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骨质疏松症的相关信号通路及其药物研究进展
胡晟;梁杰
【期刊名称】《临床医学进展》
【年(卷),期】2024(14)3
【摘要】骨质疏松症(Osteoporosis, OP)是一种常见的老年性骨病,由于骨的形成和吸收之间的平衡被破坏导致损伤骨的微观结构,最终骨脆性增加从而造成骨折风险上升和骨折率增加。
骨骼的吸收与形成与骨骼代谢的动态和平衡息息相关,可通过不同的方式来影响骨骼代谢的动态和平衡进而影响骨骼重建。
在其涉及的机制中,骨代谢和信号通路是紧密相连的,它们都对骨质疏松症做出了重要贡献。
为了进一步治疗骨质疏松症,在本文中探究了与骨代谢有关的信号通路的研究,重点是
OPG/RANKL/RANK、Wnt/β-catenin和组蛋白酶K信号通路,以及相关的靶点和抗骨质疏松症药物。
【总页数】6页(P1853-1858)
【作者】胡晟;梁杰
【作者单位】三峡大学人民医院(宜昌市第一人民医院)骨科宜昌
【正文语种】中文
【中图分类】R58
【相关文献】
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2.补肾方药影响骨质疏松症相关信号转导通路的研究进展
3.杜仲诱导骨髓间充质干细胞成骨分化防
治骨质疏松症相关信号通路研究进展4.丹参及其活性单体成分调控骨质疏松症相关信号通路的研究进展5.骨质疏松症相关信号通路的研究进展
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论㊀㊀著(基础研究)骨质疏松症ｍｉＲＮＡ和基因差异表达分析及ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡ调控网络的构建汪悦东ꎬ万㊀雷ꎬ张志海ꎬ黄宏兴ꎬ朱根福㊀㊀[摘要]㊀目的㊀ｍｉＲＮＡ在骨质疏松症的发生发展过程中发挥重要作用ꎮ文中旨在筛选与骨质疏松症密切相关的ｍｉＲ￣ＮＡ和基因ꎬ完成骨质疏松症ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡ调控网络的构建ꎮ㊀方法㊀通过ＧＥＯ数据库查找骨质疏松症的基因芯片表达谱ꎬ采用ＧＥＯ２Ｒ进行分析并筛选差异表达基因(ＤＥＧｓ)和差异表达ｍｉＲＮＡꎬ采用火山图对差异基因和ｍｉＲＮＡ进行展示ꎬ然后通过Ｄａｖｉｄ在线数据库完成ＧＯ和ＫＥＧＧ通路分析ꎬＳｔｒｉｎｇ在线数据库用于完成ＰＰＩ蛋白网络分析ꎮ采用ＴａｒｇｅｔＳｃａｎ㊁ｍｉＲＴａｒＢａｓｅ和ｍｉＲＤＢ预测靶基因ꎬ最后通过Ｃｙｔｏｓｃａｐｅ软件进行ＰＰＩ和ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡ调控网络可视化ꎮ㊀结果㊀通过筛选得到１５个差异ｍｉＲＮＡ和１７４个差异表达基因ꎮ通过ＧＯ和ＫＥＧＧ通路分析得到２５条ＧＯ功能注释ꎬ生物过程包括对药物的反应㊁血管生成㊁离子迁移㊁ＧＴＰａｓｅ介导的信号转导的调控㊁适应性免疫反应等ꎬＫＥＧＧ富集分析得到ＮＦ￣κＢ信号通路㊁ＨＩＦ￣１信号通路和谷胱甘肽代谢ꎮ通过ｃｙｔｏｈｕｂｂａ插件得到１０个ｈｕｂ基因ꎬ分别为:ＣＤＨ２㊁ＰＯＬＲ２Ａ㊁ＫＬＦ４㊁ＣＣＮＤ１㊁ＳＯＸ４㊁ＮＣＢＰ２㊁ＶＥＧＦＡ㊁ＰＫＬＲ㊁ＥＰ３００㊁ＨＮＲＮＰＬꎮ７个ｍｉＲＮＡ(２个上调的ｍｉＲＮＡꎬ５个下调ｍｉＲＮＡ)分别为:ｈｓａ￣ｍｉＲ￣１８ｂ￣５ｐꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣１９４￣５ｐ上调ꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣４７６８￣３ｐꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣４２６９ꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣４７１７￣３ｐꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣６２９￣３ｐꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣４７９３￣３ｐ下调ꎮ对７个ｍｉＲＮＡ进行预测得到３０６５个靶基因ꎬ然后与１７４个ＤＥＧｓ交集得到４４个交集基因ꎬ最后成功构建ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡ网络调控图ꎮｈｓａ￣ｍｉＲ￣４２６９和ｈｓａ￣ｍｉＲ￣１９４￣５ｐ与其调控的靶基因表达呈现正相关关系比较多ꎮ㊀结论㊀ｍｉＲ￣１９４￣５ｐ在骨质疏松症中显著上调ꎬ可能通过调控其靶基因ＣＤＨ２在骨质疏松症中发挥重要作用ꎬ为骨质疏松症的诊断和治疗提供了候选靶点ꎮ㊀㊀[关键词]㊀骨质疏松症ꎻｍｉＲＮＡꎻ调控网络ꎻＧＥＯ数据库㊀㊀[中图分类号]㊀Ｒ６８㊀㊀㊀[文献标志码]㊀Ａ㊀㊀㊀[文章编号]㊀１００８￣８１９９(２０２０)０３￣０２５８￣０６㊀㊀[ＤＯＩ]㊀１０.１６５７１/ｊ.ｃｎｋｉ.１００８￣８１９９.２０２０.０３.００８基金项目:广东省中医药局科研项目(２０１９３００８)ꎻ广州市海珠区科技计划项目(海科工商信计２０１８￣９４㊁２０１８￣９６)作者单位:５１０４０５广州ꎬ广州中医药大学第三临床医学院[汪悦东(医学硕士研究生)]ꎻ５１００００广州ꎬ广州中医药大学第三附属医院骨科(万㊀雷㊁张志海㊁黄宏兴㊁朱根福)通信作者:张志海ꎬＥ－ｍａｉｌ:１３７２５２９５７９３＠１３９.ｃｏｍＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｎｅｔｗｏｒｋｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｍｉＲＮＡａｎｄｇｅｎｅｓｉｎｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓＷＡＮＧＹｕｅ￣ｄｏｎｇ１ꎬＷＡＮＬｅｉ２ꎬＺＨＡＮＧＺｈｉ￣ｈａｉ２ꎬＨＵＡＮＧＨｏｎｇ￣ｘｉｎｇ２ꎬＺＨＵＧｅｎ￣ｆｕ２(１.ＴｈｅＴｈｉｒｄＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅｏｆＧｕａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＧｕａｎｇｚｈｏｕ５１０４０５ꎬＧｕａｎｇ￣ｄｏｎｇꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｒｔｈｏｐｅｄｉｃｓꎬＴｈｅＴｈｉｒｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＧｕａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＧｕａｎｇｚｈｏｕ５１００００ꎬＧｕａｎｇｄｏｎｇꎬＣｈｉｎａ)㊀㊀[Ａｂｓｔｒａｃｔ]㊀Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀ＭｉｃｒｏＲＮＡｓ(ｍｉＲＮＡ)ｐｌａｙａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ.ＴｈｉｓｓｔｕｄｙａｉｍｓｔｏｓｃｒｅｅｎｆｏｒｍｉＲＮＡｓａｎｄｇｅｎｅｓｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓꎬａｎｄｔｏｃｏｍｐｌｅｔｅｔｈｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆａｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡｒｅｇｕｌａ￣ｔｏｒｙｎｅｔｗｏｒｋｏｆｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ.㊀Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀ＴｈｅｇｅｎｅｃｈｉｐｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｅｏｆｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅＧＥＯｄａｔａｂａｓｅꎬａｎｄｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｇｅｎｅｓ(ＤＥＧｓ)ａｎｄｍｉＲＮＡｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄａｎｄｓｃｒｅｅｎｅｄｖｉａＧＥＯ２Ｒ.Ｗｅｕｓｅｄｖｏｌｃａｎｉｃｍａｐｓｔｏｄｉｓｐｌａｙｄｉｆ￣ｆｅｒｅｎｔｉａｌｇｅｎｅｓａｎｄｍｉＲＮＡｓꎬａｎｄｃｏｍｐｌｅｔｅｄｔｈｅＧＯａｎｄＫＥＧＧｐａｔｈｗａｙａｎａｌｙｓｉｓｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅＤａｖｉｄｏｎｌｉｎｅｄａｔａｂａｓｅ.ＴｈｅＳｔｒｉｎｇｏｎｌｉｎｅｄａｔａｂａｓｅｉｓｕｓｅｄｔｏｃｏｍｐｌｅｔｅＰＰＩｐｒｏｔｅｉｎｎｅｔｗｏｒｋａｎａｌｙｓｉｓ.ＴｈｅＴａｒ￣ｇｅｔＳｃａｎꎬｍｉＲＴａｒＢａｓｅａｎｄｍｉＲＤＢｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｐｒｅｄｉｃｔｔｈｅｔａｒｇｅｔｅｄｇｅｎｅｓ.ＦｉｎａｌｌｙꎬｔｈｅＰＰＩａｎｄｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｎｅｔｗｏｒｋｓｗｅｒｅｖｉｓｕａｌｉｚｅｄｂｙＣｙｔｏｓｃａｐｅｓｏｆｔｗａｒｅ.㊀Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀Ｗｅｏｂｔａｉｎｅｄ１５ｄｉｆｆｅｒ￣ｅｎｔｉａｌｍｉＲＮＡｓａｎｄ１７４ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｇｅｎｅｓｔｈｒｏｕｇｈｓｃｒｅｅｎ￣ｉｎｇ.ＴｈｅＧＯｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔａｎａｌｙｓｉｓｍａｉｎｌｙｆｏｃｕｓｅｄｏｎｄｒｕｇｒｅｓｐｏｎｓｅꎬａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓꎬｉｏｎｔｒａｎｓｐｏｒｔꎬｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｓｍａｌｌＧＴＰａｓｅｍｅｄｉａｔｅｄｓｉｇ￣ｎａｌｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎꎬａｄａｐｔｉｖｅｉｍｍｕｎｅｒｅｓｐｏｎｓｅꎬｅｔｃ.ＮＦ￣κＢｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙａｎｄＨＩＦ￣１ｓｉｇｎａｌｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｔｈｒｏｕｇｈＫＥＧＧｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔａｎａｌｙｓｉｓ.Ｗｅｏｂｔａｉｎｅｄ１０ｈｕｂｇｅｎｅｓｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｃｙｔｏｈｕｂｂａｐｌｕｇ￣ｉｎ.Ｗｅａｌｓｏｏｂｔａｉｎｅｄ３０６５ｔａｒｇｅｔｅｄｇｅｎｅｓｂｙｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｏｆｓｅｖｅｎｍｉＲ￣ＮＡｓꎬａｎｄｔｈｅｎｉｎｔｅｒｓｅｃｔｅｄｔｈｅｍｗｉｔｈ１７４ＤＥＧｓｔｏｏｂｔａｉｎ４４ｉｎｔｅｒｓｅｃｔｉｏｎｇｅｎｅｓ.ＦｉｎａｌｌｙꎬｗｅｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄａｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｍａｐｏｆｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡｎｅｔｗｏｒｋ.ＴｈｅｍｉＲ￣１９４￣５ｐｉｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｕｐ￣ｒｅｇｕｌａｔｅｄｉｎｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ.㊀Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ㊀ＴｈｅｍｉＲ￣１９４￣５ｐｍｉｇｈｔｐｌａｙａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓｂｙｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｉｔｓｔａｒｇｅｔｇｅｎｅＣＤＨ２ꎬｗｈｉｃｈｐｒｏｖｉｄｅｓｃａｎｄｉｄａｔｅｔａｒｇｅｔｓｆｏｒｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｏｓ￣ｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ.㊀㊀[Ｋｅｙｗｏｒｄｓ]㊀ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓꎻｍｉＲＮＡꎻｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｎｅｔｗｏｒｋꎻＧＥＯｄａｔａｂａｓｅ０㊀引㊀㊀言㊀㊀骨质疏松症是一种以骨量低和骨组织微结构破坏为特征的全身性代谢性的骨骼疾病ꎬ其容易导致骨脆性增加和骨折易感性[１－２]ꎮ随着国内人口老龄化的增加ꎬ骨折是医疗保健成本和社会负担的主要原因[３]ꎮ自２０００年以来ꎬｍｉｃｒｏＲＮＡｓ(ｍｉＲＮＡｓ)被认为是人类基因表达中一类独特的生物调节因子ꎬ对ｍｉＲＮＡｓ的研究也不断深入[４]ꎮＭｉＲＮＡｓ是一类比较短的非编码ＲＮＡ分子ꎬ调控转录后基因的表达ꎮＭｉＲＮＡｓ是由Ｄｒｏｓｈａ酶通过初级ｍｉＲＮＡ(ｐｒｉｍａ￣ｒｙｍｉＲＮＡｓꎬｐｒｉ￣ｍｉＲＮＡ)加工形成前体ｍｉＲＮＡ(ｐｒｅ￣ｍｉＲＮＡ)ꎬ再通过Ｄｉｃｅｒ酶进一步加工生成成熟的ｍｉＲＮＡ[５]ꎮ对ｍｉＲＮＡ的研究主要集中在组织水平ꎬ并发现与疾病有关ꎬ如癌症㊁心血管疾病㊁阿尔茨海默病等ꎬ但是迄今为止尚未充分了解ｍｉＲＮＡ在骨质疏松症和肌肉减少症中的作用ꎮ㊀㊀生物信息学分析和基因芯片分析技术已被广泛应用于筛查遗传基因组㊁转录组水平的改变[６－７]ꎬ这有利于确定差异表达基因及其功能ꎮ本研究旨在筛选与骨质疏松症密切相关的ｍｉＲＮＡ和基因ꎬ完成骨质疏松症ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡ调控网络的构建ꎮ１㊀材料与方法１.