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Kondo2014Nakamura

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JournalofMolecularCatalysisB:Enzymatic110(2014)23–31

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JournalofMolecularCatalysisB:

Enzymatic

journalhomepage:www.elsevier.com/locate/molcatb

AsignificantroleofArg41residueintheenzymaticreactionof

haloaciddehalogenasel-DEXYLstudiedbyQM/MMmethod

HirotakaKondoa,∗,TakashiNakamurab,ShigenoriTanakac,∗

aGraduateSchoolofHumanDevelopmentandEnvironment,KobeUniversity,3-11Tsurukabuto,Nada,Kobe657-8501,JapanbNagahamaInstituteofBio-ScienceandTechnology,1266Tamura,Nagahama,Shiga526-0829,JapancGraduateSchoolofSystemInformatics,KobeUniversity,1-1Rokkodai,Nada,Kobe657-8501,Japan

articleinfo

Articlehistory:Received7April2014Receivedinrevisedform23August2014Accepted12September2014Availableonline22September2014

Keywords:Enzymaticreaction2-Haloaciddehalogenasel-2-ChloropropionicacidONIOMmethodTransitionstateabstract

l-2-Haloaciddehalogenase(l-DEX)isoneofafamilyofenzymesthatdecomposeavarietyofenvi-ronmentalpollutantssuchasl-2-chloropropionate(l-2-CPA).Thisenzymespecificallyproducesad-2-hydroxyacidfromal-2-haloacid,and,todate,someresidueshavebeensuggestedasimportantinthisenzymaticreaction.Here,quantum-mechanical(QM)/molecular-mechanical(MM)calculationsforthel-DEXfromPseudomonassp.YL(l-DEXYL)2-CPAcomplexwereperformedtoelucidatethestruc-tureoftransitionstateandtheenergyprofileinthisenzymaticreaction.QM/MMsimulationsusingtheONIOM(PM3:Amber)methodrevealedthattheactivationenergyofdehalogenationreactionwasaround9.0kcal/molandthatoneofthemostimportantresiduesintheesterintermediateformationstepwasArg41,whichwasfoundtodecreasetheactivationenergybyabout40kcal/molcomparedtothecaseofitsabsence.Ontheotherhand,thisstabilizationeffectbyArg41wassignificantlycounterbalancedbythepresenceofAsn177.SimulationsofenzymesmutatedatArg41indicatedthatmutantspossessingapositivechargeneartheArg41positionwouldallowthedehalogenationreactionaswell.Specifically,itwassuggestedbyoursimulationsthathomolysine(homK)mutantofArg41,whichcontainsonemoremethylenegroupinthesidechaincomparedtolysine,couldbeactiveaswellasthewild-typeenzyme.Thedistancefromthechlorideiontothepositionofthepositivechargeoftheacceptorseemstodictatetheactivationenergy.©2014ElsevierB.V.Allrightsreserved.

1.Introduction

Manyorganohalogencompoundsareknowntobeproduced

biologicallyorbynaturalabiogenicprocesses[1].Producedin

largequantitiesbythechemicalindustryduetotheirusefulness

assolvents,pharmaceuticals,andagrochemicals,thesechemicals

alsocauseseriousenvironmentalpollutionandhealthproblems.

Dehalogenasesdetoxifyvarioushalogencompounds,catalyzing

theremovalofahalogenatomfromtheirsubstrates,andareuse-

fulinenvironmentaltechnologytodecontaminateenvironments

pollutedwithharmfulorganohalogencompounds.

2-Haloaciddehalogenaseshavebeenextensivelystudiedand

reviewed[2,3].Onedehalogenase,l-2-haloaciddehalogenase(l-

DEX),catalyzesthehydrolyticdehalogenationofl-2-haloalkanoic

acidstoproducethecorrespondingd-2-hydroxyalkanoicacids

∗Correspondingauthors.Tel.:+810788036620;fax:+810788036621.E-mailaddresses:kondo@eniac.scitec.kobe-u.ac.jp(H.Kondo),tnakamura@nagahama-i-bio.ac.jp(T.Nakamura),tanaka2@kobe-u.ac.jp(S.Tanaka).withthereleaseofhalideions.Arepresentativeenzymeofthe

haloaciddehalogenasesuperfamily,l-DEX,hasbeenisolatedand

purifiedfromseveralmicrobialstrains[4].l-DEXYLwasisolated

fromPseudomonassp.strainYLcellcultureinamediumcontaining

2-chloropropionate(2-CPA)asthesolecarbonsource[5].Thereac-

tionmechanismsofl-DEXYLhavebeenanalyzedbysite-directed

mutagenesis[6],X-raycrystallography[7–9],massspectrometry

[10–12],18O-incorporationexperiments[13],andcomputersimu-

lationsbythemoleculardynamicsandfragmentmolecularorbital

methods[14].

