INVSC1酿酒酵母菌株使用说明

人抗酿酒酵母抗体（ASCA）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中抗酿酒酵母抗体（ASCA）含量。

实验原理用纯化的抗原包被微孔板，制成固相载体，往包被抗原的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗原、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的ASCA呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100U/ml，做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释）后，分别稀释成100U/ml，50U/ml，25U/ml，42.5U/ml，6.25U/ml，3.12U/ml，1.56U/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0U/ml，临用前15分钟内配制。

如配制50U/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）100U/ml 的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3.样品稀释液：1×20ml。

4.检测稀释液A：1×10ml。

5.检测稀释液B：1×10ml。

6.检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。

如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

7.检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B1:100稀释。

稀释方法同检测溶液A。

产品编号:CA T：RY8002产品概述：本产品由ds cDNA和pGADT7-Rec（Smal-lineared）载体同源重组构建文库质粒，含有多个克隆位点和限制性内切酶，可用于酵母单杂、酵母双杂筛库，可以与诱饵载体共转化酵母菌株筛选相互作用蛋白。

载体信息：保存条件：-80℃~-70℃保存，运输条件：干冰。

产品质检参数：文库库容量>1*108，重组率>95%，空载率<5%，平均长度0.8-1kb。

案例实验流程:文库菌株与诱饵菌株交配融合(1) 活化AH109诱饵培养物，挑取单克隆于5 mL的SD/-Trp培养基中摇菌，30℃，200 rpm，1-2d；(2) 将摇培好的AH109诱饵培养物(≥1x109 cfu/mL)800 g离心5 min，再用5 mL 2×YPDA 重悬诱饵菌，并和1 mL的Y187文库细胞(≥2x107 cfu/mL)混合在2 L无菌烧瓶中；注意：烧瓶的大小至少2 L才能在低速旋转时对交配培养物进行充分的通气。

(3) 用1 mL的2×YPDA冲洗文库小瓶中的细胞，冲洗2次；(4) 加入45 mL 2×YPDA，轻轻旋转，于30 ℃，30-50 rpm恒温摇床上孵育20-24 h；注意：低速旋转是必要的，以防止细胞沉淀到烧瓶的底部。

但是，以> 50 rpm的速度摇动培养物会显著降低交配效率。

(5) 800 g，10 min收集Mating产物，用50 mL ddH2O冲洗烧瓶并重悬沉淀两次，在离心收菌；(6) 最后将细胞沉淀重悬于6 mL ddH2O中。

从中取20 ul培养物进行梯度稀释后涂SD-TL 平板，用于检测文库转化效率。

其余涂三缺、四缺平板20块。

注意事项酵母工作菌液避免反复冻融，使用时请在冰上解冻。

技术支持南京瑞源生物技术有限公司坐落于南京市栖霞区生命科技园，专注于基因组高通量研究领域，致力于生物高科技研发，目前产品的技术水平已达到省级实验水平，瑞源生物立足于生命科学，为基础研究领域科学工作者提供生物学技术服务，自2019年创立以来，全体员工致力于利用酵母系统研发新药物靶点，专注于生物学研究，长期与全国各大农林/医药院校在大型科研技术研发上紧密合作。

酿酒酵母表达载体pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEFpY15TEF, pY16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424,酵母双杂交系统：酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109;质粒pGADT7,pGBKT7 ;对照质粒pGBKT7-53 , pGBKT7-lam , pGADT7-T , PCL1，酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,丫187,丫190,毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZ aA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc ,配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33, KM71 , KM71H , GS115,原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62等原核表达载体，包括pET系列，pET-GST, pGEX 系列(含GST标签)，pMAL 系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis 系列，pQE 系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB 系列，pLLP-ompA,pIN-III-ompA(分泌型表达系列),pQBI63 (原核表达带荧光)pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPi nPoi nt-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF (+) , pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk 233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK(+) ,pBlueScript SK (-) pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C,大肠杆菌冷激质粒：pColdI pColdII pColdIII pColdTF原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1, pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣：pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞：DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 TopIO ToplOF BL21 ( DE3) HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21 (AI ) BL21 (DE3) plysS TG1 TB1 DH5a (pir) Tuner (DE3) Bl21 codonplusRIPL Novablue (DE3) Rosetta Rosetta(DE3) Rosetta (DE3) plys Rosetta-gami (DE3)Rosetta-gamiB(DE3) , Rosetta-gamiB( DE3) plysS Orgami(DE3) OrgamiB (DE3) HMS174 (DE3)植物表达/RNAi 载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301,pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381 Z,1391 Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIA super1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNA载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2, T-DNA插入载体(随机突变体库)pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1枯草芽抱杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43,pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK,pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641,pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01 ,配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi 基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0, pSilencer 2.1-U6 hygro, pSilencer 3.1-H1 hygro, pSilencer 3.1-H1 neo pSilencer 4.1-CMV neo, pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi 载体(oligoengine) pSuper-puro RNAi 逆转录病毒载体(clontech) : RNAi-Ready pSIREN-Retro Q, RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen ( Luciferase shRNA Ann ealed Oligo nucleotide) RNAi 慢病毒载体(addgene : pLKO.1哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B , pSecTag2 A, pVAX1 , pBudCE4.1,pTracer CMV2, pcDNA3.1 (-) /myc-His A , pcDNA6-Myc/His B , pCEP4, pIRES, pIRESneo, pIRES hyg3, pCMV-myc, pCMV-HA , pIRES-puro3, pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT , pBIND , pACT-MyoD , pBIND-ld , pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-HybridSystem:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II 哺乳动物诱导表达系统：pOPRSVI , pOPI3CAT, pCMVLacl,GeneSwitch System:pSwitch 哺乳动物表面展示系统:pDisplay,四环素调控系统(Invitrogen): pcDNA4/TO/Myc-HisA ，pcDNA4/TO/Myc-HisB ，pcDNA4/TO/Myc-HisC ，pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ，pcDNA6/TR 四环素调控系统(Clontech) : pTet-On, pTet-Off，pTRE2,pRevTRE, pRevTet-On, pRevTet-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc，pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc ，pI K B-EGFP，pNFAT-TA-Luc，pCaspase3-senso, pAP1 (PMA) -Luc;pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFA T-RE/Hygro]，pGL4.75;p53-Luc，pAP-1-Luc，pNF- K B-Luc，pSRE-Luc，pFA2-Elk1，pFC-MEKK，pFR-luc,Gateway系统(invitrogen) pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR，乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株，pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY300PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523，pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.pla ntarum,L.rham no susGG,B.coagula ns,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infan tis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos 载体pLAFR3,pMP2444 (GFP) ,pHY300PLK,pRT102,pRL1063a,转座子载体pUT-mi niT n5,pMGS100,pWHM10,pKC1139,pSET152, pOJ260,pPG611.1,pPG612.1腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统(Stratagene : pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ, pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3,配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cell line 腺相关病毒系统(Stratagen© : pAAV-MCS , pAAV-RC , pHelper, pAAV-LacZ，pAAV-IRES-hrGFP , pCMV-MCS ,慢病毒载体:pLVX-DsRed-Mo no mer-N1,pLVX-IRES-ZsGree n1,pLVX-AcGFP1-N1 丄en ti6/v5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLe ntilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q, RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGree n, pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV- neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry 质粒载体。

s17-1lamppir大肠杆菌使用说明s17-1 lamp pir大肠杆菌编号名称规格单位北京华越洋生物NRR00790 s17-1 lamp pir大肠杆菌300ul 支s17-1 lamp pir大肠杆菌基本信息：s17-1 lamp pir大肠杆菌菌种来源于ATCC28188，引进后视为第0代。

