抗中性粒细胞胞浆抗体 PPT课件

流行病学
▪ 在美国，WG的患病率至少10万，发病年 龄在40岁～50岁，男女比例为1：1； MPA患病率为1/10万，平均发病年龄为50 岁。
▪ 英格兰发病率可达1/2000。 ▪ 我国：MPA占大多数（约79.1%），WG
占20.4%，而CSS仅占0.5%，平均发病年 龄56.1岁，男女之比为1：1.14，夏秋季 多发。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
临床表现
▪ ANCA相关性血管炎好发于中、老年 人,其中以50～60岁居多,男女比例基 本一致,但20岁以下的青年患者中以 女性多见,好发于冬春季节。
▪ 患者可有上呼吸道感染样前驱症状,且 常有发热、疲乏和体重下降等非特异 性症状,此外还常肉芽肿病 (W egenerps granulomatosis, W G)
▪ 显微镜下型多血管炎 (m icroscop ic polyangiitis, MPA)
▪ 变应性肉芽肿性血管炎 ( churg - strauss syndrome, CSS)
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医学检验·各论：抗中性粒细胞胞浆 >>>
临床意义： 代表了pANCA和cANCA的混合物。阳性见于 溃疡性结肠炎、自身免疫性肝炎和慢性炎 症疾病。
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正常值： 正常人血清为：阴性。
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相关检查：
抗中性粒细胞抗体（ANGA）、抗中性粒细 胞胞浆抗体、异型中性粒细胞、中性粒细 胞杀菌试验、中性粒细胞趋化试验、嗜中 性分叶核粒细胞数。
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相关症状： 炎性损害、炎性细胞浸润、粒细胞缺乏、 发热、新生儿中性粒细胞增多。
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相关疾病：
强直性脊柱炎、懒惰白细胞综合征、急性 海绵窦栓塞性静脉炎、风湿性多肌痛、环 状红斑、皮肌炎与多发性肌炎、风湿性心 脏病、类风湿性关节炎、成人斯蒂尔病、 复发性风湿病、面部粟粒性狼疮。
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临床意义：
trauss综合征(CSS)、结节性多动脉炎 (PAN)、少数巨细胞动脉炎、过敏性紫癜、 白细胞破碎性皮肤性血管炎和白塞病。 pANCA：抗原主要为髓过氧化物酶(MPO)。 pANCA不如cANCA具有诊断特异性。pANC阳 性主要见于特发性坏死性新月体性肾小球 肾炎(NCGN)、 显微镜
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临床意义：
下多动脉炎(MPA)。也可见于ChurgStrauss综合征(CSS)、结节性多动脉炎 (PAN)、SLE、RA、SS、SSc。在NCGN、MPA 中pANCA和cANCA阳性率几乎相同。相对而 言，pANCA患者的血管炎病变程度重，常 有多系统损害。 非典型ANCA(xANCA)：它

polyangiitis, EGPA）
– 局限于单个器官的AAV
8
AAV分类
• 在北美和欧洲 – GPA——PR3-ANCA阳性 – EGPA——MPO-ANCA阳性 – MPA——两种抗体 – 以及局限于肾脏的AAV——MPO-ANCA阳性 • 在中国 – GPA——MPO-ANCA阳性 – MPA——MPO-ANCA阳性
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MPA临床特点
• 50岁发病，男性略占优势 • 累及小动脉，小静脉和毛细血管 • 特征性表现为皮肤-肺-肾综合征 （最常见的皮疹 为可触及的紫癜）
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GPA临床特点
• 30-40岁为高峰年龄，任何年龄都可 • 上呼吸道肉芽肿 （鼻窦炎，耳炎，鼻衄），下呼 吸道症状（咯血），可累及眼、鼻和其他器官 • 34%患者可出现中枢和周围神经病变 • 肾损害（肾小球肾炎），急性肾衰 • 单纯激素治疗不能阻止病情进展，75%的患者CTX 有效
9
中国 AAV 的流行病学
• 目前，还缺乏中国人群 AAV 确切的患病率数 据。 • 研究发现，对于≥ 65 岁接受了肾活检的老年患 者，约36.5%是继发性肾小球疾病，其中 ANCA 相关性肾小球肾炎（44.0%）是主要原因。在急性 肾损伤（AKI）的患者（19.5%）中，主要病因是 AAV（48.1%）。
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血管炎诊断
• 血管炎的诊断标准只是分类标准 • 系统性血管炎的诊断需根据临床表现、实验室检 查、病理活检资料及影像学资料包括X胸像、血 管造影、CT/MRI等综合判断以确定血管炎的类型 及病变范围。
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AAV鉴别诊断
• • • • • • 其他类型血管炎 感染（分枝杆菌、真菌、放线菌、梅毒 恶性肿瘤（肺癌、结外淋巴瘤、浆细胞病） 毒品的使用（经鼻吸可卡因） 变应性支气管炎、嗜酸细胞性白血病 其他自身免疫病（肺出血-肾炎综合征、 SLE）