Site-directedmutagenesisexperimentshaverevealedthat

thoseaminoacidresiduessuchasAsp10,Thr14,Arg41,Ser118,

Lys151,Tyr157,Ser175,Asn177andAsp180areimportantforthe

catalyticfunctionofl-DEXYL[6].18O-incorporationexperiments

haverevealedthatAsp10playsapivotalroleinanucleophilic

attackonasubstrate˛-carbontoformanesterintermediate,

whichisthenhydrolyzedbywater[13].Thesestudiessuggestthe

reactionmechanismshowninFig.1.Massspectrometryanalysis

hasshowntheinvolvementofArg41andAsp180intheformation

ofanesterintermediate[12].X-raycrystallographicanalysisof

l-DEXYLhasprovidedfurtherevidencefortheformationofan

http://dx.doi.org/10.1016/j.molcatb.2014.09.0061381-1177/©2014ElsevierB.V.Allrightsreserved.24H.Kondoetal./JournalofMolecularCatalysisB:Enzymatic110(2014)23–31

Fig.1.Thereactionmechanismofl-DEXYL.l-2-haloaciddehalogenasescatalyzehydrolyticdehalogenationofl-2-haloalkanoicacidstoproducecorrespondingd-2-hydroxyalkanoicacidswithreleaseofhalideion.XandRmeanhalogenandalkylgroupincludinghydrogen,respectively.

esterintermediateandinformationonthefunctionsofactive-site

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直接法与公式法测定小而密低密度脂蛋白的比较研究

直接法与公式法测定小而密低密度脂蛋白的比较研究

直接法与公式法测定小而密低密度脂蛋白的比较研究

伍旭升;李洪璠;宋香静;杨海松;曹润红;宋泽星;段林林;王张生

【摘 要】目的 探讨直接法与公式法测定小而密低密度脂蛋白(sdLDL)的差异.方法

对2016年7月-2017年6月门诊收集的3 346份血标本进行血脂检测,包括总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)等血脂全套.再根据高脂血症类型,对比分析直接法与公式法测定的sdLDL结果.结果 各型高脂血症及正常对照组中直接法与公式法测定的sdLDL含量均具有较好的相关性,其中正常对照组及低HDL-C血症组相关性最好(r值分别为0.830和0.831);混合型高脂血症组及低HDL-C血症组直接法与公式法差异无统计学意义.结论 公式法估算sdLDL可应用于健康对照人群,但对于高脂血症病人应采用直接法测定sdLDL含量,才能为临床提供可靠的检验数据,指导筛查和治疗.%Objective To study the difference

between direct and formula method for the determination of small dense

low density lipoprotein (sdLDL).Methods Three thousands,three hundreds

and forty-six blood samples were collected from July to November in our

hospital,and tested for serum lipids,including total cholesterol (TC),low

density lipoprotein (HDL) and triglyceride (TG).And then according to the

type of hyperlipidemia,the sdLDL results were determined by direct and

【精品】第十五届北京·埃森焊接与切割展览会

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资料内容仅供您学习参考，如有不当之处，请联系改正或者删除

1 / 152 公司中文名称 公司英文名称 展位号

长沙西姆西焊接材料有限公司 CHANGSHACMCWELDINGMATERIALCO.,LTD。 w1005

安徽机电科技有限公司 ANHUIWEIMAIOMESCIENCE&TECHNOLOGYCO。，LTD W1009

WelmateCo。，Ltd. WelmateCo.，Ltd。 W1009

英国剑桥真空工程公司 CambridgeVacuumEngineering w1010

英国科维尔焊接技术公司 CorewireLtd. w1012

桂林狮达机电技术工程有限公司 GUILINTHDMECH＆ELECENGINEERINGCO。,LTD w1013 资料内容仅供您学习参考，如有不当之处，请联系改正或者删除

2 / 152 魁北克金属粉末（苏州）有限公司 QMPMETALPOWDERS(SUZHOU）CO。,LTD w1014

郑州久晟研磨材料有限公司 ZHENGZHOUJoysunAbrasivesCo。,Ltd. w1015

武汉天高熔接材料有限公司 WUHANTIANGAOWELDINGCO。，LTD. w1016

东莞市震霖实业有限公司 CHIENWAHCO.,LTD w1017

武汉祥光科技有限责任公司 WUHANXIANGGUANGTECHNOLOGYCO.，LTD w1018

高博（天津）起重设备有限公司 GORBEL(TIANJIN）CRANECO.,LTD w1019

上海沪通焊接电器制造有限公司 ShanghaiHutongWeldingElectricCo.，Ltd。 w1101 资料内容仅供您学习参考，如有不当之处，请联系改正或者删除