用接种环接种至3ml沙氏葡萄糖蛋白胨液体培养基中28℃培养至OD600=0.50，视为第1代，按照1:1的体积加入50%甘油，按照每管300μl的量分装至1.5ml的EP管中。

长期保存于-80℃。

s17-1 lamp pir大肠杆菌使用方法：s17-1 lamp pir大肠杆菌为甘油菌，内含培养基。

使用时只需要用接种环在菌种处挑去一定量的菌，接种至培养基中即可。

可以划线，也可以直接接种至液体培养基中。

1、PDA液体配方：土豆200g/L，葡萄糖20g/L2、用接种环接种至3ml PDA液体培养基中28℃培养至OD600=0.50，按照1:1的体积加入50%甘油，按照每管300μl的量分装至1.5ml的EP管中。

3、按照10%的接种量接种至100ml PDA培养基中28℃培养至OD600=0.50，按照1:1的体积加入50%甘油，按照每管1ml的量分装至1.5ml的EP管中。

4、推荐保存2代，视为安全保菌的方式s17-1 lamp pir大肠杆菌操作说明：1.使用s17-1 lamp pir大肠杆菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。

也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。

2.为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板，然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

s17-1 lamp pir相关菌株:TB1(DE3)大肠杆菌菌株，TB1(DE3)大肠杆菌乙型溶血性链球菌TB1(DE3)大肠杆菌菌株，TB1(DE4)大肠杆菌阴沟肠杆菌TB1(DE3)大肠杆菌菌株，TB1(DE5)大肠杆菌粘质沙雷氏菌断发毛癣菌株，断发毛癣菌金黄色葡萄球菌ATCC6538肺炎克雷伯氏菌株，肺炎克雷伯氏菌AD494(DE3)大肠杆菌菌株粪产碱杆菌株，粪产碱杆菌AGL-1根癌农杆菌粪肠球菌粪链球菌株，粪肠球菌粪链球菌ATCC15834发根农杆菌弗氏柠檬酸杆菌株，弗氏柠檬酸杆菌BJ5183菌株福氏志贺氏菌株，福氏志贺氏菌BL21 Gold PlysS(DE3)大肠杆菌菌株光滑念珠菌株，光滑念珠菌BL21 PlysS（DE3）大肠杆菌菌株红色毛癣菌株，红色毛癣菌BL21 Trxb大肠杆菌菌株桔青霉菌株，桔青霉菌BL21-AI（DE3）大肠杆菌菌株克柔假丝酵母菌株，克柔假丝酵母菌BL21-Trxb(DE3)大肠杆菌菌株痢疾志贺氏菌株，痢疾志贺氏菌BL21(DE3)-Condon Plus-RIPL 大肠杆菌菌株马红球菌株，马红球菌BL21(DE3)大肠杆菌菌株马拉色菌株，马拉色菌BL21（DE3）PlysS 大肠杆菌菌株裴氏着色真菌株，裴氏着色真菌BL21大肠杆菌菌株普通变形杆菌株，普通变形杆菌BY4742酵母菌奇异变形杆菌株，奇异变形杆菌C41(DE3) PlysS大肠杆菌菌株缺陷假单胞菌株，缺陷假单胞菌C41(DE3)大肠杆菌菌株热带念珠菌株，热带念珠菌C43(DE3)大肠杆菌菌株生孢梭菌株，生孢梭菌C43(DE3)PlysS大肠杆菌表达菌株石膏样小孢子菌，石膏样小孢子菌株DB3.1大肠杆菌宋内志贺氏菌，宋内志贺氏菌株DH5a大肠杆菌克隆菌株汤卜逊沙门氏菌，汤卜逊沙门氏菌株DH5α大肠杆菌菌株鲜绿青霉，鲜绿青霉DH10B大肠杆菌克隆菌株小肠结肠炎耶尔森氏菌，小肠结肠炎耶尔森氏菌株DH10Bac杆状病毒表达菌株须癣毛癣菌，须癣毛癣菌株EGY48双杂交酵母菌蕈状芽孢杆菌EHA105根癌农杆菌猪霍乱沙门氏菌，猪霍乱沙门氏菌株GS115毕赤酵母表达菌A4发根农杆菌,a4农杆菌株GV3101根癌农杆菌AD494（DE3）PlysS大肠杆菌菌株INVSC1酿酒酵母菌株AH109酵母双杂交菌株,AH109 JM109 大肠杆菌菌株ArcticExpress? (DE3)RP大肠杆菌菌株JM109(DE3)大肠杆菌白念珠菌JM110大肠杆菌菌株阪崎肠杆菌K-12 MG1655大肠杆菌鲍曼不动杆菌LBA4404根癌农杆菌变形链球菌ATCC25175 LBA9402发根农杆菌表皮葡萄球菌M15 大肠杆菌菌株产气肠杆菌金黄色葡萄球菌ATCC25923肠炎沙门菌MC1061大肠杆菌菌株大肠埃希菌ATCC25922 NMY51双杂交酵母菌单增李斯特菌Origami B (DE3) 大肠杆菌菌株短小芽孢杆菌Origami2(DE3)大肠杆菌菌株腐生葡萄球菌Rosetta-gami 2（DE3）PlysS大肠杆菌表达菌株副溶血性弧菌Rosetta-gami-B pLysS大肠杆菌黑曲霉Rosetta-gami(DE3)PlysS大肠杆菌菌株金黄色葡萄球菌CMCC（B）26003 Rosetta-gami2(DE3)大肠杆菌菌株蜡样芽孢杆菌Rosetta-gamiB(DE3)大肠杆菌菌株酿酒酵母菌Rosetta(DE3) PlysS大肠杆菌菌株犬小孢子菌ATCC32903 Rosetta(DE3)大肠杆菌表达菌株嗜热脂肪芽孢杆菌Rosetta2(DE3) PlysS大肠杆菌菌株苏云金芽孢杆菌Rosetta2(DE3)大肠杆菌菌株铜绿假单胞杆菌s17-1 lamp pir大肠杆菌菌株Top10大肠杆菌菌株SMD1163酵母菌Top10F'大肠杆菌菌株Stbl2大肠杆菌菌株Trans110 大肠杆菌克隆菌株Stbl3大肠杆菌TransB 大肠杆菌菌株SURE大肠杆菌克隆菌株Tuner（DE3）大肠杆菌菌株T1大肠杆菌克隆菌株WB800枯草芽孢杆菌TG1大肠杆菌克隆菌株XL1-Blue 大肠杆菌菌株Y1HGold单杂交酵母菌株XL2 blue MRF' 大肠杆菌菌株Y2Hgold酵母双杂交菌株XL2-Blue大肠杆菌克隆菌株Y187酵母双杂交菌株XL10-Gold 大肠杆菌菌株拟南芥种子KM71酵母表达菌藤黄微球菌无乳链球菌。

二色补血草LbGRP基因的克隆及抗逆能力分析潘妍;王玉成;张大伟;杨传平【期刊名称】《遗传》【年(卷),期】2010(32)3【摘要】富含甘氨酸RNA结合蛋白(Glycine-rich RNA-bindingproteins,GRP)是植物中重要的转录后调控蛋白,在植物的生长发育及对胁迫的抗性调控等过程中起重要作用.文章从二色补血草(Limonium bicolor(Bunge)O.)cDNA文库中克隆出了富含甘氨酸RNA结合蛋白基因(LbGRP)的全长cDNA序列(GenBank登录号:GQ398238).为了研究LbGRP的抗逆功能,将其构建到酵母表达载体pYES2中,转化到酿酒酵母INVSc1菌株中,获得重组酵母INVSc1(pYES2.LbGRP),同时将转空pYES2质粒的酵母INVSc1(pYES2)作为对照.对重组酵母INVSc1(pYES2-LbGRP)和对照INVSc1(pYES2)进行NaCl、KCl、NaHCO_3、Na_2CO_3、干旱和冷冻胁迫,比较它们在不同胁迫下的存活率.结果表明,INVSc1(pYES2-LbGRP)在各种胁迫下的存活率明显高于对照INVSc1(pYES2),证明LbGRP基因具有抗NaCl、KCl、NaHCO_3、Na_2CO_3、干旱和冷冻等胁迫的能力,推测该基因参与了二色补血草的抗逆调控过程.【总页数】9页(P278-286)【作者】潘妍;王玉成;张大伟;杨传平【作者单位】东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室,哈尔滨,150040;东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室,哈尔滨,150040;东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室,哈尔滨,150040;东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室,哈尔滨,150040【正文语种】中文【相关文献】1.二色补血草硫氧还蛋白过氧化物酶基因LbTPx的克隆及其表达 [J], 刁桂萍 ;杨传平 ;王玉成2.二色补血草海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶基因的克隆及分析 [J], 马辉;刘桂丰;徐晨曦;王玉成;杨传平3.二色补血草中2个金属硫蛋白基因的克隆及分析 [J], 李红艳;杨传平;王玉成;王丙锋4.二色补血草LbARP基因的克隆及其表达分析 [J], 刁桂萍;柳燕;宋佳;林佳忱;刘志华5.一个新的二色补血草金属硫蛋白基因LbMT2的克隆及其表达分析 [J], 班巧英;刘桂丰;王玉成;张大伟;蒋丽丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

酿酒酵母表达载体pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF，pY15TEF，pY16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109；质粒pGADT7,pGBKT7；对照质粒pGBKT7-53，pGBKT7-lam，pGADT7-T，PCL1，酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190,毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZαA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc，配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33，KM71，KM71H，GS115，原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列，pET-GST，pGEX系列（含GST标签），pMAL系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列，pQE系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB系列，pLLP-ompA,pIN-III-ompA （分泌型表达系列）,pQBI63（原核表达带荧光）pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinPoint-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF（+）, pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK （+）,pBlueScript SK（-）pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒： pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1，pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣： pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞： DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21（DE3）HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21（AI）BL21（DE3）plysS TG1 TB1 DH5a（pir）Tuner（DE3）Bl21 codonplusRIPL Novablue （DE3）Rosetta Rosetta（DE3）Rosetta（DE3）plys Rosetta-gami（DE3）Rosetta-gamiB（DE3）, Rosetta-gamiB（DE3）plysS Orgami（DE3）OrgamiB（DE3）HMS174（DE3）植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301,pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIAsuper1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2,T-DNA插入载体（随机突变体库）pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43,pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK,pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641,pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01，配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0，pSilencer 2.1-U6 hygro， pSilencer 3.1-H1 hygro，pSilencer 3.1-H1 neo， pSilencer 4.1-CMV neo， pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi载体（oligoengine）pSuper-puro RNAi逆转录病毒载体（clontech）: RNAi-Ready pSIREN-Retro Q， RNAi-ReadypSIREN-RetroQ-ZsGreen（Luciferase shRNA Annealed Oligonucleotide）RNAi慢病毒载体（addgene）: pLKO.1哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B，pSecTag2 A，pVAX1，pBudCE4.1,pTracer CMV2，pcDNA3.1（-）/myc-His A ，pcDNA6-Myc/His B，pCEP4， pIRES，pIRESneo，pIRES hyg3，pCMV-myc，pCMV-HA，pIRES-puro3，pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT，pBIND，pACT-MyoD，pBIND-Id，pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-Hybrid System:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II哺乳动物诱导表达系统:pOPRSVI ，pOPI3CAT，pCMVLacI,GeneSwitch System:pSwitch哺乳动物表面展示系统:pDisplay, 四环素调控系统（Invitrogen）：pcDNA4/TO/Myc-His A，pcDNA4/TO/Myc-His B，pcDNA4/TO/Myc-His C，pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ，pcDNA6/TR四环素调控系统（Clontech）：pTet-On，pTet-Off，pTRE2,pRevTRE，pRevTet-On，pRevTet-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc，pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc，pIκB-EGFP，pNFAT-TA-Luc，pCaspase3-sensor，pAP1（PMA）-Luc;pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFA T-RE/Hygro]，pGL4.75;p53-Luc，pAP-1-Luc， pNF-κB-Luc，pSRE-Luc，pFA2-Elk1，pFC-MEKK，pFR-luc,Gateway系统（invitrogen）pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR，乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株，pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY3 00PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523，pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.plantarum,L.rhamnosusGG,B.coagulans,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infantis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos载体pLAFR3,pMP2444（GFP）, pHY300PLK,pRT102,pRL1063a, 转座子载体pUT-miniTn5,pMGS100, pWHM10,pKC1139,pSET152,pOJ260,pPG611.1,pPG612.1，腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统（Stratagene）: pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ,pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cellline 腺相关病毒系统（Stratagene）： pAAV-MCS，pAAV-RC，pHelper，pAAV-LacZ，pAAV-IRES-hrGFP，pCMV-MCS，慢病毒载体:pLVX-DsRed-Monomer-N1,pLVX-IRES-ZsGreen1,pLVX-AcGFP1-N1,Lenti6/v 5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLentilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGreen,pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV-neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry质粒载体。

