的影响(1)卵母细胞的成熟率C型钠肽的添加对卵母细胞的成熟率也有一定的促进作用,但效果不如生长因子明显。
(2)胚胎的发育情况C型钠肽处理组的早期胚胎发育情况与对照组相比,无明显差异。
四、讨论生长因子和C型钠肽在山羊卵母细胞成熟及早期胚胎发育过程中发挥了重要作用。
卵母细胞体外成熟培养液的改良及研究卵母细胞体外成熟培养液是指能够模拟卵巢微环境,促进卵母细胞发育成熟的培养液。
由于其能够为体外受精提供条件,因此在体外受精辅助生殖技术中起着重要作用。
然而,传统的卵母细胞体外成熟培养液中存在一些问题,如成熟率低、不稳定性差等,因此有必要对其进行改良和研究。
首先,对于卵母细胞体外成熟培养液的改良方向,可以从以下几个方面入手。
1.组成成分的改良:可以优化培养液的蛋白质、激素和营养物质的组成,以提高卵母细胞的成熟率和质量。
例如,可以调整培养液中雌激素和孕激素的浓度和比例,以提高卵母细胞的发育和成熟。
2.pH值和温度的优化:培养液的pH值和温度对卵母细胞的成熟和发育起着至关重要的作用。
因此,可以通过优化这两个参数,提高卵母细胞的成熟率。
例如,可以将培养液的pH值调整到适合卵母细胞发育的范围内,同时将温度控制在适宜的范围内。
3.添加生长因子:生长因子在卵母细胞的成熟过程中起着重要的调控作用。
因此,可以添加适量的生长因子到培养液中,以提高卵母细胞的成熟率和质量。
4.寻找新的培养基:除了改良和优化传统的培养液外,还可以通过寻找新的培养基,进一步提高卵母细胞的成熟率和质量。
近年来,一些研究者已经发现了一些新的培养基,如基于胶原或蛋白质水凝胶的培养基,能够显著提高卵母细胞的成熟率和质量。
另外,卵母细胞体外成熟培养液的研究也是十分重要的。
通过对卵母细胞培养过程中的细胞生物学、分子生物学和遗传学等方面的研究,可以深入了解卵母细胞的成熟过程和分子机制,从而为卵母细胞的体外培养提供理论基础和指导。
总之,通过改良和研究卵母细胞体外成熟培养液,可以提高卵母细胞的成熟率和质量,促进体外受精辅助生殖技术的发展。