L-硒-甲基硒代半胱氨酸检验方法

柱前衍生高效液相色谱荧光检测法测定奶粉中L-硒-甲基硒代半胱氨酸刘建群;赵元;舒积成;张锐;张小平【期刊名称】《福建分析测试》【年(卷),期】2011(020)004【摘要】建立了硒营养强化奶粉中L-硒-甲基硒代半胱氨酸含量柱前衍生高效液相荧光检测测定方法。

奶粉样品经乙腈沉淀蛋白,上固相萃取柱处理后,与邻苯二甲醛和3-巯基丙酸进行衍生化反应。

然后采用Diamonsil C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,醋酸盐缓冲液-乙腈-甲醇为流动相,流速为1mL·min-1,柱温40℃,荧光检测波长λex=343nm,λem=454 nm,进样量20μL,以三（羟甲基）氨基甲烷为内标进行测定。

在1.3-22.0μg·mL-1浓度范围内与相对峰面积呈良好的线性关系,回归方程为：【总页数】5页(P6-10)【作者】刘建群;赵元;舒积成;张锐;张小平【作者单位】江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室,江西南昌330004 ;江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室,江西南昌330004 ;江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室,江西南昌330004 ;江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室,江西南昌330004 ;江西川奇药业有限公司,江西南昌330029【正文语种】中文【中图分类】O657.72;R977.4【相关文献】1.手性柱高效液相色谱拆分测定营养强化剂硒-甲基硒代半胱氨酸对映体 [J], 刘建群;王亚莉;张小平2.液相色谱串联质谱法定量检测青花菜中L-硒甲基硒代半胱氨酸 [J], 张明;杜业刚;林少彬;杨文婕3.高效液相色谱法测定硒-甲基硒代半胱氨酸 [J], 刘建群;刘芳;张锐;张小平;寇晓莉4.柱前衍生高效液相色谱-荧光检测法测定血浆中同型半胱氨酸 [J], 唐秀芳;甄乾娜;樊子勉;冯成亚;丁敏5.5,5′-二硫硝基苯甲酸柱前衍生高效液相色谱法测定酶促反应液中的L-半胱氨酸[J], 刘忠;杨文博;金永杰;白钢因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

硒代氨基酸检测方法硒代氨基酸，作为人体重要的微量元素，其检测方法的研究对于保障人体健康具有重要意义。

本文将详细介绍硒代氨基酸的检测方法，以期为相关领域的研究提供参考。

一、硒代氨基酸简介硒代氨基酸，主要包括硒代蛋氨酸（Se-Met）和硒代半胱氨酸（Se-Cys），是人体内重要的硒形态。

硒元素在人体内具有抗氧化、提高免疫力、预防心血管疾病等多种生理功能。

因此，对硒代氨基酸的检测在生物医学、食品安全等领域具有重要应用价值。

二、硒代氨基酸检测方法1.高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是一种常用的硒代氨基酸检测方法。

通过样品预处理，将硒代氨基酸从复杂样品中分离出来，然后利用反相色谱柱进行分离，最后采用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）或原子荧光光谱（AFS）检测。

该方法具有灵敏度高、准确度好、重复性高等优点。

2.气相色谱-质谱联用法（GC-MS）气相色谱-质谱联用法适用于硒代氨基酸的挥发性衍生物检测。

样品经预处理后，通过硅烷化、甲基化等衍生化反应，将硒代氨基酸转化为挥发性衍生物，然后进行气相色谱分离，最后采用质谱检测。

该方法具有灵敏度高、选择性好、适用范围广等特点。

3.原子荧光光谱法（AFS）原子荧光光谱法是一种直接检测硒元素的方法。

样品经预处理后，通过氢化物发生反应，将硒转化为气态硒化氢，然后进入原子荧光光谱仪进行检测。

该方法具有操作简便、灵敏度高、线性范围宽等优点。

4.电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）电感耦合等离子体质谱法是一种高灵敏度的元素分析方法。

样品经预处理后，通过电感耦合等离子体将样品中的硒元素离子化，然后进入质谱仪进行检测。

该方法具有灵敏度高、动态范围宽、多元素同时检测等优点。

5.酶联免疫吸附法（ELISA）酶联免疫吸附法是一种基于抗原-抗体特异性反应的检测方法。

通过制备针对硒代氨基酸的特异性抗体，将样品中的硒代氨基酸与抗体结合，然后加入酶标记的二抗，最后通过酶催化反应产生颜色变化进行定量分析。

硒的检测技术研究进展硒的检测方法研究始于20世纪90年代，所研究和应用的方法有比色法、荧光分光光度法、原子吸收光谱法、石墨炉原子吸收光谱法、氢化物一原子吸收光谱法、氢化物一原子荧光光谱法、催化动力学法、高效液相一荧光法、气相色谱法、电感耦合等离子体一质谱法等，由于含硒样品种类繁多，且每种测定方法都有其优缺点，所以根据不同的分析样品，选择合适的测定方法，有着非常重要的意义。

硒在生物体中的存在形式分为有机态和无机态，其检测方法的研究和发展也分为两个方面：一类总硒的检测，另一类是有机硒的形态分析检测，现将各种方法分别简述如下：1总硒的测定1.1 比色法 3，3一二氨基联苯胺（3，3 - Diaminobenzidine）在酸性条件下与四价硒反应生成黄色化合物，在pH7左右时能被甲苯萃取，进行比色定量。

