牛磺熊去氧胆酸胶囊质量一致性评价研究

HPLC法测定牛磺熊去氧胆酸胶囊的有关物质刘小双;蒲旭峰;欧世荣;杨蕊【摘要】目的：建立测定牛磺熊去氧胆酸胶囊有关物质的方法。

方法采用KromasilC18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5μm），流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钠溶液（磷酸调 pH 至3.0），梯度洗脱，检测波长205 nm，柱温30℃，流速1.0 mL/min，进样量50μL。

结果牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸分别在0.048~9.52µg/mL（r=0.9992）、0.051~101.00µg/mL（r=0.9998）、2.51~50.28µg/mL （r=0.9998）范围内与峰面积呈良好的线性关系，其定量限分别为2.489、3.671、126.597 ng；检测限分别为0.702、1.018、38.219 ng。

牛磺鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸平均回收率分别为102.12%、99.71%，RSD 分别为0.96%、0.62%（n=9）。

结论该方法简便准确、精密度和重复性良好，结果准确可靠。

【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2016(014)009【总页数】2页(P28-28,29)【关键词】牛磺熊去氧胆酸胶囊;有关物质;高效液相色谱法【作者】刘小双;蒲旭峰;欧世荣;杨蕊【作者单位】成都中医药大学药学院，四川成都611137;成都中医药大学药学院，四川成都 611137;成都欣捷高新技术开发有限公司，四川成都 610041;成都欣捷高新技术开发有限公司，四川成都 610041【正文语种】中文【中图分类】R282.710.5牛磺熊去氧胆酸（tauroursodeoxycholicacid，TUDCA）化学名是2-[[（3，5，7）-3α，7β-二羟基-24-氧代胆甾烷-24-基]氨基]乙烷磺酸二水合物[1]，其具有溶解胆固醇结石和保护肝细胞等生理功能。

牛磺熊去氧胆酸胶囊（商品名滔罗特）由BruschettiniS..r.I.（意大利贝司迪大药厂）研制，临床主要用于治疗胆囊胆固醇结石、原发硬化性胆管炎、原发胆汁性肝硬化等[2-5]。

牛磺熊去氧胆酸胶囊质量一致性评价研究牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholicacid,TUDCA)的化学名为2-[[(3,5,7)-3α,7β-二羟基-24-氧代胆甾烷-24-基]氨基]乙烷磺酸二水合物,其具有有效保护肝细胞、溶解胆固醇中结石等多项生理功能,在临床主要可用于治疗原发胆汁性肝硬化、胆囊胆固醇结石、慢性丙型病毒性肝炎和原发硬化性胆管炎等。

本课题的主要目的是研制与原研品质量一致的牛磺熊去氧胆酸胶囊,为了缩小与牛磺熊去氧胆酸胶囊原研品之间的差距,以质量源于设计(Quality by Design,QbD)为设计理念,该课题对胶囊处方研究、胶囊质量标准制定、胶囊自制品与原研品质量一致性研究等方面进行了考察,具体内容如下：1、牛磺熊去氧胆酸胶囊处方研究本实验以体外溶出度为评价指标,采用微晶纤维素、乳糖、药用淀粉、硬脂酸镁等材料制成牛磺熊去氧胆酸胶囊,考虑胶囊溶出度、有关物质、含量等相关因素,设计优化了牛磺熊去氧胆酸胶囊的最佳处方。

三批中试样品的溶出度测定结果表明,牛磺熊去氧胆酸胶囊处方组成合理,能够生产出质量合格且均一的牛磺熊去氧胆酸胶囊。

2、牛磺熊去氧胆酸胶囊质量标准研究建立了薄层色谱法测定牛磺熊去氧胆酸胶囊中牛磺酸；建立了高效液相色谱法测定牛磺熊去氧胆酸胶囊的有关物质和含量；建立了牛磺熊去氧胆酸胶囊溶出度测定的方法；同时对该胶囊的性状、鉴别、装量差异等质量指标进行了研究,最终确定了牛磺熊去氧胆酸胶囊的质量标准。

3、牛磺熊去氧胆酸胶囊与原研产品的质量一致性研究为了考察牛磺熊去氧胆酸胶囊自制品与原研品(滔罗特)的区别,本实验进行了主要理化特性、溶出曲线、稳定性的比较,结果自研品与原研品除胶囊色泽及内容物的形式有差异外,其余各项指标均一致；在四种溶出介质中的溶出曲线结果表明,自研产品与原研品的溶出行为一致；在稳定性方面,参比药品在总杂质量上较自研产品高,自研产品质量优于参比药品。

(10)申请公布号(43)申请公布日 (21)申请号 201410807314.2(22)申请日 2014.12.23G01N 30/02(2006.01)G01N 30/06(2006.01)G01N 30/74(2006.01)(71)申请人重庆药友制药有限责任公司地址401121 重庆市渝北区人和镇星光大道100号(72)发明人李睿 钟家庆 曾加智 周莎(54)发明名称一种检测牛磺熊去氧胆酸中有关物质的方法(57)摘要本发明涉及一种牛磺熊去氧胆酸中有关物质的检测方法，特别是涉及一种应用HPLC-ELSD 法同时测定牛磺熊去氧胆酸中8种有关物质的方法。