１㊀基因芯片信息㊀从ＮＣＢＩ￣ＧＥＯ数据库中获得骨质疏松症和非骨质疏松症中的基因芯片表达谱ꎬ包括ＧＳＥ６４４３３和ＧＳＥ５６１１６ꎬ其中ＧＳＥ６４４３３包含２３例绝经后骨量减少女性和２５例绝经后骨质疏松症女性全血中的ｍｉＲＮＡ表达数据ꎮＧＳＥ５６１１６包含１０例绝经后骨质疏松症患者ꎬ３例健康绝经后妇女外周血的ｍＲＮＡ表达数据ꎮ１.２㊀ＤＥＧｓ和差异ｍｉＲＮＡ的数据处理㊀骨质疏松症样本和正常样本之间的差异表达基因通过ＧＥＯ２Ｒ在线工具确定ꎮ其中差异表达ｍｉＲＮＡ的筛选条件为｜ｌｏｇＦＣ｜>１并调整Ｐ<０.０５ꎬ差异表达基因的筛选条件为｜ｌｏｇＦＣ｜>１并调整Ｐ<０.０１ꎮ１.３㊀ＧＯ和ＫＥＧＧ分析㊀使用ＤＡＶＩＤ６.８(ｈｔ￣ｔｐ://ｄａｖｉｄ.ｎｃｉｆｃｒｆ.ｇｏｖ)在线数据库进行生物学分析差异表达基因的功能[８]ꎮＰ<０.０５为差异有统计学意义ꎮ１.４㊀ＰＰＩ网络和ｃｙｔｏｈｕｂｂａ分析㊀ＰＰＩ网络信息通过在线工具ＳＴＲＩＮＧ(检索相互作用基因的检索工具)进行分析ꎬ筛选条件ｍｅｄｉｕｍｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅ>０.４ꎬ然后应用Ｃｙｔｏｓｃａｐｅｖ３.７.０软件构建差异表达基因的ＰＰＩ网络[９]ꎮ使用ｃｙｔｏｈｕｂｂａ插件进行计算ꎬ最终通过ＭＣＣ算法筛选出ｔｏｐ１０的基因[１０]ꎮ１.５㊀ｍｉＲＮＡ靶基因预测㊀借助ＴａｒｇｅｔＳｃａｎ㊁ｍｉＲ￣ＴａｒＢａｓｅ和ｍｉＲＤＢ平台预测ｍｉＲＮＡ靶基因ꎬ采取任意２个数据库交集的结果作为该ｍｉＲＮＡ的靶基因[１１－１３]ꎮ１.６㊀ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡ调控网络构建㊀借助ｃｙｔｏ￣ｓｃａｐｅ软件构建ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡ调控网络图ꎬｍｉＲＮＡ和ｍＲＮＡ作为节点ꎬｍｉＲＮＡ和ｍＲＮＡ的相互关系为连线ꎬ正方形代表ｍｉＲＮＡꎬ椭圆形代表ｍｉＲＮＡꎬ红色代表差异表达上调ꎬ蓝色代表差异表达下调ꎮ２㊀结㊀㊀果２.１㊀骨质疏松症中差异表达基因和ｍｉＲＮＡ的鉴定通过筛选得到１５个差异ｍｉＲＮＡꎬ其中上调的差异ｍｉＲＮＡ有８个ꎬ下调的差异ｍｉＲＮＡ有７个ꎮ总共得到１７４个差异基因ꎬ其中上调的差异表达基因有１２８个ꎬ下调的差异表达基因有４６个ꎮ见图１ꎮ２.２㊀骨质疏松症差异表达基因ＧＯ和ＫＥＧＧ通路分析㊀通过ＧＯ和ＫＥＧＧ通路分析得到２５条ＧＯ功能注释ꎬ生物过程包括对药物的反应㊁血管生成㊁经典Ｗｎｔ信号通路㊁离子转运㊁小ＧＴＰ酶介导的信号转导的调节㊁适应性免疫应答㊁泌乳㊁肽基酪氨酸磷酸化的正调节㊁解剖结构形态发生㊁细胞迁移的负调节㊁单一生物细胞￣细胞黏附㊁神经上皮细胞分化㊁血管形态发生㊁受体内化的正调节㊁阳性趋化㊁Ｗｎｔ信号通路的正调节㊁细胞氨基酸代谢过程和胚胎后相机型眼发育ꎮ细胞成分包括细胞骨架㊁突触㊁Ｔ细胞受体复合物和免疫突触ꎮ分子功能包括蛋白质同二聚化活性㊁ＧＴＰ酶激活剂活性和化学引诱活性ꎮ３条ＫＥＧＧＰＡＴＨＷＡＹ包括ＮＦ￣κＢ信号通路㊁ＨＩＦ￣１信号通路和谷胱甘肽代谢ꎮ见表１ꎮａｂ㊀㊀㊀ａ:差异ｍｉＲＮＡ火山图ꎻｂ:差异基因火山图图１㊀骨质疏松症中的差异ｍｉＲＮＡ及基因火山图Ｆｉｇｕｒｅ１㊀ＶｏｌｃａｎｏｍａｐｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｍｉＲＮＡｓｏｒｇｅｎｅｓ表１㊀骨质疏松症差异表达基因的ＧＯ和ＫＥＧＧ富集分析Ｔａｂｌｅ１㊀ＧＯａｎｄＫＥＧＧｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔａｎａｌｙｓｉｓｏｆＤＥＧｓ项目名称基因数差异倍数Ｐ值ＧＯ富集分析㊀ＧＯ:００４２４９３对药物的反应７２.８４３０.０３６㊀ＧＯ:０００１５２５血管生成６３.３２２０.０３４㊀ＧＯ:００６００７０经典的Ｗｎｔ信号通路５７.４３８０.００４㊀ＧＯ:０００６８１１离子迁移５４.８６１０.０１９㊀ＧＯ:００５１０５６ＧＴＰａｓｅ介导的信号转导的调控５４.６０７０.０２３㊀ＧＯ:０００２２５０适应性免疫反应５４.１７１０.０３２㊀ＧＯ:０００７５９５哺乳期４１１.７５９０.００５㊀ＧＯ:００５０７３１肽基酪氨酸磷酸化的正调控４６.０２３０.０２８㊀ＧＯ:０００９６５３解剖结构形态发生４５.３６８０.０３８㊀ＧＯ:００３０３３６细胞迁移的负调控４５.１９９０.０４１㊀ＧＯ:００１６３３７单个生物细胞间粘附４４.８９００.０４８㊀ＧＯ:００６０５６３神经上皮细胞分化３５２.９１６０.００１㊀ＧＯ:００４８５１４血管形态发生３２１.７８９０.００８㊀ＧＯ:０００２０９２受体内在化的正调控３１５.４３４０.０１６㊀ＧＯ:００５０９１８趋化性３１０.５８３０.０３２㊀ＧＯ:００３０１７７Ｗｎｔ信号通路的正调控３１０.２８９０.０３４㊀ＧＯ:０００６５２０细胞氨基酸代谢过程３９.２６００.０４１㊀ＧＯ:００３１０７７胚胎后相机型眼睛发育２６１.７３５０.０３２㊀ＧＯ:０００５８５６细胞骨架８２.６５５０.０３１㊀ＧＯ:００４５２０２突触６４.０８２０.０１６㊀ＧＯ:００４２１０１Ｔ细胞受体复合物３２０.５２３０.００９㊀ＧＯ:０００１７７２免疫突触３１０.８６５０.０３１㊀ＧＯ:００４２８０３蛋白质均二聚活性１２２.０７１０.０２９㊀ＧＯ:０００５０９６ＧＴＰ酶激活剂活性８３.６１２０.００７㊀ＧＯ:００４２０５６化学吸引活性３１３.９９８０.０１９ＫＥＧＧ富集分析㊀ｈｓａ０４０６４ＮＦ－κＢ信号通路４４.４５５０.０５８㊀ｈｓａ０４０６６ＨＩＦ－１信号通路４４.０３７０.０７４㊀ｈｓａ００４８０谷胱甘肽代谢３５.６９９０.０９５２.３㊀蛋白质￣蛋白质相互作用网络(ＰＰＩ)和ｈｕｂ基因分析㊀蛋白质￣蛋白质相互作用网络得到８８个节点㊁１００条边ꎬ通过ｃｙｔｏｈｕｂｂａ插件得到１０个ｈｕｂ基因ꎬ分别为:ＣＤＨ２㊁ＰＯＬＲ２Ａ㊁ＫＬＦ４㊁ＣＣＮＤ１㊁ＳＯＸ４㊁ＮＣＢＰ２㊁ＶＥＧＦＡ㊁ＰＫＬＲ㊁ＥＰ３００㊁ＨＮＲＮＰＬꎮｈｕｂ基因网络得到１０个节点㊁２２条边ꎮ见图３ꎮ㊀㊀㊀ａ:ＤＥＧｓＰＰＩ网络构建ꎻｂ:前１０的ｈｕｂ基因㊀㊀㊀图示红色ｃｙｔｏｈｕｂｂａ插件得分最高ꎬ黄色次之ꎬ蓝色最低图２㊀骨质疏松症靶基因的ＰＰＩ网络Ｆｉｇｕｒｅ２㊀ＰＰＩｎｅｔｗｏｒｋｏｆｔｈｅｔａｒｇｅｔｇｅｎｅｓ２.