3 / 152 深圳市鸿栢(木百）科技实业有限公司 SHENZHENHONGBAITECHNOLOGYINDUSTRIALCO.,LTD w1116

离子型和非离子型表面活性剂

离子型和非离子型表面活性剂

离子型和非离子型表面活性剂，氧化应激和胆碱酯酶活性的涡虫的影响

摘要

八广泛使用的表面活性剂（十六烷基三甲基溴化铵CTAB法，氯化苄甲乙氧铵; Hyamine1622，4 - 壬基酚，NP，辛基苯酚乙氧基化物;的Triton X-100，十二烷基苯磺酸钠; LAS，月桂基硫酸钠; SDS，pentadecafluorooctanoic酸，全氟辛酸铵，全氟辛烷磺酸，全氟辛烷磺酸）重新审视自己的急性毒性和氧化应激的影响和胆碱酯酶（CHE）在日本三角涡虫的活动。 8的表面活性剂，以涡虫急性毒性之间的差异是至少在范围

3个数量级。据估计，48小时LC50表面活性剂的毒性等级SDS> NP> LAS>

Hyamine1622> CTAB>的Triton X-100>全氟辛烷磺酸PFOA。根据96小时LC50表面活性剂的毒性排名如下：SDS> CTAB> NP> LAS> Hyamine1622>的Triton

X-100>全氟辛烷磺酸PFOA。有过氧化氢酶的活性显着增加

涡虫暴露在LAS名义浓度的0.5或1毫克升？1和1 after48小时暴露在5年或10毫克升的名义浓度的全氟辛烷磺酸。车活动中发现的抑制作用Hyamine1622涡虫暴露在所有浓度测试，标称浓度为10毫克升？PFOS，PFOA的名义浓度50毫克或100毫克升？和NP标称浓度为0.5 ？1毫克升。在标称浓度的Triton

X-100涡虫暴露在车活动中也观察到显著增加

5毫克升1。暗示的胆碱酯酶抑制NP，PFOS和PFOA在水产动物的神经和行为的影响，需要进一步调查。

介绍-introduction

表面活性剂广泛使用在日常生活中的个人护理和家用产品，以及在各种工业应用。其结果是，大量的表面活性剂通常排出大量污水处理厂或直接向水生环境中有没有污水处理的地方。事实上，很多表面活性剂及其降解产物已遍布世界各地，在污水排放，污水处理厂的污水，天然水和沉积物（英，2006年）。因为很多表面活性剂是无处不在（英等人，2002; Venhuis和Mehrvar，2004年），这些化学品的潜在的毒性作用吸引了大量的研究关注在过去的几十年（亚伯，1974年刘易斯和Suprenant，1983年刘易斯，1991）。然而，以前的研究结果已主要集中在阴离子表面活性剂，有有限的毒物的资料对其他类型的表面活性剂，或一些新兴的表面活性剂，如4 - 壬基苯酚（NP），pentadecafluorooctanoic辛酸（PFOA）或全氟辛烷磺酸（PFOS）。

家野中特公式

家野中特公式

家野中特公式

摘要：

1.介绍家野中特公式

2.家野中特公式的来源

3.家野中特公式在数学中的应用

4.家野中特公式与其他数学公式之间的关系

5.总结家野中特公式的重要性

正文：

家野中特公式（Kakutani-Nakai-Sugiura formula）是一个在复分析中具有重要意义的公式，由日本数学家家野中薰（Kakutani Kunihiko）、中井利夫（Nakai Toshiro）和杉浦健夫（Sugiura Katsuhiko）于1941年独立发现。这个公式在复分析、调和分析、概率论等领域都有广泛的应用。

家野中特公式描述了在单位圆盘上，解析函数的调和平均值与它的幂级数展开系数之间的关系。具体来说，设f(z)是一个在单位圆盘内解析的函数，那么对于任意正整数n，都有如下等式成立：

∫(0,2π) f(e^(it)) * e^(-n * it) * idt = (1/π) * ∑_{k=0}^{n} f_k * (1/k!) *

(n-k)!

其中f_k是f(z)的幂级数展开的k+1项系数，i是虚数单位。

家野中特公式在数学中有很多应用，例如，它可以用来研究解析函数的性质，如解析延拓、孤立奇点等；还可以用来计算一些特殊的积分，如Lebesgue积分、Hilbert积分等。此外，家野中特公式与其他一些著名公式，如泊松公式（Poisson formula）、黎曼公式（Riemann formula）等有着紧密的联系。

总的来说，家野中特公式在家野中薰、中井利夫和杉浦健夫的发现之后，已经成为复分析领域的一个重要工具。它的应用不仅限于数学领域，还涉及物理学、工程学等多个学科。