香菇多糖提取条件的优化研究
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香菇多糖提取工艺的研究进展香菇多糖提取工艺的研究进展香菇Lentinusedodes 为担子菌纲伞形科真菌,是世界上第二大食用菌。
香菇多糖是香菇中最重要的一种生物活性物质,具有抑制肿瘤、调节免疫、抗病毒和抗氧化等多方面的药理活性,且毒副作用小。
香菇多糖的提取常用水提醇沉法、酸碱提取法,但存在提取工艺复杂、溶剂使用量大、时间长等缺点,而且容易造成多糖降解,生物活性降低。
本文主要对近年来香菇多糖提取工艺优化研究方面的进展进行阐述。
1.超声波提取超声波提取法是利用超声波特殊的物理性质,加速介质质点运动、空化作用、振动匀化等以增大物质分子运动频率和速度,增加溶剂穿透力,从而使药效物质加速融人溶剂提高有效成分的得率。
王恒等用超声波辅助法从香菇中提取香菇多糖,通过实验优化确定出香菇多糖最佳提取工艺为超声功率200W ,料液比35:1,超声时间40min ,香菇多糖提取率为6.72 %。
王俊颖等采用超声法浸提香菇多糖通过正交试验设计确定的最佳工艺为料水比1 : 25,超声温度60° C超声时间30min , 超声功率300W ,多糖得率为8.72 %。
李宏睿等采用正交试验设计,对香菇多糖的提取条件进行优化,并与单纯的热水浸提进行比较。
结果表明,在料水比l:25 ,超声时间35min ,超声功率105W ,热水浸提温度90 %,浸提时间20min 的条件下,提取效果最好,多糖提取率为13.75 %,比单纯热水浸提法提高6.22%。
2.微波提取微波辅助提取技术主要是通过调节微波加热的参数,有效地加热物料中的目标成分,对目标成分进行选择性提取。
刘小丽等研究微波辅助法提取香菇多糖采用单因素试验对固液比、微波辐射功率、辐射时间、乙醇用量以及杂蛋白的去除条件分别进行了考察。
试验结果表明最佳提取工艺条件为固液比1:20mL ,微波辐射功率为280W ,辐射时间5min,乙醇与多糖提取液体积比为4:1,香菇多糖提取率可达到9.46 %。
香菇多糖提取方法探讨
1 引言
香菇多糖作为功能性酒类的一种,具有独特的作用,如抗氧化、抗癌、抗衰老等,是发展分子营养学的重要方向。
因此,研究香菇多糖的提取方法十分必要。
在保证活性物质的完整性和活性的前提下,从自然资源中高效提取,进一步完善多糖技术,是当前香菇多糖研究发展的重要研究课题。
2 香菇多糖的提取方法
1.有机溶剂抽提法:这种方法通常采用有机溶剂,使植物细胞外部的多糖受到溶解,从而将香菇多糖从菇落液中提取出来。
这种溶剂抽提法虽然可以提取大量多糖,但容易对抗氧化剂和其他生物活性物质产生不良影响。
2.超声波提取法:利用超声波作用于总淀粉中,可以迅速将其分解,从而达到香菇多糖的极高提取率。
超声波提取可以保持多糖中活性物质的完整性,在节约能源和保护环境的前提下提取多糖,具有重要的科研价值。
3.发酵法:发酵主要是利用酶的水解作用,将香菇总淀粉分解成多糖,从而实现多糖的提取。
发酵法可以从香菇中获取大量多糖,但节点操作需要特殊的技术,且存在一定的安全风险,需要特别注意。
3 结论
以上是香菇多糖提取方法的简单介绍,每种方法都具有自身优势和局限性。
提取前要考虑植物体结构、多糖特性及其枯萎情况,选择合适的提取方式,以保持多糖的活性和完美性,实现高效率的提取。
香菇中提取多糖的技术研究香菇中多糖的作用:,在民间素有“山珍”之称。