酿酒酵母表达载体pYES2,ｐYES２／NT,ｐYＥS２/CT,pYES3,pYES6,pYCｐlａｃ2２-GＦP,酵母载体pAUR12３,pRS３03TEF,pRS30４, pRS305,pRS306,ｐY13ＴEF,ｐY14TEＦ,pY１５TEF,pＹ16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6,pＳH４７,酵母单杂载体pHISｉ,pLacZi,pHIＳ2, pGＡD4２4, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187,酿酒酵母AＨ109;质粒pGADＴ7,pGBＫT７;对照质粒pGBKT7－5３,pGBKT７-lam,pGＡDＴ７-T,PCＬ1,酿酒酵母菌株ＩＮＶＳc1,YM42７1, AH109,Y1８７,Y１９0,毕赤酵母表达载体pPＩＣ9K,pPIC9Ｋ-His,pPＩＣ3.5K,ｐＰICZalｐhaＡ,B,C,ｐP ＩCZA,B,C,ｐGAPZαA,ｐAＯ8１5,pPIC9k-Hｉs,pＨIL-S1,pＰink ｈc,配套毕赤酵母Pｉcｈiaｐiｎk,毕赤酵母宿主Ｘ33,KＭ７１,KM71H,GS115,原核表达载体pQＥ30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括ｐET系列,ｐＥT-GST,pGEX系列(含GＳT标签),pMAL系列pMＡL-c2x,－c4x,－c4e,-c5x,-p5x,pＢＡD,pBAＤHis,ｐＢADmycHis系列,ｐQE系列,pＴｒｃ9９a,pTrcＨis系列,pＢV２2０,22１,222,pTＸＢ系列,ｐLＬP-oｍpA,pIN-III-ompA(分泌型表达系列),pQBI6３(原核表达带荧光)pEＴ3a, pET 3d, pET 11a,ｐEＴ12a, ｐEＴ14b, ｐＥT 15b, pＥT 16b, pＥT 17b,pET 19b, pET 2０b, pET 21a,b,d, pET ２2b,ｐET ２3a,ｐET 23b, pET24a,b,pET ２5ｂ, pET 2６b, ｐEＴ27b, pET ２8a,b, pET 29a,pET 30a, pET 31b, pET32a, pEＴ35b, pET 38b, pEＴ３９b,pET 40b, pEＴ４１ａ,b pET 42a,pＥT 43、1ａ,b pET 44ａ, ｐEＴ49ｂpEＴ３０2,303 pET His,pET Dsｂ,ｐET GST,ｐＥT Trx pＱE2, ｐQE9 pQE30,31,32, pQE 4０ｐQＥ７０pQE80L pＱＥTirs sｙstem pR ＳET-A pRSEＴ-B pRSET－C pGEX4T-1,-2,－3,５ｘ-１,6p-1,６p-2,2ｔk,3c ｐＢV22０,221,222 ｐTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAＤＨｉsＡ,B,C pPinPoiｎｔ-Ｘa1,Xa2,Xａ3 pMALc2x, p2x pＢV220 pGEM Ex1, pGEＭ7ZF(+), pＴrｃ99Ａ,ｐTwin1, pEZZ18ｐkk232－８,pｋk ２33-３,pAＣYＣ１８4,pBR３２2,ｐUC119 pＴYB1,pTYB2,pTYB4,pTＹB11 pＢlueＳcript SK(+),pＢlueSｃript SK(－) ｐLＬP ompA, ｐＩNIIIomｐA,ｐMＢP-P,pＭBP-Ｃ, 大肠杆菌冷激质粒: p ＣｏｌdＩpColｄII ｐColdIIＩpCｏldTF 原核共表达质粒:pＡCYCｄuet－1,ｐＥTｄuet-1,pＣＤFdｕｅt-1,ｐＲＳFduet－1 Ｔakara公司大肠杆菌分子伴侣: p Ｇ-KＪＥ8 ｐGro7 pKJE7 pＧＴｆ２ｐTf１6 大肠杆菌宿主细胞: DH5a JM101 JＭ103 ＪＭ105 JM107 JＭ１０9JM110Top1０Toｐ１０F ＢL21(ＤE３) HB１01 ER252９Ｅ２５66 C256６MＧ1655XL－10goｌd ＸＬblue Ｍ15 JＦ11２5K802 SＧ111７BL21(ＡI) BL21(DＥ3)plysS TG1 TB1 DH5ａ(ｐir) Tuner(DＥ3) Bl21 codonplusRIPL Novablue(ＤE3)RosettａＲｏsetｔa(DE3) Ｒoseｔｔa(DＥ３)plysＲosetta－ｇamｉ(ＤＥ3) Ｒｏseｔta-ｇａmiＢ(DＥ3), Ｒｏsettａ-ｇａmiB(DＥ3)plysS Orｇami(DＥ３)ＯrｇamiB(DE3) HMS174(DＥ3)植物表达／ＲNＡi载体农杆菌pＢI121,pBＩ12１-ＧFＰ,pBI101,pＢI2２1,pSN1301, pＵN1３01,pRTL２, pRＴL2-GFP ,pRTL2-CFP,pRTL2-RFＰ, pRＴL2-YFP,pCAMＢIＡ１３00, １301, １３0２,１303,１304,１305, 1３8１Z,13９1Z,230０, 2301,330０,３301,pＣAMBIA suｐer13００,ｐCAMBIＡsupeｒ1300－GFＰ,pPZＰ212,pＰＺP２1２1,pPZP21２-ＧＦP,pGDG,RNAi载体pART2７,ｐHAＮＮIBAL,pＫAＮNIBＡL,pＦGＣ５9４1,pTＣK303, pTRV１,pＴRV ２, T－ＤNＡ插入载体(随机突变体库)pSKＩ0１5,ｐSKI07４,真菌ＡTＭT载体p ＢＩG2RHPＨ2-GUＳ-GFＰ,ｐＢHt1枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,ｐＨT4３,pHP１３,pHＰ４3, pBE2,pMUTＩN4,pUB11０,ｐＥ1９4,ｐMA5, pMＫ３,ｐＭK４,pHT304,pHY300PLK, pＢest5０2,pDＧ1363,pSG1154,pＡX01, ｐＳAS1４4,ｐDＬ,ｐDG148-stu,pDG641,ｐA Ｌ12,ｐUＣX０5-ｂgaB,pHT0１,配套菌株ＢS １６８,WＢ60０,ＷB800,WB7００, WB800N,1０１2,FZB42,1A7４７,广宿主质粒ｐＶＬT３3RNＡi基因沉默干扰敲除载体pSilenｃer1、0,pSｉlencer ２.