４㊀ｍｉＲＮＡ靶基因和交集基因㊀对ｌｏｇＦＣ值比较大的７个ｍｉＲＮＡ进行构建ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡ网络调控图ꎬ７个ｍｉＲＮＡ(２个上调的ｍｉＲＮＡꎬ５个下调ｍｉＲ￣ＮＡ)分别为:ｈｓａ￣ｍｉＲ￣１８ｂ￣５ｐꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣１９４￣５ｐꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣４７６８￣３ｐꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣４２６９ꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣４７１７￣３ｐꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣６２９￣３ｐꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣４７９３￣３ｐꎮ通过预测到３０６５个靶基因ꎬ然后与１７４个ＤＥＧｓ交集得到４４个交集基因ꎬ见图４ꎬ分别为:ＡＴＸＮ７ꎬＥＰ３００ꎬＮＦＩＣꎬＤＩＳＣ１ꎬＣＣＤＣ８８ＡꎬＳＬＣ４０Ａ１ꎬＱＤＰＲꎬＶＥＧＦＡꎬＣＰＭꎬＭＰＺＬ２ꎬＫＩＦ２６ＢꎬＩＴＰＲＩＰＬ２ꎬＡＶＬ９ꎬＺＮＦ４４５ꎬＲＡＳＳＦ４ꎬＥＲＣ１ꎬＡＰＯＬ４ꎬＡＬＣＡＭꎬＧＩＮＳ４ꎬＰＲＫＤ３ꎬＵＭＰＳꎬＧＳＴＭ１ꎬＣＵＥＤＣ１ꎬＣＳＮＫ２Ａ１ꎬＫＩＡＡ１４５６ꎬＳＬＣ３１Ａ１ꎬＳＨＩＳＡ９ꎬＳＲＧＡＰ１ꎬＣ１ｏｒｆ１１５ꎬＰＰＡＲＧＣ１ＢꎬＲＲＥＢ１ꎬＲＡＬＧＡ￣ＰＡ２ꎬＰＴＰＲＥꎬＲＡＳＡＬ２ꎬＧＳＧ１ＬꎬＢＴＮ３Ａ１ꎬＰＡＲＤ３ＢꎬＲＢＰＪＬꎬＭＩＳＰꎬＣＰＮＥ６ꎬＫＣＮＨ１ꎬＲＮＦ１２５ꎬＣＤＨ２ꎬＭＡＰ９ꎮ２.５㊀ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡ调控网络㊀通过ｃｙｔｏｓｃａｐｅ软件对ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡ调控网络进行构建ꎬ可以发现ｈｓａ￣ｍｉＲ￣４７６８￣３ｐ关联的靶基因最多ꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣１８ｂ￣５ｐ关联的靶基因最少ꎮｈｓａ￣ｍｉＲ￣１９４￣５ｐ的靶基因多为表达上调ꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣４２６９靶基因多为表达下调ꎮ见图５ꎮ图４㊀骨质疏松症差异表达基因和预测的靶基因交集结果Ｆｉｇｕｒｅ４㊀ＩｎｔｅｒｓｅｃｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｏｆＤＥＧｓａｎｄｐｒｅｄｉｃｔｅｄｔａｒｇｅｔｇｅｎｅｓ㊀㊀㊀红色㊁蓝色:分别为上调㊁下调图５㊀骨质疏松症ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡ调控网络Ｆｉｇｕｒｅ５㊀ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｎｅｔｗｏｒｋ３㊀讨㊀㊀论㊀㊀本研究选取了人血液ｍｉＲＮＡ和基因芯片ꎬ其中ＧＳＥ６４４３３包括２３例绝经后骨量减少女性和２５例绝经后骨质疏松症女性全血中的ｍｉＲＮＡ表达数据ꎬＧＳＥ５６１１６包括１０例绝经后骨质疏松症患者和３例健康绝经后妇女外周血的ｍＲＮＡ表达数据ꎬ通过比较共找出１５个差异ｍｉＲＮＡ和１７４个差异表达基因ꎮ据报道ꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣１９４￣５ｐ在骨质疏松症妇女中表达增强[１４]ꎮ本研究发现的差异ｍｉＲＮＡ中ꎬｈｓａ￣ｍｉＲ￣１９４表达同样是上调的ꎬ因此ꎬｍｉＲ￣１９４￣５ｐ很可能是骨质疏松症的可行生物标记物ꎮ㊀㊀研究表明ｍｉＲＮＡ与疾病的关系对骨质疏松症疾病的诊断及治疗具有比较重要的意义[１５－１６]ꎮＭｉ￣ｃｒｏＲＮＡ(ｍｉＲＮＡ)已显示出增强或抑制骨组织中不同细胞类型的细胞增殖㊁分化和活性ꎮｍｉＲＮＡ行为及其靶点的发现有助于将它们识别为骨骼中的最新调控者ꎮ研究表明ꎬｍｉＲＮＡ失调介导骨相关病变的进展ꎬ例如椎间盘退变和骨质疏松症[１７－１８]ꎮ相关研究表明ｍｉＲ￣１９４￣５ｐ可以作为骨质疏松症的生物标志物[１４－１９]ꎬ而对于骨质疏松症与ｍｉＲ￣１８ｂ￣５ｐ的相关研究比较少ꎬ对于骨质疏松症与ｍｉＲ￣４７６８￣３ｐ㊁ｍｉＲ￣４２６９㊁ｍｉＲ￣４７１７￣３ｐ㊁ｍｉＲ￣６２９￣３ｐ㊁ｍｉＲ￣４７９３￣３ｐ的相关研究几乎没有ꎬ这为我们提供新的研究方向ꎮ本研究进一步把１０个ｈｕｂ基因与４４个交集基因匹配后发现３个重叠基因ꎬ分别是ＣＤＨ２㊁ＶＥＧＦＡ㊁ＥＰ３００ꎮ目前研究表明血管内皮因子加速骨形成及重建过程ꎬ直接促进ＢＭＳＣｓ及增加成骨细胞的成骨活性ꎬ降低破骨细胞溶骨活性来促进骨形成及增加骨密度[２０]ꎮ根据ｍｉＲＮＡ与ｍＲＮＡ的竞争关系进行筛选ꎬ本研究得到与ｍｉＲ￣１９４￣５ｐ存在负相关关系的基因是ＣＤＨ２㊁ＲＮＦ１２５ꎬ正相关关系的是ＤＩＳＣ１㊁ＥＰ３００㊁ＭＰＺＬ２㊁ＳＬＣ４０Ａ１ꎬ与ＶＥＧＦＡ存在负相关关系的ｍｉＲＮＡ是ｍｉＲ￣４７９３￣３ｐꎮ所以ｍｉＲ￣１９４￣５ｐ￣ＣＤＨ２㊁ｍｉＲ￣１９４￣５ｐ￣ＲＮＦ１２５和ｍｉＲ￣４７９３￣３ｐ￣ＶＥＧＦＡ这３条ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡ调控网络值得我们后续的验证并深入探讨其与骨质疏松症的关系ꎮ同理ꎬ对于筛选到的其它ｍｉＲＮＡ及其对应的基因所构成的ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡ调控网络我们也可以进一步验证ꎮ㊀㊀ＧＯ与ＫＥＧＧ分析有助于更深入地认识并筛选出ＤＥＧｓ的功能和作用ꎮＧＯ富集分析主要药物的反应㊁血管生成㊁经典Ｗｎｔ信号通路等ꎮ相关研究证明了血管生成在骨骼发育和修复中起着关键作用[２１]ꎮＷｎｔ信号通路是涉及各种生物过程的多方面作用的主要信号传导途径ꎬ骨骼是能够重塑和维持组织稳态的动态组织ꎬＷｎｔ信号级联导致促进骨形成和抑制骨吸收ꎬ导致骨重建的平衡ꎮＷｎｔ信号通路是骨质疏松症发生发展的重要途径[２２]ꎮＫＥＧＧ富集分析发现ＮＦ￣κＢ信号通路㊁ＨＩＦ￣１信号通路和谷胱甘肽代谢这３条信号通路ꎮ参与ＮＦ￣κＢ信号通路的差异基因包括ＢＣＬ１０ꎬＣＳＮＫ２Ａ１ꎬＥＲＣ１ꎬＳＹＫꎮ参与ＨＩＦ￣１信号通路的差异基因包括ＥＰ３００ꎬＶＥＧＦＡꎬＨＫ２ꎬＩＬ６Ｒꎮ转录因子ＮＦ￣κＢ是参与正常细胞功能和发育所必需的信号传导途径的蛋白质家族ꎮ删除该途径的各种组分导致骨骼发育异常ꎮ既往研究已经确定ＮＦ￣κＢ信号传导介导ＲＡＮＫ配体诱导的破骨细胞生成ꎬ抑制ＮＦ￣κＢ是抑制破骨细胞形成和骨再吸收活性的有效方法[２３－２４]ꎮ越来越多的证据表明ＨＩＦ￣１α促进破骨细胞形成㊁增强破骨活性的重要作用[２５]ꎬＨＩＦ￣１α是细胞对缺氧的适应性反应的关键介质ꎬ缺氧/ＨＩＦ￣１α抑制成骨细胞增殖ꎬ并且ＨＩＦ￣１α与Ｏｓｘ在抑制Ｗｎｔ途径方面具有协同作用ꎬＨＩＦ￣１α通过激活成骨细胞中的Ｓｏｓｔ表达来抑制Ｗｎｔ信号通路[２６－２８]ꎮ㊀㊀应用人类基因表达芯片探索基因表达谱的差异ꎬ本研究中ꎬ预测了７个具有显着差异表达的ｍｉＲＮＡ和核心基因ꎬ为骨质疏松症的研究提供了新的视角ꎮ但是ꎬ研究结果所得到的ｍｉＲＮＡ￣ｍＲＮＡ调控网络与骨质疏松症的关系需要更多的研究证据验证ꎬ随着未来对骨质疏松症的核心基因和ｍｉＲＮＡ的不断深入研究ꎬ本研究筛选的差异基因和ｍｉＲＮＡ有可能成为骨质疏松症的潜在生物标志物和关键靶点ꎬ这些有助于骨质疏松症的治疗药物开发和研究ꎬ并对骨质疏松症的诊断和治疗提供新的诊断靶点和治疗方向ꎮ另外ꎬ可以基于上述核心基因和ｍｉＲＮＡ来开发遗传致病因子的筛选点和相应的分子靶向药物ꎬ最终应用于骨质疏松症患者个体化治疗ꎮʌ参考文献ɔ[１]㊀ＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅＣＤ.Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ:Ｄｉａｇｎｏｓｉｓꎬｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ[Ｊ].ＡｍＪＭｅｄꎬ１９９３ꎬ９４(６６０３):９１４￣９１５.[２]㊀芮敏劼ꎬ郑苏阳ꎬ郭㊀杨ꎬ等.内质网应激通路与骨质疏松相关性的研究进展[Ｊ].医学研究生学报ꎬ２０１６ꎬ２９(８):８７７￣８８２. 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骨碎补总黄酮防治原发性骨质疏松症的进展2复旦大学附属中山医院厦门医院福建厦门350601【摘要】随着中国社会经济的不断发展，人口老龄化越来越严重。