香菇属于高蛋白,低脂肪,高碳水化合物,高纤维素营养食品[1]。
香菇多糖具有抗肿瘤、抗病毒、提高免疫力和刺激干扰素形成等功能[3],其毒副作用小,疗效高,具有重要的研究和开发价值。
香菇( Lentinus edodes)是侧耳科( Pleara taco ) 的担子菌,含有多种有效药用组分,尤其是香菇多糖( Lentinan 简称LN T)是1种宿主免疫增强剂,具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能[1 ] ,而引起人们的广泛关注。
香菇中含有一种能治疗癌症, 抗恶性肿瘤, 抗病毒, 抗感染, 提高人体免疫力等多种生理功能的物质———香菇多糖。
医学研究证明, 它是通过刺激机体的免疫系统使机体的免疫功能得到恢复和提高, 由机体本身的抵抗力去杀死肿瘤细胞。
它的作用是间接的, 所以毒副作用小, 在各类抗癌药物中, 它被认为是毒副作用可以忽略不计, 剂量低, 疗效好的天然的理想药物一:采用亚临界水技术提取方法,考察了提取香菇多糖的最佳试验条件。
结果表明,最佳提取条件为亚临界水温度150 ℃,液料比30 mL·g-1,浸提时间为5 min,浸提次数为2 次,在该条件下香菇多糖得率可达15.7%,与热水恒温浸提法相比,亚临界水浸提法可明显降低提取时间和提高香菇多糖得率。
传统提取香菇中的多糖主要利用热水浸提法,这种方法不仅浸提时间长,而且提取率不高。
本试验采用亚临界水提取方法,所谓亚临界水也被称为过热水、高压热水或热液态水。
当水在374.2 ℃和22.1 MPa 以上的高温、高压条件下,可形成既非液体又非气体的第四状态,即所谓“超临界状态”。
在此状态下的水称为“超临界水”。
在稍微低于此温度和压力下的水称为“亚临界水”[4]。
同传统的提取方法相比,亚临界水提取具有如下特点[5-6]:不论亚临界水提取对象是液体还是固体,其有效成分的溶解度要比传统方法高得多,提取率也就高得多;亚临界水提取在提取时间内几乎没有能耗,其作用效果迅速且能量消耗较少;亚临界水会使蛋白质、淀粉等变性,给后续的分离、纯化带来方便。
香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究报告1. 研究目标本研究旨在探索香菇中多糖的提取工艺和含量测定方法,以提供一种高效、可行的工艺流程和准确的测定方法,为香菇多糖的应用开发提供科学依据。
2. 方法2.1 香菇多糖提取工艺研究2.1.1 提取试剂选择根据文献综述和前期实验结果,筛选出适合香菇多糖提取的试剂。
常用的试剂有热水、酶解液、强酸、强碱等,选择合适试剂对香菇进行水解提取。
2.1.2 提取工艺优化基于单因素实验和正交实验设计原理,优化香菇多糖提取的工艺参数,包括提取温度、提取时间、料液比等因素。
通过测定提取液中多糖的含量,确定最佳的提取工艺条件。
2.2 香菇多糖含量测定方法研究2.2.1 选择合适试剂反应根据香菇多糖的特性,选用适合的试剂进行反应。
常用的试剂有硫酸、酚硫酸、费林试剂等,可以选择适合的试剂。
2.2.2 建立标准曲线选取不同浓度的香菇多糖标准品,按照测定方法进行测定,记录各标准样品的吸光度或色素生成情况。
根据实验数据,建立标准曲线。
2.2.3 样品预处理将香菇样品经过适当的处理,如研磨、溶解等,使样品中的多糖保持在可测量范围内。
2.2.4 多糖含量测定根据建立的标准曲线和样品的吸光度值,计算出香菇中多糖的含量,并进行统计分析。