１-U６hｙｇｒo, pSｉlenｃer 3.1-H1hygｒo,pSilencer 3、１-H1 neo,ｐSileｎcer 4、1-CMＶne ｏ, pSileｎｃｅｒ4、1－CMV puro pMIR－RＥPORT Lｕciferase RNＡi载体(olｉｇoｅngine) pSuｐer-puro RＮＡｉ逆转录病毒载体(cloｎtｅｃh): RＮＡi －Ｒｅady pＳＩREN-Retro Q, RNAi-Reａdy ｐＳIＲEN-ＲｅtroQ-ZsGreeｎ(LuｃiferasｅshRNＡAnneａlｅdＯlｉgonucｌeotiｄe) RNＡi慢病毒载体(addgeｎe): pLKO.1哺乳动物表达载体ｐｃDNA3、1＋/-,pｃDNA4/HｉsＭax B,pSecTaｇ2 A,pVAＸ1,pBｕdCE4.1,pTrａcer CMＶ２,pcＤNＡ３、1(-)/ｍyc－Ｈis A ,pcDNA6-Ｍｙc/His Ｂ,pＣEＰ4,ｐIRES,pIRＥSnｅo,pIRES hyg3,pCMＶ-ｍyc,pCMV－HA,pＩRES-puｒｏ３,ｐIＲＥS-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACＴ,ｐBIND,pACＴ-MyｏD,pBＩND-Ｉd,pG5luc,pＣMＶ-BD,pCMV－AD, pBD-p5３, ｐＦR-ｌuｃ,CｙtotraｐＴwo－HybrｉｄSysｔem:ｐSｏs, pSoｓMAFＢ, ｐMｙr蜕皮激素诱导系统ｐＩND, ｐVｇＲxR,LacSwith ＩI哺乳动物诱导表达系统:ｐOPＲＳVI ,pOPI3ＣＡＴ,pCMVLacI,GｅneSwitcｈSyｓtｅm:pＳwiｔｃh哺乳动物表面展示系统:pDiｓplａy, 四环素调控系统(Invitrｏｇeｎ):pcＤNA4／TＯ／Myｃ-HiｓA,pcDＮA4/TO/Myc-HiｓB,ｐcDNＡ４/TO/Myc-Ｈis C,ｐｃDNA4/ＴO/Mｙｃ－His/ＬacＺ,pcDNA６/TR四环素调控系统(Cｌｏntech):pTeｔ-On,pTeｔ-Ｏff,ｐTRE2,pRevTRE,pReｖTｅｔ-On,ｐRevTet-off 信号通路报告载体:pＧAS-TA-Ｌｕc,ｐＳTAＴ3-TＡ-Ｌｕc,ｐISRE-TA－Lu ｃ, pTＡ-Luc,pIκB－EＧFＰ,pNFＡＴ-TA－Luc,pCasｐase3-sensor,pAP１(PMA)－Luc;pGL4.26[lｕc2P/ｍｉnＰ/Hｙgro],pGL4.２9[lｕc2Ｐ/ＣＲＥ/Hygｒｏ],pGL４.３0[luc2P/NFAT-RＥ/Ｈygｒo],pGL4、75;p５3-Luc,pAP-1-Lｕc, pNF-κB－Lｕc,pSRE-Lｕc,pFＡ２-Elk１,pFC-ＭＥKK,pFR-luc,Gaｔeｗａy系统(inviｔrｏｇen)pcDNＡ6、2－GＷEmＧFP-miR ｎegａtive, pＬeｎｔi6／TR,pcDNＡ6、２-GＷEmＧFP-mｉR,乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株,pNZ8148,pLEISS,pMG3６e,ｐBB Ｒ1ＭCＳ-5,pBBＲ1MCＳ－6,ｐＲV61０,pLＥＭ4１5,ｐＨY300ＰLＫ,分泌型乳酸菌表达载体pVＥ5523,pＰG611、1,pＰG６１２.1等与乳酸杆菌菌株宿主菌NZ ９００0,ＭG13６3,Laｃtoｂaｃｉｌluｓcaｓei １.539,Ｌacｔｏbacｉｌｌuｓcasei,acidophilｕsＮCFM,1、2,Lactobaciｌｌus sａkei 23K,Ｌ、planｔaｒuｍ,L.rh ａmnosus GG,B、ｃoaguｌans,Biｆidobactｅrium ｂiｆiduｍ,Ｂifidｏbactｅrｉｕｍinfantis,Laｃtococcus lacｔｉs M17,1663,Lactobａcillus reuｔｅrii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MＣS-2,3,4,5,6, ｐJＲD2１５,pJN105,ｐＭE60３２,Ｃos载体pLＡＦR３,pMP2444(ＧFＰ),pHY３00ＰLＫ,pＲT1０２,pRＬ１0６3a, 转座子载体ｐUT-minｉＴn ５,pMＧS100,pWHＭ10,pKＣ1139,pＳＥT１52,pOJ260,pPＧ６11、1,ｐPG6１2、1,腺病毒载体/慢病毒,逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒,腺病毒系统(Strａtagene): pAdEａsy-1,pSｈuttle-CＭＶ,pShutｔｌe,pAdTrack,pAdＴracｋ-CＭV, ｐＳhuttle-ＩRＥS-ｈrＧＦP-１、pShuttle-IRＥS－hｒＧＦP-2、pShuttlｅ-CMV-lacZ, pShuｔtｌe－CMV-EGＦP-Ｃ,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BＪ5183,2９３,２93T cｅll ｌｉｎe 腺相关病毒系统(Strataｇene):ｐAAＶ-MCS,pAＡＶ-RＣ,pHｅｌｐer,pAAV-LacZ,pAAＶ-IRES-hrＧFP,pＣMV-MCS,慢病毒载体:ｐLVX-DsRed-Ｍoｎomｅr－N1,pLVX－IREＳ－ZｓGreen1,pLVＸ-AcＧFP1-N1,Lｅｎti6/v5-EDST－EＧFP,pＷPXL, FＵGW,pLeｎｔilox 3、7,ＲNＡｉ－ReａｄｙpＳIREN-Reｔro Ｑ, RNＡi-Ready pSIREN－Retro Q－ＺsGreen, ｐSUＰEＲ、Rｅtro-ＧＦP／Neo,ｐＳUPER-Ｒetrｏ-Ｎeo, pSUPＥR.Retro-puro,PLＮＣＸPLNＣX2 pMＳＣV-HYG pMSCＶ-ｎeo ｐＭSCＶ-puro pLEGFP-C1 ｐLＯX-CW-CRE pＬOＸ-GFP-IＲＥS-TK pRｅtｒoＸ－IREＳ-ＤsＲｅdExprｅsｓ, pLVX-ＩRＥS-ｍＣherry质粒载体。