骨质疏松症是老年人中经常发生的疾病。
因此，骨质疏松症的发病率逐年增加。
有效预防和治疗原发性骨质疏松症是当前临床医学研究的重点。
近年来，许多学者已经证实，骨碎补总黄酮可以有效预防和治疗原发性骨质疏松症。
从细胞生物学、形态学、血生化、生物力学、分子生物学等多方面都显现出骨碎补总黄酮在防治骨质疏松症的优点，从科学的角度出发，不断探讨该药的治疗机制，为该药在临床应用提供依据。
本篇文章主要探讨了骨碎补总黄酮防治原发性骨质疏松症的进展。
【关键词】骨碎补总黄酮；防治；原发性骨质疏松症；研究进展原发性骨质疏松症是一种通常影响老年人的常见临床疾病，现已成为全球性的公共问题，随着年龄的增长和骨质疏松症，老年人的身体机能逐渐下降。
它严重影响老年人的健康并降低生活质量。
根据调查数据，全世界大约有7千万人患有原发性骨质疏松症，患者通常超过62岁，而且随着年龄的增长，他们更容易生病，病情恶化，在严重的情况下，治疗效果会降低。
因此有大量的中老年人都需要及时采取有效的防治措施。
有研究表明，采用中药来防治原发性骨质疏松症有很好的效果，骨碎补忠黄酮就是一种中药制剂的药物，安全性高，可以在临床上广泛的应用。
对其进行科学的论证，是为该药在临床推广运用的提供重要依据。
1.骨碎补总黄酮影响骨质疏松症的代谢及骨量骨质疏松症的临床表现是由于以下事实：随着患者年龄的增长，骨量减少，骨组织结构逐渐变弱，并且骨脆性增加，从而导致骨折发生率增加。
临床上，在去除骨髓后测量骨组织，并通过骨量计算骨矿物质和有机物含量。
骨矿物质含量和骨密度均可在临床上测量。
因此，确定骨质疏松症和骨折危险因素的最重要内容就是测量骨密度。
通过临床医学对其不断的探讨，李建国[1]等发现利用大鼠来实验骨质疏松症的防治药物，观察实验的维甲酸大鼠骨质疏松症模型以及去卵巢骨质疏松症模型，骨碎补忠黄酮可增加患有骨质疏松症的实验大鼠的骨密度，有效预防和治疗原发性骨质疏松症，并增加股骨和腰椎之间的密度，说明骨碎补忠黄酮可提高骨质疏松症大鼠的骨量。
cGAS-STING信号通路在骨质疏松症中的作用机制
张忠文;赵瑞;齐雅茜;王薇;宋志靖;张浩令
【期刊名称】《中国骨质疏松杂志》
【年(卷),期】2024(30)4
【摘要】cGAS-STING信号通路是一种新型的、重要的先天免疫信号通路,其被核酸物质激活,并与其他免疫应答相互作用,在炎症、感染、癌症等多种病理过程中发挥重要作用。
近期研究发现cGAS-STING参与了各种与年龄相关的肌肉骨骼疾病的发生和发展,并对骨代谢产生影响。
然而,在骨质疏松症(osteoporosis,OP)中确切的作用机制尚不清楚。
因此,本文综述了cGAS-STING及其下游在OP中的作用机制,为开发OP新的治疗策略提供思路。
【总页数】5页(P606-610)
【作者】张忠文;赵瑞;齐雅茜;王薇;宋志靖;张浩令
【作者单位】甘肃中医药大学公共卫生学院;甘肃中医药大学中医临床学院;甘肃中医药大学针灸推拿学院;教育部敦煌医学与转化重点实验室;马来西亚理科大学高级医学和牙科研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R580
【相关文献】
1.cGAS-STING信号通路在结肠癌中的作用机制研究
2.非洲猪瘟病毒A137R蛋白拮抗cGAS-STING信号通路及其作用机制
3.Hippo信号通路在骨质疏松症中作用
机制的研究进展4.非洲猪瘟病毒D129L蛋白拮抗cGAS-STING信号通路及其作用机制5.肿瘤免疫微环境中cGAS-STING信号通路的细胞间信号传递
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Notch信号通路与骨质疏松症及中医药防治韦沅汛;陈锋;林宗汉;张驰;潘成镇;韦宗波【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2024(28)4【摘要】背景:近年研究表明,Notch信号通路对骨质疏松症有不同程度的影响,深入该方向的研究对骨质疏松的防治具有重要意义。
目前,中医药以其多角度、多层次和不良反应小的明显优势在缓解骨质疏松方面发挥显著作用,已成为当今社会研究的重点。
目的:分析、整理国内外文献,进一步了解Notch信号通路与骨质疏松症的联系,阐明中医药调控Notch信号通路防治骨质疏松症的作用机制。
方法:以“Notch、骨质疏松症、成骨细胞、破骨细胞、骨髓间充质干细胞、信号通路、中药、丸、实验”等为中文检索词,检索中国知网、万方、维普数据库;以“No tch、osteoporosis、Osteoblasts、Osteoclasts、Mesenchymal stem cells、Signal pathway、traditional Chinese medicine、pill、experiment”等为英文检索词,检索PubMed、Nature、Embase数据库,选择各数据库建库至2022年10月的相关文献。
结果与结论:Notch信号通路通过参与调控间充质干细胞、成骨细胞和破骨细胞的分化、增殖,从而在不同程度上影响骨质疏松症的发生和进展;Notch信号通路通过直接或间接调控Notch1、Jagged1、Hes、Hey、巨噬细胞集落刺激因子、核因子κB受体活化因子配体等关键细胞因子调节间充质干细胞、成骨细胞和破骨细胞的增殖、分化,进而对骨形成起到促进或抑制的作用,最终对骨质疏松症起到一定的防治效果。
中药活性成分大多从补肾类中药提取,如淫羊藿、杜仲、补骨脂、刺五加、女贞子等,且中药复方及制剂都具有补肾强骨的功效,这为后续研究Notch信号通路向防治骨质疏松症提供更多的中药选择和方向。
目前中药的研究多为活性成分和单味药提取物,中药复方及制剂的临床实验研究相对较少;关于针灸、推拿、中西医结合等疗法调控Notch信号通路防治骨质疏松症的研究较少,未来还需继续探索中医技术类疗法及中西医结合等疗法对Notch信号通路的调控和对骨质疏松治疗的作用机制。
52 药品评价 2015年第12卷第15期引 言原发性骨质疏松症是常见疾病，罹患于绝经后妇女和老年男性，其最大危害是会引起脆性骨折。
因此，对骨质疏松的治疗目标是降低首次骨折或再次骨折的发生风险。
目前抗骨质疏松药物按机制可以分为抑制骨吸收和增加骨形成两类药物，抑制骨吸收代表药物是双膦酸盐类，而促进骨形成代表药物为甲状旁腺素。
最近已经成功研发出一批新型抗骨质疏松药物，有些已经或者即将上市，我们对此充满期待，这些药物的研发成功正是源于罕见骨病致病基因的发现及对其机制的阐明。
本文将少见骨病致病基因及其相关信号通路进行阐述，主要涉及OPG/RNKL/RANK 、WNT Wnt/β-catenin 和组织蛋白酶K 信号通路，及与之相关的抗骨质疏松新型药物。
OPG/RNKL/RANK信号通路该通路较早被学者们认识，不但涉及骨骼系统，而且对免疫、血液系统等均有重要作用。