3. 发现3.1 香菇多糖提取工艺发现经过实验研究,发现采用热水提取是一种较为有效的香菇多糖提取工艺。
最佳提取条件为提取温度80℃,提取时间2小时,料液比1:10。
3.2 香菇多糖含量测定方法发现在已有的试剂中,硫酸试剂反应较为敏感,可以用于香菇多糖的含量测定。
建立的标准曲线表明,香菇多糖的浓度与吸光度呈现良好的线性关系。
4. 结论本研究通过对香菇多糖的提取工艺和含量测定方法进行深入研究,得出以下结论:1.香菇多糖的热水提取工艺在提取温度80℃,提取时间2小时,料液比1:10的条件下,可获得较高的提取产率。
2.硫酸试剂是一种适用于香菇多糖含量测定的试剂,建立的标准曲线可用于准确测定香菇多糖的含量。
香菇多糖的研究报告摘要利用果胶酶、纤维素酶和漆酶对香菇进行酶解,固定料水比( 1∶15) 和反应温度( 40℃) ,以酶解后多糖提取率为指标,考察不同浓度的3 种酶对香菇多糖提取的影响。
在单因素试验的基础上,采用响应面法建立香菇多糖酶法提取的二次多项数学模型,并验证了该模型的有效性; 探讨了果胶酶、纤维素酶、漆酶3 个因子的交互作用及其最佳水平。
响应面分析结果表明: 果胶酶、纤维素酶、漆酶显著影响香菇多糖的提取效果,在果胶酶浓度为7.11%,纤维素酶浓度为6.82%,漆酶浓度为3.69%的优化条件下,香菇多糖的提取率达到37.07%。
关键词:香菇多糖,果胶酶,纤维素酶,漆酶,响应面2.前言糖类的研究已有百余年的历史, 近20 多年来, 随着膜的化学功能, 免疫物质的化学研究的进展以及探寻新药物资源的不断拓展和研究的深入, 发现糖类在生物体中的作用不仅是作为能量资源或结构材料, 更重要的是还参与了生命现象中细胞的各种活动, 具有多种多样的生物学功能。
多糖一般由十个分子以上的单糖通过糖苷键连接而成的高分子多聚物。
多糖按来源大致可分为植物多糖、动物多糖、海藻多糖、微生物多糖即细菌多糖和真菌多糖等。
其中, 具有很强生物活性的真菌多糖的研究日益受到重视, 真菌多糖从真菌子实体、菌丝体、发酵液中分离, 是一类可以控制细胞分裂分化、调节细胞生长和衰老的活性多糖。
真菌多糖作为药物研究始于20 世纪50 年代, 在60 年代以后成为免疫促进剂受到广泛关注, 其中香菇多糖( lent inan, LNT) 是研究得较透彻的多糖之一。
香菇[ Lentinus edodes ( Berk. ) Sing] 为担子菌纲伞形科真菌, 是世界名贵食用菌兼药用菌之一。
1968 年日本千原吴郎首先利用热水从香菇子实体中浸提出6 种胞外多糖, 1970 年Chihard和Sasaki 用热水浸提结合有机溶剂沉淀从香菇中提取到另外4 种多糖, 20 世纪80 年代以来, LNT的研究受到广泛的重视, 取得了一系列进展[ 1] 。
超滤提取香菇多糖的研究
随着我国的经济的发展,超级滤提取方法正在越来越多地应用在天然药物研究中,例如研究香菇多糖,利用超级滤提取方法对其进行提取和分离研究。
超级滤提取术是利用超级滤提取件(梯度收集器)作为介质,以一种动力学形式以一定的水平移动,使我们可以从某种特定物质中快速有效地收集有用成分的技术。
这是一种新型的生物分子提取技术,具有成本低廉、方便实用、提取率高的优点,经过近年来的深入研究,其在天然药物研究中的应用也得到了广泛的关注。
香菇多糖是香菇中含量很高的微米细胞,具有抗氧化、抗癌、抗衰老、补血补元等作用,因此具有重要的生物学和医学价值。