酵母菌灭活条件
酵母菌的灭活条件可以采用多种方法，以下是一些常见的方法：
1.高压蒸汽灭菌法：在103.4千帕蒸汽压和121.3摄氏度的条件下，
维持15-20分钟，可以杀死所有的微生物，包括酵母。

2.巴氏消毒法：通过低温维持法来灭活酵母。

3.热处理：在发面过程中，如果温度超过54℃，酵母会失去活性。

此外，酒装瓶后，用玻璃瓶密封并在65-70℃下灭菌20分钟，既可以达到杀菌的效果，又能将酵母灭活。

4.紫外照射：采用紫外灯照射酵母约12小时也可以实现灭活。

5.辐照：辐照处理对酵母的杀菌灭活效果很好，但需要注意的是，
如果果酒包装采用玻璃材质，可能会因为辐照导致玻璃颜色发生改变。

6.试剂法：使用0.9%的碘乙酰胺溶液也可以灭活酵母。

所有质粒载体汇总酿酒酵母表达载体pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF，pY15TEF，pY16TEF, 酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109；质粒pGADT7,pGBKT7；对照质粒pGBKT7-53，pGBKT7-lam，pGADT7-T，PCL1，酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190,毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZαA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc，配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33，KM71，KM71H，GS115，原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列，pET-GST，pGEX系列（含GST标签），pMAL系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列，pQE系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB系列，pLLP-ompA,pIN-III-ompA （分泌型表达系列）,pQBI63（原核表达带荧光）pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinPoint-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF（+）, pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk233-3,pACYC184,pBR322,pUC119pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK （+）,pBlueScript SK （-）pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒： pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1，pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣： pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞： DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21（DE3）HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21（AI）BL21（DE3）plysS TG1 TB1 DH5a（pir）Tuner（DE3）Bl21 codonplusRIPL Novablue （DE3）Rosetta Rosetta（DE3）Rosetta（DE3）plys Rosetta-gami（DE3）Rosetta-gamiB（DE3）, Rosetta-gamiB（DE3）plysS Orgami （DE3）OrgamiB（DE3）HMS174（DE3）植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301,pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIAsuper1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2,T-DNA插入载体（随机突变体库）pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43,pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5,pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK,pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641,pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01，配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0，pSilencer 2.1-U6 hygro，pSilencer 3.1-H1 hygro，pSilencer 3.1-H1 neo，pSilencer 4.1-CMV neo， pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi载体（oligoengine）pSuper-puro RNAi逆转录病毒载体（clontech）: RNAi-Ready pSIREN-Retro Q， RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen（Luciferase shRNA Annealed Oligonucleotide）RNAi慢病毒载体（addgene）: pLKO.1 哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B，pSecTag2 A，pVAX1，pBudCE4.1,pTracer CMV2，pcDNA3.1（-）/myc-His A ，pcDNA6-Myc/His B，pCEP4， pIRES，pIRESneo，pIRES hyg3，pCMV-myc，pCMV-HA，pIRES-puro3，pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT，pBIND，pACT-MyoD，pBIND-Id，pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-Hybrid System:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II哺乳动物诱导表达系统:pOPRSVI ，pOPI3CAT，pCMVLacI,GeneSwitch System:pSwitch哺乳动物表面展示系统:pDisplay, 四环素调控系统（Invitrogen）：pcDNA4/TO/Myc-His A，pcDNA4/TO/Myc-His B，pcDNA4/TO/Myc-His C，pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ，pcDNA6/TR四环素调控系统（Clontech）：pTet-On，pTet-Off，pTRE2,pRevTRE，pRevTet-On，pRevT et-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc，pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc，pIκB-EGFP，pNFAT-TA-Luc，pCaspase3-sensor，pAP1（PMA）-Luc;pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL 4.30[luc2P/NFA T-RE/Hygro]，pGL4.75;p53-Luc，pAP-1-Luc，pNF-κB-Luc，pSRE-Luc，pFA2-Elk1，pFC-MEKK，pFR-luc,Gateway系统（invitrogen）pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR，乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株，pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY3 00PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523，pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.plantarum,L.rhamnosusGG,B.coagulans,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infantis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii 广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos 载体pLAFR3,pMP2444（GFP）, pHY300PLK,pRT102,pRL1063a, 转座子载体pUT-miniTn5,pMGS100, pWHM10,pKC1139,pSET152,pOJ260,pPG611.1,pPG612.1，腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统（Stratagene）: pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ,pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cellline 腺相关病毒系统（Stratagene）：pAAV-MCS，pAAV-RC，pHelper，pAAV-LacZ，pAAV-IRES-hrGFP，pCMV-MCS，慢病毒载体:pLVX-DsRed-Monomer-N1,pLVX-IRES-ZsGreen1,pLVX-AcGFP1-N1,Lenti6/v 5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLentilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGreen,pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV-neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry质粒载体。

6个简答和2个论述题CAS-ibp-2004名词解释：肽平面；肽键中的C—N键具有部分双键的特征，不能自由旋转，这些现象是因共振而产生的。

其结果使肽键处在一个刚性的平面上，此平面被称为肽键平面(酰胺平面)。

磷酸戊糖途径；一个葡萄糖-6-磷酸经代谢产生NADPH和核糖-5-磷酸的途径。

其过程可以分为两个阶段：①六碳糖（6-磷酸-葡萄糖）脱羧形成五碳糖（5-磷酸-核酮糖），并伴有NADPH+H+和CO2的生成；②5-磷酸-核酮糖通过异构化，转酮基，转醛基与糖酵解途径联系起来。

荧光共振能量转移（FRET）；当一个荧光分子（又称为供体分子）的荧光光谱与另一个荧光分子（又称为受体分子）的激发光谱相重叠时，供体荧光分子的激发能诱发受体分子发出荧光，同时供体荧光分子自身的荧光强度衰减。

简答：1 “限制性内切酶是原核生物抵抗外界，免疫防御的一道防线”这句话如何理解。

定义：限制性核酸内切酶是可以识别特定的核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶，简称限制酶。

在20 世纪60 年代，人们就注意到DNA 在感染宿主后会被降解的现象，从而提出限制性切酶和限制酶的概念。

1968 年，首次从E.coli K 中分离到限制酶，它有特定的识别位点但没有特定的切割位点，其中切割位点离识别位点达1000bp 以上。

1970 年，美国约翰·霍布金斯大学的H. Smith 于偶然中发现，流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae）能迅速降解外源的噬菌体DNA ，其细胞提取液可降解E.coli DNA ，但不能降解自身DNA ，从而找到HindⅡ限制性内切酶。

限制性核酸内切酶分布极广，几乎在所有细菌的属、种中都发现至少一种限制性内切酶，多者在一属中就有几十种，例如在嗜血杆菌属中（Haemophilus）现已发现的就有22种。