核因子κB(nuclear factor-kappa B ，NF-κB)受体活化素配体(receptor activator of nuclear factor κB ligand ，RANKL)与NF-κB 受体活化因子(receptor activator of nuclear factor κB ，RANK)结合后激活NF-κB ，促进破骨细胞的生成、分化和成熟，而骨保护素(osteoprotegerin ，OPG)可与RANKL 结合，阻止RANK 活化，抑制破骨细胞活性。
如下一些少见或罕见遗传性骨病致病基因均涉及该通路。
1. OPG 基因突变青少年性畸形性骨炎(juvenileB one metabolism related signal pathwayand study of anti osteoporosis drugs骨代谢相关信号通路与抗骨质疏松新型药物的研发上海交通大学附属第六人民医院骨质疏松和骨病科&骨代谢病和遗传研究室 章振林中图分类号 R681 文献标识码 A 文章编号 1672-2809(2015)15-0052-04摘要 最近有一些新型抗骨质疏松药物已经研发成功，这些药物正是基于罕见骨病致病基因的发现及对机制的阐明而研发的。
中老年人骨密度检查结果的影响因素及护理措施研究【摘要】目的：分析中老年人骨密度检查结果的影响因素及其护理干预方法。
方法：抽取年限为2022年1月-2023年5月期间前来本院接受骨密度检查的84例中老年人为研究对象，对其影响骨密度检查结果的影响因素进行分析，并对结果异常者给予护理干预。
结果：男性骨密度值高于女性（P<0.05）；中老年人的年龄越大骨密度值越低（P<0.05）；不吸烟及饮酒人群的骨密度值越高、而缺乏运动及缺少日晒的人群骨密度值越低（P<0.05）。
结论：经调研后可得出性别、年龄、吸烟、饮酒、运动、日晒等均为影响骨密度检查结果的重要因素；而临床医务工作者可根据影响因素对中老年人给予针对性的护理指导干预。
【关键词】中老年人；骨密度检查；影响因素；护理干预与青少年或中青年人群相比，中老年人因骨质疏松的原因其骨密度值会明显降低。
以往对中老年人骨密度值下降的原因进行调研后发现，此类人群出现骨质疏松、骨密度降低与其年龄、运动习惯、饮食习惯等多种因素密切相关[1]。
骨密度检查是用于鉴别诊断骨质疏松的主要手段，通过对人体骨骼的扫描检查测定骨骼内矿物质的含量，从而判断中老年人是否存在骨质疏松以及严重程度[2]。
由于骨质疏松后并没有明显的特征表现，通常仅会在中老年人发现骨折情况时才能经相关检查得出，而骨折情况严重的话其致残率相对更高，因此及早进行检查诊断尤为重要。
为了探究骨密度检查的准确性，我院抽取84例中老年患者进行骨密度检查，分析可能对检查结果的产生影响的因素，并给予相应护理干预指导。
现内容总结如下1对象和方法1.1对象抽取年限为2022年1月-2023年5月期间前来本院接受骨密度检查的84例中老年人为研究对象，其中男性39例、占比46.43%，女性45例、占比53.57%，年龄46-89岁、均值（63.78±4.23）岁。
患者了解本研究意义与作用，经慎重考虑后签署相关同意书。
《中国组织工程研究》 Chinese Journal of Tissue Engineering Research 文章编号:2095-4344(2018)16-02461-06 2461 www.CRTER.org ·研究原著·
万雷，男，1979年生，河南省商水县人，汉族，2011年广州中医药大学毕业，博士，副主任中医师，主要从事骨质疏松症的防治研究。
中图分类号:R318 文献标识码:A 稿件接受：2018-03-16
Wan Lei, M.D., Associate chief physician, the Affiliated Orthopedics Hospital, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510240, Guangdong Province, China
补肾健脾活血方含药血清提高过表达Sost转染成骨细胞增殖和 碱性磷酸酶活性
万 雷1，黄宏兴1，黄 红2，王 凡3，柴 爽4，王吉利4，刘少津4，黄佳纯4 (1广州中医药大学附属骨伤科医院，广东省广州市 510240；2广州中医药大学，广东省广州市 510405；3湖南省中医院，湖南省长沙市 410005；4广州中医药大学研究生院，广东省广州市
510405) DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.0275 ORCID: 0000-0002-3876-5506(万雷)
文章快速阅读：
文题释义： Sost：是骨硬化蛋白(Sclerostin)编码基因，也是Wnt信号通路中的关键拮抗因子，能竞争性地与低密度脂蛋白LRP5/6相结合，抑制Wnt信号通路的传导作用，影响成骨细胞的分化和增殖。 骨形成：是一个由多种因素调节的复杂过程，在这个过程中，激素与生长因子调节既相对独立又相互联系。LRP 5：是一种存在于成骨细胞表面的膜蛋白，其表达改变和功能丢失，可降低体外培养鼠头盖骨骨质密度，使骨质厚度变薄。
网络出版时间：２０２４－０１－１０１１：１１：３３ 网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｌｉｎｋ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｕｒｌｉｄ／３４．１０８６．Ｒ．２０２４０１０８．１８３０．０１８姜黄素抑制ＮＦ κＢ信号通路缓解氧化应激对成骨分化的损害发挥抗骨质疏松作用胥甜甜１，田昊春２，杨新民２，罗栋华３，王长根４，漆启华２（南昌大学第一附属医院１．药学部、２．骨科，江西南昌 ３３０００６；３．江西省高安市瑞州医院，江西宜春 ３３６０００；４．江西省赣州市寻乌县人民医院，江西赣州 ３４１００）收稿日期：２０２３－０８－１５，修回日期：２０２３－１１－１８基金项目：江西省卫生健康委员会科技计划项目（Ｎｏ２０２０３１８２；）国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８１９６０３９５）作者简介：胥甜甜（１９８９－），女，主管药师，研究方向：临床药学，Ｅｍａｉｌ：３１５３７２６０１＠ｑｑ．ｃｏｍ；漆启华（１９８３－），男，副主任医师，硕士生导师，研究方向：脊柱外科基础与临床，通信作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｑｑｈｕａ１９３８＠１２６．ｃｏｍｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２３０６０２０文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２４）０１－００４６－０９中国图书分类号：Ｒ ３３２；Ｒ２８２ ７１；Ｒ３３６；Ｒ３４９ １；Ｒ６８１摘要：目的 探讨姜黄素抑制氧化应激对成骨分化损害的机制及以剂量依赖的方式发挥抗骨质疏松的作用。
方法 采用细胞氧化应激模型，加入不同浓度的姜黄素，测定骨形成指标，并检测参与的潜在信号通路。
同时，用姜黄素处理小鼠去卵巢（ｏｖａｒｉｅｃｔｏｍｉｚｅｄ，ＯＶＸ）骨质疏松动物模型来证实其抗骨质疏松的作用。