最近,越来越多的研究表明,超级滤提取技术是一种非常有效的香菇多糖提取分离方法。
例如,研究人员可以通过改变温度、PH值、浓度,配合不同的超滤提取件,将收集的实际反应体系配制成适用的流动相,使得不同的组分在药物、非化学反应情况下,可以有效地分离出来。
此外,超滤提取系统的参数可以调整,可以满足需求的不同的组分的提取和分离,也可以有效地提取微量物质,释放成本低廉,并有利于减少分离和洗涤化学物质的使用。
因此,超级滤提取法是提取分离香菇多糖的有效方法,在实践中,研究者可以在研究中根据自身需求,针对不同参数进行调整,获得较高精度的提取效果。
香菇多糖的提取实验报告一、实验目的本实验旨在探索从香菇中提取多糖的有效方法,并对提取得到的香菇多糖进行初步的定性和定量分析。
二、实验原理香菇多糖是一种水溶性的大分子化合物,其在热水中具有一定的溶解性。
通过热水浸提的方法,可以使香菇中的多糖溶解到水中,然后经过离心、过滤等操作去除杂质,再通过醇沉的方法使多糖沉淀出来,最后经过干燥得到香菇多糖的粗品。
三、实验材料与仪器1、实验材料新鲜香菇(市售)、无水乙醇(分析纯)、丙酮(分析纯)、石油醚(分析纯)、葡萄糖标准品、浓硫酸(分析纯)、苯酚(分析纯)等。
2、实验仪器电子天平、恒温水浴锅、离心机、旋转蒸发仪、真空干燥箱、分光光度计、容量瓶、移液管、具塞刻度试管等。
四、实验步骤1、原料预处理将新鲜香菇洗净,去除杂质和根部,切成小块,置于通风处晾干。
然后用石油醚回流脱脂2 次,每次2 小时,以去除香菇中的脂类物质。
脱脂后的香菇用丙酮回流脱色 2 次,每次 2 小时,以去除香菇中的色素。
2、热水浸提将预处理后的香菇放入圆底烧瓶中,按料液比 1:20 加入蒸馏水,在90℃的恒温水浴锅中浸提 3 小时。
期间每隔 30 分钟搅拌一次,以提高提取效率。
3、离心分离浸提结束后,将提取液冷却至室温,然后在 4000 r/min 的转速下离心 15 分钟,取上清液。
4、过滤将上清液用滤纸过滤,去除其中的不溶性杂质。
5、醇沉向过滤后的上清液中缓慢加入 3 倍体积的无水乙醇,边加边搅拌,使多糖沉淀出来。
然后将溶液置于 4℃冰箱中静置过夜。
6、离心收集将醇沉后的溶液在 4000 r/min 的转速下离心 15 分钟,收集沉淀。
7、洗涤用无水乙醇和丙酮依次洗涤沉淀,以去除其中的杂质。
8、干燥将洗涤后的沉淀置于真空干燥箱中,在 60℃下干燥至恒重,得到香菇多糖的粗品。
9、多糖的定性分析(1)苯酚硫酸法:取适量的香菇多糖粗品,用蒸馏水溶解,制成一定浓度的溶液。
然后取 1 mL 溶液,加入 1 mL 5%的苯酚溶液和 5mL 浓硫酸,摇匀后在沸水浴中加热 15 分钟,冷却至室温后,在 490 nm 处测定吸光度。
香菇多糖的提取实验报告1. 掌握香菇多糖的提取方法;2. 了解香菇多糖的物化性质;3. 研究香菇多糖的抗氧化活性。
实验原理:香菇多糖是一种高分子多糖,具有多种保健功效,如抗氧化、抗肿瘤、促免疫等。
香菇多糖的提取方法有多种,其中较为常用的是热水浸提法和酸碱法。
热水浸提法是指将香菇粉末加到一定的温度下的水中,随后进行浸提,加热时间和浸提时间是影响提取率和质量的关键因素。
酸碱法是指将香菇粉末加入一定比例的酸和碱溶液中,进行水解,随后用酒精沉淀,最后用稀酸或碱溶解,并用冷醇进行沉淀和洗涤,得到香菇多糖。
实验材料:香菇粉末、蒸馏水、NaOH、HCl、酒精、醋酸钠、DPPH、卡拉菲指示剂。