限制作用实际就是限制酶降解外源DNA，维护宿主遗传稳定的保护机制。

酿酒酵母表达载体p YES2 ,p YES2/NT ,p YES2/CT ,p YES3 ,p YES6, pYCp Iac22-GF P,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEFPY15TEF, pY16TEF,酵母基因重组表达载体p UG6, p SH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424,酵母双杂交系统：酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109 ;质粒PGADT7,pGBKT7 ；对照质粒pGBKT7-53，pGBKT7-lam，pGADT7-T , PCL1,酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109，丫187，丫190, 毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZ aA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc，配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33，KM71，KM71H，GS115,原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62等原核表达载体，包括pET系列，pET-GST, PGEX 系列(含GST标签)，pMAL 系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis 系列，pQE 系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB 系列，pLLP-ompA,pIN-HI-ompA (分泌型表达系列),pQBI63 (原核表达带荧光)pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a,pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His, pET Dsb, pET GST, pET Trx p QE2, pQE9 p QE30,31,32, pQE 40 p QE70 pQE80L p QETirs system pRSET-A pRSET-B p RSET-C p GEX4T-1,-2,-3,5x-1,6 p-1,6 p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinP oi nt-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF (+) , pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk233-3, PACYC184, pBR322 ,p UC119 p TYB1, pTYB2, pTYB4, pTYB11 p BIueScri pt SK(+) ,pBlueScript SK (-) pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C,大肠杆菌冷激质粒：pColdI pColdII pColdIII pColdTF原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1, pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣：PG-KJE8 PGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞：DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21( DE3) HB101 ER2529 E2566C2566 MG1655 XL- 10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21 ( AI) BL21(DE3)plysS TG1 TB1 DH5a (pir)Tuner( DE3)BI21 codonplusRIPL Novablue(DE3) Rosetta Rosetta(DE3) Rosetta( DE3)plys Rosetta-gami (DE3)Rosetta-gamiB(DE3) , Rosetta-gamiB( DE3)plysS Orgami(DE3) OrgamiB( DE3) HMS174 (DE3) 植物表达/RNAi 载体农杆菌PBI121,PBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301, p UN1301, pRTL2 , p RTL2-GF P , p RTL2-C FP, p RTL2-R FP , p RTL2-Y FP,p CAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z, 1391Z,2300, 2301,3300,3301, pCAMBIA sup er1300, pCAMBIAsup er1300-GF P,pPZP 212, pPZP 2121, pPZP 212-GF P,p GDG,RNA K 体p ART27, pH ANNIBAL ,p KANNIBAL, pFGC5941, pTCK303, pTRV1, pTRV2,T-DNA插入载体(随机突变体库)pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体p BIG2R HPH 2-GUS-GF P,p BHt1枯草芽抱杆菌表达载体P WB980, pH T43, pHP 13, pHP 43, pBE2, PMUTIN4,pUB110, pE194, pMA5, p MK3, pMK4, pH T304, pH Y300PLK, pBest502, PDG1363,p SG1154, pAX01, pSAS144, pDL, pDG148-stu, pDG641, pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01 ,配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi 基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0, pSilencer 2.1-U6 hygro, pSilencer3.1-H1 hygro, pSilencer 3.1-H1 neo PSilencer4.1-CMV neo, pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi 载体(oligoengine) pSuper-puro RNAi 逆转录病毒载体(clontech) : RNAi-Ready pSIREN-Retro Q, RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen ( Luciferase shRNA Ann ealed Oligo nucleotide) RNAi 慢病毒载体(addgene : pLKO.1哺乳动物表达载体PCDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B , pSecTag2 A, pVAX1 , pBudCE4.1,pTracer CMV2, pcDNA3.1 (-) /myc-His A , pcDNA6-Myc/His B , pCEP4, pIRES, pIRESneo, pIRES hyg3, pCMV-myc, pCMV-HA , pIRES-puro3, pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT , pBIND , pACT-MyoD , pBIND-Id , pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-HybridSystem:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II 哺乳动物诱导表达系统：pOPRSVI , pOPI3CAT , pCMVLacI,GeneSwitchSystem: pSwitch哺乳动物表面展示系统：p Dis play,四环素调控系统(In vitrogen): pcDNA4/TO/Myc-His A , pcDNA4/TO/Myc-His B , pcDNA4/TO/Myc-His C ,pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ , pcDNA6/TR 四环素调控系统(Clontech): pTet-On , pTet-Off , pTRE2,pRevTRE , pRevTet-On , pRevTet-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc , pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc , pI K B-EGFP,pNFAT-TA-Luc ,pCaspase3-sensQr pAP1 (PMA)-Luc; pGL4.26[luc2 P/minP/Hygro], pGL4.29[luc2 P/CRE/Hygro], pGL4.30[luc2 P/NFA T-RE/Hygro] , pGL4.75;p53-Luc, pAP-1-Luc, pNF-K B-Luc, pSRE-Luc, pFA2-Elk1 , pFC-MEKK , pFR-luc,Gateway系统(invitrogen) pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR , 乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株pN Z8148, pLEISS, pMG36e, pBBR1MCS-5, pBBR1MCS-6, pRV610, pLEM415, pHY3 OOPLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523, pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L. pla ntarum,L.rham no susGG,B.coagula ns’Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infan tis,Lactococcus lactisM17,1663,Lactobacillus reuterii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33, pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215, pJN105, pME6032,Cos 载体pLAFR3,pMP2444 (GFP) , pHY300PLK,pRT102,pRL1063a,转座子载体pUT-mi niT n5, pMGS100, p WHM10, pKC1139, pSET152, pO J260, pP G611.1, pP G612.1腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统(Stratagene : pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ, pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3,配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cell line 腺相关病毒系统(Stratageng : pAAV-MCS , pAAV-RC , pHeIper , pAAV-LacZ , pAAV-IRES-hrGFP , pCMV-MCS ,慢病毒载体:p LVX-DsRed-Mo no mer-N1, pLVX-IRES-ZsGree n1, pLVX-AcGF P1-N1,Le nti6/v 5-EDST-EGF P,pWP XL, FUGW, pLe ntilox 3.7,RNAi-Ready p SIREN-Retro Q,RNAi-Ready p SIREN-Retro Q-ZsGree n,pSUP ER.Retro-GF P/Neo ,pSUP ER-Retro-Neo, pSUP ER.Retro-puro,P LNCXP LNCX2 p MSCV-HYG p MSCV- neo p MSCV- puro p LEGF P-C1 p LOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry 质粒载体。