结果 体外实验发现，低浓度姜黄素（１～１０μｍｏｌ·Ｌ－１）促进成骨细胞增殖，提高骨形成碱性磷酸酶（ａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ＡＬＰ）活性，逆转氧化应激导致的成骨钙沉积下降，降低了核因子ｋａｐｐａ Ｂ配体的受体激动剂（ＲＡＮＫＬ）和白介素 ６（ＩＬ ６）的表达。
721中国骨质疏松杂志 2021年5月第27卷第5期 Chin J Osteoporos, May 2021,Vol 27, No. 5Published online doi ：10. 3969/j.issn.l006-7108. 2021. 05. 020-药物研究-基于网络药理学研究杜仲治疗骨质疏松性骨折的作用 机制门志涛X 徐敏2黄承军2万雷3马江涛1黄宏兴3 黄红7**基金项目：国家自然科学基金项目(81973886,81674004)* 通信作者：黄红，Email ：HLHH@ 1. 广州中医药大学，广东广州5100062. 柳州市中医医院，广西柳州5450013. 广州中医药大学第三附属医院，广东广州510378中图分类号：R589. 5；R683；R285. 6 文献标识码：A 文章编号：1006-7108(2021) 05-0721-06摘要：目的基于网络药理学研究杜仲治疗骨质疏松性骨折的分子作用机制。
方法利用TCMSP 计算系统生物学实验室、GeneCards 数据库，分别对杜仲的有效成分、杜仲的治疗靶点和骨质疏松性骨折的靶标进行筛选，然后利用R 语言软件对杜仲 治疗靶点与骨质疏松性骨折疾病靶标进行取交集,得到中药-疾病靶标，再利用Cytoscape 技术对杜仲的多组分、多靶点、多通路、多疾病网络进行可视化研究,构建中药-疾病-成分-靶标的调控网络，然后通过构建杜仲与骨质疏松性骨折靶标的相互作用网络图以及柱状图，从而筛选得到其关键核心的靶标。
最后对核心靶标进行GO 和KEGG 分析。
结果 筛选得到杜仲治疗 骨质疏松性骨折19个有效成分,59个中药-疾病靶标,杜仲-骨质疏松性骨折靶标涉及的GO 功能富集的结果包括核受体的活 动、转录因子活性、类固醇激素受体活性等。
杜仲-骨质疏松性骨折靶标涉及的KEGG 信号通路富集分析的结果主要包括:细胞凋亡信号通路、内分泌抵抗、p53信号通路、MAPK 信号通路、NF-kappaB 信号通路、PI3K-Akt 信号通等。
73第16卷 第12期 2014 年 12 月
辽宁中医药大学学报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 16 No. 12
Dec .，2014
Wnt/β-catenin信号通路是一条保守而重要的胞内信号通路，参与了胚胎发育、组织器官生成等多种基本的生命过程。近年的研究表明Wnt/β-catenin信号通路在骨组织的生长发育以及个体成年后的骨代谢平衡中扮演着重要角色。抑制Wnt/β-catenin信号通路会引起骨代谢异常，导致骨质疏松，激活Wnt/β-catenin信号通路会促进骨形成，是目前骨骼系统相关疾病发病机制和骨代谢研究的新热点[1]。本文针对Wnt/β-catenin信号通路拮抗剂与骨质疏松的关系进行简要综述，探讨以Wnt/β-catenin信号通路拮抗剂作为靶点治疗骨质疏松的应用前景。1 Wnt/β-catenin信号通路组成和调节Wnt/β-catenin信号通路是最早被发现的Wnt信号途径，在不同物种中Wnt/β- catenin信号转导的分子机制具有极高的保守性。该通路的主要成分包括：配体Wnt蛋白、受体卷曲蛋白（frizzled，Fz）和低密度脂蛋白相关受体蛋白5/6（LRP5/6）、胞质蛋白（β-catenin）和核内转录因子（TCF/LEF）等。Wnt蛋白家族是细胞外富含半胱氨酸的分泌型糖蛋白，长度约为350~380个氨基酸，现已证实存在的Wnt蛋白至少20种。受体Fz存在细胞膜表面，是富含半胱氨酸的7次跨膜蛋白，在人类已经发现10种Fz分子。LRP5/6属于低密度脂蛋白受体超家族，主要功能为维持体内胆固醇的稳定和介导脂蛋白和蛋白酶等大分子的细胞内吞作用。β-catenin蛋白是由CTNNBI基因产生的一种大小为88 kD的产物，位于人3p22~p21.3染色体上。TCF/LEF是细胞核内转录因子，属于HMG家族，在人类主要有4个TCF/LEF，分别是：TCF1、LEF1、TCF3 和TCF4。Wnt/β-catenin信号通路处于失活的状态时，活化轴蛋白（Axin）、结肠腺瘤性息肉病蛋白APC（Adenomatous Polyposis Coli）和糖原合成酶激酶GSK3β（Glycogen Synthase Kinase-3β）形成一个巨大的蛋白复合体磷酸化胞质中的β-catenin，被磷酸化的β-catenin进而被泛素化，最后被蛋白酶体降解。而当胞外的配体Wnt与细胞膜上的跨膜受体Frizzled及单跨膜受体LRP5/6结合后，Wnt信号通路被激活。激活的受体将信号进一步传递给细胞质中的一系列蛋白，包括Dishevelled（Dsh）、GSK3β、Axin和APC等，导致Axin- APC-GSK3β复合体被破坏，使得β-catenin从这个降解复合体中释放出来并在胞质中积累。此时由于细胞核内外的β-catenin的平衡发生了变化，大量的β- catenin进入细胞核与转录因子LEF/TCF等结合，激活下游靶基因的转录[2]。
Wnt/β-catenin信号通路拮抗剂与骨质疏松万雷，黄宏兴，罗明，赖圆圆，曾国勇（广州中医药大学附属骨伤科医院，广东 广州 510240）
摘 要：Wnt/β-catenin信号通路是重要的细胞信号转导途径，在细胞的增殖、分化中发挥重要作用。目前的研究表明Wnt/β-catenin信号通路在骨代谢中发挥重要作用，该通路的异常与骨质疏松的发生有关。Wnt/β-catenin拮抗剂可以抑制Wnt/β-catenin信号通路，导致通路表达异常，进一步研究Wnt/β-catenin信号通路拮抗剂，设计出阻断该通路拮抗剂的物质，可为骨质疏松的治疗提供一种新的途径。关键词：Wnt/β-catenin信号通路；拮抗剂；骨质疏松中图分类号：R681 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2014) 12- 0073- 03
收稿日期：2014-05-17基金项目：国家自然科学基金课题（81302991；81373653）；广东省自然科学基金课题（S2011010005671；S2013010012173；S2013040016828）作者简介：万雷（1979-），男，河南周口人，副主任中医师，博士，研究方向：骨质疏松症的防治。
Antagonists of Wnt/β-catenin Signaling Pathway and OsteoporosisWAN Lei，HUANG Hongxing，LUO Ming，LAI Yuanyuan，ZENG Guoyong（Affiliated Orthopedics and Trauma Hospital，Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangzhou 510240，Guangdong，China）