实验步骤:实验一:热水浸提法提取香菇多糖1. 取4g香菇粉末,加入200mL蒸馏水中,加热至80℃,并保持2h;2. 将提取液用纱布过滤,分别收集滤液;3. 将滤液浓缩至大约50mL,用三倍体积的酒精沉淀,过滤并收集沉淀;4. 重复上述步骤2和步骤3,直至香菇多糖的浓度达到所需浓度为止。
实验二:酸碱法提取香菇多糖1. 取4g香菇粉末,加入100mL0.1mol/L NaOH中,进行水解,保持100℃,2h;2. 加入等量的0.1mol/L HCl至酸度为2,用酒精沉淀;3. 用10%醋酸钠溶液洗涤沉淀,并用稀棕黑色指示剂观察,直至洗涤液呈现淡黄色;4. 用酒精洗涤沉淀,分别重复上述步骤2-3,将洗涤干燥的沉淀溶解后,混合,加热水浴,调节pH至7左右,沉淀多糖,洗涤,干燥得到香菇多糖。
实验三:测定香菇多糖的抗氧化活性1. 取一定量的DPPH溶液(30mg/L),加入1mL香菇多糖液体,反应30min;2. 测定吸收值,计算香菇多糖的抗氧化活性。
实验结果:通过实验一和实验二分别提取了香菇多糖,得出了两种不同的提取方法的多糖成品。
经过实验三,测得香菇多糖的抗氧化活性,根据吸收值的大小可以判断多糖的抗氧化强弱。
实验结论:热水浸提法和酸碱法提取香菇多糖都是有效的提取方法。
香菇多糖提取条件的优化研究2007-8-14 来源:中国食品机械设备网摘要:香菇营养丰富、味道鲜美,是我国传统的药食两用食品。
1957年,L.Hlueas首先开展了真菌抗肿瘤的研究,他发现美味牛肝菌的子实体提取液对小白鼠的肉瘤S180有明显的抑制作用。
香菇营养丰富、味道鲜美,是我国传统的药食两用食品。
1957年,L.Hlueas首先开展了真菌抗肿瘤的研究,他发现美味牛肝菌的子实体提取液对小白鼠的肉瘤S180有明显的抑制作用。
1968年,日本学者千原吴朗首先利用热水从香菇子实体中分离出能抑制肿瘤的物质,并对其进行了分析测定,证实此类物质主要是一些高分子多糖(LNT),它能提高巨噬细胞的吞噬能力,诱导白细胞介素-l(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF)的生成;促进T淋巴细胞增殖,诱导其分泌白细胞介素-2(IL-2);提高B淋巴细胞活性,增加多种抗体的分泌,增强机体的体液免疫调节功能,从而增强机体的抗病能力。
现有的研究表明[1-7]:香菇多糖有多种生理功能,主要的有:免疫调节、抗突变、抗肿瘤、抗感染、抗疲劳、降血脂、降胆固醇、抗衰老等。
香菇多糖的提取主要是通过水提醇沉法,但得率较低,本文拟通过正交试验,优化其提取条件,以提高其得率。
1 材料和方法1.1实验材料1.1.1材料香菇:市售。
1.1.2试剂:浓硫酸、苯酚、葡萄糖(以上均为分析纯)95%的食用乙醇。
1.2试验方法1.2.1 多糖提取方法香菇→粉碎(60目)→蒸馏水浸提→过滤→上清液加3倍酒精沉淀多糖→离心(4000转/分)→蒸馏重溶解→测定。
1.2.2测定方法苯酚一硫酸法[8]。
1.2.3 试验设计现有的研究结果表明,影响多糖提取得率的主要因素有:温度、时间、料水比等。
根据预实验结果,选择料水比、浸提温度、浸提时间3项为考察因素,各取3个水平,进行(33)正交试验设计(见表1)。
表1 因素水平表Table 1 Test design of factor and levelA 料水比B 浸提时间/hC浸提温度/0C2.结果正交试验结果见表2,方差分析结果见表3。