水样需要经酸混合液消解后，将四价以下的无机和有机硒氧化成四价硒，再与盐酸反应将六价硒还原至四价硒，然后再测定总硒含量。

该法样品中若存在大量铁、铜、钼及钒等重金属离子时，可用Na2 - EDTA消除干扰，强氧化剂能将3，3一二氨基联苯胺试剂氧化产生棕红色，因此水样用混合酸消解时一定要加热至大量酸被赶掉，少量的强氧化剂可用盐酸羟胺消除。

本法最低检出限为2.5 μg.L-1，测定上限为50 μg.L-1，灵敏度较低。

1.2荧光分光光度法2，3一二氨基萘（2，3 - diaminonaphthalene，缩写为DAN）在pill.5 -2.0的酸性溶液中，选择性地与四价硒离子反应生成4，5一苯并苤硒脑(4，5一ben-zopiaselenol)绿色荧光物质，被环已烷萃取后，以368 nm为激发波长，在520 nm处测定，所产生的荧光强度与四价硒含量成正比。

水样经硝酸一高氯酸混合酸液消解，将四价以下的无机和有机硒氧化为四价硒，再经盐酸消解将六价硒还原为四价硒，然后测定总硒含量，本法最低检出量为0. 005 μg，取20 mL水样测定，硒的最低检出浓度为0.25 μg.L-1，现为国家标准方法第二法。

卫生部公告2009年第11号――食品添加剂、营养强化剂新品种等文章属性•【制定机关】卫生部(已撤销)•【公布日期】2009.07.22•【文号】卫生部公告2009年第11号•【施行日期】2009.07.22•【效力等级】部门规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】食品安全正文卫生部公告（2009年第11号）根据《中华人民共和国食品安全法》和《食品添加剂卫生管理办法》的规定，批准附件所列食品添加剂、营养强化剂、食品用酶制剂、食品用香料新品种、扩大使用范围及使用量的食品添加剂和食品营养强化剂以及修改后的甲基纤维素质量规格。

特此公告。

附件： 1.食品添加剂、营养强化剂新品种2.食品用酶制剂新品种3.食品用香料新品种4.扩大使用范围及使用量的食品添加剂5.扩大使用范围及使用量的食品营养强化剂6.修改后的甲基纤维素质量规格二○○九年七月二十二日附件1：食品添加剂、营养强化剂新品种一、食品添加剂新品种决明胶名称：决明胶 cassia gum功能：增稠剂2．生产工艺以决明（Cassia obtusifolia 或Cassia tora）植物的种子胚乳为原料，用化学萃取的方法加工而成的一种胶体，主要含半乳甘露聚糖，即包含甘露糖线性主链和半乳糖侧链的聚合物。

3.性状灰白色干燥、可自由流动的粉末。

4.技术要求二、营养强化剂新品种（一）L-硒-甲基硒代半胱氨酸名称：L-硒-甲基硒代半胱氨酸 L-Se-methylselenocysteine功能：营养强化剂2.生产工艺以α-乙酰氨基丙烯酸甲酯和甲硒醇钠为主要原料，经加成、酶法拆分制得的L-硒-甲基硒代半胱氨酸。

3.性状外观为白色粉末状或颗粒状固体，具蒜样气味。

易溶于水，微溶于甲醇，熔点174℃-176℃（分解）。

（二）低聚果糖名称：低聚果糖Oligofructose功能：营养强化剂2. 生产工艺以菊苣为原料，经部分酶水解后提纯、喷雾干燥制得。

3.技术要求附件2：食品用酶制剂新品种一、磷脂酶C英文名称：Phospholipase C来源：巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）DVSA-PLC-004菌株供体：某一土壤样品中所衍生的磷脂酶C基因。

矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。

如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。

㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。

(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。

如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。

对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。

二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。

2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。

㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。

2、矿产品价格稳定性及变化趋势。

三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。

2、矿区矿产资源概况。

3、该设计与矿区总体开发的关系。

㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。

2、矿床开采技术条件及水文地质条件。

矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。

如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。

㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。

(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。

如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。

对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。

二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。

2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。

㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。

2、矿产品价格稳定性及变化趋势。

三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。

2、矿区矿产资源概况。

3、该设计与矿区总体开发的关系。

㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。

2、矿床开采技术条件及水文地质条件。

矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。

如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。

㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。

(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。

如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。

对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。

二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。

2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。

㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。

2、矿产品价格稳定性及变化趋势。

三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。

2、矿区矿产资源概况。

3、该设计与矿区总体开发的关系。

㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。

2、矿床开采技术条件及水文地质条件。

矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。

如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。

㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。

(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。

如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。

对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。

二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。

2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。

㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。

2、矿产品价格稳定性及变化趋势。

三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。

2、矿区矿产资源概况。

3、该设计与矿区总体开发的关系。

㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。

2、矿床开采技术条件及水文地质条件。

矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。

如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。

㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。

(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。

如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。

对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。

二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。

2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。

㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。

2、矿产品价格稳定性及变化趋势。

三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。

2、矿区矿产资源概况。

3、该设计与矿区总体开发的关系。

㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。

2、矿床开采技术条件及水文地质条件。