酿酒酵母表达载体pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF，pY15TEF，pY16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109；质粒pGADT7,pGBKT7；对照质粒pGBKT7-53，pGBKT7-lam，pGADT7-T，PCL1，酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190,毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZαA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc，配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33，KM71，KM71H，GS115，原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列，pET-GST，pGEX系列（含GST标签），pMAL系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列，pQE系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB系列，pLLP-ompA,pIN-III-ompA （分泌型表达系列）,pQBI63（原核表达带荧光）pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinPoint-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF（+）, pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK （+）,pBlueScript SK（-）pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒： pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1，pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣： pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞： DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21（DE3）HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21（AI）BL21（DE3）plysS TG1 TB1 DH5a（pir）Tuner（DE3）Bl21 codonplusRIPL Novablue （DE3）Rosetta Rosetta（DE3）Rosetta（DE3）plys Rosetta-gami（DE3）Rosetta-gamiB（DE3）, Rosetta-gamiB（DE3）plysS Orgami（DE3）OrgamiB（DE3）HMS174（DE3）植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301,pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIAsuper1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2,T-DNA插入载体（随机突变体库）pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43,pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK,pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641,pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01，配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0，pSilencer 2.1-U6 hygro， pSilencer 3.1-H1 hygro，pSilencer 3.1-H1 neo， pSilencer 4.1-CMV neo， pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi载体（oligoengine）pSuper-puro RNAi逆转录病毒载体（clontech）: RNAi-Ready pSIREN-Retro Q， RNAi-ReadypSIREN-RetroQ-ZsGreen（Luciferase shRNA Annealed Oligonucleotide）RNAi慢病毒载体（addgene）: pLKO.1哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B，pSecTag2 A，pVAX1，pBudCE4.1,pTracer CMV2，pcDNA3.1（-）/myc-His A ，pcDNA6-Myc/His B，pCEP4， pIRES，pIRESneo，pIRES hyg3，pCMV-myc，pCMV-HA，pIRES-puro3，pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT，pBIND，pACT-MyoD，pBIND-Id，pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-Hybrid System:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II哺乳动物诱导表达系统:pOPRSVI ，pOPI3CAT，pCMVLacI,GeneSwitch System:pSwitch哺乳动物表面展示系统:pDisplay, 四环素调控系统（Invitrogen）：pcDNA4/TO/Myc-His A，pcDNA4/TO/Myc-His B，pcDNA4/TO/Myc-His C，pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ，pcDNA6/TR四环素调控系统（Clontech）：pTet-On，pTet-Off，pTRE2,pRevTRE，pRevTet-On，pRevTet-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc，pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc，pIκB-EGFP，pNFAT-TA-Luc，pCaspase3-sensor，pAP1（PMA）-Luc;pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFA T-RE/Hygro]，pGL4.75;p53-Luc，pAP-1-Luc， pNF-κB-Luc，pSRE-Luc，pFA2-Elk1，pFC-MEKK，pFR-luc,Gateway系统（invitrogen）pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR，乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株，pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY3 00PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523，pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.plantarum,L.rhamnosusGG,B.coagulans,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infantis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos载体pLAFR3,pMP2444（GFP）, pHY300PLK,pRT102,pRL1063a, 转座子载体pUT-miniTn5,pMGS100, pWHM10,pKC1139,pSET152,pOJ260,pPG611.1,pPG612.1，腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统（Stratagene）: pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ,pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cellline 腺相关病毒系统（Stratagene）： pAAV-MCS，pAAV-RC，pHelper，pAAV-LacZ，pAAV-IRES-hrGFP，pCMV-MCS，慢病毒载体:pLVX-DsRed-Monomer-N1,pLVX-IRES-ZsGreen1,pLVX-AcGFP1-N1,Lenti6/v 5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLentilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGreen,pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV-neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry质粒载体。

酵母转化试剂盒使用说明书（第二版）储存条件：Carrier DNA短期4℃，长期-20℃保存，其它组分可室温或4℃保存，有效期1年。

产品内容：Components SK2400-200PEG Solution50mlLiAc Solution50mlCarrier DNA2×1ml说明书1份酵母感受态细胞的制备：1.活化菌种。

-80℃保存的菌种在固体YPDA培养基（YPDA加20g Agar/L）上划线，在30℃培养2-4天。

2.挑取酵母单菌落在固体YPDA培养基上划3-5mm的短线，在30℃培养2-4天。

待酵母单菌落长至2mm长时，接种。

3.首先把酵母细胞接种到3ml液体YPDA培养基中，30℃过夜培养。

4.第二天转接到含有30ml液体YPDA培养基的三角瓶中继续培养，待OD600到0.4-0.5范围内。

收集细胞，1000g，离心5min,去上清。

5.沉淀用30-50ml的无菌的去离子水悬浮。

1000g，离心5min，去上清。

6.沉淀用合适体积的1/10浓度的LiAc悬浮（30ml的酵母菌最多用不超过1mL的1/10浓度的LiAc悬浮，通常100μl的酵母细胞用于转化一个质粒，即一个反应）。

1/10浓度的LiAc稀释方法：100μl LiAc Solution+900μl无菌水。

7.把酵母细胞的悬浮液分装到1.5ml的离心管中，每管分装100μl，用于转化一个质粒即一个反应。

1000g，离心5min，去上清。

制备好的感受态细胞备用。

酵母转化：1.配制预混液，每转化一个质粒即一个反应需要360μl的预混液。

PEG Solution240μlLiAc Solution36μlCarrier DNA10μl质粒（大约200ng/μl）5μl（根据质粒的浓度加入相应的体积）O补充）总体积360μl（不足体积用ddH22.吸取360μl的预混液加入到感受态细胞中，用枪头反复吹吸沉淀，使离心管底的酵母细胞彻底地悬浮在含有PEG的预混液中。

准备培养基及酵母菌种的操作步骤介绍：培养基是生物学实验中非常重要的一部分，它提供了微生物生长所需的营养物质。

在培养基中培养酵母菌种，既可以用于学术研究，也可以用于工业生产。

本文将介绍准备培养基及酵母菌种的操作步骤。

材料准备：1. 干净的培养皿或试管2. 称量器具3. 培养基粉末（例如，YPD培养基）4. 蒸馏水或去离子水5. 培养基加热器6. 高压灭菌器或高压高温灭菌器7. 酵母菌株操作步骤：步骤1：准备培养基1. 使用称量器具称取所需的培养基粉末，按照厂商提供的配方添加适量的粉末。

2. 在一个干净的培养皿或试管中加入适量的蒸馏水或去离子水，搅拌均匀直至溶解。

3. 将培养皿或试管放入培养基加热器中，加热至溶液达到沸腾状态。

4. 让溶液在沸腾状态下继续煮沸1-2分钟，以确保培养基已灭菌。

5. 关闭加热器，让培养基冷却至室温。

步骤2：准备酵母菌种1. 从酵母菌培养基上选择一颗酵母菌斑点，用无菌的酒精酒精烟灭菌火柴沾取少量酵母菌斑点。

2. 将沾取的酵母菌点均匀涂抹在新准备的培养基表面。

3. 用洁净的无菌钢圈将酵母菌点轻轻均匀地划过培养基表面。

4. 重复上述步骤，直到所有酵母菌斑点均匀分布在培养基表面。

5. 使用无菌技术，在无菌环境中将培养皿或试管密封。

步骤3：培养酵母菌种1. 将密封好的培养皿或试管置于高压灭菌器或高压高温灭菌器中，进行高压灭菌。

2. 设定灭菌温度和时间，通常为121℃，15-20分钟。

3. 灭菌后，使用无菌技术将培养皿或试管移至无菌操作台上。

4. 将培养皿或试管倒置保存，以避免营养物质沉积在口部，导致污染。

注意事项：1. 操作过程中保持无菌环境，使用无菌器皿和器具，避免外界细菌和微生物的污染。

2. 严格按照配方准确称取培养基粉末，避免因质量误差导致培养基制备不准确。

3. 培养基在加热过程中要达到沸腾状态，并保持一定时间，以确保培养基的灭菌效果。

4. 在培养酵母菌种时要使用无菌环境，避免细菌的污染。