Abstract：Wnt/β-catenin signaling pathway is an important cellular signal transduction pathway and plays an important role in cell proliferation and differentiation. Current researchs indicate that Wnt/β-catenin signaling pathway is significant in bone metabolism and its abnormalities relate to the occurrence of osteoporosis. Wnt/β-catenin signaling pathway antagonists can inhibit the Wnt/β-catenin signaling pathway and cause the pathway abnormal expression. Further studys of the Wnt/β-catenin signaling pathway antagonists and designing the materials to block the pathway antagonists can provide a new kind of osteoporosis treatment approach.Key words：wnt/β-catenin signaling pathway；antagonist；osteoporosis
DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2014.12.02874
辽宁中医药大学学报 16卷2 Wnt/β-catenin信号通路拮抗剂Wnt/β-catenin信号通路拮抗剂根据其发生作用的部位可以分为细胞外拮抗剂和细胞内拮抗剂。细胞外拮抗剂有Dkk1、Sost、Wise、sFRPs、Wif1、Cerberus蛋白等。细胞内拮抗剂有GSK-3β、Axin、APC、CKIa等。2.1 细胞外拮抗剂2.1.1 Dkk1蛋白 Dkk蛋白属于分泌型糖蛋白，人类基因组编码4种同源形式的Dkk蛋白，其中Dkk1、Dkk4抑制Wnt信号通路，Dkk2具有抑制和激活双重效应，Dkk3的作用尚不明确。Dkk1是目前研究最多的Dkk家族成员，它可以结合受体LRP5/6或与Kremen1/2、LRP5/6共同结合形成三聚体，通过诱导细胞内吞作用移除细胞膜上的LRP5/6，阻止Wnt信号转导。在成年个体，Dkk1主要在成骨细胞和成熟骨细胞中表达，而在生长发育期的个体尚不明确。Dkk1过表达可以引起骨量丢失。有研究认为Dkk1基因的变异在原发性骨质疏松症（Osteoporosis，OP）发病中起重要作用[3]。调查显示OP患者血清Dkk1水平显著高于正常对照组，并且与骨密度T值存在负相关[4]。体外培养的OP患者股骨头成骨细胞的Dkk1表达显著高于骨性关节炎患者，而β-catenin、碱性磷酸酶的表达则相反[5]。此外，长期卧床导致的废用性骨量丢失患者的血清Dkk1水平表达升高，同时伴随着骨形成减少和骨吸收增加[6]。以上研究表明Dkk1升高可引起成骨细胞活性下降、骨形成减少，提示在骨组织中抑制Dkk1表达的重要性。已有动物实验证明Dkk1中和抗体可以提高小鼠骨量，抑制Dkk1表达可以促进去卵巢骨质疏松模型小鼠骨形成[7]。但是目前Dkk1抗体的研究主要是动物实验，临床应用仍有一些问题需要解决，抑制Dkk1后异常激活的Wnt/β-catenin信号通路与多种肿瘤的发生和转移有关，因此如何特异性地调控骨组织的Dkk1表达而不影响其他组织器官代谢以及寻找促进骨形成和降低肿瘤风险之间的最佳平衡点仍需进一步研究。2.1.2 Sost和Wise蛋白Sost蛋白由Sost基因编码，主要由骨细胞分泌，通过结合受体LRP5/6阻止Wnt/β-catenin信号通路转导，抑制骨形成。有研究证实Sost蛋白下调是机械应力上调Wnt目的基因表达、促进骨形成的必须条件，在Sost蛋白过表达的转基因小鼠中应力诱导的骨形成受抑制[8]，甲状旁腺激素（PTH）促进骨形成的作用减弱[9]。以上研究说明抑制Sost蛋白表达可以促进骨形成，考虑Sost蛋白主要由骨细胞分泌，因此可以用中和抗体抑制Sost蛋白表达促进骨形成而不影响其它组织器官代谢。动物实验表明性腺完整的老年雄性大鼠经过皮下注射Sost抗体治疗后骨形成增加，腰椎和长骨骨密度显著提高[10]，绝经后骨质疏松模型大鼠在给予Sost抗体治疗后同样表现为骨形成和全身骨量增加[11]，共同说明Sost中和抗体有望作为促进骨形成的合成代谢药物用于治疗老年性和绝经后骨质疏松。已经有关于Sost抗体临床研究的报道，Padhi等[12]的随机双盲对照实验表明人Sost单克隆抗体AMG785可以提高绝经后妇女腰椎和髋部骨密度，与PTH促进骨合成代谢作用不同的是AMG785促进骨形成的同时降低骨吸收，提示AMG785不同于传统抗骨吸收骨质疏松药物，它可以有效增加骨质疏松症患者骨量，逆转骨密度的下降。目前关于Sost抗体尚缺乏大样本的临床研究，动物实验表明Sost基因敲除的小鼠骨形成增加，表现为高骨量[13]，然而有研究报道PTH促进骨合成的作用在Sost基因敲除的小鼠严重降低[14]，提示完全抑制Sost蛋白会影响骨形成，但是在人体完全抑制Sost蛋白是否会影响骨组织及其他组织器官的正常代谢尚不明确。Wise，也名为Sost-dc1，与Sost同属于DAN/Cerebus蛋白家族。Wise对Wnt信号通路具有双向调节作用，它可以促进Wnt/β-catenin信号通路转导，也可以通过与LRP6结合抑制Wnt配体活性[15]，此外，Wise抑制BMP信号通路。有调查研究显示Wise的基因多态性在中国女性峰值骨量的获取和维持中起作用[16]，提示Wise可以通过Wnt和BMP信号通路参与调节骨量，具体的机制值得进一步的研究。2.1.3 sFRPs蛋白Frizzled相关蛋白（secreted frizzled-related proteins，sFRP）是一种分泌型糖蛋白，它可以直接与Wnt配体相互作用，抑制Wnt配体与Frizzled结合，阻断信号转导。人sFRPs蛋白家族由5名成员组成，分别是sFRP1~5，其中sFRP1和骨质疏松关系最为密切。Yao等[17]的研究表明sFRP1抑制成骨细胞功能，sFRP1过表达的转基因小鼠骨形成受抑制，相比野生型对照组，PTH对转基因小鼠骨的合成代谢作用减弱。相反，抑制sFRP1可以促进骨形成。sFRP1基因敲除的小鼠皮质骨形成提高，成骨细胞增殖和分化增加[18]，抑制sFRP1蛋白包含了部分PTH对骨的合成代谢作用[19]。以上研究提示sFRP1可能成为治疗骨质疏松的靶目标，抑制sFRP1可以促进骨形成。但是由于sFRP1直接与Wnt配体结合，抑制sFRP1可以激活包括Wnt/β-catenin等多条Wnt信号通路，同时激活多条Wnt信号通路是否对骨组织的代谢产生不良影响尚不明确。2.1.4 Wif1Wif1（Wnt inhibitor factor）是保守的分泌型蛋白，可以直接与Wnt配体结合，阻断Wnt信号转导。Cho等[20]的实验证实Wif1是体外培养的小鼠间充质细胞系C3H10T1/2向成骨细胞分化的负性调控因子，转染Wif1的小鼠间充质细胞系向成骨细胞分化减少，向脂肪细胞分化增加。而当用干扰RNA抑制Wif1后细胞碱性磷酸酶活性增加。该研究提示抑制Wif1可以促进成骨细胞分化，有可能作为治疗骨质疏松的靶点，但是目前针对Wif1和骨代谢的研究较少，未见相关临床研究报道。由于Wif1和sFRP类似，可同时抑制多条Wnt信号通路，其应用可能受限。2.1.5 CerberusCerberus是与Wif1和sFRPs相似的、与Wnt蛋