该方法采用辛烷基键合硅胶色谱柱，蒸发光散射检测器，采用流动相A 和B 混合等度或梯度洗脱，其中流动相A ：2.5～50mmol/L 铵盐缓冲液，流动相B ：甲醇或乙腈。

本方法简便、快速、准确、可靠，色谱峰分离度良好，可同时定性或定量检测牛磺熊去氧胆酸中的8种有关物质。

(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书2页 说明书14页 附图2页CN 105784854 A 2016.07.20C N 105784854A1.一种采用高效液相色谱检测牛磺熊去氧胆酸中有关物质的方法，检测条件如下：固定相：以辛烷基键合硅胶为填充剂；流动相：流动相A：2.5～50mmol/L盐缓冲液，调pH至2.5~3.5；流动相B：甲醇或乙腈；洗脱条件：采用流动相A与流动相B混合等度洗脱，流动相A与流动相B的体积比为56～75∶25～44；或采用流动相A与流动相B梯度洗脱，洗脱条件如下：时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）065～7525～35365～7525～351238～5743～62245～3070～95305～3070～9530.165～7525～353865～7525～35流速：0.7~1.2ml/min；柱温：30~40℃；蒸发光散射检测器：漂移管温度为95~115℃，载气流量为2.5~3.5L/min；其中，铵盐缓冲液选自甲酸铵、乙酸铵、氨水、三乙胺或其混合物；其中，pH调节剂选自甲酸、乙酸、三氟乙酸或其混合物。

生物资源2021,43(1 ):50〜56Biotic ResourcesD O I：10. 14188/j. ajsh. 2021. 01. 007牛磺熊去氧胆酸抑制两种病毒的研究陈倩K2,朱淑敏】’3,黄世佳2,屈三甫U*，吕颂雅h2*(1.武汉大学病毒学国家重点实验室，湖北武汉430072;2.武汉大学湖北省细胞稳态重点实验室，湖北武汉430072;3.武汉大学中国典型培养物保藏中心，湖北武汉430072)摘要：熊胆汁是自古就被用于消炎祛火的重要中药。

牛磺熊去氧胆酸（tauroursodeoxycholic acid，TUDC A)为熊胆汁的主 要成分，人胆汁中也有低水平的存在。

为了探究TUDCA对儿童手足口病重要病原体柯萨奇病毒A16型（coxsackievirus A16, CVA16)是否有抑制作用，在病毒感染不同阶段加人TUDCA处理，通过M T T法、流式细胞术等技术检测CVA16感染的细胞 存活率以及TUDCA对人横纹肌肉瘤细胞（rhabdomyosarcoma cell, RD)内吞效率的影响。

结果发现，TUDCA在病毒吸附进入阶段抑制CVA16感染细胞，但不影响宿主细胞的内吞活性:：研究还发现TUDCA能在病毒人侵阶段抑制水泡口炎疱疹病毒（vesicular stomatitis virus, VSV)的感染，这提示TUDCA的抗病毒作用不具有特异性。

本研究发现了 TUDCA抑制CVA16 和VSV病毒感染这一新用途，为抗手足口病和口炎疱疹药物的研发提供了新的思路和方案。

关键词：柯萨奇病毒A16;水泡口炎疱疹病毒；牛磺熊去氧胆酸；抗病毒药物中图分类号：Q932 文献标志码：A 文章编号=2096-3491(2021)01-0050-07Study of the inhibitory effect of Tauroursodeoxycholic acid on two kinds of virusCHEN Qian1 z, ZHU Shumin1 3, HUANG Shijia2, QU Sanfu 3，, LU Songya' 2*(1. State Key Laboratory of Virology, Wuhan University, Wuhan 430072, Hubei, China；2. Hubei Key Laboratory of Cell Homeostasis, Wuhan University, Wuhan 430072, Hubei, China；3. China Center for Type Culture Collection, Wuhan University, Wuhan 430072, Hubei, China)A b s tra c t：Bear bile has been used as an important traditional Chinese medicine to eliminate inflammation and fire since ancient times. Tauroursodeoxycholic acid (T U D C A) is the main bile acid of bear bile, and also present at low lev­els in human bile. To investigate whether TUDCA has an inhibitory effect on coxsackievirus A16(CVA16) , an impor­tant pathogen of children's hand, foot and mouth disease (H FM D) , M TT method, flow cytometry and other methods were used to detect the cell survival rate of CVA16 infection under TUDCA treatment at different stages of virus infection and the effect of TUDCA on the endocytosis efficiency of RD cells. In this study, it was found that TUDCA inhibited the infection of CVA16 at the stage of virus adsorption, but did not affect the endocytosis activity of host cells. TUDCA can also inhibit the infection of vesicular stomatitis virus (V SV) in the stage of virus invasion, which suggests that TUDCA has no specific antiviral effect. The study demonstrates a new use for TUDCA to inhibit infection of HFMD virus and V S V, and provides a new way of thinking and approach for developing drugs against HF'MD and VSV.Key w o rd s：C V A16；V S V；T U D C A；antiviral drug收稿日期：2020-04-28 修回日期：2020-12-30 接受日期：2021-02-01作者简介：陈倩（ 1994-)，女，硕士生，研究方向：抗手足口病毒感染。