ANCA临床意义
结合临床特征，ANCA阳性有助于诊断 单纯免疫荧光阳性意义不大，单MPO阳性意义也不大 ANCA阴性不能排除ANCA-相关的血管炎 持续ANCA阳性，而临床病情已缓解无需继续治疗 ANCA转阴性后对变成阳性，要警惕疾病复发
ANCA相关血管炎
易累及肾脏、呼吸系统、神经系统 ANCA阳性 肺部影像学、肾脏活检、EMG检查有特征性
ANCA—相关血管炎的临床特征
受累系统 全身
表现 发热、体重减轻、乏力
肌肉骨骼 皮肤
肾脏 呼吸道 神经系统
肌痛、关节痛 高出皮肤的紫癜，荨麻疹
蛋白尿、血尿、肾功能不全 坏死性肾小球肾炎 呼吸困难，咳嗽，咯血 肺部浸润，ILD，肺出血 周围神经病变（单神经炎）
ANCA相关性血管炎临床特征
特征 WG MPA Churg-strauss Syn
美国风湿病协会1990年Churg-Strauss综合征分类诊断标准
无
Churg-Strauss WG
无 其他血管炎 （如炎症性 肠病性血管 炎等
特异性检查
1
ANCA
2
3 4
活检
血管造影 非侵入性影像检查
抗中性白细胞胞浆抗体（ANCA）
P－ANCA：抗髓过氧化酶（Myeloperoxidase） 与肾小球肾炎，Churg-Strass血 管 炎，系统性坏死性血管炎综合征 有 关 C－ANCA：抗蛋白酶－3与Wegener肉芽肿 （90％）相关
炎症性 肠病 血管炎
小血管炎鉴别诊断 小血管炎
ANCA-相关小血管炎 （WG，mPA, ChurgStrauss Syn 肉芽肿？ 有 Asthma和嗜 酸性细胞增 多？ 有 无 MPA 有 HenochSchoulein purpura

常用的有间接免疫荧光法与ELISA： 1、间接免疫荧光法
医学检验·各论：抗中性粒细胞抗体（ANGA） >>>体上， 直接与相应抗原反应。
第一步，用未知未标记的抗体(待检 标本)加到已知抗原标本上，在湿盒中 37℃保温30min，使抗原抗体充分结合， 然后洗涤，除去未结合的抗体。
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临床意义： 胞抗体出现在HIV感染的非症状期且在症 状期大量增加。
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正常值： 间接免疫荧光法，ELISA法：阴性。
(注：具体参考值请根据各实验室而定。)。
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医学检验·各论 抗中性粒细胞抗体
（ANGA） 内容课件模板
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简介：
“抗中性粒细胞抗体”(ANGA)通常指 中性粒细胞减少症患者血清中的抗体以及 抗中性粒细胞膜成分抗体，这些自身抗体 与“抗中性粒细胞胞浆抗体”(ANCA)不同。 测定ANGA可以协助诊断临床上各种引起粒 细胞减少的疾病。
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简介： 进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗 涤除去多余的游离反应物，从而保证试验 结果的特异性与稳定性。
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临床意义：
ANGA阳性多见于多系统自身免疫紊乱 常伴有自身免疫性中性粒细胞减少症如系 统红斑狼疮(SLE)、干燥综合征、Graves 病以及混合性自身免疫性紊乱。霍奇金病、 非霍奇金病和慢性淋巴细胞白血病的病毒 感染可伴有免疫性中性粒细胞减少症，尤 其是EB病毒和艾滋病病毒(HIV)感染，中 性粒细

ANCA
抗中性粒细胞胞浆抗体
antineutrophil cytoplasmic antibodies
ANCA的发现
? 1982 Davies 寡免疫复合物型节段坏 死性新月体肾小球肾炎(ＮＣＧＮ)病人 中首次发现ANCA 。
? 1985 Vander Woude 研究表明ANCA 对Wegener肉芽肿高度敏感，是疾病 活动的指标。
与ANCA抗体谱相关的疾病
疾病 WG MPA NCGN CSS SLE RA UC PNCA(少见） cANCA,pANCA pANCA,cANCA (少见） pANCA,cANCA (少见） pANCA pANCA,aANCA pANCA,aANCA pANCA,aANCA pANCA,aANCA
北大第一医院肾内科对怀疑小血管炎 的5604名患者血清进行了 ANCA的检测， IIF-ANCA 检出率为5.3%，阳性检出最多 在7、8和12月份。 85% 的 IIF-ANCA 阳性 患者确诊为 ANCA相关小血管炎。抗 MPO 和抗PR3阳性的比率约为 7:1。平均发病年 龄为53.1岁。
ANCA相关疾病在我国并不少见
? PR3可降解、消化血管壁成分如弹力 蛋白及其它细胞外基质。
MPO
? MPO是中性粒细胞内含量最为丰富的蛋 白质,其分子量为133至155KD,由两条 重链和两条轻链组成。
? MPO在中性粒细胞的氧爆炸或产生超氧 阴离子过程中起重要的催化作用。
ANCA的致病作用
中性粒细胞被攻击
TNF,IL-1等 靶抗原转移到细胞膜表面
What is ANCA?
? 是以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为 靶抗原的自身抗体，主要为IgG型。
? ANCA如同抗核抗体谱一样，是一类自 身抗体的总称，其作用的抗原成分是中 性粒细胞中的髓样颗粒蛋白。

火灾袭来时要迅速疏散逃生，不可蜂 拥而出 或留恋 财物， 要当机 立断， 披上浸 湿的衣 服或裹 上湿毛 毯、湿 被褥勇 敢地冲 出去
临床表现
▪ ANCA相关性血管炎好发于中、老年 人,其中以50～60岁居多,男女比例基 本一致,但20岁以下的青年患者中以 女性多见,好发于冬春季节。
▪ 患者可有上呼吸道感染样前驱症状,且 常有发热、疲乏和体重下降等非特异 性症状,此外还常伴有多器官病变的临 床表现。
▪ 特异性特异性指标-ANCA ：诊断，指导治 疗，判断复发
火灾袭来时要迅速疏散逃生，不可蜂 拥而出 或留恋 财物， 要当机 立断， 披上浸 湿的衣 服或裹 上湿毛 毯、湿 被褥勇 敢地冲 出去
ANCA检测方法
▪ IIF法
▪ cANCA-WG ▪ pANCA-MPA
▪ 抗原特异性ELISA法
▪ 抗PR3抗体--WG ▪ 抗MPO抗体--MPA
10条中至少有3条可以考虑PAN（包括MPA）
火灾袭来时要迅速疏散逃生，不可蜂 拥而出 或留恋 财物， 要当机 立断， 披上浸 湿的衣 服或裹 上湿毛 毯、湿 被褥勇 敢地冲 出去
美国1990年分类诊断标准 --Churg Strauss syndrome
▪ 哮喘史 ▪ 血嗜酸性粒细胞增高＞10% ▪ 单神经炎，多发性单神经炎 ▪ 游走性或一过性肺浸润 ▪ 副鼻窦炎 ▪ 病理
发病机制
目前尚不清楚。多数学者认为原 发性小血管炎与免疫因素有关。 ANCA不仅是原发性小血管炎的 重要标志,而且在发病机理中也有 重要作用。
火灾袭来时要迅速疏散逃生，不可蜂 拥而出 或留恋 财物， 要当机 立断， 披上浸 湿的衣 服或裹 上湿毛 毯、湿 被褥勇 敢地冲 出去
发病机制

p, a
actin? BPI ,其它
p, a
actin? BPI ,其它
p, a
actin? BPI ,其它
p, a
LF, CG,MPO(少见)
p, a
LF, CG,MPO (少见)
p, a
LEFU,RCOIMGM,UMN PO(少见)
ANCA临床意义(3)：药物性 /感染性疾病
相关疾病
IIF染色型
抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）
EUROIMMUN
ANCA临床意义(1)：原发性系统性小血管炎
相关疾病
IIF染色型 特异性靶抗原抗体
韦格纳氏肉芽肿(WG)
c, p(少见) PR3(85%),MPO(10%)
显微型多动脉炎(MPA) 坏死性新月体肾小球肾炎 （NCGN） 过敏性肉芽肿性血管炎(CSS) 结节性多动脉炎(PAN) 抗肾小球基底膜疾病 （抗GBM病）
细胞核周围呈现平滑的带状荧 光，细胞核阴性
胞浆型ANCA（cANCA）
细胞浆呈现不均匀的颗粒样荧光， 有时形成小团块或粗大颗粒，核分
叶处有荧光增强
EUROIMMUN
两种ANCA荧光染色成因
无水乙醇固定 时，MPO等抗 原物质可以从 嗜天青颗粒中 释放出来，由 于电荷作用吸 附在细胞核周
围形成p-
ANCA
核膜型ANA的干扰
1
4
粒细胞 (乙醇固定)
猴肝
2
3
粒细胞 (甲醛固定)
EUROIMMHUNEp-2 cells
ANA + pANCA（甲醛抗性）
1
4
粒细胞 (乙醇固定)
猴肝
2
3
粒细胞 (甲醛固定)