熊去氧胆酸胶囊生物等效性研究技术指导原则（征求意见稿）2021年4月目录一、概述 (1)二、人体生物等效性研究设计 (1)（一）研究类型 (1)（二）受试人群 (1)（三）给药剂量 (1)（四）给药方法 (2)（五）血样采集 (2)（六）检测物质 (2)（七）生物等效性评价 (2)（八）其他 (2)三、人体生物等效性研究豁免 (3)四、参考文献 (3)熊去氧胆酸胶囊生物等效性研究技术指导原则12一、概述3熊去氧胆酸胶囊（Ursodeoxycholic Acid Capsules，UDCA）4用于治疗胆囊胆固醇结石、胆汁淤积性肝病等疾病，主要成5分为熊去氧胆酸。

该成分为内源性物质，体内处置过程复杂。

6熊去氧胆酸胶囊人体生物等效性研究应符合本指导原7则，还应参照《以药动学参数为终点评价指标的化学药物仿8制药人体生物等效性研究技术指导原则》、《生物等效性研9究的统计学指导原则》等相关指导原则要求。

10二、人体生物等效性研究设计11（一）研究类型12建议采用两制剂、两周期、两序列交叉设计，开展单次13给药的空腹及餐后人体生物等效性研究。

也可采用平行设计。

14（二）受试人群15健康受试者。

16（三）给药剂量17建议单次口服500 mg。

1（四）给药方法1819口服给药。

20（五）血样采集21合理设计样品采集时间，使其包含吸收、分布及消除相。

22（六）检测物质23血浆中非结合熊去氧胆酸和总熊去氧胆酸（非结合熊去24氧胆酸加上熊去氧胆酸甘氨酸结合物以及牛磺酸结合物）。

25（七）生物等效性评价26以基线校正后的（1）非结合熊去氧胆酸和（2）总熊去27氧胆酸（非结合熊去氧胆酸加上熊去氧胆酸甘氨酸结合物以28及牛磺酸结合物）的C max、AUC0-t和AUC0-∞为评价指标。

29生物等效性接受标准为：受试制剂与参比制剂的C max、30AUC0-t和AUC0-∞的几何均值比90%CI在80.00~125.00%范围31内。

牛磺酸熊去氧胆酸质量标准全文共四篇示例，供您参考第一篇示例：牛磺酸熊去氧胆酸（TUDCA）是一种重要的胆汁酸衍生物，广泛应用于医药、保健品等领域。

作为一种药用原料，在生产和使用过程中，质量标准至关重要。

本文将就牛磺酸熊去氧胆酸的质量标准进行详细探讨。

牛磺酸熊去氧胆酸的外观和性状是其质量标准的重要组成部分。

标准规定了其外观为白色或类白色结晶粉末状，具有特有的气味，这有利于生产企业和使用者对产品的初步鉴别和评价。

牛磺酸熊去氧胆酸的纯度要求也十分关键。

高纯度的TUDCA在医药和保健品领域更受欢迎。

质量标准中，通常会规定TUDCA的纯度需求，比如不得低于98%（按干燥基计）。

这一要求对于确保产品的有效性和安全性至关重要。

除了纯度外，杂质限量也是质量标准的重点内容之一。

对重金属、有机物残留等有害物质的残留限量必须符合国家卫生标准，从而保障产品的安全性和可靠性。

牛磺酸熊去氧胆酸的物理性质、化学性质、溶解度、稳定性、微生物限度等方面也需包含在质量标准中。

这有助于生产企业进行质量控制，并为相关部门提供了可操作的执行依据。

为了保证牛磺酸熊去氧胆酸在市场上的质量稳定性，制定更为严格的质量标准是必要的。

质量标准的执行还需要相关监管部门的加强监督，确保生产企业能够严格按照标准要求进行生产，从而保障产品的质量和安全。

牛磺酸熊去氧胆酸质量标准的制定和执行对于保障产品质量安全，促进行业健康发展具有重要意义。

希望有关部门和企业能够重视这一问题，共同努力，促进行业的良性发展。

第二篇示例：牛磺酸熊去氧胆酸（TUDCA）是一种重要的生化物质，被广泛应用于治疗肝脏疾病、保护肝脏功能和改善消化系统健康。

作为一种生物活性物质，TUDCA的质量标准十分重要，它直接影响到产品的功效和安全性。

本文将对牛磺酸熊去氧胆酸质量标准进行详细解析，为相关生产和使用提供参考。

牛磺酸熊去氧胆酸的质量标准应包括物理性状、化学性质、微生物限度、含量测定、有关杂质、残留溶剂等方面的要求。