ANCA不仅与原发性小血管炎相关,也可 见于许多其它炎症性疾病,例如炎症性肠病,包 括溃疡性结肠炎和克隆氏病;自身免疫性肝胆 疾病,如原发性硬化性胆管炎;类风湿性关节炎; 和某些肺部非感染性炎症性疾病,如囊性纤维 化、肺间质纤维化等。但上述ANCA相关的疾 病并不识别PR3和MPO,其特异性ANCA靶抗 原为其它胞浆成分。
环绕细胞核周围的细 胞质亮染
直接应用IIF法判断ANCA时，pANCA和ANA很难区分，两者并存时 又可互相掩盖，在ANA滴度较高时则 鉴别更加困难，容易造成假阳性或假 阴性。
以乙醇固定的中性粒细胞为基 质有时难以区分pANCA与抗核抗体， 借助灵长类肝脏冰冻切片可以将二 者相区别：若抗核抗体阳性则所有 肝细胞核出现荧光，而pANCA（以 及cANCA)阳性，仅在肝血窦的中性 粒细胞出现荧光。
PR3(45%)MPO(45%) PR3(25%)MPO(65%) PR3(10%)MPO(60%) LF,HEL, MPO(少见） LF, MPO(少见） LF,其他 LF, HEL,其他 PR3, MPO,BPI,其他
c-ANCA在诊断活动性WG时的敏感性 为81%～90%,特异性为97%,多数WG患 者的ANCA特异性靶抗原为PR3;
PR3可降解、消化血管壁成分如弹力 蛋白及其它细胞外基质。
MPO
MPO是中性粒细胞内含量最为丰富的蛋 白质,其分子量为133至155KD,由两条 重链和两条轻链组成。
MPO在中性粒细胞的氧爆炸或产生超氧 阴离子过程中起重要的催化作用。
ANCA的致病作用
中性粒细胞被攻击
TNF,IL-1等 靶抗原转移到细胞膜表面
特异性靶抗原
c-ANCA p-ANCA
丝氨酸蛋白酶3 （PR3） 髓过氧化物酶（MPO） 弹性蛋白酶（HEL) 组织蛋白酶G（CG） 溶菌酶（LY） 乳铁蛋白（LF） 通透性杀菌蛋白（BPI）

著。
第53页，共90页。
免疫吸附治疗时患者抗体水平变化情况
120
100
80
8 60
6
40
20
0
第第第第第第第第第第一一二二三三四四五五次次次次次次次次次次治治治治治治治治治治疗疗疗疗疗疗疗疗疗疗前后前后前后前后前后
14
12
10
4
2
0
第54页，共90页。
Rituximab（抗CD20）治疗难治性WG
ANCA相关性血管炎治疗
诱导缓解——标准治疗（激素+CTX） 维持治疗——CTX、Aza、MTX
第44页，共90页。
CTX冲击治疗ANCA相关性血管炎的疗效 及不良反应（与口服比较）
在使疾病缓解方面，CTX冲击治疗优于持 续给药 感染发生率低 复发率两者无显著差异 终末期肾衰竭或死亡方面两者无显著差 异
方法：375mg/m2/week x 4 结果：10例病人全部缓解
半年内完全停用激素 随访1年，1例复发 ANCA↓，CRP ↓，ESR ↓，IgM ↓
Karima A, et al. Ajrccm 2005; 10. 13
第55页，共90页。
B细胞在ANCA相关性血管炎 发病机理中的作用
抗原提纯功能 表达co-stimulatory分子 产生细胞因子 调节树突状细胞，T细胞的分化及激活 产生自身抗体
少见
少见
心衰
周围神经病变 10%
58%
78%
嗜酸性细胞↑ 轻度
无
显著
第21页，共90页。
第22页，共90页。
肺部表现
肺的表现 发病时(％) 总发生率(％)
肺累及
45
87
放射学发现